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蜂毒溶血肽基因的定点诱变及其在大肠杆菌中的表达 被引量:16

Site-directed Mutagenesis of Melittin Gene and Its Expression in Escherichia coli
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摘要 从蜜蜂毒腺中提取总RNA,通过RT-PCR方法扩增得到了蜂毒溶血肽前体蛋白的cDNA,再进一步通过定点诱变在蜂毒溶血肽序列前引入了羟胺裂解位点,构建了与β-半乳糖苷酶部分序列相融合的蜂毒溶血肽诱变蛋白表达载体,序列分析结果表明,成功地引入了目的密码子且与β-半乳糖苷酶部分序列构成正确的读码框,并在大肠杆菌中表达了诱变蛋白,为基因工程生产蜂毒溶血肽提供了新途径。 The cDNA encoding promelittin was obtained from the total RNA of bee poison gland by RT-PCR Moreover, hydroxylamine clearage site was arranged before the melittin sequences by site-directed mutagenesis. The expression vector containing the mutagenic promelittin sequence with partial sequence of B -galactosidase was constructed. The result of DNA sequence analysis demonstrated that the obtained cDNA sequence include the desired codon and the reading frame of fusion gene was correct. The induced protein was expressed in Escherichia coli
出处 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第2期176-182,共7页
关键词 蜂毒溶血肽 定点诱变 大肠杆菌 基因表达 melittin mutagenesis expression
  • 相关文献

参考文献2

二级参考文献6

  • 1李继周,陈仲兵,蔡青年,张青文,郭忠,张福林,张芩.蜂毒溶血肽(melittin)的cDNA克隆[J].农业生物技术学报,1997,5(2):162-167. 被引量:10
  • 2张青文,中国博士后论文集.4,1991年,634页
  • 3徐旬,DNA重组技术,1990年,10页
  • 4郭尧君,生物化学与生物物理进展,1991年,18卷,1期
  • 5匿名著者,Hermann Scasgger and Gebhardvontagow,1987年,368页
  • 6哈密斯 B D,蛋白质的凝胶电泳实践方法

共引文献45

同被引文献221

引证文献16

二级引证文献101

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