基于超高效液相色谱四级杆-飞行时间串联质谱技术(Ultra High Performance Liquid Chromatography-Quadrupole-Time of Flight Mass Spectrometry/Mass Spectrometry, UHPLC-Q-TOF-MS/MS)分析与网络药理学探究地龙活性成分的抗疲劳作用...基于超高效液相色谱四级杆-飞行时间串联质谱技术(Ultra High Performance Liquid Chromatography-Quadrupole-Time of Flight Mass Spectrometry/Mass Spectrometry, UHPLC-Q-TOF-MS/MS)分析与网络药理学探究地龙活性成分的抗疲劳作用机制。通过UHPLC-Q-TOF-MS/MS获得地龙化学成分信息,收集成分作用靶点、疲劳和抗疲劳的基因靶点取交集,进行基因本体(Gene Ontology, GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)富集分析。利用KEGG Mapper初步阐明抗疲劳机制,设计动物实验验证地龙抗疲劳功效。网络分析表明地龙抗疲劳主要集中在磷酸化的正向调节、核因子-κB(Nuclear Factor kappa-B, NF-κB)信号通路、5-羟色胺能突触、JAK-STAT通路和精氨酸和脯氨酸代谢通路等。动物实验结果表明,与空白组相比,地龙提取物中剂量组小鼠负重游泳实验时间由9.78 min延长至34.07 min(P<0.001),肝糖原含量显著升高,高剂量组为2 591.21 mg/g(P<0.001),高剂量组小鼠尿素氮和血乳酸含量分别降低至3.65 nmol/L和182.21 nmol/L(P<0.01)。综上,地龙通过多成分、多靶点、多途径的协同效应发挥抗疲劳作用,为后续的抗疲劳机制研究提供新的思路与方法。展开更多
绞股蓝属植物资源丰富,在我国分布广泛。绞股蓝属植物因含有丰富的达玛烷型三萜皂苷且药理活性多样而引起国内外广泛关注。目前对于绞股蓝属植物化学成分及药理活性研究主要集中于绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]和长梗...绞股蓝属植物资源丰富,在我国分布广泛。绞股蓝属植物因含有丰富的达玛烷型三萜皂苷且药理活性多样而引起国内外广泛关注。目前对于绞股蓝属植物化学成分及药理活性研究主要集中于绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]和长梗绞股蓝(G.longipes C.Y.Wu ex C.Y.Wu&S.K.Chen)2个种,对绞股蓝属其他种植物的研究则较少。本文采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术,系统阐明缅甸绞股蓝(G.burmanicum King ex Chakrav)中的化学成分。首先对不同来源缅甸绞股蓝进行液质分析,观察成分组成的一致性;根据绞股蓝属来源达玛烷型三萜皂苷质谱裂解规律、丙二酰基及乙酰基皂苷成分裂解特点,结合自建数据库及ChemSipder、SciFinder、PubChem在线数据库,对表征的各个峰的结构进行鉴定;通过液质基峰离子(base peak ion,BPI)色谱图对比缅甸绞股蓝与长梗绞股蓝的成分异同。实验结果显示,不同来源缅甸绞股蓝样品的成分组成一致性良好,共从缅甸绞股蓝样品中鉴定化学成分47个,包括12个黄酮和35个三萜皂苷类成分,其中6个为新化合物。缅甸绞股蓝中的皂苷普遍存在丙二酰基和乙酰基化现象,反相C18色谱分析时它们常常在相应的原型皂苷后相继出现。色谱图显示缅甸绞股蓝与长梗绞股蓝皂苷成分一致性良好,且主要成分绞股蓝皂苷XLIX和绞股蓝皂苷A及其丙二酰基成分在2个种间含量相当。综上,通过缅甸绞股蓝的液质分析,明确了缅甸绞股蓝的成分组成及特点,为缅甸绞股蓝的开发利用提供了实验依据。展开更多
文摘绞股蓝属植物资源丰富,在我国分布广泛。绞股蓝属植物因含有丰富的达玛烷型三萜皂苷且药理活性多样而引起国内外广泛关注。目前对于绞股蓝属植物化学成分及药理活性研究主要集中于绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]和长梗绞股蓝(G.longipes C.Y.Wu ex C.Y.Wu&S.K.Chen)2个种,对绞股蓝属其他种植物的研究则较少。本文采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术,系统阐明缅甸绞股蓝(G.burmanicum King ex Chakrav)中的化学成分。首先对不同来源缅甸绞股蓝进行液质分析,观察成分组成的一致性;根据绞股蓝属来源达玛烷型三萜皂苷质谱裂解规律、丙二酰基及乙酰基皂苷成分裂解特点,结合自建数据库及ChemSipder、SciFinder、PubChem在线数据库,对表征的各个峰的结构进行鉴定;通过液质基峰离子(base peak ion,BPI)色谱图对比缅甸绞股蓝与长梗绞股蓝的成分异同。实验结果显示,不同来源缅甸绞股蓝样品的成分组成一致性良好,共从缅甸绞股蓝样品中鉴定化学成分47个,包括12个黄酮和35个三萜皂苷类成分,其中6个为新化合物。缅甸绞股蓝中的皂苷普遍存在丙二酰基和乙酰基化现象,反相C18色谱分析时它们常常在相应的原型皂苷后相继出现。色谱图显示缅甸绞股蓝与长梗绞股蓝皂苷成分一致性良好,且主要成分绞股蓝皂苷XLIX和绞股蓝皂苷A及其丙二酰基成分在2个种间含量相当。综上,通过缅甸绞股蓝的液质分析,明确了缅甸绞股蓝的成分组成及特点,为缅甸绞股蓝的开发利用提供了实验依据。
文摘目的 采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF-MS)定性分析通络明目胶囊(Tongluo Mingmu Capsule,TLMMC)的化学成分谱。方法 固定相为Acquity Uplc HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相A为0.1%甲酸水溶液,流动相B为0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱,体积流量0.30 mL/min,进样量5μL。整合中药系统药理学数据库(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)、中药综合数据库(traditional Chinese medicine integrated database,TCMID)、ChemSpider(http://www.ChemSpider.com/)、Chemical Book(http://www.chemicalbook.com/)和相关文献,建立了TLMMC的内部数据库。根据已有对照品的相对分子质量与质谱碎片离子信息,结合上述内部数据库对成分进行定性鉴别。结果 从TLMMC中共定性鉴别了82种化学成分,采用已有对照品的保留时间、精确相对分子质量及碎片离子的对比,确定了其中42种成分;通过精确相对分子质量及碎片离子的比对推测了另外40种成分的可能存在。82种化学成分包括36种黄酮、11种三萜皂苷、11种单萜、8种蒽醌以及16种其他化合物;其中13种化学成分来自黄芪、13种化学成分来自银杏叶、8种化学成分来自赤芍、8种化学成分来自墨旱莲、6种化学成分来自地黄、6种化学成分来自粉葛、5种化学成分来自决明子、5种化学成分来自大黄、5种化学成分来自三七、5种化学成分来自蒲黄、4种化学成分来自女贞子、4种化学成分来自地龙。结论 建立的UHPLC-Q-TOF-MS法可快速、全面地分析TLMMC的化学轮廓;采用该方法共鉴定了82种成分,涵盖制剂中的全部12味中药。本结果较为系统地阐明了TLMMC的药效物质基础,为其起效机制的解析和临床合理应用奠定基础。
