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Evaluate the inactivation efficiency of HCV byMB/visible light using RTPCR
1
《中国输血杂志》 CAS CSCD 2001年第S1期340-,共1页
关键词 HCV Evaluate the inactivation efficiency of HCV byMB/visible light using rtpcr
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基于荧光定量PCR(RT-PCR)方法对鱼粉中尼罗罗非鱼源性成分定性定量检测
2
作者 何浩斌 叶嘉文 +3 位作者 梁冠宇 黄燕华 周萌 梁日深 《水产学报》 北大核心 2025年第8期156-164,共9页
【目的】快速准确检测出鱼粉中尼罗罗非鱼源性成分。【方法】以尼罗罗非鱼特异性基因片段为基础,设计荧光定量PCR特异性引物,建立鱼粉尼罗罗非鱼源性成分荧光定量PCR(RT-PCR)检测方法。利用不同鱼类及虾蟹类组织DNA验证引物特异性,以尼... 【目的】快速准确检测出鱼粉中尼罗罗非鱼源性成分。【方法】以尼罗罗非鱼特异性基因片段为基础,设计荧光定量PCR特异性引物,建立鱼粉尼罗罗非鱼源性成分荧光定量PCR(RT-PCR)检测方法。利用不同鱼类及虾蟹类组织DNA验证引物特异性,以尼罗罗非鱼DNA梯度稀释及纯鱼粉中掺不同含量尼罗罗非鱼粉进行灵敏度测试,最后针对市售8种鱼粉样品进行检测,确定方法的适用性和检测能力。【结果】该方法对尼罗罗非鱼源性成分检测具有较高的特异性,在其他鱼类及虾蟹类样品中均无扩增信号。方法灵敏度高,可以检出浓度0.1000 ng/μL的尼罗罗非鱼源DNA,在自制混合鱼粉样品中可检出含量为0.0100%的尼罗罗非鱼成分。【结论】利用该方法对8种市售鱼粉样品进行检测,其中有4种鱼粉检出一定含量的尼罗罗非鱼成分。该方法可以针对鱼粉中尼罗罗非鱼源性成分进行快速有效检测。 展开更多
关键词 水产饲料 尼罗罗非鱼成分 鱼粉 实时荧光定量PCR(rtpcr) 检测
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川芎嗪联合环胞霉素A逆转白血病多药耐药的研究 被引量：37
3
作者 杨岚 杨平地 +2 位作者 梁蓉 袁跃传 田琼 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第4期304-306,共3页
目的 :寻找有效的多药耐药联合逆转剂。方法 :用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR) ,Westernblot和MTT法研究川芎嗪逆转耐药细胞系HL - 6 0 /VCR的作用 ,对多种化疗药物耐药的白血病用川芎嗪与环孢菌素A(CsA)加化疗药物联合用于治疗 2 1... 目的 :寻找有效的多药耐药联合逆转剂。方法 :用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR) ,Westernblot和MTT法研究川芎嗪逆转耐药细胞系HL - 6 0 /VCR的作用 ,对多种化疗药物耐药的白血病用川芎嗪与环孢菌素A(CsA)加化疗药物联合用于治疗 2 1例复发难治性白血病。结果 :单用川芎嗪在体外能不同程度地增强HL- 6 0 /VCR细胞对多种化疗药物的敏感性 ,降低p170蛋白的表达。川芎嗪联合环胞素A有较好逆转复发难治性白血病多药耐药的作用 ,治疗组完全缓解率 44 4% ,部分缓解 33 3%。结论 :川芎嗪联合环胞素A可能成为安全有效的逆转药物 ,在治疗复发难治性白血病中有较大的临床意义和推广价值。 展开更多
关键词 白血病 川芎嗪 多药耐药性 环孢霉素A rtpcr
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异丹叶大黄素和白藜芦醇对小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素6mRNA表达的影响 被引量：20
4
作者 钟淼 程桂芳 +2 位作者 赖春宁 洪海燕 朱秀媛 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期329-332,共4页
目的：观察异丹叶大黄素和白藜芦醇对分别由炎性三肽（ｆＭＬＰ）和钙离子载体Ａ２３１８７（Ａ２３１８７）诱导的小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ６）ｍＲＮＡ表达水平的影响。方法：用半定量ｍＲＮ... 目的：观察异丹叶大黄素和白藜芦醇对分别由炎性三肽（ｆＭＬＰ）和钙离子载体Ａ２３１８７（Ａ２３１８７）诱导的小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ６）ｍＲＮＡ表达水平的影响。方法：用半定量ｍＲＮＡ的ＲＴＰＣＲ。结果：异丹叶大黄素和白藜芦醇在２×１０－６和２×１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１浓度下，均能抑制ｆＭＬＰ和Ａ２３１８７诱导的小鼠腹腔巨噬细胞ＩＬ６ｍＲＮＡ的表达。结论：该２个化合物抑制ＩＬ６活性的作用机制之一是抑制ＩＬ６ｍＲＮＡ表达。 展开更多
关键词 白细胞介素6 MRNA 白藜芦醇 异丹叶大黄素
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鸡传染性支气管炎病毒疫苗株和中国流行株鉴别诊断的研究 被引量：6
5
作者 刘思国 江国托 +3 位作者 刘明春 康丽娟 刘忠贵 卢景良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第3期161-163,共3页
根据国外已发表的ＩＢＶ核蛋白基因序列设计一对特异性引物，引物跨度为１５Ｋｂ，包括整个开放阅读框架。由于疫苗株Ｍ４１在核蛋白基因３′末端非编码区缺失近０２Ｋｂ的基因片段，因此ＲＴＰＣＲ扩增将得到１３Ｋｂ的基因产... 根据国外已发表的ＩＢＶ核蛋白基因序列设计一对特异性引物，引物跨度为１５Ｋｂ，包括整个开放阅读框架。由于疫苗株Ｍ４１在核蛋白基因３′末端非编码区缺失近０２Ｋｂ的基因片段，因此ＲＴＰＣＲ扩增将得到１３Ｋｂ的基因产物。我们应用这对引物扩增９株ＩＢＶ的核蛋白基因，结果表明，除８株ＩＢＶ扩增出１５Ｋｂ的预计大小的基因产物外，疫苗株Ｍ４１则扩增出１３Ｋｂ的基因产物，与实际设计相符。经酶切分析、分子杂交及序列分析鉴定证实我们获得的ＰＣＲ产物为ＩＢＶ的核蛋白基因。 展开更多
关键词 支气管炎病毒 鉴别诊断 IBV 疫苗株 流行株
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糖尿病大鼠肾脏水通道蛋白-2mRNA的表达及黄芪的调节作用 被引量：11
6
作者 穆鑫 袁霞 +2 位作者 康白 何国荣 杜冠华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1176-1179,共4页
目的观察黄芪注射液(astragalus membranaceus,AM)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏髓质水通道蛋白-2(aquaporin-2,AQP-2)基因表达的影响,以探讨黄芪治疗糖尿病的分子生物学机制。方法实验大... 目的观察黄芪注射液(astragalus membranaceus,AM)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏髓质水通道蛋白-2(aquaporin-2,AQP-2)基因表达的影响,以探讨黄芪治疗糖尿病的分子生物学机制。方法实验大鼠分为4组:正常组、糖尿病模型组、AM小剂量组和AM大剂量组,后两组应用AM5、10g·kg-1·d-1腹腔注射6周,测定各组大鼠血糖、血清胰岛素及C肽水平,用代谢笼法测定各组大鼠24h尿量,RT-PCR方法测定各组大鼠肾AQP-2 mRNA的表达。结果糖尿病大鼠血糖水平明显增高,血清胰岛素及C肽水平明显下降,单用黄芪注射液治疗对血糖、血清胰岛素和C肽水平无明显影响,但黄芪治疗可使糖尿病大鼠尿量明显增加。RT-PCR检测发现糖尿病大鼠肾髓质AQP-2 mRNA的表达明显上调,黄芪治疗可使其表达下降。结论黄芪治疗糖尿病利水消肿、改善水平衡代谢紊乱的作用可能与其降低肾髓质AQP-2 mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 水通道蛋白-2 糖尿病 黄芪注射液 水代谢 尿量 RT-PCR
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2013～2015年河北省部分地区发热呼吸道症候群哨点监测病例中鼻病毒感染的研究 被引量：11
7
作者 刘俐 韩光跃 +7 位作者 崔爱利 李岩 韩旭 毛乃颖 齐顺祥 许文波 张燕 李琦 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期193-200,共8页
探讨人鼻病毒（Human rhinovirus,HRV）在河北省部分地区发热呼吸道症候群（Febrile respiratory syndrome,FRS）哨点监测病例中的感染情况。2013~2015年,从河北省部分地区发热呼吸道症候群哨点监测病例中采集标本792份,用多重实时荧光R... 探讨人鼻病毒（Human rhinovirus,HRV）在河北省部分地区发热呼吸道症候群（Febrile respiratory syndrome,FRS）哨点监测病例中的感染情况。2013~2015年,从河北省部分地区发热呼吸道症候群哨点监测病例中采集标本792份,用多重实时荧光RT-PCR方法对9种常见的呼吸道病毒病原体进行筛查,HRV阳性标本再用RT-PCR方法扩增VP4/VP2靶基因片段,进行序列测定和分析。病原构成比位于前三位的病原分别是人副流感病毒（Human parainfluenza virus,HPIV）,HRV和人流行性感冒病毒（Human influenza virus,Flu）。HRV阳性标本73份,检出率为9.22%。其中HRV混合其他呼吸道病毒感染的有12份（12/73,16.44%）,与HPIV的混合感染率最高。本研究发现,HRV感染以5岁以下儿童为主,占全部HRV感染病例的60.27%;没有明显的季节分布趋势;住院病例比门急诊病例检出率高;下呼吸道感染患者中HRV的检出率高于上呼吸道感染患者;HRV在不同性别病例中检出率差别没有统计学意义。本研究共检测到HRV的20个血清型,其中A组HRV包括11个血清型,C组HRV包括9个血清型,B组HRV未检出。本研究显示,河北省存在HRV多个血清型的共循环,亟需加强河北省发热呼吸道症候群中HRV的监测,为HRV防控策略制订提供基础数据。 展开更多
关键词 人鼻病毒(HRV) 发热呼吸道症候群(FRS) 多重实时荧光RT-PCR 血清型
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大鼠视上核、室旁核肠三叶因子表达与实验性胃溃疡的关系 被引量：8
8
作者 吴靖芳 史宝林 +3 位作者 张静 郑慧娥 张耕 任君旭 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期660-665,共6页
目的探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间肠三叶因子(ITF)在下丘脑视上核(SON)、室旁核(PVN)的表达及其与实验性胃溃疡愈合的关系。方法以免疫组织化学染色、酶联免疫吸附实验分别检测溃疡组(42只)和正常组(6只)大鼠下丘脑和血清及ITF的表达... 目的探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间肠三叶因子(ITF)在下丘脑视上核(SON)、室旁核(PVN)的表达及其与实验性胃溃疡愈合的关系。方法以免疫组织化学染色、酶联免疫吸附实验分别检测溃疡组(42只)和正常组(6只)大鼠下丘脑和血清及ITF的表达及含量变化,RT-PCR检测ITFmRNA的转录情况。结果 ITF免疫反应阳性物质主要位于视上核和室旁核大细胞部。溃疡1d视上核和室旁核ITF积分吸光度略增高,2d、4d和6d逐渐升高,6d达高峰(P<0.01),10～23d均维持在较高水平(P<0.05)。血清ITF的变化与免疫组织化学法结果相似;溃疡组ITF/3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)吸光度比值在溃疡2～23d均高于正常组(P<0.01,或P<0.05)。结论胃溃疡自愈期间可能通过下丘脑和血清ITF的高表达参与溃疡愈合的调节。 展开更多
关键词 肠三叶因子 视上核 室旁核 实验性胃溃疡 反转录-聚合酶链式反应 大鼠
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葛根素对实验性大鼠肺纤维化影响 被引量：17
9
作者 陈珍旭 吴蓉易 +2 位作者 张淑玉 李连琨 唐勇 《临床肺科杂志》 2006年第4期423-426,共4页
目的观察葛根素对肺纤维化大鼠的影响。方法大鼠随机分为对照组、模型组、葛根素组,以博来霉素气管内滴入建立大鼠的肺纤维化模型,第29天取肺组织作病理切片及HE染色和胶原纤维染色,以免疫组化法(SP法)检测I型胶原纤维,以RT-PCR法检测TG... 目的观察葛根素对肺纤维化大鼠的影响。方法大鼠随机分为对照组、模型组、葛根素组,以博来霉素气管内滴入建立大鼠的肺纤维化模型,第29天取肺组织作病理切片及HE染色和胶原纤维染色,以免疫组化法(SP法)检测I型胶原纤维,以RT-PCR法检测TGFβ1,并进行图像分析定量,进行统计分析。结果葛根素组相比模型组在总胶原纤维、I型胶原纤维和TGFβ1mRNA的表达均有下降。结论葛根素可抑制炎症和成纤维细胞增殖,抑制TGFβ1mRNA的表达,并可减少肺胶原纤维的形成,起到抑制和延缓实验大鼠肺纤维化的作用。 展开更多
关键词 肺纤维化 葛根素 TGFΒ1 免疫组织化学 rtpcr
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猪繁殖与呼吸综合征病毒和盖他病毒双重RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量：8
10
作者 王新港 周峰 +6 位作者 王傲杰 崔丹丹 常洪涛 陈陆 杨霞 王新卫 王川庆 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期232-238,共7页
盖他病毒（Getah virus,GETV）可感染猪并引起和猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）相类似的临床表现,且两者可混合感染而难以区分。我国检测PRRSV和其他诸多病毒的多重PCR文献已比比皆是,但尚... 盖他病毒（Getah virus,GETV）可感染猪并引起和猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）相类似的临床表现,且两者可混合感染而难以区分。我国检测PRRSV和其他诸多病毒的多重PCR文献已比比皆是,但尚无同时检测PRRSV和GETV方法的报道。为此,作者根据GenBank中公布的PRRSV和GETV全基因序列,设计了两对分别扩增PRRSV ORF7基因和GETV Cap基因片段的引物,通过反应条件的优化及特异性、灵敏性和重复性试验,首次建立了可同时检测PRRSV和GETV的双重RT-PCR方法。结果显示,该方法可以同时扩增出PRRSV 633bp和GETV 316bp的特异性片段,而对猪瘟病毒等其他相关病毒扩增结果均为阴性。对GETV和PRRSV的cDNA最低检测量分别为2.48×10-4 ng和2.50×10-5 ng。用建立的双重RTPCR方法对河南15个地市92个猪场的136份临床疑似PRRS发病猪样品进行检测,共从58个猪场检出PRRSV单一阳性样品44份,阳性率为32.4%;GETV单一阳性样品7份,阳性率为5.15%;GETV和PRRSV混合感染样品8份,阳性率为5.88%。检测结果与单一RT-PCR结果吻合率达100%。该方法为GETV和PRRSV的快速检测、鉴别诊断和分子流行病学研究等提供了新的技术手段。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合症(PRRS) 盖他病毒(GETV) 双重RT-PCR
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检测小麦线条花叶病毒的TaqMan MGB探针技术 被引量：10
11
作者 闻伟刚 谭钟 +1 位作者 张吉红 张颖 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期351-355,共5页
为给小麦线条花叶病毒(Wheat streak mosaic virus,WSMV)的灵敏、稳定、快速检测提供依据,根据该病毒不同分离株外壳蛋白(Coat protein,CP)基因的保守序列,设计了特异性引物与Taq Man MGB荧光探针,建立了WSMV的实时荧光RT-PCR检测方法... 为给小麦线条花叶病毒(Wheat streak mosaic virus,WSMV)的灵敏、稳定、快速检测提供依据,根据该病毒不同分离株外壳蛋白(Coat protein,CP)基因的保守序列,设计了特异性引物与Taq Man MGB荧光探针,建立了WSMV的实时荧光RT-PCR检测方法。结果表明,本研究设计的Taq Man MGB荧光探针对WSMV的检测具有很好的特异性,解决了因病毒不同分离物之间基因组变异较大、难以找到长片段保守序列来设计探针的困难。该方法无需任何PCR后处理,基因污染风险小。它与双抗体夹心酶联免疫检测方法相比,灵敏度提高1 000倍,具有快速、灵敏和高特异性的优点,适合于WSMV的快速检测。 展开更多
关键词 小麦线条花叶病毒 TAQMAN MGB探针 实时荧光RT—PCR
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美多巴和中药合用对帕金森病大鼠酪氨酸羟化酶(TH)及TH mRNA的影响 被引量：10
12
作者 何建成 袁灿兴 卫洪昌 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期54-56,共3页
目的探讨中西药合用治疗帕金森病(PD)的作用机制。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射于脑右侧黑质造成偏侧PD模型,并采用中西药物(含美多巴135mg/Kg、中药为3.006g/ml)治疗,同时设立正常对照组、假手术组。用免疫组化和RT-PCR的方法观... 目的探讨中西药合用治疗帕金森病(PD)的作用机制。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射于脑右侧黑质造成偏侧PD模型,并采用中西药物(含美多巴135mg/Kg、中药为3.006g/ml)治疗,同时设立正常对照组、假手术组。用免疫组化和RT-PCR的方法观察对酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞及THmRNA表达的影响。结果中西药合用可以升高TH的含量,提高TH的活力,阻止或缓解6-OHDA对黑质及纹状体的损毁作用;THmRNA的表达亦明显增加,且与TH的变化趋势是一致的。结论中西药合用对TH含量的升高作用可能是通过影响TH mRNA而产生的。 展开更多
关键词 帕金森病 中药 美多巴 酪氨酸羟化酶 免疫组化 RT-PCR
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奥利亚罗非鱼DMO和DMT基因的时空表达特征分析 被引量：4
13
作者 曹谨玲 俞菊华 +2 位作者 曹哲民 李建琳 吴婷婷 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期129-136,共8页
采用荧光定量RT-PCR方法对奥利亚罗非鱼DMO和DMT基因的时空表达进行了研究。结果发现,这两个基因均从原肠胚早期开始转录,一直到出膜,都维持着较高的表达水平,但DMO表达量明显高于DMT。从鱼苗孵化出膜的第1天开始,随着日龄的增加,DMO和... 采用荧光定量RT-PCR方法对奥利亚罗非鱼DMO和DMT基因的时空表达进行了研究。结果发现,这两个基因均从原肠胚早期开始转录,一直到出膜,都维持着较高的表达水平,但DMO表达量明显高于DMT。从鱼苗孵化出膜的第1天开始,随着日龄的增加,DMO和DMT基因的表达量均增加,但DMO在性腺和脑中都能表达,而DMT则仅在精巢中专一性表达。鱼苗性腺分化时期,也可影响DMO和DMT基因的表达量,提示它们可能与激素调控有关。在雌、雄鱼的肝和肾等5种组织中均检测不到这两个基因转录本的存在;在脑中仅可检测到DMO基因不同强弱的转录本,呈现出很强的中枢神经系统的表达特异性。此外,在成体的卵巢和精巢中分别只可检测到DMO和DMT基因的大量表达,显示二者在性别决定和分化中的重要功能。奥利亚罗非鱼DMO基因在其中枢神经系统发育及卵巢发生和功能维持上有着重要功能;DMT基因在精巢发生和功能维持上起重要作用。 展开更多
关键词 奥利亚罗非鱼 DMO DMT 时空表达 荧光定量
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膜细胞骨架蛋白-ezrin在肾细胞癌中的表达及意义 被引量：3
14
作者 杨旭凯 郑少斌 +6 位作者 周海宽 姜耀东 黎相照 张鹏 吴芃 赵俊峰 药晨 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期500-503,共4页
目的从蛋白和转录水平观察肾癌组织中ezrin蛋白的表达及其与肾癌临床病理特征的关系。方法收集80例肾癌组织及40例癌旁正常肾组织,应用组织芯片和免疫组化检测ezrin蛋白的表达情况;同时取其中50例肾癌组织及40例癌旁正常肾组织行RT-PCR... 目的从蛋白和转录水平观察肾癌组织中ezrin蛋白的表达及其与肾癌临床病理特征的关系。方法收集80例肾癌组织及40例癌旁正常肾组织,应用组织芯片和免疫组化检测ezrin蛋白的表达情况;同时取其中50例肾癌组织及40例癌旁正常肾组织行RT-PCR检测其mRNA表达。结果ezrin蛋白的表达定位于细胞浆和细胞膜。ezrin蛋白的阳性表达率在肾癌组织中为95%(76/80),显著高于正常肾组织的阳性表达率75%(30/40)(χ2=10.350,P=0.002);ezrin mRNA表达阳性率在肾癌组织中为82%(41/50),显著高于正常肾组织62.5%(25/40)(χ2=4.321,P=0.038)。免疫组化评分及ezrin mRNA阳性表达率淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组[(9.500±2.502)vs.(7.232±3.045),13/14vs.16/36,P<0.05];腔静脉瘤栓组显著高于无腔静脉瘤栓组[(9.315±3.027)vs.(7.563±2.991),14/14vs.22/36,P<0.05]。而肾癌组织中ezrin蛋白,ezrin mRNA表达水平与患者的性别、年龄、肿瘤分期、分级、肿瘤大小及肿瘤病理类型无关(P>0.05)。结论肾癌组织中ezrin蛋白及mRNA水平均呈高表达,其表达的强度与肿瘤淋巴结转移,腔静脉瘤栓形成有关。ezrin可能参与了肾癌的发生、侵袭和转移,有望成为肾细胞癌生物学行为的评估指标。 展开更多
关键词 组织芯片 免疫组织化学 RT-PCR EZRIN 肾细胞癌
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tritordeum花粉特异性表达的遗传分析 被引量：4
15
作者 陈泠 何光源 +1 位作者 涂知明 陈明洁 《华中科技大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期116-118,共3页
为明确转基因tritordeum中被外源uidA基因标记的启动子的调控特异性,对筛选到的一株标记材料进行了两代uidA基因的遗传表达分析,结果表明,后代材料基因组中都含有uidA基因,没有发生分离,且都只在花粉中检测到GUS活性,在其他组织没有检测... 为明确转基因tritordeum中被外源uidA基因标记的启动子的调控特异性,对筛选到的一株标记材料进行了两代uidA基因的遗传表达分析,结果表明,后代材料基因组中都含有uidA基因,没有发生分离,且都只在花粉中检测到GUS活性,在其他组织没有检测到GUS活性.进一步RT-PCR分析显示uidA基因在根和叶中没有发生转录,说明该株材料为花粉特异性启动子被uidA基因标记的阳性纯合体,实验证明该特异性能稳定遗传. 展开更多
关键词 基因工程 花粉特异性 TRITORDEUM β-葡萄糖醛酸酶(GUS) 反转录聚合酶链式反应
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脾气虚胃溃疡大鼠胃黏膜生长抑素相关信号转导分子的变化 被引量：3
16
作者 杜娟 王秀琴 +4 位作者 季凤清 曾晓蓓 尚宏伟 孙海梅 张立新 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期894-900,共7页
目的探讨生长抑素及其信号传递分子与脾气虚胃溃疡的发生及转归的关系。方法选用成年Wistar大鼠,雌、雄性各35只,建立脾气虚胃溃疡大鼠模型;运用HE染色、免疫组织化学分析、RT-PCR及免疫印迹法,分别观察胃黏膜的组织结构、生长抑素含量... 目的探讨生长抑素及其信号传递分子与脾气虚胃溃疡的发生及转归的关系。方法选用成年Wistar大鼠,雌、雄性各35只,建立脾气虚胃溃疡大鼠模型;运用HE染色、免疫组织化学分析、RT-PCR及免疫印迹法,分别观察胃黏膜的组织结构、生长抑素含量、2型生长抑素受体mRNA、细胞外信号传递激酶2(ERK2)表达的变化。结果脾气虚胃溃疡大鼠胃黏膜中,2型生长抑素的蛋白含量增加,生长抑素受体mRNA表达上调,(ERK2)表达下降。结论生长抑素信号传递途径中相关信号分子的变化可能是引起脾气虚胃溃疡发生的原因之一。 展开更多
关键词 脾气虚 胃溃疡 生长抑素 信号传递 免疫组织化学 反转录-聚合酶链反应 免疫印迹法 大鼠
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北美型猪蓝耳病病毒鉴别RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量：5
17
作者 张燕霞 吴发兴 +3 位作者 郑辉 刘爽 张志 李晓成 《中国动物检疫》 CAS 2011年第12期36-38,共3页
参考Genbank发表的美洲型猪蓝耳病病毒(porcine reproductive and respiratory syndrone virus,PRRSV)CH-1a(北美型经典PRRSV)、JXA1(北美型HP-PRRSV)等毒株的的主要结构蛋白基因序列,应用Primer5.0软件设计了一对特异性的北美型PRRSV... 参考Genbank发表的美洲型猪蓝耳病病毒(porcine reproductive and respiratory syndrone virus,PRRSV)CH-1a(北美型经典PRRSV)、JXA1(北美型HP-PRRSV)等毒株的的主要结构蛋白基因序列,应用Primer5.0软件设计了一对特异性的北美型PRRSV鉴别检测引物,其对经典PRRSV的扩增片段为511bp,对HP-PRRSV的扩增目片段为421bp。进行了该方法的特异性、敏感性、重复性试验,建立了美洲型PRRSV鉴别RT-PCR检测方法。应用此法对2010年1—12月收集的126份临床样品进行了检测,总体检出率达53.17﹪。结果表明该方法具有特异、敏感、重复性好等优点,可用于北美型PRRSV的临床发病鉴别检测及流行病学监测等工作。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 北美型 NSP2基因 rtpcr 鉴别
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宫颈鳞癌组织SLP-2表达临床意义初步研究 被引量：2
18
作者 杨晓 刘玉玲 +2 位作者 任景丽 赵莉莉 胡晓军 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第14期1090-1093,共4页
目的:研究SLP-2在宫颈鳞癌组织中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法:收集郑州大学第二附属医院经手术切除的组织42例宫颈鳞癌组织、43例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者的宫颈组织和48例正常宫颈组织,采用半定量RT-PCR技术检测SLP-2mRN... 目的:研究SLP-2在宫颈鳞癌组织中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法:收集郑州大学第二附属医院经手术切除的组织42例宫颈鳞癌组织、43例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者的宫颈组织和48例正常宫颈组织,采用半定量RT-PCR技术检测SLP-2mRNA的表达情况,以上组织在病理科存档的石蜡切片采用免疫组化SP法检测SLP-2蛋白的表达情况。结果:PT-PCR法检测结果显示,与CIN及正常宫颈组织相比,SLP-2mRNA在宫颈鳞癌组织中的表达水平显著降低,F=3 979.485,P<0.01;免疫组化染色结果显示,SLP-2蛋白在正常宫颈组织中的表达率81.3%,CIN组织中的表达率为51.2%,宫颈鳞癌组织中的表达率(14.3%)明显低于CIN及正常宫颈组织,χ2=40.197,P<0.01;SLP-2的低表达与宫颈鳞癌的组织分化程度相关(P=0.033),而与患者年龄、临床分期、淋巴结转移、肌层浸润深度及肿瘤大小无相关性,P值均>0.05。结论:SLP-2在宫颈鳞癌中低表达,SLP-2的低表达在宫颈鳞癌的发生发展中发挥重要的作用,可能与宫颈鳞癌的组织分化程度密切相关。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 SLP-2 半定量rtpcr 免疫组化
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LAT1、CD98hc在胃癌组织中表达与临床病理特征的关系 被引量：4
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作者 史良会 张才全 彭小壮 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2011年第12期1361-1366,共6页
目的:探讨L型氨基酸转运载体1(L-typeamino acid transporter-1,LAT1)、CD98hc在胃癌中的表达及其与胃癌临床病理特征的关系。方法:采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法和免疫组织化学方法检测45例胃癌组织及45例癌旁正常组织中LAT1、CD... 目的:探讨L型氨基酸转运载体1(L-typeamino acid transporter-1,LAT1)、CD98hc在胃癌中的表达及其与胃癌临床病理特征的关系。方法:采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法和免疫组织化学方法检测45例胃癌组织及45例癌旁正常组织中LAT1、CD98hc、Ki67表达。结果:RT-PCR检测显示胃癌组织中LAT1、CD98hc的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.05);免疫组化结果显示,LAT1在胃癌组织和癌旁组织中表达率分别为64.4%和6.67%(P<0.01);CD98hc在胃癌组织和癌旁组织中的表达率分别为60.0%和22.2%(P<0.01);LAT1、CD98hc的表达在低分化组显著高于高中分化组(P<0.05);肿瘤大小≥5cm组显著高于<5cm组;在Ⅰ～Ⅱ期、淋巴结无转移组LAT1、CD98hc的表达明显比Ⅲ～Ⅳ期、淋巴结转移组低(P<0.01);LAT1、CD98hc与Ki67的表达水平均呈正相关(P<0.01)。结论:胃癌组织中LAT1、CD98hc具有高表达率,且表达具有高度肿瘤特异性,提示LAT1、CD98hc可能在胃癌的生长与转移中有非常重要的作用。 展开更多
关键词 LAT1 CD98hc 胃癌 RT-PCR 免疫组织化学
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细胞外调节蛋白激酶信号通路参与机械牵张诱导肺泡上皮细胞高迁移率族蛋白B1的表达调控 被引量：3
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作者 丁宁 肖慧 +2 位作者 高巨 许立新 佘守章 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期919-922,共4页
目的探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路在机械牵张诱导肺泡上皮细胞(A549)表达高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的作用。方法肺泡上皮细胞A549分为A、B、C3组,A组为对照组;B组A549细胞施加14%牵张应变,牵张时间为4h;C组细胞的牵张模式与B... 目的探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路在机械牵张诱导肺泡上皮细胞(A549)表达高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的作用。方法肺泡上皮细胞A549分为A、B、C3组,A组为对照组;B组A549细胞施加14%牵张应变,牵张时间为4h;C组细胞的牵张模式与B组相同,只是于施加牵张前用ERK的特异性抑制剂PD98059预处理A549细胞2h。分别用免疫细胞化学染色和RT-PCR检测细胞HMGB1蛋白和mRNA的表达,用Westernblotting检测ERK激酶的活性。结果A549细胞施加14%牵张应变后,HMGB1蛋白和mRNA表达明显增加,ERK激酶活性明显增高(P<0.05);该诱导激活作用可被PD98059阻断。结论机械牵张通过ERK信号通路,调节A549细胞的HMGB1基因和蛋白表达。 展开更多
关键词 机械牵张 高迁移率族蛋白B1 细胞外调节蛋白激酶 免疫组织化学 反转录.聚合酶链反应 免疫 印迹法 肺泡上皮细胞
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