期刊文献+

琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测小麦基因组DNA RAPD扩增产物的方法学比较 被引量:13

The Comparison of RAPD Detecting Results of Breeds for Resistant or Sensitive Species of Powdery Mildew in Wheat Using Ago-Gel and PAG Electrophoretic Technologies
在线阅读 下载PDF
导出
摘要 通过 2 0 % (w v)的琼脂糖凝胶和 5 % (w v)的聚丙烯酰胺凝胶电泳对小麦白粉病抗、感特性品种基因组DNA的RAPD检测结果表明 :5 %聚丙烯酰胺凝胶对线性DNA分子 ( 0 1~ 2 0kb)和长度相差 1 0 0bp以下的DNA分子的分离较 2 0 %的琼脂糖凝胶电泳效果好。因此 ,我们研究出了一项利用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测小麦白粉病抗、感特性的新技术 ,在工作中建立了一种适合于检测小麦基因组DNA结构差异的电泳方法。该方法主要包括 :( 1 )丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺的新配比 ;( 2 )分离DNA片段的最佳凝胶浓度 ;( 3)电泳条件 ;( 4 )脱色、漂洗、银染、显色过程。实验发现 ,该技术对于小麦白粉病抗、感特性检测中的小片段和长度相差 1 0 0bp以下的线性DNAPCR扩增结果的分辨效果较好。应用该技术在抗感品种间已经发现了DNA水平上的差异。 w/v)Ago-gel as maximum gel-density is inferior to 5%(w/v)PAG for some small segments and some DNA molecules which length differ within 100bp by way of comparing of RAPD detecting results of breeds for resistant or sensitive species of powdery mildew in wheat.Consequently an improved PAGE technology suitable for detecting results of breeds for resistant or sensitive species of powdery mildew in wheat was developed.The technology characterized by(1)a new ration of Acr and Bis in gel stock solution,(2)a best gel density is perfect for separating DNA segments,(3)the better electrophoretic condition,(4)the procedure of discoloring,bleaching,silver dying and developing.Test discovered that the technology distinguished effect is good for some small segments and some DNA molecules which length differ within 100bp.The technology has discovered DNA difference in breeds for resistant or sensitive species of powdery mildew in wheat. ;
出处 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第8期96-100,共5页 China Biotechnology
基金 天津市科委青年基金 ( 0 0 3 70 1111) 重大攻关计划 ( 0 0 3 12 2 0 11 3)资助项目
关键词 琼脂糖 聚丙烯酰胺凝胶电泳 小麦 基因组 Wheat Powdery mildew Ago-gel electrophoresis PAGE
  • 相关文献

参考文献10

二级参考文献18

  • 1汪小全,邹喻苹,张大明,张志宪,洪德元.RAPD应用于遗传多样性和系统学研究中的问题[J].Acta Botanica Sinica,1996,38(12):954-962. 被引量:318
  • 2陈永久,张亚平.随机扩增多态DNA影响因素的研究[J].Zoological Research,1997,18(2):221-227. 被引量:101
  • 3储钟稀 许春辉 等.植物叶绿素-蛋白质复合物的研究I.阳生植物向日葵、阴生植物-叶兰的叶绿素-蛋白质复合物[J].植物生理学报,1980,(6):164-172.
  • 4李爱芬.褐藻两个光系统的色素-蛋白质复合物的分离及特性研究:学位论文[M].青岛:中国科学院海洋研究所,1998..
  • 5刘峰 陈受宜.-[J].大豆科学,1998,17(3):256-256.
  • 6[1]WALLACE R W,YU H P,DIECKERT J P.Visualization of protein-SDS complexes in polyacrylamide gel by chilling[J].Anal.Biochem.,1974,61:86-92.
  • 7[2]TAKAGI T,KURO K,ISEMUCA T.Simple visualization of protein bands in SDS-Polyacrylamide gel electrophoresis by the insoluble complex formation between SDS and a cationic surfactant[J].Anal.Biochem.,1977,79:104-109.
  • 8[3]HIGGINS R C,DAHMUS M E.Rapid visualization of protein bands in preparative SDS-polyacrylamide gels[J].Anal.Biochem.,1979,93:257-260.
  • 9[4]LEE C,LEVIN A,BRANTON D.Copper staining:a five-minute protein stain for sodium dodecyl sulfate-polyacylamide gels[J].Anal.Biochem.,1987,166:308-312.
  • 10[5]FERNERAS M,GAVILANES J G,GARCIA-SEQURA J M.A permanent Zn2+ reverse staining method for the detection and quanftiication of proteins in polyacrylamide gels[J].Anal.Biochem.,1993,213:206-212.

共引文献168

同被引文献199

引证文献13

二级引证文献53

相关作者

内容加载中请稍等...

相关机构

内容加载中请稍等...

相关主题

内容加载中请稍等...

浏览历史

内容加载中请稍等...
;
使用帮助 返回顶部