摘要
目的采用抑制消减杂交技术,分析食管癌手术前后免疫相关的基因表达差异,了解手术治疗对食管癌患者免疫功能的影响。方法选5例食管肿瘤患者,在手术治疗前和结束时每例患者分别取10ml外周静脉血,样本采集后马上进行外周血单个核细胞(PMBC)分离及提取RNA。分为2组,手术前组和手术后组。每组5个人的RNA混合后做cDNA合成。治疗后组和治疗前组进行正向比较,cD-NA经两轮杂交与PCR扩增后T/A克隆构建文库,并对克隆进行PCR扩增,选取部分阳性克隆测序,与GenBank同源比较,分析其生物学意义。结果用SSH法建立食管癌手术前后免疫相关的差异表达基因的cDNA文库,通过筛选,发现在食管癌手术后,含有与免疫相关的基因,如IL-2、化学趋化因子受体4等表达较前增强,提示食管癌手术改善患者的免疫功能。另外还发现肿瘤相关基因CHES1表达较前增强,另外还发现了3个未知序列。结论成功通过SSH建立了食管癌手术前后免疫相关的差异表达基因的消减文库,核酸序列分析结果表明其中部分基因为与炎症相关的基因,部分基因与癌症形成相关,还发现了一些未知序列。
出处
《中国实用医药》
2009年第31期44-46,共3页
China Practical Medicine
