摘要
目的确定适合何首乌RAPD-PCR的基因组DNA提取方法及最适宜反应体系。方法通过改良的CTAB法提取何首乌基因组DNA,研究其用于RAPD-PCR的可行性。利用正交设计方法L16(45),针对Tag酶,引物,dNTP,镁离子,模板设计了5因素4水平的正交实验,优化RAPD-PCR反应体系。结果正交设计结果表明,可以得到几种不同的有效扩增反应体系组合。根据实际需求,最适宜的RAPD-PCR反应体系为20μl,其中1×PCRbuffer,Tag酶1U,引物1μmol/L,镁离子2mmol/L,dNTP300μmol/L,模板40ng。结论改良的CTAB法和正交优化得到的反应体系适合用于何首乌RAPD遗传多样性分析。
出处
《时珍国医国药》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第9期2255-2257,共3页
Lishizhen Medicine and Materia Medica Research
基金
广东省自然科学基金(No.06019716)
