摘要
目的构建表达幽门螺杆菌热休克蛋白60(Hsp60)的候选菌株并研究其免疫原性。方法利用PCR技术扩增Hsp60基因,将其定向插入pET-22b(+)载体,在BL21(DE3)大肠杆菌中表达并通过动物实验研究其免疫原性。结果克隆的Hsp60基因序列与Genbank公布的一致,Hsp60重组蛋白表达量占菌体总蛋白的27.2%,并可被幽门螺杆菌感染者血清所识别,用其免疫小鼠可产生抗该重组蛋白的抗体。结论Hsp60有可能成为一种有效的疫苗用于幽门螺杆菌感染的预防和治疗。
Objective To constructa recombinantstrainof bacteriaexpressingheatshockproteinof(Hsp)Helicobacter pylori(Hp)andstudytheimmunogenicityof Hsp60.Methods PCRamplificationof Hsp60DNAwasperformedbeforeitwas insertedintotheprokaryoticexpressionvectorpET-22b(+)to transformBL21(DE3)E.coli strain.Hsp60expressedby the recombinantE.coli was collectedand purifiedfor immunogenicityassessmentin mice.Results DNAsequenceanalysis showedidenticalDNAsequenceof Hsp60thusproducedto thatpublishedin Genbank.Accountingfor a ratioof27.2%amongthe totalproteinproductionin the bacterium,recombinantHsp60proteinwas recognizedby the serumfrom Hp-infectedpatientsand producedcorrespondingantibodyin Balb/cmice in responseto immunization.Conclusion RecombinantHsp60proteincanbe usedpotentiallyas a vaccineforcontrollingandtreatingHp infection.
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2002年第1期3-5,共3页
Journal of First Military Medical University
基金
"863"计划专题(102-07-03-06)
国家自然科学基金(30170890)
军队"十五"医药卫生科研课题(OIMA-132)