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Establishment of a Method for Determination of Anemoside B4 Content in Pulsatilla Water Extract 被引量:2
1
作者 王建舫 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2015年第8期1600-1602,共3页
[Objective] This study aimed to establish a new method for determination of anemoside B4 content in pulsatilla water extract. [Method] Using acetonitrile-water (28:72) as the mobile phase, the high performance liqu... [Objective] This study aimed to establish a new method for determination of anemoside B4 content in pulsatilla water extract. [Method] Using acetonitrile-water (28:72) as the mobile phase, the high performance liquid chromatography, equipped with UV detector, was used to determine the anemoside B4 content in pulsatilla water extract. [Result] In the concentration range of 300-800 μg/ml, anemoside B4 content showed a good linear relationship with peak area. The average recovery of anemoside B4 was 98.12% (n=-6; RSD=-1.37%). [Conclusion] The established method meets the requirements by methodology, and it can be used to determine the anemoside B4 content in pulsatilla water extract. 展开更多
关键词 Pulsatilla Anemoside B4 High performance liquid chromatography method establishment
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Yield and tillering response of super hybrid rice Liangyoupeijiu to tillage and establishment methods 被引量:6
2
作者 M.A.Badshah Naimei Tu +2 位作者 Yingbin Zou M.Ibrahim Ke Wang 《The Crop Journal》 SCIE CAS 2014年第1期79-86,共8页
Tillering is an important agronomic trait for rice grain production. To evaluate yield and tillering response, Liangyoupeijiu(super hybrid rice) was grown in Hunan, China during 2011–2012 under different methods of t... Tillering is an important agronomic trait for rice grain production. To evaluate yield and tillering response, Liangyoupeijiu(super hybrid rice) was grown in Hunan, China during 2011–2012 under different methods of tillage(conventional and no-tillage system) and crop establishment methods(transplanting at a spacing of 20 cm × 20 cm with one seedling per hill and direct seeding at a seeding rate of 22.5 kg ha-1). Our results revealed that, at maximum tillering(Max.) and at maturity(MA) stages, direct seeding(DS) resulted in 22% more tillers than transplanting(TP) irrespective of tillage system. Tiller mortality reached a peak between panicle initiation(PI) and booting(BT) stages, and was 16% higher under conventional tillage(CT) than under no-tillage(NT). Transplanting required 29% more time for the completion of tillering and less for DS. Tillering rate was 43% higher in DS than TP under either CT or NT. There was a positive correlation between panicle number per m2and maximum tiller number per m2, but not panicle-bearing tiller rate. The panicle bearing tiller rate was higher under DS than TP and higher under NT than CT. Tiller dry weight gradually increased up to heading(HD) stage, and was 14% higher under TP than DS. Leaf area(cm2tiller-1) gradually increased from Max. to HD stage and then decreased by 34% in conventional tillage transplanting(CTTP) and 45% in no-tillage transplanting(NTTP) from 12DAH–24DAH(days after heading), but was similar(35%) under DS under either CT or NT. Grain yield was higher under CTTP owing to the larger sink size(heavier panicle, more spikelets in per cm length of panicle) than under DS. 展开更多
关键词 establishMENT method Super hybrid rice TILLAGE TILLERING YIELD
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Establishment and application of detective method of anti-body absorbing red blood cell ARBC) by flow cytometer (FCM)
3
《中国输血杂志》 CAS CSCD 2001年第S1期374-,共1页
关键词 BODY FCM by flow cytometer establishment and application of detective method of anti-body absorbing red blood cell ARBC CELL flow
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Establishment of a new method of digital orthopedic surgery and its widespread clinical application
4
作者 丁焕文 《外科研究与新技术》 2011年第2期126-127,共2页
Objective To create an unique new method of digital orthopedic surgery and widely apply to spinal surgery,treatment of bone and joint injuries,ligament reconstruction and repair,bone minor resection and reconstruction... Objective To create an unique new method of digital orthopedic surgery and widely apply to spinal surgery,treatment of bone and joint injuries,ligament reconstruction and repair,bone minor resection and reconstruction,serious bone and 展开更多
关键词 establishment of a new method of digital orthopedic surgery and its widespread clinical application
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DHAV-1、DAstV-1、DHAV-3和APMV-1四重PCR检测方法的建立及应用
5
作者 李海名 吴晓燕 +3 位作者 康华裕 王旭 王一涵 张彦龙 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2026年第2期94-99,共6页
为了建立一种能同时检测鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)、鸭星状病毒1型(DAstV-1)、鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)和禽副黏病毒1型(APMV-1)的方法,试验根据GenBank中公布的DHAV-13A基因、DAstV-11a基因、DHAV-33a3b基因和APMV-1 F基因序列分别设计4对... 为了建立一种能同时检测鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)、鸭星状病毒1型(DAstV-1)、鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)和禽副黏病毒1型(APMV-1)的方法,试验根据GenBank中公布的DHAV-13A基因、DAstV-11a基因、DHAV-33a3b基因和APMV-1 F基因序列分别设计4对特异性引物,通过优化反应条件及特异性、敏感性和重复性试验建立了四重PCR检测方法,并采用该方法对96份疑似病毒感染的鸭病料样本进行检测。结果表明:DHAV-1、DHAV-3、DAstV-1和APMV-1四重RT-PCR检测方法的最优退火温度和引物浓度分别为56℃、0.8μmol/L。该方法能同时扩增出大小为195 bp(DHAV-13A基因)、289 bp(DAstV-11a基因)、462 bp(DHAV-33a3b基因)、726 bp(APMV-1基因)的特异性片段,而与鸭瘟病毒(DPV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鸭圆环病毒(DuCV)和鸭甲肝病毒2型(DHAV-2)无交叉反应;对DHAV-1、DAstV-1、DHAV-3和APMV-1的最低检测限分别为1.111×10~4 copies/μL、3.078×10~2 copies/μL、4.938×10~3 copies/μL、3.456×10~2 copies/μL;批间重复试验和批内重复试验的3个平行样本的结果均一致。采用该方法对96份临床样本的检测结果与参考方法的符合率为100%。说明本研究建立的针对DHAV-1、DHAV-3、DAstV-1和APMV-1四重PCR检测方法特异性强、敏感性较高、重复性好,在临床样本检测中展现出良好的应用效果。 展开更多
关键词 鸭甲肝病毒 鸭星状病毒 禽副黏病毒1型 混合感染 多重PCR检测方法 检测方法建立
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中风中医证候动物模型的建立与评价研究进展
6
作者 黄竞萱 邵妍 《实用中医内科杂志》 2026年第1期108-114,共7页
中风又称脑卒中,是一种严重威胁人类健康的急性脑血管疾病,具有高发病率、高致残率和高病死率的特点。符合中风中医证候动物模型的建立对于深入认识中风的病因病机、科学评价中医药疗效以及推动中医药现代化研究具有重要意义。文章对中... 中风又称脑卒中,是一种严重威胁人类健康的急性脑血管疾病,具有高发病率、高致残率和高病死率的特点。符合中风中医证候动物模型的建立对于深入认识中风的病因病机、科学评价中医药疗效以及推动中医药现代化研究具有重要意义。文章对中风中医证候动物模型的建立方法与评价研究进展进行了系统归纳。中风中医证候动物模型建立方法多样,目前多采用缺血再灌注、药物刺激、手术等方法,模拟风痰阻络、痰热腑实、气虚血瘀及肝肾阴虚等常见中医证候。中风中医证候模型建立对中医治疗评价,多从行为学表现、生化指标、组织病理变化检测等多个维度展开,以验证模型科学性与临床相关性。尽管当前模型在模拟中医证候方面取得一定成效,但仍存在证候标准化不足、模型稳定性差、重复性低等问题。针对以上问题,文章进一步提出推动证候标准化、优化造模手段、加强多学科交叉融合等方向,提升模型的科学性与临床相关性,为后续中医药研究提供更可靠的实验模型参考,助力深入探索中医药治疗中风的科学内涵与作用机制。 展开更多
关键词 中风 中医证候 动物模型 建立方法 评价研究
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乙型肝炎表面抗原确认方法的建立及评价
7
作者 王菊英 纪婷婷 刘瑶瑶 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第9期2251-2254,共4页
目的:基于化学发光免疫分析法及其中和试验,建立并评价用于乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的确认方法。方法:①确认方法的检测程序:首先通过预试验确定中和抗体的最佳浓度。进行HBsAg确认时,在已加入测试血清的检测杯和对照杯中,按照1∶1比例(... 目的:基于化学发光免疫分析法及其中和试验,建立并评价用于乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的确认方法。方法:①确认方法的检测程序:首先通过预试验确定中和抗体的最佳浓度。进行HBsAg确认时,在已加入测试血清的检测杯和对照杯中,按照1∶1比例(100μl∶100μl)分别加入中和抗体和术前四项(乙肝血清学标志物、HCV抗体、梅毒螺旋体抗体、HIV抗体)全阴血清,混匀后,37℃下温育30 min,使用西门子Atellica IM HBsAg检测程序测试预处理的标本。②确认方法的可靠性评价:比对分析64例不同浓度HBsAg有反应性血清的确认方法检测结果与西门子确认试剂测试结果的符合率。③确认方法的诊断价值及阳性判断值的确定:以64例HBsAg有反应性标本的西门子确认试剂测试结果为“金标准”,应用ROC曲线统计分析确认方法检测结果的中和率。结果:①预试验中HBsAb≥1285.12 mU/ml时,检测结果中和率均>50%,中和率随着HBsAb浓度的升高而升高,不同浓度HBsAg经相同浓度HBsAb中和后,中和率变化趋势不明显。②两种方法最终结果的符合率为100.00%。③曲线下面积(AUC)为0.9934,阳性判断值为中和率≥47.93%,其敏感度为98.15%,特异度为100.00%。结论:该检测方法简单易行、经济实用、诊断价值高,适于不同浓度HBsAg的确认。 展开更多
关键词 HBSAG 假阳性 中和抗体 确认方法 建立 评价
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厦门市杏林湾水环境中全氟及多氟化合物的分布特征和生态风险评价
8
作者 吴奇润 倪凯文 +3 位作者 杨欣雨 张娴 颜昌宙 张子兴 《生态毒理学报》 北大核心 2025年第4期360-375,共16页
利用高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)建立了43种全氟及多氟烷基化合物(PFASs)的分析方法,对厦门市杏林湾的水体和沉积物的污染水平和潜在生态风险进行了研究。结果表明,杏林湾水样中检测出22种PFASs,ΣPFASs浓度范围为204.27~1350.78 ... 利用高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)建立了43种全氟及多氟烷基化合物(PFASs)的分析方法,对厦门市杏林湾的水体和沉积物的污染水平和潜在生态风险进行了研究。结果表明,杏林湾水样中检测出22种PFASs,ΣPFASs浓度范围为204.27~1350.78 ng·L^(-1),全氟己基乙基磺酸(6:2FTS)为主要污染物。沉积物中检测出19种PFASs,ΣPFASs浓度范围为5.33~301.26 ng·g^(-1),全氟己酸(PFHxA)为主要污染物。来源分析表明,杏林湾中的PFASs主要来自生活污水、工业废水和含氟消费品生产和使用过程。多数PFASs在水相和沉积物相的来源不同,水相反映了当前的污染输入,而沉积物相反映了历史污染累计。风险商评价结果表明,部分点位水体6:2FTS和6:2氯代多氟醚磺酸(6:2Cl-PFESA)表现出高风险,全氟辛酸(PFOA)、全氟十二烷酸(PFDOA)和全氟辛烷磺酸(PFOS)等呈现中风险,而部分点位沉积物中全氟癸酸(PFDA)、PFOS和全氟戊酸(PFPA)表现出高风险,PFOA、全氟庚酸(PFHpA)和全氟丁酸(PFBA)等呈现中风险,其余化合物处于低风险状态。这些中高风险化合物需要特别关注,其潜在生态危害会对水生态系统产生深远影响。 展开更多
关键词 全氟及多氟化合物 生态风险 方法建立 污染水平
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基于报告基因法检测CpG QCX1佐剂体外生物活性方法的建立和验证
9
作者 葛君 何鹏 +5 位作者 姜传文 黄红颖 张双 卢锦标 李建强 胡忠玉 《中国新药杂志》 北大核心 2025年第16期1748-1754,共7页
目的:建立并验证基于报告基因法的CpG QCX1佐剂体外生物活性检测方法。方法:按ICH Q2(R2)和《中华人民共和国药典》2020年版三部通则9401指导原则并结合实验设计(design of experiment,DOE)优化分析方法,并验证方法的特异性、相对准确... 目的:建立并验证基于报告基因法的CpG QCX1佐剂体外生物活性检测方法。方法:按ICH Q2(R2)和《中华人民共和国药典》2020年版三部通则9401指导原则并结合实验设计(design of experiment,DOE)优化分析方法,并验证方法的特异性、相对准确度、中间精密度、线性和范围。结果:建立的方法确定待测样品浓度范围为0.195~50μg·mL^(-1),稀释倍数为1∶2,细胞浓度为4.5×10^(5)个·mL^(-1),孵育时间为16 h。该方法可特异性检测CpG QCX1,在50%~185%的线性范围内,5个活性水平的相对偏倚为-2.7%~-1.0%,几何变异系数<10%,线性回归相关系数r=0.996,均满足要求。结论:本研究建立的检测方法具有良好的特异性、准确性、稳健性和耐用性,可用于相关CpG产品的质量控制。 展开更多
关键词 CpG QCX1 体外生物活性 方法建立 方法验证 质量控制
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血虚证动物模型建立及评价指标研究
10
作者 陈晓莉 闫广利 《中国医药导刊》 2025年第3期232-238,共7页
血虚证是中医临床上常见的证型之一,由于人体中的血液无法滋养五脏六腑、经脉、四肢百骸,临床表现为面色无华、头晕目眩、心慌失眠等。临床上对于血虚证的诊断很大程度受医者个人经验和主观判断影响,使得血虚证的诊断难以统一和标准化,... 血虚证是中医临床上常见的证型之一,由于人体中的血液无法滋养五脏六腑、经脉、四肢百骸,临床表现为面色无华、头晕目眩、心慌失眠等。临床上对于血虚证的诊断很大程度受医者个人经验和主观判断影响,使得血虚证的诊断难以统一和标准化,导致血虚证研究发展滞后。为推动血虚证的临床诊断标准化及研究进程,建立科学、合理、与中医临床实践相符合的血虚证动物模型及其评价体系尤为重要。血虚证动物模型的建立和评价指标的研究为中医药治疗血虚证提供了重要的实验基础。目前,血虚证动物模型主要通过物理、化学等手段损耗实验动物血液或抑制其造血功能来制备。本研究总结血虚证动物模型建立的常用方法,包括失血法、化学损伤法、溶血法、辐射损伤法和复合药物法,根据血虚证临床患者的症状,分析血虚证动物模型的评价指标,如一般体征、外周血象、骨髓造血功能、造血及免疫因子和多组学的生物标志物,以期提高后续血虚证相关研究的科学性和临床应用价值。 展开更多
关键词 血虚证 动物模型 建立方法 评价指标
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声学法测量气相黏度的实验方法探索
11
作者 谭颖 彭夏尧 +2 位作者 杨震 张凯 段远源 《计量学报》 北大核心 2025年第4期600-606,共7页
针对传统黏度测量方法难以实现高精度测量热力学平衡态下气相黏度的问题,提出使用声学法测量气相黏度。该方法通过在共鸣腔内产生共振并解析其中声波能量耗散机制来获得气相黏度。利用具有特殊设计的双腔结构,大大提高粘性耗散在声波能... 针对传统黏度测量方法难以实现高精度测量热力学平衡态下气相黏度的问题,提出使用声学法测量气相黏度。该方法通过在共鸣腔内产生共振并解析其中声波能量耗散机制来获得气相黏度。利用具有特殊设计的双腔结构,大大提高粘性耗散在声波能量耗散中的占比,从而能够从共鸣腔的频率响应获知黏度。初步探索了声学法测量气相黏度的基本原理与黏度修正方法,声波能量耗散主要由粘性边界层、热边界层和腔体体积效应造成,利用逆品质因数法可对气相黏度进行热边界层和腔体体积效应修正,获得更加精确的气相黏度。在此基础上,建立了包含双共鸣腔的实验本体、共振频率测量系统、温度测量与控制系统以及压力测量与配气系统等的完整气相黏度测量实验系统,为后续开展气相黏度高精度测量奠定了实验基础。 展开更多
关键词 气相黏度 声学法 双共鸣腔 逆品质因数法 实验系统建立
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抄手消费习惯调查及抄手皮感官评价方法建立
12
作者 林嘉琪 魏燕超 +3 位作者 汪江华 郭波莉 赵海燕 张影全 《中国食物与营养》 2025年第9期40-46,共7页
目的:调查了解不同人群抄手消费习惯及品质要求,以期面向消费者构建抄手皮感官评价方法。方法:通过问卷调查的方式,收集不同性别、不同年龄段、不同收入水平、不同居住地区人群抄手消费习惯及品质要求,根据262份问卷调查结果筛选抄手皮... 目的:调查了解不同人群抄手消费习惯及品质要求,以期面向消费者构建抄手皮感官评价方法。方法:通过问卷调查的方式,收集不同性别、不同年龄段、不同收入水平、不同居住地区人群抄手消费习惯及品质要求,根据262份问卷调查结果筛选抄手皮感官评价要素,依据消费者对不同要素的关注度占比赋分。结果:消费者对抄手食用品质的关注要素集中在馅料味道(70.23%)和抄手皮口感(67.56%)。在制作抄手时,90.57%的消费者选择从市场购买抄手皮,不同人群对抄手皮品质需求存在差异。消费者对生抄手皮的厚度、软硬度、色泽关注较高,色泽更倾向于乳黄/微黄;对熟抄手皮的爽滑性、色泽、软硬度、弹性关注较高,色泽也更倾向于乳黄/微黄。结论:生抄手皮各要素赋分依次为“色泽”20分、“厚度”25分、“软硬度”25分、“是否粘连”15分、“韧性”15分;熟抄手皮各要素赋分依次为“色泽”20分、“表观状态”15分、“爽滑性”25分、“软硬度”20分、“弹性”15分、“粘牙程度”5分、“耐泡性”10分。 展开更多
关键词 抄手皮 消费习惯 感官评价
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骆驼痘病毒实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:1
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作者 朱道中 梅明珠 +5 位作者 李明 佟铁铸 王莹 丁宁 徐娟 王春霞 《广东畜牧兽医科技》 2025年第1期46-51,共6页
骆驼痘(Camelpox,CML)是一种广泛流行的骆驼病毒性传染病,它主要发生于中东和东北非的大规模骆驼群,给骆驼产业造成了巨大的经济损失。该研究通过对GenBank中所公布的13个骆驼痘病毒分离株全基因组核苷酸序列进行同源性比较,选取其ATIP... 骆驼痘(Camelpox,CML)是一种广泛流行的骆驼病毒性传染病,它主要发生于中东和东北非的大规模骆驼群,给骆驼产业造成了巨大的经济损失。该研究通过对GenBank中所公布的13个骆驼痘病毒分离株全基因组核苷酸序列进行同源性比较,选取其ATIP基因保守序列,筛选出了一套特异性引物和探针,建立了相应的实时荧光PCR检测方法。结果表明,该方法特异性强、重复性好、灵敏度高,其最低检测限度为7.8 copies/μL。 展开更多
关键词 骆驼痘病毒 实时荧光PCR 方法建立
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Optimization of automated patch-clamp technique and comparative analysis with manual patch-clamp:A case study on the TRPV1 channel
14
作者 Guifang Duan Yue Li +3 位作者 Xia Yuan Shuxiang Song Yingli Xu Jianchun Zhou 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 2025年第5期485-492,共8页
Patch-clamp technique serve as a powerful tool for precisely measuring and characterizing ion channel currents,offering critical molecular-level insights essential for drug screening and optimization.By enabling a dee... Patch-clamp technique serve as a powerful tool for precisely measuring and characterizing ion channel currents,offering critical molecular-level insights essential for drug screening and optimization.By enabling a deeper understanding of ion channel behavior,these techniques significantly accelerate the process of drug discovery and development.In recent years,automated patch-clamp technique has undergone substantial advancements,surpassing traditional manual methods with its high throughput,improved data consistency,and automation.However,fully harnessing these advantages requires meticulous optimization of experimental conditions tailored to specific targets.Without such refinement,the high cost of consumables and operational expenses could severely hinder the widespread adoption of this technique.This study focused on the TRPV1 channel,detailing the establishment of an automated patch-clamp detection system for TRPV1 currents,optimization of experimental parameters,and a comparative evaluation of the results against manual patch-clamp techniques. 展开更多
关键词 Patch-clamp technique Ion channels methods establishment PHARMACOLOGY
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不同包装的杏与玫瑰花酱复合果丹皮贮藏品质的研究及货架期模型的建立 被引量:1
15
作者 古丽米热·努尔麦麦提 冯作山 白羽嘉 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第3期298-308,394,共12页
该文旨在研究不同包装方式对杏与玫瑰花酱复合果丹皮在贮藏过程中品质变化的影响,并通过品质变化规律预测其货架期。首先采用糖纸包装(candy paper packaging,CW)、真空包装(vacuum packaging,VP)、保鲜袋包装(storage bag packaging,W... 该文旨在研究不同包装方式对杏与玫瑰花酱复合果丹皮在贮藏过程中品质变化的影响,并通过品质变化规律预测其货架期。首先采用糖纸包装(candy paper packaging,CW)、真空包装(vacuum packaging,VP)、保鲜袋包装(storage bag packaging,WPB)和铝箔袋包装(aluminum foil bag packaging,ABP)4种包装方式对复合果丹皮进行包装,并在常温下贮藏180 d测定其在贮藏期间品质指标的变化值,以水分含量、可溶性糖含量、硬度和菌落总数为表征指标建立化学动力学模型以预测复合果丹皮的货架期。结果表明,采用VP方式能有效延缓复合果丹皮中可溶性糖、维生素C、活性成分等营养成分的降解、抑制复合果丹皮在贮藏期间被微生物的污染。可溶性糖和菌落总数的变化规律符合零级动力学模型、水分含量与硬度的变化规律符合一级动力学模型,验证结果表明,VP方式下复合果丹皮以4种表征指标建立的预测模型准确度较高,预测值与实测值相对误差较小,Arrhenius方程具有较好的拟合性。因此,VP方式的应用将会为复合果丹皮的包装和贮藏提供理论基础。 展开更多
关键词 关杏与玫瑰花酱复合果丹皮 包装方式 贮藏品质 货架期模型的建立
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人链式激活免疫细胞制剂对非小细胞肺癌杀伤活性的检测方法建立及验证
16
作者 周巧 李美玲 +5 位作者 陈志刚 王壮 尚孙玉麟 徐秋玲 朱艳萍 张益丽 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第8期862-869,共8页
目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)/萤光素酶(Luc)双荧光标记的肿瘤细胞株,建立人链式激活免疫细胞制剂对非小细胞肺癌细胞杀伤活性的检测方法,并进行初步验证。方法:通过HLA高分辨分型筛选出HLA-A、HLA-B、HLA-C基因型别为纯合子且相应等位... 目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)/萤光素酶(Luc)双荧光标记的肿瘤细胞株,建立人链式激活免疫细胞制剂对非小细胞肺癌细胞杀伤活性的检测方法,并进行初步验证。方法:通过HLA高分辨分型筛选出HLA-A、HLA-B、HLA-C基因型别为纯合子且相应等位基因的分布频率高于2.500%的非小细胞肺癌细胞系作为细胞模型,采用携带有GFP和Luc基因的重组慢病毒感染原始细胞株而获得GFP、Luc稳定表达的细胞系作为靶细胞。通过效应细胞与靶细胞共培养,并优化靶细胞前处理步骤、共培养时间、效靶比等参数,建立人链式激活免疫细胞制剂对非小细胞肺癌杀伤活性的检测方法,并进行专属性、精密度验证。结果:通过HLA高分辨分型,成功筛选出高频等位基因HLA-A*11:01:01(20.893%)、HLA-B*52:01:01(2.991%)、HLA-C*12:02:02(3.139%)的非小细胞肺癌(HCC827)细胞株作为细胞模型。通过慢病毒载体成功构建GFP/Luc双荧光标记的HCC827细胞株,GFP阳性率达96%。重组慢病毒滴度为1.83×10^(7) TU/mL。效靶比为5∶1 、10∶1 、15∶1 、20∶1时,各组间杀伤活性差异显著(P<0.05),且杀伤活性随培养时间延长显著升高(P<0.000 1)。经综合评估后确认最优参数效靶比为10∶1,共培养时间为72 h。方法学验证表明,建立的方法专属性强;重复性变异系数为0.80%~1.86%;精密度变异系数为1.00%~1.58%,方差分析显示差异无统计学意义(P > 0.05),说明方法重复性良好。结论:成功建立了人链式激活免疫细胞制剂对非小细胞肺癌杀伤活性的检测方法并验证成功,该方法有助于人链式激活免疫细胞制剂在细胞免疫治疗有效性评价中发挥重要作用。 展开更多
关键词 人链式激活免疫细胞制剂 非小细胞肺癌 萤光素酶 绿色荧光蛋白 杀伤活性 方法学建立 方法学验证
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直接进样-气相色谱法测定白酒中7种醛类物质含量
17
作者 曾庆儒 苏正 +5 位作者 龚小会 谢玲 陈晨 郭启鹏 刘安荣 杨博 《酿酒》 2025年第3期101-105,共5页
目的:基于气相色谱检测技术,采用直接进样的方式建立白酒中7种醛类物质含量的测定方法,并探究其在不同香型白酒中的含量分布情况。方法:吸取10 mL酒样,加入100 μL内标物涡旋混匀后,采用直接进样的方式对目标物进行分析。结果:7种醛类... 目的:基于气相色谱检测技术,采用直接进样的方式建立白酒中7种醛类物质含量的测定方法,并探究其在不同香型白酒中的含量分布情况。方法:吸取10 mL酒样,加入100 μL内标物涡旋混匀后,采用直接进样的方式对目标物进行分析。结果:7种醛类物质在各自质量浓度范围内线性关系良好,方法检出限为0.052~1.442 mg/L,平均回收率为93.98%~106.41%,相对标准偏差为1.47%~4.53%。结论:该方法适用于不同香型白酒中7种醛类物质的测定。此外,乙醛、正丙醛、异丁醛、乙缩醛、异戊醛、糠醛、苯甲醛的含量与白酒的香型有一定关系。 展开更多
关键词 气相色谱法 直接进样 白酒 醛类物质 方法建立
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基于一种高灵敏度的LC-MS/MS方法定量检测SD大鼠脑组织中AB-38b的含量
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作者 沙翩 潘丹丹 +1 位作者 顾竹林 秦亚玮 《药物分析杂志》 北大核心 2025年第9期1637-1645,共9页
目的:通过建立一种高灵敏度的分析方法,定量检测正常大鼠脑组织中AB-38b的浓度,进一步去揭示AB-38b在大鼠脑内的药代动力学过程。方法:选择托伐普坦作为内标,脑组织样品采用甲醇进行蛋白质沉淀预处理。采用Shim-pack VP-ODS C_(18)(2.0 ... 目的:通过建立一种高灵敏度的分析方法,定量检测正常大鼠脑组织中AB-38b的浓度,进一步去揭示AB-38b在大鼠脑内的药代动力学过程。方法:选择托伐普坦作为内标,脑组织样品采用甲醇进行蛋白质沉淀预处理。采用Shim-pack VP-ODS C_(18)(2.0 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以乙酸铵-甲醇为流动相,流速0.2 mL·min^(-1),柱温40℃,自动进样器温度4℃,进样体积5μL。离子化方式为电喷雾电离,采用多重反应监测模式正离子检测AB-38b(m/z 705.2→618.3),托伐普坦(m/z 449.3→252.2)。此方法经过全面的方法学验证,涵盖标准曲线与定量下限的确立、残留效应考察、准确度与精密度的验证、基质效应的探究,以及提取回收率的测定等多个关键环节。雄性SD大鼠(240±14 g)30只,随机分为5组,每组6只,禁食但可自由饮水12 h后进行单次灌胃给药,给药剂量为50 mg·kg^(-1),于给药后0、15、50、90和480 min称取大鼠体质量并以二氧化碳吸入法进行安乐死,取出大脑组织,并称取各组质量,加入磷酸盐缓冲液制备组织匀浆,按组织样品处理方法处理后,经LC-MS/MS检测大鼠脑组织中AB-38b的浓度。结果:AB-38b质量浓度在2.5~150 ng·ml^(-1)范围内线性关系良好(R~2>0.999),定量下限为2.5 ng·ml^(-1);其日内精密度和日间准确率分别为88.54%~104.56%和95.24%~102.31%,精密度(RSD)均<9%、AB-38b和IS在大鼠脑组织匀浆样品中的提取回收率为81.9%~95.9%,RSD<15%;AB-38b的基质效应范围为87.74%~96.21%,RSD<15%;AB-38b保留时间处残留峰面积小于LLOQ峰面积的20%,内标保留时间处残留峰面积小于峰面积的5%;AB-38b在脑组织匀浆中室温下储存6 h、三次冻融循环下、进样器中24 h、长期(-80℃)储存60 d条件下是稳定的,RSD均<12.7%,结果提示,准确度与精密度、提取回收率、基质效应、残留效应、稳定性等均符合接受标准。结论:本研究建立的LC-MS/MS检测方法检测快速,灵敏度高,特异性强,能够准确测定大鼠脑组织中AB-38b的含量。 展开更多
关键词 AB-38b 分析检测方法建立 液相色谱-串联质谱 SD大鼠 脑组织
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动态显色法检测去氧胆酸细菌内毒素方法的建立与验证
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作者 武星 韩峰 +1 位作者 朱彤 郝钢 《北方药学》 2025年第7期9-12,共4页
目的:旨在通过动态显色法建立去氧胆酸的细菌内毒素检测方法,以提高其检测灵敏度和定量能力。方法:对比两种动态显色法鲎试剂(安度斯与科德角),通过细菌内毒素标准品稀释建立标准曲线,进行细菌内毒素检测。采用无水乙醇预处理去氧胆酸... 目的:旨在通过动态显色法建立去氧胆酸的细菌内毒素检测方法,以提高其检测灵敏度和定量能力。方法:对比两种动态显色法鲎试剂(安度斯与科德角),通过细菌内毒素标准品稀释建立标准曲线,进行细菌内毒素检测。采用无水乙醇预处理去氧胆酸原料药,确定最大有效稀释倍数为400倍进行检测。结果:安度斯和科德角鲎试剂的标准曲线回归方程均符合《中国药典》规定的要求。在去氧胆酸上清液稀释400倍的情况下,回收率达到104.12%,检测结果符合规定,且无干扰现象。结论:本研究成功建立了动态显色法用于去氧胆酸细菌内毒素检测的有效方法,两种鲎试剂均表现出良好的检测性能,且经过优化的预处理步骤和稀释倍数验证了其可靠性,适用于去氧胆酸等难溶性物质的细菌内毒素检测。本方法的建立为去氧胆酸的质量控制提供了科学依据。 展开更多
关键词 去氧胆酸 动态显色法 细菌内毒素 方法建立
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粗毛纤孔菌中5种天然活性成分测定与分析
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作者 王晓军 吕军 +5 位作者 程倩倩 杜成志 杜蒙 李雯雯 孙允超 李洪霄 《中国食用菌》 2025年第5期74-79,共6页
为优化桑黄质量控制和优质菌株筛选方法,丰富其活性成分数据库,研究了粗毛纤孔菌子实体中5种天然活性成分的含量及分析方法。采用单因素变量法优化建立了1种测定粗毛纤孔菌子实体中麦角甾醇含量的高效液相色谱法,方法学验证显示该方法... 为优化桑黄质量控制和优质菌株筛选方法,丰富其活性成分数据库,研究了粗毛纤孔菌子实体中5种天然活性成分的含量及分析方法。采用单因素变量法优化建立了1种测定粗毛纤孔菌子实体中麦角甾醇含量的高效液相色谱法,方法学验证显示该方法线性范围为0.1~200.0 mg·L^(-1),检出限为0.0012 mg·g^(-1),定量限为0.0040 mg·g^(-1),加标回收率95.3%~104.7%,精密度(RSD)1.4%~2.4%,稳定性(RSD)4.2%。对山东省6批粗毛纤孔菌菌株子实体中的麦角甾醇、粗多糖、总三萜、总酚和黄酮的测定结果表明,不同菌株子实体中的活性成分含量差异较大,菌株S1子实体中麦角甾醇和粗多糖含量最高,其他几种活性成分含量也较高,为优良品种选育理想材料。 展开更多
关键词 粗毛纤孔菌 麦角甾醇 高效液相色谱法 方法建立 方法学验证 活性成分
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