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油茶PLAC8家族蛋白的鉴定与分析 被引量:1
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作者 赵松子 幸伟年 赵攀 《南方林业科学》 2025年第2期1-7,14,共8页
【目的】PLAC8家族蛋白在植物调控器官大小及重金属转运方面具有重要作用,对该家族的研究有助于提高油茶的产量及品质。【方法】基于油茶基因组、转录组及单细胞转录组数据,利用生物信息学的方法对其PLAC8家族蛋白进行鉴定与分析。【结... 【目的】PLAC8家族蛋白在植物调控器官大小及重金属转运方面具有重要作用,对该家族的研究有助于提高油茶的产量及品质。【方法】基于油茶基因组、转录组及单细胞转录组数据,利用生物信息学的方法对其PLAC8家族蛋白进行鉴定与分析。【结果】油茶基因组中含有26个CoPLAC8基因;系统进化树分析表明,CoPLAC8可以分为3个亚家族、7个分支,其中,SlFW2.2、MdCNR8、PaCNR12等3个与器官大小相关的基因分别分布在I-2、I-4、I-5分支,CoPLAC8-5与MdCNR8在同一亚支;Zn载体AtPLAC86分布在I-1分支,参与Cd转运的AtPLAC88、AtPLAC85及AtPLAC812分别分布在I-2、I-3、I-4分支。基因表达分析表明,CoPLAC8-5、CoPLAC8-7、CoPLAC8-17、CoPLAC8-18、CoPLAC8-20、CoPLAC8-23等6个基因在种子、种皮、果皮、茎、根等组织中的表达水平较高,CoPLAC8-5及CoPLAC8-18在成熟子房的心皮内层及胎座的表达水平较低。【结论】CoPLAC8-5可能是参与油茶果实大小调控的关键基因,CoPLAC8-5、CoPLAC8-7、CoPLAC8-17、CoPLAC8-18、CoPLAC8-20、CoPLAC8-23等6个基因可能与种仁中的Cu富集有关。 展开更多
关键词 油茶 plac8 果实大小 铜富集 表达
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PLAC8激活ERK信号通路促进肺腺癌PC-9细胞增殖
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作者 赵亮 吴文彬 +3 位作者 姜静 魏敏雪 严欢 曾小飞 《解剖科学进展》 2025年第5期643-646,共4页
目的探讨胎盘特异性蛋白8(PLAC8)对肺腺癌细胞增殖的影响。方法构建PLAC8干扰及PLAC8过表达的肺腺癌(LUAD)细胞株PC-9,Western blot方法验证PLAC8干扰及过表达效果;CCK-8方法检测PC-9细胞增殖;Western blot方法检测PC-9细胞ERK信号通路... 目的探讨胎盘特异性蛋白8(PLAC8)对肺腺癌细胞增殖的影响。方法构建PLAC8干扰及PLAC8过表达的肺腺癌(LUAD)细胞株PC-9,Western blot方法验证PLAC8干扰及过表达效果;CCK-8方法检测PC-9细胞增殖;Western blot方法检测PC-9细胞ERK信号通路蛋白表达;在PLAC8过表达、PLAC8干扰及相应对照组PC-9细胞中加用ERK信号通路抑制剂U0126,CCK-8方法检测各组细胞增殖能力变化。结果干扰PLAC8的表达导致肺腺癌细胞增殖能力降低,而过表达PLAC8则提高肺腺癌细胞的增殖;抑制ERK信号可显著降低过表达PLAC8导致的细胞增殖能力增强。结论PLAC8能通过激活ERK信号通路促进肺腺癌细胞PC-9的增殖。 展开更多
关键词 肺腺癌 plac8 增殖 ERK信号通路
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越橘FWL/PLAC8家族基因特征及表达分析 被引量:4
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作者 俞蕾 周雅 +5 位作者 宗宇 张颖 邱佳琪 李永强 杨莉 郭卫东 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期336-346,共11页
以高丛越橘(Vaccinium corymbosum)大果型品种‘奥尼尔’和小果型品种‘蓝雨’为试材,测定花芽膨大与果实发育期间生长曲线及成熟果实的部分生理指标;开展包含PLAC8保守结构域的FWL(fruit weight like)基因全基因组鉴定与序列分析,并应... 以高丛越橘(Vaccinium corymbosum)大果型品种‘奥尼尔’和小果型品种‘蓝雨’为试材,测定花芽膨大与果实发育期间生长曲线及成熟果实的部分生理指标;开展包含PLAC8保守结构域的FWL(fruit weight like)基因全基因组鉴定与序列分析,并应用实时荧光定量PCR法检测VcFWL/PLAC8基因亚家族成员在花芽膨大与果实发育进程中的相对表达水平。结果表明:‘奥尼尔’果实单果质量与横径自S2期起均显著高于‘蓝雨’,其成熟果实中心室数、单果种子数及种子质量也显著高于‘蓝雨’果实。越橘VcFWL/PLAC8家族包含11个成员,分布于10条染色体上,结构分析显示这些基因均包含2~3个外显子。大部分VcFWL/PLAC8基因包含高度保守的结构域,聚类分析可将其分为3个亚家族,其中B和C亚家族成员间高度保守。qPCR分析表明A与C亚家族基因的表达模式和越橘花芽与果实发育进程中细胞增殖趋势一致,B亚家族基因的表达丰度较低,推测VcFWL/PLAC8基因可能通过不同的机制和途径参与调控果实的生长发育。 展开更多
关键词 越橘 vcfwl/plac8 果实大小 表达特性
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Plac8l1在小鼠精子发生过程中的表达特征研究 被引量:1
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作者 王慧英 张蕊 +1 位作者 张瑾 昌文林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期410-413,共4页
目的:探讨Plac8l1(placenta-specific 8 like 1)基因在小鼠睾丸组织的表达特征,及其与精子发生的相关性。方法:经生物信息学方法初步筛选到一个睾丸特异性表达候选基因Plac8l1,并推测其可能与小鼠精子发生相关;采用半定量RT-PCR和实时定... 目的:探讨Plac8l1(placenta-specific 8 like 1)基因在小鼠睾丸组织的表达特征,及其与精子发生的相关性。方法:经生物信息学方法初步筛选到一个睾丸特异性表达候选基因Plac8l1,并推测其可能与小鼠精子发生相关;采用半定量RT-PCR和实时定量RT-PCR对Plac8l1表达的时空特异进行了研究;应用原位杂交技术对Plac8l1 m RNA在成年小鼠睾丸中的细胞类群表达特征进行初步研究;通过构建过表达PLAC8L1-EGFP重组蛋白质粒及生物信息学分析进行亚细胞定位研究与功能预测。结果:(1)Plac8l1是1个睾丸特异性转录基因。(2)在成年小鼠,Plac8l1只在睾丸和附睾组织发生特异性转录,而且睾丸中的表达水平明显高于附睾[睾丸vs.附睾=[(1.000±0.000)vs.(0.036±0.018),P=0.000]。(3)随着小鼠精子发生的起始,睾丸中Plac8l1转录水平逐渐升高(P=0.000)。(4)m RNA原位杂交结果显示Plac8l1 m RNA主要定位在成年小鼠睾丸中的间质细胞和精母细胞。(5)经生物信息学分析,PLAC8L1也有着一个类似于PLAC8的功能域,过表达重组蛋白显示PLAC8L1在细胞膜上聚集。结论:Plac8l1是1个睾丸特异性基因,可能与精子发生过程中的精母细胞分化相关;PLAC8L1具有1个富含半胱氨酸的PLAC8结构域,这一结构域可能介导了PLAC8L1在细胞膜上聚集并与其他蛋白相互作用,并可能在精母细胞分化中发挥重要作用。 展开更多
关键词 睾丸特异性基因 plac8l1 精子发生 睾丸 小鼠
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东北虎胎盘PLAC-8基因的分离与结构分析
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作者 李倩 元虹懿 +1 位作者 杜海荣 张明海 《野生动物学报》 北大核心 2018年第3期467-470,共4页
胚胎发育阶段是指受精卵至胎儿娩出的发育过程,包括分化前期,胚胎阶段和胎儿阶段。PLAC-8基因在胎儿的发育阶段起到连接胎儿和母体的作用。并且是胚胎着床过程中的关键分子。对PLAC-8基因的研究,对预测野生动物的妊娠结果具有至关重要... 胚胎发育阶段是指受精卵至胎儿娩出的发育过程,包括分化前期,胚胎阶段和胎儿阶段。PLAC-8基因在胎儿的发育阶段起到连接胎儿和母体的作用。并且是胚胎着床过程中的关键分子。对PLAC-8基因的研究,对预测野生动物的妊娠结果具有至关重要的作用,对于妊娠早期的基因诊断提供了证据。本实验从东北虎胎盘cDNA文库中成功克隆了具有完整编码区的PLAC-8基因的全长cDNA序列,并利用生物信息学方法对其序列进行了结构分析,为进一步研究PLAC-8的生物学功能及其在胎儿发育中的分子调控机理奠定基础。 展开更多
关键词 plac-8 胎盘 CDNA文库 东北虎
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鼻咽鳞状细胞癌中PLAC8的表达及临床意义 被引量:3
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作者 石琳钰 杨蕊 +5 位作者 黄茂凌 焦沃尔 魏金凤 邹游 戴梦源 陈始明 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期472-475,共4页
目的探讨PLAC8在鼻咽癌组织及体外培养的鼻咽癌细胞中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测PLAC8蛋白在51例鼻咽癌组织芯片及32例鼻咽慢性炎性反应组织芯片(TMA)中的表达,分析其与鼻咽癌临床病理参数之... 目的探讨PLAC8在鼻咽癌组织及体外培养的鼻咽癌细胞中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测PLAC8蛋白在51例鼻咽癌组织芯片及32例鼻咽慢性炎性反应组织芯片(TMA)中的表达,分析其与鼻咽癌临床病理参数之间的关系。蛋白印迹法检测PLAC8蛋白在永生化鼻咽上皮细胞系NP69及不同鼻咽癌细胞系(CNE1、CNE2、C666-1、5-8F、6-10B)中的表达情况。结果 PLAC8在51例鼻咽癌组织中表达主要定位于细胞质,表达率为72.5%,在32例鼻咽慢性炎性反应组织中表达率为46.9%,两者间差异有统计学意义(P<0.01)。在鼻咽癌组织中PLAC8的表达与T分期、临床分期及远处转移无关(P>0.05),而与淋巴结转移有关(P<0.05)。蛋白印迹法发现PLAC8蛋白在多株鼻咽癌细胞系中的表达相对于人永生化鼻咽上皮细胞系NP69的表达明显升高。结论 PLAC8可能在鼻咽癌的发生、发展过程中起着重要作用,并可能调控了鼻咽癌的淋巴结转移。 展开更多
关键词 plac8 鼻咽癌(NPC) 免疫组织化学 组织芯片 蛋白印迹
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敲低胎盘特异性蛋白8(PLAC8)抑制人胚胎干细胞增殖并促进其凋亡 被引量:3
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作者 李如梅 李敏 陈蕾 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1089-1094,共6页
目的探讨胎盘特异性蛋白8(PLAC8)对人胚胎干细胞(hESC)增殖和凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR和Western blot法检测空载体组、PLAC8短发夹RNA(shPLAC8)组、过表达PLAC8(PLAC8-OE)组感染hESC的效率;以及各组细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和... 目的探讨胎盘特异性蛋白8(PLAC8)对人胚胎干细胞(hESC)增殖和凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR和Western blot法检测空载体组、PLAC8短发夹RNA(shPLAC8)组、过表达PLAC8(PLAC8-OE)组感染hESC的效率;以及各组细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白D1(CCND1)的mRNA和蛋白水平。流式细胞术检测敲低和过表达PLAC8对hESC凋亡的影响。结果PLAC8敲低组的CCND1、PCNA的mRNA和蛋白水平降低,细胞凋亡增加;PLAC8过表达组CCND1和PCNA的mRNA和蛋白表达略上调,细胞凋亡略有下降,但差异均无统计学意义。结论敲低PLAC8的表达会抑制hESC增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞(hESC) 胎盘特异性蛋白8(plac8) 细胞增殖 细胞凋亡
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Advances in Gene Structure, Evolution and Function of Plac8 被引量:1
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作者 白芸 高丽丽 庞秋香 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2014年第3期329-332,共4页
Placenta specific protein 8 (PLAC 8) also called onzin or C15, is a cys- teine-rich protein. It is widely distributed in eukaryotes, and its function has been extensively studied. It not only regulates cell division... Placenta specific protein 8 (PLAC 8) also called onzin or C15, is a cys- teine-rich protein. It is widely distributed in eukaryotes, and its function has been extensively studied. It not only regulates cell division, differentiation, and apoptosis, but also plays an important role in the immune process. This article describes the latest progress of plac8 gene structure characteristics, evolution, expression and function and possible mechanisms. 展开更多
关键词 plac8 EVOLUTION CANCER APOPTOSIS IMMUNITY
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一种富含半胱氨酸蛋白plac8的研究进展 被引量:5
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作者 欧阳聪 孙宁远 薛璐 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期90-93,共4页
胎盘特异蛋白8(Placenta special gene 8,plac8)又称onzin,是一种富含半胱氨酸,有着独特结构并在组织中特异性表达的蛋白。Plac8广泛分布于真核生物中,可以调节细胞一系列的生理活动,包括增殖、分裂、分化、免疫和凋亡等。除此之外,plac... 胎盘特异蛋白8(Placenta special gene 8,plac8)又称onzin,是一种富含半胱氨酸,有着独特结构并在组织中特异性表达的蛋白。Plac8广泛分布于真核生物中,可以调节细胞一系列的生理活动,包括增殖、分裂、分化、免疫和凋亡等。除此之外,plac8还通过不同的信号通路在肿瘤发生分化中发挥着重要的作用。拟对plac8的结构、表达、功能和可能的作用机制进行综合性论述。 展开更多
关键词 plac8 增殖 分化 免疫 凋亡 肿瘤
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PLAC8调控肿瘤细胞发生、发展的作用及其机制的研究进展 被引量:1
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作者 石琳钰 杨蕊 陈始明 《医学研究杂志》 2017年第12期7-10,14,共5页
胎盘特异性蛋白8(the protein placenta-specific 8,PLAC8),又被称为Onzin和C15,是一种富含半胱氨酸的蛋白。PLAC8与其他蛋白具有很少的序列相似性,其功能得到越来越广泛的研究,特别是其调控肿瘤细胞发生、发展的作用。目前研究发现PLAC... 胎盘特异性蛋白8(the protein placenta-specific 8,PLAC8),又被称为Onzin和C15,是一种富含半胱氨酸的蛋白。PLAC8与其他蛋白具有很少的序列相似性,其功能得到越来越广泛的研究,特别是其调控肿瘤细胞发生、发展的作用。目前研究发现PLAC8可以调控肿瘤细胞的细胞凋亡、细胞周期、细胞分化和上皮-间质转化及细胞自噬等过程。本文旨在对PLAC8在肿瘤发病中的作用及机制进行综述。 展开更多
关键词 肿瘤 plac8基因 作用机制 综述
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Plac8的结构以及功能研究进展 被引量:1
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作者 马小云 陈文娇 周艳 《生命的化学》 CAS CSCD 2020年第5期714-721,共8页
胎盘特异蛋白8(placenta special gene 8,plac8)又称Onzin或C15,是一种富含半胱氨酸的蛋白质,广泛分布于真核生物中。plac8可影响细胞分化以及凋亡过程,同时在多种疾病尤其是肿瘤的发生过程中具有重要作用。本文旨在阐述plac8的结构特... 胎盘特异蛋白8(placenta special gene 8,plac8)又称Onzin或C15,是一种富含半胱氨酸的蛋白质,广泛分布于真核生物中。plac8可影响细胞分化以及凋亡过程,同时在多种疾病尤其是肿瘤的发生过程中具有重要作用。本文旨在阐述plac8的结构特点、功能以及其可能存在的作用机制等。 展开更多
关键词 plac8 癌症 免疫反应 细胞分化 综述
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敲除PLAC8蛋白对人胚肾细胞增殖的影响
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作者 秦绪慧 马立群 +3 位作者 欧阳聪 王海霞 浦易之 薛璐 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期25-29,共5页
为了构建PLAC8蛋白敲除的人胚肾细胞株(293T)并检测其对293T细胞增殖的影响,基于CRISPR/Cas9基因编辑技术及流式细胞分选术构建敲除PLAC8蛋白的293T细胞株,通过基因组测序及错配酶酶切进行编辑细胞系的筛选。用筛选得到的细胞系提取细... 为了构建PLAC8蛋白敲除的人胚肾细胞株(293T)并检测其对293T细胞增殖的影响,基于CRISPR/Cas9基因编辑技术及流式细胞分选术构建敲除PLAC8蛋白的293T细胞株,通过基因组测序及错配酶酶切进行编辑细胞系的筛选。用筛选得到的细胞系提取细胞总蛋白,通过蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测编辑效率。进一步通过细胞生存实验(MTT实验)检测敲除PLAC8对293T细胞增殖的影响,通过蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测敲除PLAC8蛋白后293T细胞中增殖相关基因的表达水平变化。结果表明,成功构建了PLAC8蛋白敲除的细胞系。与野生型细胞系相比,PLAC8表达下调会抑制细胞增殖,且在这一过程中AKT、RAF-1、ERK2、C-MYC等4个与增殖相关基因的蛋白水平改变,提示PLAC8可能通过AKT及RAF-1-ERK2-C-MYC这一级联通路信号调控细胞增殖。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 基因敲除 plac8 细胞增殖 MAPK信号通路
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Candidate oncogene placenta specific 8 affects cell growth and cell migration in non-small cell lung cancers
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作者 JINNI MA MEILIN ZHOU +4 位作者 XIN XU XINYAO GAO HAIXIA WANG JINHUA SHEN LU XUE 《BIOCELL》 2024年第2期239-252,共14页
Background:Placenta specific 8(PLAC8)is a candidate oncogene involved in the development and progression of solid tumors.However,the status of PLAC8 in lung cancer(LC),especially non-small cell lung cancer(NSCLC)is st... Background:Placenta specific 8(PLAC8)is a candidate oncogene involved in the development and progression of solid tumors.However,the status of PLAC8 in lung cancer(LC),especially non-small cell lung cancer(NSCLC)is still not lucid.Methods:Tissue microarray analysis(TMA)was performed to detect the expression patterns of PLAC8 in LC tissues and cell lines.Then a series of cellular experiments were performed fto assess cell proliferation,cell cycle profiles,and cell motility to explore the role of PLAC8 in NSCLC-derived cell lines:H1299 and A549.Results:TMA results showed that PLAC8 played complex and even contradictory roles in different LC samples.Detailed cell-based experiments confirmed that PLAC8 could promote cell viability,alter the cell cycle,and accelerate cell mobility by regulating cell cyclins or cadherins,respectively.Conclusions:The study findings indicate that PLAC8 might participate in LC,especially NSCLC,by affecting cellular physiological processes.The outcomes also shed new light on the potential role of PLAC8 as a therapeutic biomarker in NSCLC. 展开更多
关键词 plac8 Lung cancer Non-small cell lung cancer Cell proliferation Cell migration
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猪急性腹泻综合征冠状病毒病原学及防治研究现状 被引量:4
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作者 蒋家霞 蒋治国 +5 位作者 何莹 林昌华 林宝江 覃秀珍 吕玲燕 胡湘云 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2023年第14期28-32,共5页
猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV)是2017年首次在中国广东发现的一种新型猪肠道冠状病毒,可引发新生仔猪剧烈呕吐、腹泻、严重脱水甚至死亡。除了对养猪业造成直接威胁外,SADS-CoV还具有... 猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV)是2017年首次在中国广东发现的一种新型猪肠道冠状病毒,可引发新生仔猪剧烈呕吐、腹泻、严重脱水甚至死亡。除了对养猪业造成直接威胁外,SADS-CoV还具有潜在的广泛种属嗜性,可能对公共卫生造成威胁。文章对该病毒的分子病原学、检测方法和防治策略进行综述,以期为后续SADS-CoV的科学研究和有效防治提供参考借鉴。 展开更多
关键词 猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV) 分子病原学 检测方法 防治策略 S蛋白 plac8
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Single cell atlas of developing mouse dental germs reveals populations of CD24^(+)and Plac8^(+)odontogenic cells 被引量:9
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作者 Yaofeng Wang Yifan Zhao +18 位作者 Shubin Chen Xiaoming Chen Yanmei Zhang Hong Chen Yuansong Liao Jiashu Zhang Di Wu Hongxing Chu Hongying Huang Caixia Wu Shijuan Huang Huichao Xu Bei Jia Jie Liu Bo Feng Zhonghan Li Dajiang Qin Duanqing Pei Jinglei Cai 《Science Bulletin》 SCIE EI CSCD 2022年第11期1154-1169,共16页
The spatiotemporal relationships in high-resolution during odontogenesis remain poorly understood.We report a cell lineage and atlas of developing mouse teeth.We performed a large-scale(92,688 cells)single cell RNA se... The spatiotemporal relationships in high-resolution during odontogenesis remain poorly understood.We report a cell lineage and atlas of developing mouse teeth.We performed a large-scale(92,688 cells)single cell RNA sequencing,tracing the cell trajectories during odontogenesis from embryonic days 10.5 to 16.5.Combined with an assay for transposase-accessible chromatin with high-throughput sequencing,our results suggest that mesenchymal cells show the specific transcriptome profiles to distinguish the tooth types.Subsequently,we identified key gene regulatory networks in teeth and bone formation and uncovered spatiotemporal patterns of odontogenic mesenchymal cells.CD24^(+)and Plac8^(+)cells from the mesenchyme at the bell stage were distributed in the upper half and preodontoblast layer of the dental papilla,respectively,which could individually induce nonodontogenic epithelia to form tooth-like structures.Specifically,the Plac8^(+)tissue we discovered is the smallest piece with the most homogenous cells that could induce tooth regeneration to date.Our work reveals previously unknown heterogeneity and spatiotemporal patterns of tooth germs that may lead to tooth regeneration for regenerative dentistry. 展开更多
关键词 Single cell RNA-seq Dental germ development Spatiotemporal pattern ODONTOGENESIS CD24^(+)odontogenic cells plac8^(+)odontogenic cells
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PLAC1特异性TCR基因修饰T细胞对乳腺癌的抗肿瘤作用 被引量:2
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作者 李琼书 成先义 +5 位作者 胡源 陈洁莹 巩秀 肖东 胡祥 刘未斌 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2018年第2期103-110,共8页
目的研究胎盘特异性基因1(PLAC1)特异性T细胞受体(TCR)基因修饰T细胞对乳腺癌的抗肿瘤作用。方法磁珠分选人类白细胞抗原分型为A2(HLA-A2)的志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中的CD8^+T细胞,流式检测CD8^+T细胞的表型。通过慢病毒载体构建... 目的研究胎盘特异性基因1(PLAC1)特异性T细胞受体(TCR)基因修饰T细胞对乳腺癌的抗肿瘤作用。方法磁珠分选人类白细胞抗原分型为A2(HLA-A2)的志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中的CD8^+T细胞,流式检测CD8^+T细胞的表型。通过慢病毒载体构建、包装,将可识别乳腺癌肿瘤抗原PLAC1的HLA-A2限制性的TCR基因导入CD8^+T细胞(称为TCR-T细胞),以慢病毒空载体包装、感染的CD8^+T细胞(NC-T细胞)作为对照细胞,通过流式细胞术检测PLAC1特异性TCR的表达效率。免疫荧光和流式细胞术检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231(三阴性乳腺癌细胞)的PLAC1和HLA-A2血清型的表达。WST-1法检测不同效靶比(5:1、10:1和20:1)TCR-T细胞或NC-T细胞与乳腺癌细胞MCF-7或MDA-MB-231作用后的细胞毒性,并通过ELISA检测共培养后T细胞IFN-γ的释放量。通过裸鼠皮下人乳腺癌移植瘤模型检测TCR-T细胞以及NC-T细胞的抗肿瘤作用。采用单因素方差分析及独立t检验进行统计学分析。结果磁珠分选出的CD8^+T细胞CD3^+CD8^+比例达到(98.89±0.30)﹪。经慢病毒感染、五聚体检测,TCR-T细胞中PLAC1特异性TCR的正确表达率为(24.58±0.82)﹪,NC-T细胞不表达PLAC1特异性TCR。免疫荧光和流式结果显示乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231为HLA-A2和PLAC1双阳性表达细胞。其中流式检测结果显示,MCF-7和MDA-MB-231细胞中HLA-A2的表达效率分别为(93.04±1.36)﹪和(98.72±0.12)﹪。在效靶比为20:1时,TCR-T细胞对MCF-7杀伤率为(51.5±1.37)﹪,高于NC-T细胞对MCF-7的杀伤率(5.93±2.40)﹪,t=15.507,P<0.01;TCR-T细胞对MDAMB-231杀伤率为(44.34±2.20)﹪,高于NC-T细胞对MDA-MB-231杀伤率(5.15±2.40)﹪(t=10.694,P<0.01)。在相同效靶比情况下,TCR-T细胞对MCF-7或MDA-MB-231细胞的细胞毒性高于NC-T细胞,且随着效靶比的增加杀伤效果增强。在效靶比为20:1时,与MCF-7共培养后TCR-T细胞IFN-γ的分泌水平[(347.49±4.10)pg/ml]高于NC-T细胞[(18.14±6.22)pg/ml](t=-76.638,P<0.01);与MDA-MB-231共培养后TCR-T细胞IFN-γ的分泌水平为(255.25±6.85)pg/ml,高于NC-T细胞[(14.70±6.38)pg/ml](t=-44.526,P<0.01),且随着效靶比的增加分泌量升高。在裸鼠皮下人乳腺癌移植瘤实验中,生理盐水组和NC-T细胞移植组小鼠的肿瘤生长迅速,TCR-T细胞治疗组小鼠肿瘤生长相对缓慢,在移植后第35天,生理盐水组、NC-T细胞组和TCR-T细胞组小鼠肿瘤的平均体积分别为(5 636.96±2 879.55)mm^3、(5 522.12±3 391.48)mm^3和(1 403.85±1 394.31)mm^3,TCR-T细胞治疗组小鼠肿瘤体积明显小于生理盐水组(F=0.1813,P<0.05)和NC-T细胞组(F=0.1307,P<0.05)。结论 PLAC1特异性TCR基因修饰T细胞对乳腺癌细胞具有较强的抗肿瘤作用,PLAC1可作为乳腺癌治疗的潜在靶标;PLAC1特异性TCR基因修饰T细胞治疗是PLAC1表达阳性的乳腺癌治疗的新策略。 展开更多
关键词 乳腺癌 plac1 TCR CD8^+T细胞 肿瘤免疫治疗
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