化学诱变抗体模拟谷胱甘肽过氧化物酶 被引量：6

1

作者 丁兰 朱振齐 +3 位作者 罗贵民 孙启安 杨同书 沈家骢 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1994年第3期296-299,共4页

用诱变剂苯甲基磺酰氟（ＰＭＳＦ）活化兔抗人ＩｇＭ（Ｆｃμ）片段上特殊活性部位的丝氨酸（Ｓｅｒ）残基，经硒化氢（Ｈ_２Ｓｅ）处理，则将丝氨酸转变成硒代半胱氨酸（ＳｅＣｙｓ）。诱变后的抗体具有谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－... 用诱变剂苯甲基磺酰氟（ＰＭＳＦ）活化兔抗人ＩｇＭ（Ｆｃμ）片段上特殊活性部位的丝氨酸（Ｓｅｒ）残基，经硒化氢（Ｈ_２Ｓｅ）处理，则将丝氨酸转变成硒代半胱氨酸（ＳｅＣｙｓ）。诱变后的抗体具有谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性，其活性为世界最好的ＧＳＨ－Ｐｘ模拟物ＰＺ５１的７０多倍。抗体效价为１：８，与没诱变的抗体相似。 展开更多

关键词 谷胱甘肽 过氧化物酶 化学诱变

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蚯蚓纤溶酶原激活剂(e-PA)小亚基活性中心的酶学性质及CD光谱的研究 被引量：3

2

作者 杨嘉树 郭亚迁 茹炳根 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期721-725,共5页

蚯蚓纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）具有多种底物特异性．对构成其的小亚基的活性中心的研究有利于阐述ｅ－ＰＡ的结构与功能的关系．利用胰蛋白酶的特异性抑制剂ＴＬＣＫ（Ｎ－α－ｐ－ｔｏｓｙｌ－Ｌ－ｌｙｓｉｎｅｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈ... 蚯蚓纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）具有多种底物特异性．对构成其的小亚基的活性中心的研究有利于阐述ｅ－ＰＡ的结构与功能的关系．利用胰蛋白酶的特异性抑制剂ＴＬＣＫ（Ｎ－α－ｐ－ｔｏｓｙｌ－Ｌ－ｌｙｓｉｎｅｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌｋｅｔｏｎｅ）对小亚基进行抑制活性的研究，结果表明ＴＬＣＫ对酶促反应的抑制曲线与可逆抑制曲线相似，但在抑制剂存在下的最大反应速度与抑制剂不存在时的最大反应速度不同．结合小亚基在ＴＬＣＫ存在下的ＣＤ光谱变化，证明了小亚基分子表面存在两个活性位点，这两个活性位点对ＴＬＣＫ的敏感性不同，从而造成ＴＬＣＫ抑制行为的异常．推测不同的活性结构对应于不同的底物特异性． 展开更多

关键词 TLCK e-PA 抑制作用 纤溶酶原激活剂 活性位点

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有机介质中酶催化反应体系的构建原则 被引量：5

3

作者 隋德新 姜涌明 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第2期106-109,共4页

构建有机介质中的酶反应体系必须考虑四种物理化学原则,即有机溶剂的选择,体系中酶和有机溶剂的分配形式,酶分子的存在状态和酶的选择。

关键词 酶反应 有机介质 构建理论

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自絮凝酵母细胞膜脂肪酸影响乙醇激活ATP酶 被引量：1

4

作者 胡纯铿 白凤武 安利佳 《华侨大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2005年第3期251-254,共4页

首次揭示酵母菌细胞膜磷脂脂肪酸组成对影响质膜ATP酶对乙醇刺激的响应.实验结果表明,细胞膜磷脂脂肪酸组成特点,对生长于未添加乙醇条件下的自絮凝酵母的质膜ATP酶活性没有影响,但却明显影响生长于添加乙醇(体积分数为0.01～0.10)的菌... 首次揭示酵母菌细胞膜磷脂脂肪酸组成对影响质膜ATP酶对乙醇刺激的响应.实验结果表明,细胞膜磷脂脂肪酸组成特点,对生长于未添加乙醇条件下的自絮凝酵母的质膜ATP酶活性没有影响,但却明显影响生长于添加乙醇(体积分数为0.01～0.10)的菌体质膜ATP酶对乙醇激活的敏感性.预培养于添加0.6 mmol·L-1棕榈酸、亚油酸或亚麻酸条件下,菌体质膜ATP酶的最大激活水平分别为各自酶的基态水平(未激活)的3.6,1.5和1.2倍,而对照组(预培养于未添加脂肪酸条件下的菌体)的相应值为2.3倍.酶激活后,米氏常数Km、最适pH和对质膜ATP酶特异性抑制剂钒酸钠的敏感性等性质不变,但最大反应速度Vmax明显增加.实验结果还表明,细胞膜磷脂脂肪酸组成特点对提高菌体的耐乙醇能力越有利,其质膜ATP酶被乙醇激活的幅度越大,说明菌体耐乙醇能力的提高,与其质膜ATP酶对乙醇激活的敏感性的增加密切相关. 展开更多

关键词 耐乙醇 质膜ATP酶 磷脂脂肪酸 自絮凝酵母 米氏常数

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用定位突变方法对人脑己糖激酶活性位点的研究 被引量：2

5

作者 陈丽蓉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期742-745,共4页

哺乳动物己糖激酶Ⅰ的分子量是１００ｋＤ．目前已经认为是由分子量５０ｋＤ酵母型己糖激酶通过基因复制和融合进化来的．己糖激酶Ⅰ的Ｃ端半分子包含了底物葡萄糖的结合位点即催化位点．Ｘ射线衍射结构的结果已经推测在酵母型的己糖激... 哺乳动物己糖激酶Ⅰ的分子量是１００ｋＤ．目前已经认为是由分子量５０ｋＤ酵母型己糖激酶通过基因复制和融合进化来的．己糖激酶Ⅰ的Ｃ端半分子包含了底物葡萄糖的结合位点即催化位点．Ｘ射线衍射结构的结果已经推测在酵母型的己糖激酶分子中Ｓｅｒ－１５８、Ａｓｐ－２１１是和葡萄糖的结合及催化活性有关，这些氨基酸残基相当于人脑己糖激酶Ⅰ分子中的Ｓｅｒ－６０３、Ａｓｐ－６５７，它们正好位于该酶分子的Ｃ端半分子中．定位突变这两个氨基酸残基得到４个该酶的Ｃ端半分子酶（ｍｉｎｉ－ＨＫⅠ）的突变体，它们是Ｓｅｒ－６０３→Ｃｙｓ，Ｓｅｒ－６０３→Ｔｈｒ，Ａｓｐ－６７５→Ｇｌｕ，Ａｓｐ－６７５→Ｖａｌ．实验结果指出４个突变体酶的Ｋｍ值变化不大，但酶活性只保留野生型酶的０．２８％～１１％，园二色谱分析４个突变体的ＣＤ谱与野生型酶基本一致，因此说明二级结构没有变化．这些研究结果和Ｘ射线衍射结构的推断是一致的，显示了Ｓｅｒ－６０３和Ａｓｐ－６５７氨基酸残基在该酶结合底物葡萄糖或催化作用上起了重要的作用． 展开更多

关键词 己糖激酶 糖酵解 突变体 活性位点

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游离整体细胞生物转化反应行为 被引量：2

6

作者 王雪根 徐虹 欧阳平凯 《南京化工大学学报》 1999年第3期32-34,共3页

对游离整体细胞（大肠杆菌）的生物转化行为，特别是在高质量浓度底物（富马酸铵）环境下的细胞形态结构进行考察，解释了高质量浓度底物，反应行为，细胞结构和细胞渗透化之间的关系。

关键词 天冬氨酸 游离整体细胞 催化剂 酶催化 生物转化

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超氧歧化酶(SOD)对人红细胞膜的保护作用 被引量：23

7

作者 秦德安 何学民 王永江 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1989年第2期134-136,共3页

前文曾报道,红细胞膜经外源O_2^-自由基(碱性条件下,邻苯三酚自氧化产生)处理后有明显损伤作用。在此基础上,本文研究猪红细胞SOD对人红细胞膜氧化损伤的保护作用。结果表明,外源SOD对人红细胞膜有明显保护作用,表现为膜流动性和膜重封... 前文曾报道,红细胞膜经外源O_2^-自由基(碱性条件下,邻苯三酚自氧化产生)处理后有明显损伤作用。在此基础上,本文研究猪红细胞SOD对人红细胞膜氧化损伤的保护作用。结果表明,外源SOD对人红细胞膜有明显保护作用,表现为膜流动性和膜重封闭能力保持正常水平,膜蛋白交联作用有显著减小。 展开更多

关键词 超氧歧化酶 红细胞膜 保护作用

全文增补中

有机介质中酶催化反应研究进展

8

作者 邹国林 李树伟 《氨基酸和生物资源》 CAS 1995年第1期41-45,共5页

本文介绍了近期有机介质中酶催化反应研究的进展，比较系统地归纳了有机介质中酶催化反应的条件以及有机介质对酶性质的主要影响。

关键词 酶 催化反应 有机介质

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2-位硒桥联β-环糊精的合成及催化性质 被引量：8

9

作者 刘俊秋 高姝娟 +3 位作者 罗贵民 阎岗林 姜明守 沈家骢 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期102-104,共3页

将β－环糊精（β－ＣＤ）２位羟基选择性磺酰化后，再用ＮａＨＳｅ处理使谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）的催化基团－ＳｅＨ引入β－ＣＤ的２位上，经空气氧化得到了ＧＰＸ模拟物双硒桥联β－环糊精．利用元素分析、核磁共振、红外光谱... 将β－环糊精（β－ＣＤ）２位羟基选择性磺酰化后，再用ＮａＨＳｅ处理使谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）的催化基团－ＳｅＨ引入β－ＣＤ的２位上，经空气氧化得到了ＧＰＸ模拟物双硒桥联β－环糊精．利用元素分析、核磁共振、红外光谱对此模拟物进行了表征．Ｘ光电子能谱技术测定了模拟物中硒的价态和含量．测活结果表明模拟物的ＧＰＸ活性是ＰＺ５１的７． 展开更多

关键词 Β-环糊精 模拟酶 硒 GPX

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生物体内酶 - 金属离子 - 底物作用机理研究 被引量：6

10

作者 孙洪良 龚钰秋 《浙江农业大学学报》 CSCD 北大核心 1998年第4期413-417,共5页

用１ＨＮＭＲ法研究了钯（Ⅱ）－ＮＴＰ－Ａ体系内金属离子与配体以及配体与配体之间的相互作用．其中ＮＴＰ代表腺苷５′－三磷酸（ＡＴＰ）和尿苷５′－三磷酸（ＵＴＰ）；Ａ代表１，１０－邻菲口罗啉，２，２′－联吡啶和Ｌ－色氨酸... 用１ＨＮＭＲ法研究了钯（Ⅱ）－ＮＴＰ－Ａ体系内金属离子与配体以及配体与配体之间的相互作用．其中ＮＴＰ代表腺苷５′－三磷酸（ＡＴＰ）和尿苷５′－三磷酸（ＵＴＰ）；Ａ代表１，１０－邻菲口罗啉，２，２′－联吡啶和Ｌ－色氨酸．实验发现，三元配合物体系中ＡＴＰ的Ｈ－Ｃ（２），Ｈ－Ｃ（８）和Ｈ－Ｃ（１′）与ＵＴＰ的Ｈ－Ｃ（５），Ｈ－Ｃ（６）和Ｈ－Ｃ（１′）都发生明显高场位移．此外。 展开更多

关键词 钯(Ⅱ) 核苷酸 酶 底物 芳环堆积作用 核磁共振

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钴卟啉的合成及消除有毒氧自由基的研究 被引量：4

11

作者 李早英 张悦宁 +2 位作者 李聪 冯清 夏淑贞 《武汉大学学报（自然科学版）》 CSCD 2000年第2期150-152,共3页

合成与结构表征了 4个钴卟啉配合物 Co(Por) ,Por=5 ,10 ,15 ,2 0 -四 - [(3,4,5 -三甲氧基苯基 )卟啉(1) ,(对甲基苯基 )卟啉 (2 ) ,(对氯苯基 )卟啉 (3) ,(对磺酸基苯基 )卟啉 (4) ].并用它们作为超氧化物歧化酶 (SOD)和过氧化氢酶 (C... 合成与结构表征了 4个钴卟啉配合物 Co(Por) ,Por=5 ,10 ,15 ,2 0 -四 - [(3,4,5 -三甲氧基苯基 )卟啉(1) ,(对甲基苯基 )卟啉 (2 ) ,(对氯苯基 )卟啉 (3) ,(对磺酸基苯基 )卟啉 (4) ].并用它们作为超氧化物歧化酶 (SOD)和过氧化氢酶 (CAT)模型物进行了双功能模拟酶活性的测试 :核黄素 -蛋氨酸光照法证实 ,在 10 - 5～ 10 - 6 mol/ L 浓度范围内 4种配合物均有消除超氧自由基 (O-·2 )的作用 ;分光光度法证实具有催化 H2 O2 的分解作用 ,其分解率随浓度的增大而增大 ;用小鼠肝匀浆法测定 ,四种钴卟啉均表明有良好的抗脂质过氧化作用 . 展开更多

关键词 钴卟啉 合成 SOD 氧自由基 毒性 CAT 消除作用

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激肽释放酶的检测及其生理效应 被引量：1

12

作者 张子健 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期195-198,共4页

近年来研究表明，体内存在着血浆激肽释放酶和各种组织激肽释放酶，它们虽有很多相似之处，但并非同一物质，而是有着明显的差异。不同的激肽释放酶，各有特异的限速蛋白质水解作用。血浆激肽释放酶和各种组织激肽释放酶的来源也各不相... 近年来研究表明，体内存在着血浆激肽释放酶和各种组织激肽释放酶，它们虽有很多相似之处，但并非同一物质，而是有着明显的差异。不同的激肽释放酶，各有特异的限速蛋白质水解作用。血浆激肽释放酶和各种组织激肽释放酶的来源也各不相同，它们广泛存在于血液、唾液、淋巴、间质液、尿液中，在体内能起着各种重要生理效应。本文对其测定方法、亚细胞定位、结构差异、生理效应等进行了综述。 展开更多

关键词 血浆 激肽释放酶 激肽原 激肽

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一类三分子生化反应系统的定性分析

13

作者 王成文 陈文成 《山东矿业学院学报》 CAS 1993年第4期378-383,共6页

利用定性分析的方法,讨论一类具有常量输入的三分子生化反应系统,得到了可行平衡点的全局稳定性,系统存在唯一极限的充要条件,并纠正了“三分子生化反应模型的稳定性”(傅延强)一文中的错误。

关键词 生物数学 微分方程 稳定性

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生命物质铁卟啉活性部位分子轨道的群论处理

14

作者 廖兴汉 《广西科学》 CAS 2000年第2期131-134,共4页

用群论寻找可约表示特征标的规则、群论的对可约表示约化的公式、群论关于属于同一不可约表示的基才能对称性匹配组合分子轨道等方法、原理处理生命的关键物质铁卟啉活性部位的分子轨道。分析分子轨道能级与生化性质和电子光谱的关系。

关键词 铁卟啉 分子轨道 群论 活性部位 生命物质 酶

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物理因子作用下抗性酶SOD酶促反应动力学与光谱研究

15

作者 王庆亚 唐树延 《发光快报》 CSCD 1992年第4期10-15,共6页

本论文以超氧化物歧化酶(SOD)——超氧阴离子(O_2^-)反应体系为例,结合 SOD溶液的荧光光谱分析,仔细研究了磁场作用下酶促反应动力学响应的物理机制。首次提出:O_2^-在磁偶极矩作用下产生“优势取向效应”,而这种取向优势使得可反应碰... 本论文以超氧化物歧化酶(SOD)——超氧阴离子(O_2^-)反应体系为例,结合 SOD溶液的荧光光谱分析,仔细研究了磁场作用下酶促反应动力学响应的物理机制。首次提出:O_2^-在磁偶极矩作用下产生“优势取向效应”,而这种取向优势使得可反应碰撞粒子的有效取向几率增加,从而使反应体系的速率常数 K 提高。同时我们又利用 Solt 等人的扩散控制反应动力学理论与计算机数值计算相结合,得到了理论模型数值解及理论曲线。在弱磁场强度(B≤0.07T)时,本理论结果与实验数值很好吻合;而在大于0.07(T)的强磁场下,两者发生了偏离,通过进一步的光谱学研究发现,强磁场会引起酶分子构象态的改变,使酶分子活性下降。 展开更多

关键词 酶促 反应动力学 光谱 SOD 磁场

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超氧化物歧化酶化学修饰的初步研究 被引量：14

16

作者 区耀华 吕冬 周昕 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1989年第3期203-205,共3页

本文以三聚氰氯为活化剂,采用聚乙二醇法对超氧化物歧化酶进行化学修饰,得到了均一的聚乙二醇-SOD加合物。修饰酶活力为天然酶的75％,表明酶活性中心结构基本保持。 对修饰酶残留氨基的测定表明,近80％可滴定氨基参加了反应,且SOD骨架... 本文以三聚氰氯为活化剂,采用聚乙二醇法对超氧化物歧化酶进行化学修饰,得到了均一的聚乙二醇-SOD加合物。修饰酶活力为天然酶的75％,表明酶活性中心结构基本保持。 对修饰酶残留氨基的测定表明,近80％可滴定氨基参加了反应,且SOD骨架结构在修饰前后变化不大,可以推测聚乙二醇是连结在蛋白质表面上的。 展开更多

关键词 超氧物歧化酶 化学修饰

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第119位天门冬氨酸单一取代转变Ha-Rasp21的核苷酸特异性研究

17

作者 钟洁明 《郑州粮食学院学报》 1998年第4期1-9,共9页

测定了在第１１９位的天门冬氨酸被天门冬酰胺取代了的Ｃ－Ｈａ－Ｒａｓ的特异性。调节性的ＧＴＰ酶（三磷酸鸟苷酸酶）家族中的许多成员均有保守的ＮＫＸＤ顺序模式。第１１９位天门冬氨酸即是这一保守顺序模式中的一个残基。本研究发... 测定了在第１１９位的天门冬氨酸被天门冬酰胺取代了的Ｃ－Ｈａ－Ｒａｓ的特异性。调节性的ＧＴＰ酶（三磷酸鸟苷酸酶）家族中的许多成员均有保守的ＮＫＸＤ顺序模式。第１１９位天门冬氨酸即是这一保守顺序模式中的一个残基。本研究发现Ｄ１１９Ｎ突变使Ｈａ－Ｒａｓ的核苷酸特异性从鸟嘌呤更改为黄嘌呤。此观察结果直接支持了下列结论：在天门冬氨酸残基的侧链和鸟嘌呤环之间的氢键形成对于核苷酸的结合的特异性起了最重要的。 展开更多

关键词 三磷酸鸟苷酸酶 鸟嘌呤 核苷酸 氢键 天门冬氨酸

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硒对磷脂酶C的抑制作用

18

作者 彭愈生 于敬海 《化学与粘合》 CAS 1989年第4期234-235,共2页

关键词 磷脂酶C 硒 抑制作用

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