目的:研究超顺磁性纳米铁颗粒(superparamagnetic iron oxide particles,SPIO)体外标记人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)及MRI成像示踪的可行性。方法:从人胎儿脐带中分离培养、扩增脐带间充质干细胞(HUCMSCs),分别采用0μg/ml,25μg/ml,50...目的:研究超顺磁性纳米铁颗粒(superparamagnetic iron oxide particles,SPIO)体外标记人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)及MRI成像示踪的可行性。方法:从人胎儿脐带中分离培养、扩增脐带间充质干细胞(HUCMSCs),分别采用0μg/ml,25μg/ml,50μg/ml浓度的SPIO标记0.5x106,1x106,2x106和10x106HUCMSCs。普鲁士蓝染色和透射电镜鉴定细胞内铁颗粒情况,并用3.0TMRI离体扫描T1WI,T2WI,GRE/300序列成像,测定细胞群信号。结果:不同数量的HUCMSCs与0μg/ml,25μg/ml,50μg/ml浓度的SPIO共同培养18小时,普鲁士蓝染色发现标记的细胞随标记浓度的升高染色程度逐渐加深。透射电镜检查显示细胞内含致密铁颗粒。离体MRI不同序列测定不同浓度SPIO标记相同数量的细胞群,GRE/30°和T2WI测定的各组之间均有统计学差别,50μg/ml与25μg/ml组分别与0μg/ml组之间有显著统计学差别(P<0.05);同一浓度SPIO标记人脐带间充质干细胞,信号强度与细胞数量有关(P<0.05)。结论:SPIO可以标记人脐带间充质干细胞,应用MRI可以对其进行体外示踪和监测。展开更多
目的研究聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)包被的超顺磁性氧化铁粒子(superparamagnetic iron oxid,SPIO)对透明软骨细胞增殖和分泌Ⅱ型胶原蛋白功能的影响,探讨其标记软骨细胞的适宜标记浓度和适宜孵育时间。方法取1～3月龄巴马小香...目的研究聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)包被的超顺磁性氧化铁粒子(superparamagnetic iron oxid,SPIO)对透明软骨细胞增殖和分泌Ⅱ型胶原蛋白功能的影响,探讨其标记软骨细胞的适宜标记浓度和适宜孵育时间。方法取1～3月龄巴马小香猪后膝关节透明软骨体外培养的第2代细胞,以2、4、6、8、10、12、14μg/mL浓度的PEI-SPIO标记液标记的软骨细胞为实验组,没有PEI-SPIO标记的软骨细胞作为对照组,分别在37℃培养箱中培育6、12、18、24、30 h,通过普鲁士蓝染色、透射电镜、细胞内铁含量、WST-1和半定量RT-PCR法检测,筛选出PEI-SPIO的最佳标记浓度和最佳孵育时间。结果 6、8、10、12、14μg/mL组标记后的普鲁士蓝染色显示90%以上的细胞被铁粒子标记;细胞内铁含量的测定结果显示标记时间超过24 h,各组细胞内铁含量基本不再增加;WST-1检测磁标记的细胞毒性结果显示,对照组与实验组无统计学差异(P>0.05)。8μg/mL标记的软骨细胞,其Ⅱ型胶原蛋白RT-PCR条带的灰度值比值与未标记软骨细胞比较有明显降低[(13.04±0.60)%vs(18.89±1.26)%,P<0.05];6μg/mL标记的软骨细胞,其条带的灰度值比值与未标记软骨细胞比较无明显差异[(27.32±1.02)%vs(28.56±1.15)%,P>0.05]。结论 PEI-SPIO可达到安全有效标记软骨细胞的要求,PEI-SPIO标记液为6μg/mL,标记24 h是PEI-SPIO标记软骨细胞的适宜标记浓度和标记时间,既可达到标记软骨细胞的目的,又不对软骨细胞的活性、增殖和Ⅱ型胶原蛋白基因的表达造成影响。展开更多
文摘目的:研究超顺磁性纳米铁颗粒(superparamagnetic iron oxide particles,SPIO)体外标记人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)及MRI成像示踪的可行性。方法:从人胎儿脐带中分离培养、扩增脐带间充质干细胞(HUCMSCs),分别采用0μg/ml,25μg/ml,50μg/ml浓度的SPIO标记0.5x106,1x106,2x106和10x106HUCMSCs。普鲁士蓝染色和透射电镜鉴定细胞内铁颗粒情况,并用3.0TMRI离体扫描T1WI,T2WI,GRE/300序列成像,测定细胞群信号。结果:不同数量的HUCMSCs与0μg/ml,25μg/ml,50μg/ml浓度的SPIO共同培养18小时,普鲁士蓝染色发现标记的细胞随标记浓度的升高染色程度逐渐加深。透射电镜检查显示细胞内含致密铁颗粒。离体MRI不同序列测定不同浓度SPIO标记相同数量的细胞群,GRE/30°和T2WI测定的各组之间均有统计学差别,50μg/ml与25μg/ml组分别与0μg/ml组之间有显著统计学差别(P<0.05);同一浓度SPIO标记人脐带间充质干细胞,信号强度与细胞数量有关(P<0.05)。结论:SPIO可以标记人脐带间充质干细胞,应用MRI可以对其进行体外示踪和监测。
