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儿童自闭症患者外周血中淋巴细胞的TCR多样性特征分析
1
作者 万政伟 卓越 +6 位作者 张志新 孙平 孙兆辰 赵娟 赵磊 张金泽 刘玉萍 《中国医药科学》 2025年第24期83-88,共6页
目的通过免疫图谱分析儿童自闭症(ASD)患者T淋巴细胞的特征性T淋巴细胞受体(TCR)序列特征,解决儿童ASD早期诊断困难。方法筛选四川省人民医院儿科2022年6月至2024年6月就诊的年龄1~14岁的ASD和正常对照儿童,分离其血液淋巴细胞并提取RNA... 目的通过免疫图谱分析儿童自闭症(ASD)患者T淋巴细胞的特征性T淋巴细胞受体(TCR)序列特征,解决儿童ASD早期诊断困难。方法筛选四川省人民医院儿科2022年6月至2024年6月就诊的年龄1~14岁的ASD和正常对照儿童,分离其血液淋巴细胞并提取RNA,逆转录扩增后高通量测序获得TCR可变区序列,构建免疫图谱并分析特征。结果共有7名纳入ASD组、172名纳入健康对照组、8名纳入交叉验证组。分析发现患者间存在特征性的高共享性TCR序列,且特征性序列表达量之和在ASD组患者与健康对照组之间差异有显著统计学意义(P<0.001)。ASD组患者样本的特征指数和健康对照组样本的特征指数进行受试者操作特征(ROC)曲线分析,ROC曲线下面积(AUC)为0.79。结论ASD患者的TCR图谱与健康对照组具有显著差异,提示可能存在与疾病发生发展相关的特异性免疫反应。未来有可能开发通过TCR检测无创辅助诊断早期ASD的方法。 展开更多
关键词 儿童自闭症 tcr多样性 高通量测序 特征性tcr序列 早期筛查与诊断
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ERMAP改善MOG特异性TCR转基因小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎
2
作者 朱婕 宋雯茜 +4 位作者 陈柯竹 李远迪 高杰 胡蓉 苏敏 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第6期1344-1349,共6页
目的:利用MOG特异性TCR转基因小鼠(2D2TCR转基因小鼠)建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,探讨外源性ERMAP对MOG_(35-55)诱导的2D2TCR转基因小鼠脾脏中T细胞的影响。方法:两组2D2TCR转基因小鼠(对照组使用Control-Ig治疗,实验组使用... 目的:利用MOG特异性TCR转基因小鼠(2D2TCR转基因小鼠)建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,探讨外源性ERMAP对MOG_(35-55)诱导的2D2TCR转基因小鼠脾脏中T细胞的影响。方法:两组2D2TCR转基因小鼠(对照组使用Control-Ig治疗,实验组使用ERMAP-Ig融合蛋白治疗)建立EAE模型,每组9只。根据每日临床评分(DAI)、HE、LFB染色结果评估MOG_(35-55)诱导的小鼠EAE脊髓损伤严重程度;流式细胞术检测脾脏内自身反应性T细胞(CD4^(+)Vα3.2^(+)Vβ11^(+))、T细胞增殖活化指标CD69(CD4^(+)Vα3.2^(+)Vβ11^(+)CD69^(+))和Ki67(CD4^(+)Vα3.2^(+)Vβ11^(+)Ki67)、Treg(CD4^(+)Vα3.2^(+)Vβ11^(+)CD25+Foxp3+)以及Th17细胞(CD4^(+)Vα3.2^(+)Vβ11^(+)IL-17A^(+));qRT-PCR检测脊髓组织IL-17A、IL-6、IFN-γ、TGF-β表达。结果:MOG_(35-55)诱导的2D2TCR转基因小鼠EAE模型中,ERMAP-Ig融合蛋白治疗组脊髓出现较轻的炎症浸润和脱髓鞘,脾脏中自身反应T细胞比例减少,T细胞活化及增殖比例降低,Treg比例增加,抑制Th17细胞分化,脊髓中炎症细胞聚集及细胞因子产生更少,抗炎因子表达增加。结论:ERMAP可能通过抑制T细胞增殖活化、促进Treg生成参与2D2TCR转基因小鼠EAE发生发展。 展开更多
关键词 红细胞膜相关蛋白 自身反应性T细胞 2D2tcr 实验性自身免疫性脑脊髓炎
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共表达TcRα12-2和TCRVβ7.1重组腺病毒载体的构建及其杀伤肝癌细胞作用的研究 被引量：2
3
作者 王俊伟 张巨峰 +3 位作者 张文峰 牟艳芳 邵红伟 黄树林 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第11期2001-2004,共4页
目的:构建共表达TCRα12-2和TCRVβ7.1重组腺病毒载体Ad.TCRα12.2-IRES-Vβ7.1,并研究其杀伤肝癌细胞的作用。方法:提取外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)总RNA,用RT-PCR的方法得到TCRα12-2基因。TCRVβ7.1基因... 目的:构建共表达TCRα12-2和TCRVβ7.1重组腺病毒载体Ad.TCRα12.2-IRES-Vβ7.1,并研究其杀伤肝癌细胞的作用。方法:提取外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)总RNA,用RT-PCR的方法得到TCRα12-2基因。TCRVβ7.1基因由pCDN3.1-Vβ7.1扩增获得,将这两个基因以IRES相连克隆入腺病毒穿梭质粒pDC315中。穿梭质粒和腺病毒骨架质粒共转染HEK293细胞,包装出可同时表达TCRα12-2和TCRVβ7.1的重组腺病毒。然后提取病毒基因组DNA,对外源目的基因进行PCR鉴定;病毒感染宫颈癌细胞(HELA),48小时后提取细胞总RNA,通过RT-PCR鉴定目的基因表达;最后病毒感染PBMC,用流式细胞仪检测目的蛋白的表达。对鉴定正确的病毒进行大量扩增并测定滴度。用MTT比色法检测Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1感染的PBMC对肝癌细胞HEPG2和BEL-7402的杀伤作用。结果:从重组病毒基因组中扩增出目的基因TCRα12-2和TCRVβ7.1,RT-PCR和流式细胞仪检测表明目的基因可以有效的表达。Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1感染PBMC组对肿瘤细胞的杀伤率明显高于PBMC组和Ad-GFP感染组。结论:成功构建了双表达TCRα12-2和TCRVβ7.1基因的重组腺病毒载体Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1,且其感染后的PBMC可有效的杀伤肝癌细胞。 展开更多
关键词 tcr 重组腺病毒栽体 tcrα12-2 tcrVβ7.1
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脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征患者外周血单个核细胞TCR信号通路相关因子表达水平分析
4
作者 曾小良 杨慧 +3 位作者 杨艳丽 彭亮 冯基花 张剑锋 《中国临床新医学》 2025年第9期1006-1010,共5页
目的分析脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者外周血单个核细胞(PBMCs)T细胞受体(TCR)信号通路相关因子表达水平。方法招募2022年3月至2022年11月于广西医科大学第二附属医院接受治疗的脓毒症相关ARDS患者22例作为病例组,于同期招... 目的分析脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者外周血单个核细胞(PBMCs)T细胞受体(TCR)信号通路相关因子表达水平。方法招募2022年3月至2022年11月于广西医科大学第二附属医院接受治疗的脓毒症相关ARDS患者22例作为病例组,于同期招募健康志愿者21名作为对照组。采集研究对象外周静脉血8 mL,分离PBMCs,通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测TCR信号通路相关因子CD247、T细胞活化连接蛋白(LAT)、白介素-2诱导的T细胞激酶(ITK)的mRNA表达水平。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白介素-6(IL-6)、白介素-17A(IL-17A)和白介素-10(IL-10)水平。采集病例组支气管肺泡灌洗液(BALF)进行瑞士-吉姆萨染色,观察炎症细胞情况。结果与对照组相比,病例组PBMCs的CD247、LAT、ITK mRNA表达水平显著降低(P<0.05),血清IL-6、IL-10、IL-17A水平显著升高(P<0.05)。脓毒症ARDS患者BALF中可见中性粒细胞、淋巴细胞、红细胞显著增多,巨噬细胞体积增大;有坏死、脱落的肺泡上皮细胞。结论脓毒症相关ARDS患者PBMCs的TCR信号通路相关因子表达显著降低,这可能是脓毒症进展的机制之一。 展开更多
关键词 脓毒症 急性呼吸窘迫综合征 T细胞受体信号通路 外周血单个核细胞
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马立克氏病病毒感染鸡TCR1与TCR2T细胞动态变化观察 被引量：1
5
作者 李一经 刘宝全 +3 位作者 李海滨 杨庆霞 刘胜旺 卢景良 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 1998年第4期355-358,共4页
为深入探讨鸡马立克氏病Ｔ细胞受体亚群的变化与疾病发生与发展的相互关系，本实验以马立克氏病强毒株人工感染１日龄ＳＰＦ雏鸡，在不同的感染期，以流式细胞仪分析脾脏、胸腺、外周血淋巴细胞中ＴＣＲ１＋Ｔ和ＴＣＲ２＋Ｔ细胞的动态... 为深入探讨鸡马立克氏病Ｔ细胞受体亚群的变化与疾病发生与发展的相互关系，本实验以马立克氏病强毒株人工感染１日龄ＳＰＦ雏鸡，在不同的感染期，以流式细胞仪分析脾脏、胸腺、外周血淋巴细胞中ＴＣＲ１＋Ｔ和ＴＣＲ２＋Ｔ细胞的动态变化。结果表明，感染鸡脾脏中ＴＣＲ１＋Ｔ细胞异常增高，而ＴＣＲ２＋Ｔ细胞在脾脏和外周血中表现为暂短的升高，其后迅速下降。 展开更多
关键词 鸡 马立克氏病 tcr1 tcr2 T细胞亚群 免疫抑制
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浅谈TCR型SVC在EAF电炉系统中的技术应用
6
作者 张帅 《冶金与材料》 2025年第8期118-120,共3页
近年来,EAF电炉以其节能高效、工艺灵活等优势在钢铁行业得到广泛应用。但在EAF电炉冶炼过程中,大量的非线性负荷注入电网会产生各种高次谐波,降低系统功率因数,增大系统电压损耗,引发电压波动或闪变,污染电网。因此,应用TCR型SVC来改善... 近年来,EAF电炉以其节能高效、工艺灵活等优势在钢铁行业得到广泛应用。但在EAF电炉冶炼过程中,大量的非线性负荷注入电网会产生各种高次谐波,降低系统功率因数,增大系统电压损耗,引发电压波动或闪变,污染电网。因此,应用TCR型SVC来改善EAF电炉系统的运行环境非常必要。通过介绍TCR型SVC基本原理、结构设计、技术要点,给出了TCR型SVC实际运行监控方案,确保EAF电炉系统稳定运行。 展开更多
关键词 EAF电炉 非线性负荷 电压波动或闪变 tcr型SVC
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TCR-T细胞疗法
7
作者 庞梦珂 赵祥 《中国细胞生物学学报》 2025年第11期2740-2750,共11页
T细胞是一类重要的免疫细胞,T细胞受体(TCR)是T细胞表面最重要的膜蛋白受体,承担着活化T细胞的重要职责。TCR通过识别抗原-MHC分子复合物pMHC,启动T细胞的特异激活。通过分离肿瘤抗原特异的TCR,可开发攻击杀死肿瘤的TCR-T细胞疗法,为攻... T细胞是一类重要的免疫细胞,T细胞受体(TCR)是T细胞表面最重要的膜蛋白受体,承担着活化T细胞的重要职责。TCR通过识别抗原-MHC分子复合物pMHC,启动T细胞的特异激活。通过分离肿瘤抗原特异的TCR,可开发攻击杀死肿瘤的TCR-T细胞疗法,为攻克肿瘤带来新的希望。TCR-T细胞疗法的成功一方面需要合适的肿瘤抗原靶点,包括病毒抗原、新抗原、分化抗原、癌症–睾丸抗原、过表达抗原,以应对不同的肿瘤适应证,另一方面需要高亲和力成熟和逆锁键工程改造等蛋白质改造手段,来提高TCR-T细胞的激活水平。目前已有TCR-T细胞疗法获得批准上市,但是TCR-T细胞疗法的进一步发展需要从抗原发现、TCR的蛋白质工程改造、低成本给药途径、T细胞改造、加强基础研究等方面进行努力,在与CAR-T疗法的资源竞争中凸显其在实体瘤疗效中的优势。 展开更多
关键词 T细胞 T细胞受体 tcr-T细胞疗法 逆锁键
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弥漫大B细胞淋巴瘤相关抗原特异TCR基因修饰T细胞TCRζ链基因的表达
8
作者 尹青松 陈少华 +3 位作者 杨力建 查显丰 李萡 李扬秋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期150-153,共4页
目的:分析DLBCL相关抗原特异TCR基因修饰T细胞经肿瘤细胞刺激活化前后TCRζ链基因表达水平的变化。方法:利用SYBRGreenⅠ荧光定量PCR,相对定量检测TCR基因修饰T细胞活化前后TCRζ链基因的表达情况,β2微球蛋白基因(β2M)为内参照,根据... 目的:分析DLBCL相关抗原特异TCR基因修饰T细胞经肿瘤细胞刺激活化前后TCRζ链基因表达水平的变化。方法:利用SYBRGreenⅠ荧光定量PCR,相对定量检测TCR基因修饰T细胞活化前后TCRζ链基因的表达情况,β2微球蛋白基因(β2M)为内参照,根据相对定量公式:2-△Ct×100%和2-△△Ct,计算TCR基因修饰T细胞活化前后TCRζ链基因的相对表达水平及其差异情况。结果:与未转染T细胞的TCRζ基因mRNA表达量(1.74±0.28)%相比,TCR转基因修饰T细胞TCRζ基因mRNA的表达水平没有发生明显的变化,表达量为(1.78±0.22)%;而经效/靶细胞(TCR基因修饰T细胞/Toledo细胞)混合培养后,活化的TCR基因修饰T细胞的TCRζ基因mRNA表达水平为(11.54±1.98)%,明显高于未刺激培养之前的TCR基因修饰T细胞和未转染T细胞的TCRζ基因的表达水平(P<0.05),分别增长了(6.59±0.80)倍和(6.48±0.36)倍。结论:TCR转基因修饰T细胞受到抗原的刺激而活化,TCRζ链基因的表达相应增加。 展开更多
关键词 tcrζ链 实时定量PCR 弥漫大B细胞淋巴瘤 tcr转基因
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淋巴瘤TCRγ及TCRβ克隆性基因重排分析
9
作者 韩西群 齐宗利 赵彤 《临床荟萃》 CAS 2009年第22期1981-1983,共3页
关键词 T细胞淋巴瘤 基因重排 tcrΓ tcrΒ
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系统性红斑狼疮T细胞TCR/CD3信号转导异常的研究进展
10
作者 游弋 郝飞 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B06期54-56,共3页
T细胞受体/CD3复合体(TCR/CD3)与抗原呈递细胞(APC)表面的组织相容复合物(MHC)-抗原肽发生交连是T细胞特征性识别抗原,活化细胞、传导信号并发生抗原特异免疫反应的重要起始途。系统性红斑狼疮T细胞TCR/CD3信号传导异常是T细胞免疫功能... T细胞受体/CD3复合体(TCR/CD3)与抗原呈递细胞(APC)表面的组织相容复合物(MHC)-抗原肽发生交连是T细胞特征性识别抗原,活化细胞、传导信号并发生抗原特异免疫反应的重要起始途。系统性红斑狼疮T细胞TCR/CD3信号传导异常是T细胞免疫功能障碍的基础。本文就系统性红斑狼疮T细胞TCR/CD3信号转导异常的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 tcr/CD3 tcr-ξ链
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慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞TCRαβ和TCRγδ的表达研究
11
作者 邱莲女 朱永泽 +1 位作者 周永列 李宏波 《中国实验诊断学》 2006年第4期348-350,共3页
目的检测慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞TCRαβ和TCRγδ的表达,评价慢性乙型肝炎患者的细胞免疫状态,并初步探究随病情发展TCRαβ和TCRγδ表达率的变化趋势。方法流式细胞术测定38例慢性乙型肝炎、14例乙型肝炎肝硬化患者淋巴细胞... 目的检测慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞TCRαβ和TCRγδ的表达,评价慢性乙型肝炎患者的细胞免疫状态,并初步探究随病情发展TCRαβ和TCRγδ表达率的变化趋势。方法流式细胞术测定38例慢性乙型肝炎、14例乙型肝炎肝硬化患者淋巴细胞中TCRαβ、TCRγδ的表达率。结果TCRαβ在慢性乙型肝炎患者中的表达率明显低于正常对照组(P<0.01)。慢性乙型肝炎各组之间TCRαβ的表达率比较:重度组和乙型肝炎肝硬化组表达率显著低于轻度组(P<0.01,P<0.01),乙型肝炎肝硬化组显著低于中度组(P<0.05)。而TCRγδ在慢性乙型肝炎各组之间比较以及与正常对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞中TCRαβ表达能力显著低于正常人,并随病情进展,其表达能力逐渐降低,提示慢性乙型肝炎患者外周血T细胞免疫功能下降。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 肝硬化 tcrαβ tcrγδ 细胞免疫
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儿童急性白血病TCRδ、γ双基因定量及连接区序列动态分析的临床意义(摘要)
12
作者 卢洁 谷仁凯 +4 位作者 雷科 孙立荣 庞秀英 李学荣 董增义 《中国小儿血液》 2000年第4期147-148,共2页
关键词 急性白血病 tcrδ tcrΓ 基因重排 序列分析
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TCR组库分析及应用的最新进展
13
作者 方智浩 龚方戚 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第8期2012-2018,共7页
通过拥有独特分子重排机制的T细胞受体(TCR),成熟的T细胞能够特异性识别主要组织相容性复合体分子上的抗原。得益于二代测序技术和单细胞测序技术的发展,高通量TCR序列检测可运用于T细胞研究中。描述性分析、多样性和克隆性分析以及对... 通过拥有独特分子重排机制的T细胞受体(TCR),成熟的T细胞能够特异性识别主要组织相容性复合体分子上的抗原。得益于二代测序技术和单细胞测序技术的发展,高通量TCR序列检测可运用于T细胞研究中。描述性分析、多样性和克隆性分析以及对抗原特异性序列的识别与鉴定等方法有助于研究者深入了解TCR组库信息,并已为感染、肿瘤和免疫学领域相关疾病的研究进展作出贡献。因而,TCR组库分析可应用于评估疾病进展情况并判断疾病预后效果,并且具备作为生物标志物辅助诊疗的潜力。此外,TCR组库分析还能够促进T细胞受体工程化T细胞(TCR-T)疗法的进一步发展。本综述就TCR组库分析及应用的最新进展进行阐述。 展开更多
关键词 T细胞受体 T细胞受体组库 单细胞测序 抗原特异性 应用
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基于TCR传热原理的混凝土复合保温衬砌渠道防冻胀效果研究 被引量：13
14
作者 郭瑞 王正中 +2 位作者 牛永红 刘铨鸿 王羿 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第20期101-106,共6页
中国北方寒冷地区广泛采用保温措施进行渠道防冻胀,在苯板保温防冻胀设计中铺设厚度一般根据半理论半经验确定,并没有考虑衬砌板与保温板接触热阻及交错布置对保温性能与削减冻胀的影响。该文依据固体材料接触热阻(thermal contact resi... 中国北方寒冷地区广泛采用保温措施进行渠道防冻胀,在苯板保温防冻胀设计中铺设厚度一般根据半理论半经验确定,并没有考虑衬砌板与保温板接触热阻及交错布置对保温性能与削减冻胀的影响。该文依据固体材料接触热阻(thermal contact resistance,TCR)原理与压力相关的传热本构模型,提出了混凝土复合保温衬砌新型式。通过ABAQUS有限元软件采用热力耦合模拟将其与普通型式的苯板保温渠道进行比较。结果表明:与普通保温衬砌渠道相比,外界负温时,复合保温衬砌的保温及消减冻胀力效果显著。理论上复合保温衬砌冻胀量消减40%以上,法向冻胀力减少66%,切向冻结力减小58%。对寒区衬砌渠道保温防冻胀设计提供了相应的理论参考。 展开更多
关键词 混凝土衬砌 保温 模型 EPS保温板 tcr 复合保温 防冻胀
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含何首乌制剂致药物性肝损伤患者TCR免疫组库特征研究 被引量：15
15
作者 刘福梅 谢雁鸣 +3 位作者 王志飞 魏戌 高阳 赵泽 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期4397-4404,共8页
探索含何首乌制剂致药物性肝损伤患者的免疫状态,分析其免疫特征。研究采用病例对照设计,通过重点专科监测收集含何首乌制剂致药物性肝损伤的病例,控制含何首乌制剂品种、性别、年龄、基础疾病和合并用药5个匹配因素,按照1∶1从前瞻性... 探索含何首乌制剂致药物性肝损伤患者的免疫状态,分析其免疫特征。研究采用病例对照设计,通过重点专科监测收集含何首乌制剂致药物性肝损伤的病例,控制含何首乌制剂品种、性别、年龄、基础疾病和合并用药5个匹配因素,按照1∶1从前瞻性医院集中监测患者中匹配使用含何首乌制剂但未发生肝损伤的病例,记录2组患者的人口学信息、疾病信息、用药信息及实验室检查信息,并采集静脉血,应用高通量测序技术检测基因序列并分析2组患者T细胞受体(TCR)免疫组库特征。研究共纳入46对患者,结果显示含何首乌制剂致药物性肝损伤患者与未发生肝损伤患者TCR免疫组库在CDR3数量及克隆种类、CDR3区氨基酸序列长度、V基因与J基因丰度、V-J基因交联,以及免疫组库的多样性上均存在显著性差异,研究发现了含何首乌制剂致药物性肝损伤患者的免疫组库多样性特征及高频率V-J交联特征,为筛选用药人群以降低含何首乌制剂致肝损伤的发生提供了参考。 展开更多
关键词 何首乌 药物性肝损伤 免疫组库 tcr
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再生障碍性贫血儿童TCRVβ亚家族T细胞克隆性增殖及其与HLA-DRB1*15的关系 被引量：11
16
作者 黄永兰 黄绍良 +2 位作者 包蓉 张绪超 吴燕峰 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期165-168,172,共5页
【目的】探讨再生障碍性贫血(再障)儿童TCRVβ24个亚家族T细胞克隆性及其与HLA-DRB1*15的关系。【方法】再障儿童17例(SAA14例,MAA3例),采用RT-PCR和基因扫描分析外周血或骨髓TCRVβ24个亚家族基因的表达和克隆性,SSP-PCR检测HLA-DR。... 【目的】探讨再生障碍性贫血(再障)儿童TCRVβ24个亚家族T细胞克隆性及其与HLA-DRB1*15的关系。【方法】再障儿童17例(SAA14例,MAA3例),采用RT-PCR和基因扫描分析外周血或骨髓TCRVβ24个亚家族基因的表达和克隆性,SSP-PCR检测HLA-DR。【结果】再障儿童外周血T细胞仅表达4～22个Vβ亚家族,而正常儿童外周血T细胞几乎表达所有Vβ亚家族。12例(包括初诊SAA4例,CR4例,复发1例和MAA3例)再障儿童存在不同程度T细胞克隆性增殖,但个体间差异较大,正常外周血和骨髓均为多克隆性T细胞。5例HLA-DRB1*15(+)患儿中4例(80%)有寡克隆T细胞,而12例HLA-DRB1*15(-)患儿中仅3例(25%)见寡克隆T细胞,两组比较差异具有显著意义(P<0.05)。伴寡克隆T细胞的6例SAA儿童经免疫抑制治疗后达CR;不伴寡克隆T细胞的5例SAA儿童接受免疫抑制治疗,其中CR1例,PR2例、无效1例,死亡1例。【结论】大多数再障儿童存在T细胞克隆性增殖,寡克隆T细胞多见于SAA,尤其是HLA-DRB1*15(+)的SAA儿童。TCRVβT细胞克隆的检测对进一步了解再障免疫功能状态、预测免疫抑制治疗效果具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 tcr Vβ基因谱 T细胞克隆 HLA—DR
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AML-M1相关TCR Vβ克隆性增殖T细胞的研究 被引量：7
17
作者 陈少华 李扬秋 +3 位作者 杨力建 郁志 罗更新 张玉平 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期353-355,359,共4页
目的　了解急性髓细胞白血病M1亚型 (AML M1 )患者外周血TCRVβ亚家族T细胞的克隆性分布特点。 方法采用RT PCR扩增 9例M1患者外周血的单个核细胞的TCRVβ2 4个亚家族基因 ,分析其TCRVβ亚家族的利用情况。PCR产物进一步经基因扫描分析 ... 目的　了解急性髓细胞白血病M1亚型 (AML M1 )患者外周血TCRVβ亚家族T细胞的克隆性分布特点。 方法采用RT PCR扩增 9例M1患者外周血的单个核细胞的TCRVβ2 4个亚家族基因 ,分析其TCRVβ亚家族的利用情况。PCR产物进一步经基因扫描分析 ,了解其CDR3长度以判断T细胞的克隆性。结果　不同标本中可检测到 2～ 5个Vβ亚家族T细胞 ,以Vβ2、Vβ3、Vβ1 7和Vβ1 9为常见 ,并在Vβ2、Vβ3、Vβ5、Vβ8、Vβ9和Vβ1 9中发现克隆性生长T细胞。结论　M1病人外周血TCRVβ亚家族T细胞表达呈现明显的选择性和克隆性增殖情况 ,这可能与M1细胞相关抗原有关 ,且克隆性增殖Vβ亚家族分布以个体特异性为主。 展开更多
关键词 tcr VΒ基因 T细胞克隆性 急性髓细胞白血病 RT-PCR 基因扫描
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NB4和HL-60细胞诱导的脐血T细胞TCR Vβ基因谱系分析 被引量：8
18
作者 汤冀 李扬秋 +1 位作者 杨力建 陈少华 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期740-745,共6页
目的:了解经NB4细胞和HL-60细胞体外诱导后脐血T细胞的TCR Vβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况。方法:采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)方法,用经丝裂霉素灭活的NB4细胞和HL-60细胞体外诱导脐血T细胞增殖,利用RT-PCR分析经MLTC前... 目的:了解经NB4细胞和HL-60细胞体外诱导后脐血T细胞的TCR Vβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况。方法:采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)方法,用经丝裂霉素灭活的NB4细胞和HL-60细胞体外诱导脐血T细胞增殖,利用RT-PCR分析经MLTC前后T细胞的24个TCR Vβ亚家族的利用情况,并用基因扫描分析其克隆性特点。结果:诱导前脐血T细胞表达20个TCR Vβ亚家族,诱导后的T细胞所表达的TCR Vβ亚家族随培养时间增加而逐渐减少,且诱导组呈现出克隆趋势或寡克隆增殖特点。两种细胞诱导后10 d均可见Vβ1的克隆增殖出现变化,此外,NB4诱导的T细胞出现Vβ15,而HL-60诱导的T细胞则出现Vβ23的克隆增殖情况。结论:NB4细胞和HL-60细胞可诱导脐血TCR VβT细胞克隆性增殖,此优势表达的克隆性T细胞可能与特异性抗原介导的细胞免疫反应有关。 展开更多
关键词 脐血 白血病细胞株 T细胞 tcr VΒ基因 克隆性
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T细胞性淋巴瘤诊断中TCR基因重排检测的应用 被引量：7
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作者 潘鑫艳 杨长绍 +2 位作者 黎贵芸 杨举伦 王丽 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期400-403,共4页
目的探讨T细胞受体(T cell receptors,TCR)基因重排检测对T细胞性淋巴瘤诊断的价值。方法收集T细胞性淋巴瘤30例和淋巴反应性增生组织30例,提取DNA,应用BIOMED-2引物系统中的56条引物进行PCR扩增,核酸分子异源双链凝胶电泳分析结果。结... 目的探讨T细胞受体(T cell receptors,TCR)基因重排检测对T细胞性淋巴瘤诊断的价值。方法收集T细胞性淋巴瘤30例和淋巴反应性增生组织30例,提取DNA,应用BIOMED-2引物系统中的56条引物进行PCR扩增,核酸分子异源双链凝胶电泳分析结果。结果 30例T细胞性淋巴瘤标本中TCRβ、TCRγ、TCRδ的检出率分别为83.3%(25/30)、93.3%(28/30)、13.3%(4/30),三者联合检测的检出率为96.7%(29/30),30例淋巴反应性增生组织中均未检测出TCR基因重排。结论利用BIOMED-2引物系统检测TCR基因重排可作为T细胞性淋巴瘤的辅助诊断工具。 展开更多
关键词 T细胞性淋巴瘤 基因重排 BIOMED-2 tcr基因
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抗原特异TCR Vα6-pIRES2-EGFP和TCRV β13-pIRES2-EGFP真核表达载体的构建及共转染研究 被引量：5
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作者 尹青松 李扬秋 +5 位作者 陈少华 杨力建 周羽竝 吴秀丽 李萡 张学利 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期1-5,11,共6页
目的构建携带弥漫大B型非霍奇金淋巴瘤(DLBL)相关抗原特异性的TCR Vα和TCR Vβ基因片段的真核表达载体TCR Vα-pIRES2-EGFP和TCR Vβ-pIRES2-EGFP,将其共同转染Raji和Jurkat细胞。方法前期研究从1例DLBL患者外周血T细胞中发现克隆性增... 目的构建携带弥漫大B型非霍奇金淋巴瘤(DLBL)相关抗原特异性的TCR Vα和TCR Vβ基因片段的真核表达载体TCR Vα-pIRES2-EGFP和TCR Vβ-pIRES2-EGFP,将其共同转染Raji和Jurkat细胞。方法前期研究从1例DLBL患者外周血T细胞中发现克隆性增殖T细胞受体(TCR)Vα6和Vβ13亚家族T细胞,在此基础上利用RT-PCR扩增TCR Vα6和TCR Vβ13基因全长序列后,分别将其定向克隆入带有绿色荧光蛋白(EGFP)的真核表达载体pIRES2-EGFP,酶切和核酸序列测定分析方法鉴定重组质粒TCR Vα6-pIRES2-EGFP和TCR Vβ13-pIRES2-EGFP的正确性;利用核转染技术(nucleofector)将其分别或共同转染Raji细胞和Jurkat细胞,24 h后利用激光共聚焦显微镜观察EGFP的瞬时表达情况,48 h后利用实时定量PCR检测TCR Vα6和TCR Vβ13基因的表达情况,Western blot检测EGFP蛋白的表达情况。结果获得来自DLBL患者的TCR Vα6和TCR Vβ13基因全长序列,酶切分析和核酸序列测定证实TCR Vα6-pIRES2-EGFP和TCR Vβ13-pIRES2-EGFP重组质粒构建正确;转染24 h后,激光共聚焦显微镜下可观察到EGFP的表达,40%以上细胞发出绿色荧光,单独转染和共转染组荧光产生情况相似;实时定量PCR在单独转染和共转染组均可检测到TCR Vα6和TCR Vβ13基因的表达,共转染组2基因的表达水平稍低于单独转染组;Western blot检测在单独转染和共转染组均显示EGFP蛋白的表达,2组的蛋白杂交带强度相似。结论成功构建了DLBL特异性的TCR Vα6-pIRES2-EGFP和TCR Vβ13-pIRES2-EGFP真核表达质粒,两者可同时转染到细胞中,并实现了体外共表达。 展开更多
关键词 DLBL tcr Vα/Vβ基因 CTL 核转染 EGFP
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