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金黄色葡萄球菌所致肺部感染的耐药特点及其Panton-Valentine杀白细胞素基因的携带状况分析 被引量:6
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作者 张雪青 陈增强 +1 位作者 黄金伟 余方友 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期51-53,共3页
目的分析金黄色葡萄球菌所致肺部感染的耐药性特点及其Panton-Valentine杀白细胞素基因的携带状况。方法回顾性调查了温州医学院第一附属医院2005年1月至2006年1月医院感染的金黄色葡萄球菌所致肺部感染患者132例,对其体外药敏试验进行... 目的分析金黄色葡萄球菌所致肺部感染的耐药性特点及其Panton-Valentine杀白细胞素基因的携带状况。方法回顾性调查了温州医学院第一附属医院2005年1月至2006年1月医院感染的金黄色葡萄球菌所致肺部感染患者132例,对其体外药敏试验进行分析;并利用多重PCR检测其PVL基因,应用多位点基因序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术对PVL基因阳性的菌株进行序列分型。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的SCCmec基因分型采用多重聚合酶链反应。结果致肺部感染的132株金黄色葡萄球菌的耐药现象较为严重,仅对万古霉素、呋喃妥因及复方新诺明等药物的敏感率较高;其中经多重PCR筛选出10株携带PVL基因的金葡菌,全部为MRSA菌株,3株为ST239-SCCⅢ,2株为ST398-SCCmecⅢ,2株为ST398-SCCmecⅣ,ST25-SCCmecⅢ、ST59-SCCmecⅠ和ST88-SCCmecⅢ各1株。结论肺部感染的金黄色葡萄球菌对多种抗生素耐药,呈多重耐药性;其携带PVL基因占一定比例。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肺部感染 耐药 Panton—valentine杀白细胞素基因 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
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表达Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)的金黄色葡萄球菌诱导人THP-1单核细胞自噬和凋亡 被引量:5
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作者 陆娟 邹治情 +7 位作者 夏雯 戴晓玥 席月 丁龙坤 张敏 吴亮 阴晴 许化溪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期406-414,共9页
目的研究表达Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)的金黄色葡萄球菌诱导人THP-1细胞自噬和凋亡机制。方法在大肠杆菌中表达重组杀白细胞素(rPVL),并免疫家兔制备多克隆抗血清。采用反转录PCR和Western blot法鉴定表达PVL的耐甲氧西林金黄... 目的研究表达Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)的金黄色葡萄球菌诱导人THP-1细胞自噬和凋亡机制。方法在大肠杆菌中表达重组杀白细胞素(rPVL),并免疫家兔制备多克隆抗血清。采用反转录PCR和Western blot法鉴定表达PVL的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。分别使用表达PVL的MRSA(MRSA^(PVL+))和不表达PVL的MRSA(MRSA^(PVL-))感染THP-1细胞,于感染后1、3、6 h收集细胞,采用实时定量PCR检测自噬相关基因3(ATG3)、ATG4B、ATG5、ATG7、ATG12;Western blot法检测beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化的PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化的AKT(p-AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化的mTOR(p-mTOR)、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、caspase-3的蛋白水平;二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针负载法检测细胞活性氧(ROS)水平;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡。结果成功制备PVL多克隆抗体,鉴定出1株MRSA^(PVL-)菌和1株MRSA^(PVL+)菌。分别以两株菌与THP-1细胞共培养1 h,MRSA^(PVL+)组仅ATG7表达量显著高于MRSA^(PVL-)组和正常对照组;共培养3 h,MRSA^(PVL+)组ATG7和ATG12表达量高于MRSA^(PVL-)组和正常对照组,其他基因表达量变化不明显。感染1、3、6 h,MRSA^(PVL+)感染组细胞PI3K、AKT和mTOR磷酸化水平显著低于MRSA^(PVL-)感染组和正常对照组;感染1 h和3 h,MRSA^(PVL-)感染组细胞PI3K、AKT和mTOR磷酸化水平显著低于正常对照组;感染6 h,MRSA^(PVL-)菌感染组细胞mTOR磷酸化水平显著低于正常对照组。感染1、3、6 h,MRSA^(PVL+)组细胞ROS水平和凋亡率均高于MRSA^(PVL-)组和正常对照组,且随着感染时间的延长细胞ROS水平和凋亡率持续增加;MRSA^(PVL-)组细胞ROS水平和凋亡率也高于正常对照组。结论MRSA^(PVL+)对THP-1细胞PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制作用更强,可促进ATG12/ATG7/ATG5自噬通路活化增加THP-1细胞自噬;同时,MRSA^(PVL+)诱导THP-1细胞ROS产生增加,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) Panton-valentine杀白细胞素(PVL) 巨噬细胞 自噬 凋亡
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儿科Panton-Valentine杀白细胞素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子特征及Panton-Valentine杀白细胞素基因多态性和耐药特征
3
作者 孙静 李向梅 +7 位作者 孙明姣 王丽娟 刘颖超 王传清 邓秋莲 刘岚 杨永弘 沈叙庄 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期1707-1711,共5页
目的研究儿童感染Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离株分子特征、PVL基因序列变异情况及耐药特征。方法对PVL阳性MRSA感染患儿临床资料进行回顾性调查,分析病例临床特征;采用PCR联合测序对MRS... 目的研究儿童感染Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离株分子特征、PVL基因序列变异情况及耐药特征。方法对PVL阳性MRSA感染患儿临床资料进行回顾性调查,分析病例临床特征;采用PCR联合测序对MRSA临床分离株进行多位点序列分型(MLST);并应用分段PCR扩增PVL基因,拼接序列与日本ST30 CA-MRSA菌株NN1的PVL序列进行比对,分析序列变异与STs分型之间的关系,构建系统树对PVL基因的系统发生多样性进行分析;采用琼脂稀释法进行16种抗生素的体外药物敏感试验。结果在73例PVL阳性MRSA感染病例中:皮肤软组织感染35例(47.9%),肺炎27例(37.0%),其他严重感染及健康儿童分离株中也检测到PVL基因;社区感染55例(75.3%)。感染菌株MLST分型共有9种,最常见的3种为ST59、ST910、ST338,分别占53.4%、17.8%、9.6%。PVL序列检测及比对结果:共发现9个核苷酸位点变异,其中3个为非同义突变(16 C→A,62 C→T,527 A→G),其余均为同义突变;有9种不同的单体型序列,各STs分型在9种序列中呈散在分布;所研究的MRSA 71株为H型,仅2株R型。PVL阳性MRSA菌株对红霉素、克林霉素、头孢呋辛耐药率高达94.5%、86.3%和82.2%。结论 PVL阳性MRSA分离株来源广泛,以皮肤软组织感染和肺炎为主;分子分型以ST59型最为常见;lukSF-PV序列高度保守,序列变异主要为H型,R型罕见。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 甲氧西林耐药 Panton—valentine杀白细胞素 等位基因变异
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Valentine’s Day
4
作者 王宗文 《语言教育》 2002年第2期15-17,共3页
Every February,across the country,candy,flowers,and gifts are exchanged between loved ones,all in the name of St.Valentine.But who is thismysterious saint and why do we celebrate thisholiday?
关键词 FLOWERS exchanged celebrate GREETING BEGIN valentine s DAY FERTILITY himself TODAY
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Prevalence of Panton Valentine Leukocidin in Carriage and Infective Strains of <i>Staphylococcus aureus</i>at a Referral Hospital in Kenya
5
作者 Geoffrey Omuse Patricia Shivachi +1 位作者 Samuel Kariuki Gunturu Revathi 《Open Journal of Medical Microbiology》 2013年第1期5-11,共7页
Panton valentine leukocidin (PVL) is a pore forming exotoxin that is expressed by some Staphylococcus aureus (S. aureus) strains and is thought to add to its virulence. The prevalence of PVL in carriage and disease ca... Panton valentine leukocidin (PVL) is a pore forming exotoxin that is expressed by some Staphylococcus aureus (S. aureus) strains and is thought to add to its virulence. The prevalence of PVL in carriage and disease causing strains varies considerably from region to region. This study compared the prevalence of the PVL gene in S. aureus isolates obtained from healthcare workers and from patients seen at the Aga Khan University Hospital Nairobi (AKUHN). S. aureus isolates obtained from healthcare workers and patients attended to at AKUHN between July 2010 and March 2011 were used for this study. Forty five S. aureus isolates from healthcare workers and 63 from clinical specimens obtained from 59 patients were analysed for the PVL gene. The prevalence of PVL in isolates from healthcare workers was 24.4% compared to 39.7% in the isolates causing infection (P = 0.098). PVL prevalence was 58.8% in S. aureus isolates obtained from skin and soft tissue infections (SSIs) compared to 25.0% in carriage isolates (P = 0.002, OR 4.29). Prevalence in isolates from invasive infections was 11.1%. Patients with PVL positive S. aureus were younger than those with PVL negative isolates (P = 0.082). The high prevalence of PVL is comparable with that reported in other African countries. The significance of the high prevalence of PVL in S.aureus isolates carried by health care workers at AKUHN is unclear at the moment. PVL prevalence is significantly higher in S. aureus isolates causing SSIs compared to carriage and invasive isolates. 展开更多
关键词 Staphylococcus AUREUS S. AUREUS Panton valentine Leukocidin PVL
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Be My Valentine
6
《疯狂英语(初中天地)》 北大核心 2006年第2期19-19,共1页
A man walks into a post office one day and sees a middle-aged, balding[秃头的] man standing at the
关键词 Be My valentine
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Identification of a T-cell epitope in the <i>Staphylococcus aureus</i>Panton-Valentine LukS-PV component
7
作者 Eric L. Brown Keri Csencsits Smith Maria Gabriela Bowden 《Open Journal of Immunology》 2012年第3期111-115,共5页
We previously observed the elicitation of a significant delayed-type hypersensitivity response to the Panton-Valentine leukocidin (PVL) LukS-PV subunit following subcutaneous immunization (Brown et al., Clinical Micro... We previously observed the elicitation of a significant delayed-type hypersensitivity response to the Panton-Valentine leukocidin (PVL) LukS-PV subunit following subcutaneous immunization (Brown et al., Clinical Microbiology and Infection, 2009, 156: 156-164). A LukS-PV-specific cell line (LST) was screened for proliferative responses against a panel of 25 amino acid-long peptides spanning the length of LukS-PV (amino acids 29-312). This analysis demonstrated that stimulation of LST with LukS-PV resulted in significant proliferative responses and adoptive transfer of LST into na?ve mice conferred a LukS-PV-specific DTH response following challenge. Challenge of mice adoptively transferred with LST with peptides 7 (149-173), 8 (169-193) and 14 (289-312) also elicited a measurable DTH response suggesting that these peptides contained T cell epitopes. 展开更多
关键词 STAPHYLOCOCCUS Cell Mediated Immunity Panton-valentine Leukocidin T Cells
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Screening for Panton-Valentine Leukocidin Toxin Genes in Multi-Drug Resistant Methicillin-Resistant <i>Staphylococcus aureus</i>Nasal Isolates from Healthy School Children in Mariental, Namibia
8
作者 Sunette Walter Ronnie Böck 《Journal of Biosciences and Medicines》 2020年第12期13-19,共7页
Panton-Valentine leukocidin (PVL) is one of the toxins responsible for increased virulence of <em>Staphylococcus aureus</em>. In school settings where children are in close contact with each other, <em&... Panton-Valentine leukocidin (PVL) is one of the toxins responsible for increased virulence of <em>Staphylococcus aureus</em>. In school settings where children are in close contact with each other, <em>S. aureus</em> strains, including those that may produce PVL, can be transmitted and spread in the community. Twenty-two multi-drug resistant MRSA nasal isolates from children enrolled in five schools in the town of Mariental and the multi-drug resistant American Type Culture Collection MRSA reference strain <em>S. aureus</em> ATCC 33591 (PVL-negative control) were used for molecular assays. Plasmid deoxyribonucleic acid (DNA) of isolates was amplified by polymerase chain reaction (PCR) and amplified PCR products were electrophoresed on a 2.5% (w/v) agarose gel containing 12 μl 0.5 μg/ml ethidium bromide and 1× TAE (Tris-acetate-EDTA) buffer at 90 volts for 50 minutes. The developed gel was viewed for the PVL-associated <em>lukS</em> and <em>lukF</em> genes that amplified at 151 bp and 406 bp, respectively. Our results indicated that seven nasal isolates had PVL toxin gene(s). From the seven isolates, three were tested positive for both <em>lukS</em> and<em> lukF</em>genes, one tested positive for only<em> lukS</em>, and three tested positive for only <em>lukF</em>. Two of the isolates harbouring both<em> lukS</em> and <em>lukF</em> genes shared the same antibiotic resistance pattern and one of them could also produce enterotoxin A. One of the isolates with only <em>lukF </em>gene could produce enterotoxins B and C. These toxin-producing isolates can be expected to be more virulent than non-producers. Children should be educated on the importance of regular handwashing with soap and water to prevent the spread of potentially virulent staphylococci amongst them and the wider community. This work warrants a larger study to be carried out to investigate PVL toxin and its associated infections in <em>Staphylococcus</em> from school children in Namibia. 展开更多
关键词 Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Panton-valentine Leukocidin Children
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Happy Valentine’s Day!
9
作者 Yuki 《美眉》 2019年第2期176-177,共2页
过了圣诞和新年,转眼就到了一年中最浪漫的节日—情人节.每年的情人节怎么少得了为男神亲手准备的甜点呢?俗话说'要想抓住一个人的心,就要先抓住他的胃',这次就跟着ViVi酱学一道可爱的情人节点心吧.
关键词 细砂糖 HAPPY valentine’s DAY
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Valentine’s day,我拿什么感动你?
10
《电子竞技》 2008年第3期114-117,共4页
当春天第一朵玫瑰盛开的时候,沉浸在爱河的人们都知道.他们将迎来属于自己的节日——情人节。当寄托着真挚爱意的鲜花、贺卡、巧克力献在情人面前时,一份能打动对方礼物也是必不可少的。于是花瓣凋零之后.你们的爱还有一个恒古不变的见... 当春天第一朵玫瑰盛开的时候,沉浸在爱河的人们都知道.他们将迎来属于自己的节日——情人节。当寄托着真挚爱意的鲜花、贺卡、巧克力献在情人面前时,一份能打动对方礼物也是必不可少的。于是花瓣凋零之后.你们的爱还有一个恒古不变的见证。如果你还在为今年的情人节礼物烦恼的话.希望这个专题能给你一些启发,我们也衷心祝愿天下所有有情人忠诚眷属。其实关于情人节的由来.有许多不同的典故,流传最广的应该属古罗马时的一个说法。当时有一个名叫Valentine的修士.他不忍看见暴君因战争需要而禁止男女青年婚恋的荒唐规定,主动为相爱男女主持婚礼.后来这位修士被打入大牢,折磨至死,他死的那一天是2月14日.人们为了纪念他,这一天就成为了今天的情人节,英语中的说法是Valentine's day。 展开更多
关键词 情人节 valentine’s day
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My Forever Valentine
11
作者 崔淑娴 《中学生英语(初中版)》 2008年第5期26-27,共2页
The traditional holidays in my family when I was a child were spent timing elaborate(精心制作的) meals around football games. My father tried to make pleasant chitchat(闲聊) and eat as much as he could during halftime... The traditional holidays in my family when I was a child were spent timing elaborate(精心制作的) meals around football games. My father tried to make pleasant chitchat(闲聊) and eat as much as he could during halftime. At Christmas he found time to have a cup or two of holiday cheer 展开更多
关键词 My Forever valentine
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情人的礼物Valentine
12
《中国体育(中英文版)》 2007年第3期108-109,共7页
情人节到了,是考验你经济实力和眼光的时刻来了……别以为情人节就是过了2月14。通常,2月14日是诉诸情意的日子,而在2月14日这天,如果一方在2月14收到礼物且对对方有同样好感时,就会在这天回送对方一份情人礼物,表示彼此已经心心相印,... 情人节到了,是考验你经济实力和眼光的时刻来了……别以为情人节就是过了2月14。通常,2月14日是诉诸情意的日子,而在2月14日这天,如果一方在2月14收到礼物且对对方有同样好感时,就会在这天回送对方一份情人礼物,表示彼此已经心心相印,这一天被人叫做"白色情人节"。嫌你在情人节送给他(她)的礼物不够独特,不够派?那就在3月14日好好补偿一下吧! 展开更多
关键词 白色情人节 valentine 这一天 感时 你那 回送 等离子电视 向下兼容 二人世界 外力冲击
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No Divorce on Chinese Valentine’s Day-Making Way for Love?
13
《ChinAfrica》 2016年第10期12-13,共2页
The Qixi Festival, also known as Chinese Valentine's Day, has been celebrated as a symbo of eternal love in Chinese culture for thousands of years. Every year, many young Chinese couples decide to tie the knot on thi... The Qixi Festival, also known as Chinese Valentine's Day, has been celebrated as a symbo of eternal love in Chinese culture for thousands of years. Every year, many young Chinese couples decide to tie the knot on this day of romance, flooding local marriage registration. 展开更多
关键词 No Divorce on Chinese valentine’s Day-Making Way for Love
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江苏省鸟类新纪录——比氏鹟莺
14
作者 徐有乐 王俊杰 陈潘 《湿地科学与管理》 2025年第1期95-96,共2页
2024年5月,在江苏盐城大丰麋鹿国家级自然保护区北侧(33°6'57.74″N,120°86'53.18″E)海堤林中,观察并拍摄到1只具顶冠纹,腹部黄色的小型莺类。经查阅相关文献与书籍,对比该鸟的形态特征后,鉴定为比氏鹟莺(Phylloscop... 2024年5月,在江苏盐城大丰麋鹿国家级自然保护区北侧(33°6'57.74″N,120°86'53.18″E)海堤林中,观察并拍摄到1只具顶冠纹,腹部黄色的小型莺类。经查阅相关文献与书籍,对比该鸟的形态特征后,鉴定为比氏鹟莺(Phylloscopus valentine),为江苏省鸟类分布新纪录。 展开更多
关键词 比氏鹟莺 鸟类新纪录 江苏省
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型与耐药性研究 被引量:99
15
作者 赵彩芸 吕媛 +4 位作者 李耘 张佳 王珊 刘健 杨维维 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期3102-3105,共4页
目的研究临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药性,检测MRSA葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)基因型,并进行杀白细胞素(PVL)毒力基因检测。方法采用标准平皿两倍稀释法测定250株MRSA对多种抗菌药物最低抑菌浓度(MIC),采用多重PCR方... 目的研究临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药性,检测MRSA葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)基因型,并进行杀白细胞素(PVL)毒力基因检测。方法采用标准平皿两倍稀释法测定250株MRSA对多种抗菌药物最低抑菌浓度(MIC),采用多重PCR方法对MRSA进行SCCmec基因分型,单一PCR方法对MRSA菌株进行PVL毒力基因检测。结果 250株MRSA经多重PCR方法检测SCCmec基因型,SCCmecⅡ-dcs型菌株30株,占12.0%,Ⅱ型的亚型1株,占0.4%,Ⅲ型62株,占24.8%,含有342 bp(dcs)额外扩增条带的Ⅲ型菌株141株,占56.4%,Ⅳ型7株,占2.8%,Ⅳa型1株,占0.4%,Ⅴ型1株,占0.4%,7株细菌未能分型,占2.8%,未发现Ⅰ型;单一PCR方法获得PVL呈阳性的菌株共2株,占临床分离MRSA的0.8%;各基因型对多种抗菌药物呈现不同程度的耐药。结论临床分离的MRSA以SCCmecⅢ型为主;其次为SCCmecⅡ型;有少量SCCmecⅣ型,少数菌PVL毒力基因阳性。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 葡萄球菌染色体mec盒 杀白细胞素
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学研究 被引量:21
16
作者 潘宏升 田素飞 +1 位作者 年华 褚云卓 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第1期34-38,共5页
了解我院患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子流行病学特点,为临床抗感染治疗提供依据。收集2007年1月~2008年9月我院分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌共54株,采用PCR进行SCCmec基因分型、葡萄球菌A蛋白(SPA)分型,并检测杀白... 了解我院患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子流行病学特点,为临床抗感染治疗提供依据。收集2007年1月~2008年9月我院分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌共54株,采用PCR进行SCCmec基因分型、葡萄球菌A蛋白(SPA)分型,并检测杀白细胞毒素(PVL)基因,同时应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性分析。54株MRSA菌株SCCmec基因分型为SCCmecⅡ型17株,SCCmecⅢ型33株,SCCmecⅣ型2株,SCCmecⅤ型2株;SPA基因分型将28株归属为t030,9株为t002,8株为t037,5株为t570,2株为t437,t163和t796各1株;PVL毒素检测只有2株SCCmecⅣ型菌株阳性;PFGE证实院内MRSA感染主要为2种克隆株传播,同时还有其他型别出现。本院MRSA流行传播的SCCmec基因型主要以Ⅲ型占优势,同时发现有携带PVL毒素的CA-MRSA分离株流行,应引起密切关注。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 基因分型 杀白细胞毒素
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金葡菌P-V杀白细胞毒素的原核表达及对人多形核白细胞的杀伤效应(英文) 被引量:4
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作者 黄静 张天托 +3 位作者 吴本权 朱家馨 刘慧 周宇麒 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1822-1829,共8页
目的:通过基因工程方法获得重组的杀白细胞毒素,为深入研究其致病机制打下基础。方法:利用PCR方法从产杀白细胞毒素金葡菌临床分离株的基因组DNA中克隆PVL-S和PVL-F基因序列,分别将其克隆到载体pET22b中,构建重组pET22b-LuKS和pET22b-L... 目的:通过基因工程方法获得重组的杀白细胞毒素,为深入研究其致病机制打下基础。方法:利用PCR方法从产杀白细胞毒素金葡菌临床分离株的基因组DNA中克隆PVL-S和PVL-F基因序列,分别将其克隆到载体pET22b中,构建重组pET22b-LuKS和pET22b-LuKF原核表达载体,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,异丙基硫代β-D半乳糖苷(sopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达,将其可溶性表达经镍离子螯合亲和层析纯化后,通过对外周血粒细胞和多形核白细胞的刺激反应鉴定其活性。结果:以PCR方法获得PVL-S和PVL-F基因片段,与克隆载体连接后测序与文献报道的基本一致,成功构建了pET22b-LuKS和pET22b-LuKF原核表达质粒,并高效诱导表达出相对分子质量约34 kD的S蛋白及相对分子质量约35 kD的F蛋白。重组蛋白(rPVS,rPVF)在37℃经IPTG诱导时均以包涵体形式存在,而30℃时部分出现可溶性表达,部分为包涵体。将上清可溶性重组蛋白作用于外周血粒细胞,可导致粒细胞出现凋亡,部分出现坏死。结论:成功构建了表达载体pET22b-LuKS和pET22b-LuKF,对其编码的S片段和F片段进行了原核表达和鉴定,高效表达了杀白细胞毒素的S和F两类蛋白,为进一步对其致病机制和免疫原性的研究奠定基础。 展开更多
关键词 葡萄球菌 金黄色 杀白细胞毒素 原核表达 中性白细胞
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2008-2011年四年我院560株MRSA的耐药性分析及分子分型 被引量:9
18
作者 何秋莹 张智贤 +5 位作者 曾华 黄彬 蔡壬辛 钟良英 陈渡波 陈少谦 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期82-86,共5页
目的了解我院2008年到2011年临床分离的560株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的葡萄球菌盒染色体mec(SCCmec)分型、杀白细胞素(PVL)阳性率及其耐药性分析,为临床用药及流行病学调查提供依据。方法收集我院2008年到2011年MRSA共560株,用... 目的了解我院2008年到2011年临床分离的560株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的葡萄球菌盒染色体mec(SCCmec)分型、杀白细胞素(PVL)阳性率及其耐药性分析,为临床用药及流行病学调查提供依据。方法收集我院2008年到2011年MRSA共560株,用聚合酶链反应(PCR)检测其mecA基因、SCCmec分型及PVL基因,应用微量肉汤法检测MRSA对环丙沙星、庆大霉素、四环素、复方新诺明、青霉素G、克林霉素、红霉素、利奈唑胺、莫西沙星、苯唑西林、奎奴普丁/达福普汀、利福平和万古霉素13种抗生素的药物敏感性,采用头孢硝噻吩纸片法检测β内酰胺酶。结果 560株mecA基因均为阳性;SCCmec分型Ⅰ型占0.4%,Ⅱ型占12.1%,Ⅲ型占50.9%,Ⅳa型占3.9%,Ⅴ型占3.6%,剩下的未能分型;PVL基因阳性菌株23株,占4.1%;MRSA对青霉素G、苯唑西林及β内酰胺类抗生素几乎百分百耐药,而对环丙沙星、庆大霉素、四环素、克林霉素、红霉素和莫西沙星耐药性较高,分别为79.4%、71.3%、76.9%、73.8%、84.3%和73.2%,其对复方新诺明、Linezolid、奎奴普丁/达福普汀耐药性较低,分别为24.3%、0.2%、0.9%,未检出万古霉素耐药菌株。结论我院2008-2011年MRSA的SCCmec分型主要以Ⅲ型为主,占50.9%,且具有多重耐药特性,来源多为医院获得性感染,社区相关性MRSA菌株占少量。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 基因型 杀白细胞素 耐药性
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儿童与成人金黄色葡萄球菌分离株携带PVL基因状况比较 被引量:6
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作者 胡龙华 熊建球 +5 位作者 周信云 余晓君 贾坤如 胡晓彦 章白苓 桂炳东 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期251-255,共5页
目的了解从儿童或成人中分离获得的金黄色葡萄球菌(金葡菌)菌株携带Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因的差异。方法分别对66株从儿童中及76株成人中分离获得的金葡菌菌株采用多重PCR,检测金葡菌16SrRNA基因、PVL基因和甲氧西林耐药... 目的了解从儿童或成人中分离获得的金黄色葡萄球菌(金葡菌)菌株携带Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因的差异。方法分别对66株从儿童中及76株成人中分离获得的金葡菌菌株采用多重PCR,检测金葡菌16SrRNA基因、PVL基因和甲氧西林耐药决定分子A(mecA)基因;并同时检测耐甲氧西林金葡菌(MRSA)的葡萄球菌盒式染色体mec(SCCmec)基因型及亚型。结果在66株从儿童分离的金葡菌株中,共检出7株mecA基因阳性,MRSA 7/66(占10.6%);而在76株从成人分离的菌株中,共检出39株mecA基因阳性,MRSA 39/76(占51.3%),成人菌株MRSA发生率显著高于儿童(χ2=26.73,P<0.01)。从儿童或成人中分离的金葡菌菌株PVL基因携带率分别为31/66(占47.0%)和6/76(占7.9%);从儿童或成人中分离的甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)的PVL基因携带率分别为29/59(占49.2%)和2/37(占5.4%),儿童与成人的差异均有统计学意义(P<均0.01);从儿童中分离的2株携带PVL基因的MRSA菌株都属于SCCmecⅣ型,从成人中分离的4株携带PVL基因的MRSA菌株中,SCCmecⅠ型、Ⅱ型各1株,SCCmecⅢ型2株。结论从儿童中分离的金葡菌株携带PVL基因阳性率较成人高,携带PVL基因以MSSA菌株为主。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 成人 儿童 PVL基因
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型及PVL基因研究 被引量:20
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作者 潘军 刘文恩 +4 位作者 张运丽 梁湘辉 邹明祥 陈振华 简子娟 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第17期2541-2544,共4页
目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)SCCmec基因型的分布特征并检测杀白细胞毒素(PVL)基因。方法收集2007年10月-2008年5月临床标本中,分离的非重复金黄色葡萄球菌110株,用头孢西丁纸片扩散法对MRSA进行初筛;用多重聚合酶链反应(PCR... 目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)SCCmec基因型的分布特征并检测杀白细胞毒素(PVL)基因。方法收集2007年10月-2008年5月临床标本中,分离的非重复金黄色葡萄球菌110株,用头孢西丁纸片扩散法对MRSA进行初筛;用多重聚合酶链反应(PCR)对MRSA进行SCCmec基因分型及PVL基因检测;用琼脂稀释法对MRSA菌株进行抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)检测。结果 64株MRSA中,63株医院获得性(HA)-MRSA,1株社区获得性(CA)-MRSA,其中SCCmecⅢ型57株(89.0%),Ⅱ型1株(1.6%),SCCmecⅣ型1株(1.6%),未分型5株(7.8%);未发现SCCmecⅠ、Ⅴ型菌株;SCCm ecⅡ型、SCCm ecⅢ型的菌株均为多药耐药株,SCCmecⅣ型的菌株除对β-内酰胺类抗菌药物耐药外,对其他类抗菌药物较敏感。结论 HA-MRSA主要以SCCmecⅢ型为主,CA-MRSA菌株为SCCmecⅣ型,携带PVL毒力基因,HA-MRSA对抗菌药物呈多药耐药性,CA-MRSA菌株耐药谱比HA-MRSA菌株耐药谱窄,加强对MRSA的监测,对指导临床合理使用抗菌药物具有重要意义。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 葡萄球菌染色体mec 杀白细胞毒素
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