摘要
为建立一种鉴别非洲猪瘟野毒株与基因缺失株(△CD2v/MGF)的TaqMan探针荧光定量PCR检测方法,本研究根据非洲猪瘟病毒的p72、CD2v、MGF360_14L基因序列分别设计PCR引物和TaqMan探针,构建标准品,绘制标准曲线,并进行敏感性、特异性、重复性试验以及样品检测。结果显示,以p72、CD2v、MGF360_14L重组质粒为标准品绘制的标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数(R2)分别为1.000、0.998和0.999;p72、CD2v与MGF360_14L基因的检测下限均为5拷贝/μL;与猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型等常见混感病原不存在交叉反应,特异性强;检测3个基因重复性变异系数均小于2%;与OIE推荐的荧光定量PCR方法对比,检测样品结果符合率100%。综上,该方法检测样品灵敏、特异和准确,可鉴别非洲猪瘟野毒株与CD2v、MGF360_14L基因缺失株,可作为一种快速、灵敏、准确的检测手段应用到实际生产及疫情监测。
出处
《兽医导刊》
2025年第3期54-60,共7页
Veterinary Orientation
基金
呼和浩特市重大科技专项“非洲猪瘟基因缺失弱毒活疫苗的研发”(2021-农-重-4)。
