摘要
根据国外已发表的ＩＢＶ核蛋白基因序列设计一对特异性引物，引物跨度为１５Ｋｂ，包括整个开放阅读框架。由于疫苗株Ｍ４１在核蛋白基因３′末端非编码区缺失近０２Ｋｂ的基因片段，因此ＲＴＰＣＲ扩增将得到１３Ｋｂ的基因产物。我们应用这对引物扩增９株ＩＢＶ的核蛋白基因，结果表明，除８株ＩＢＶ扩增出１５Ｋｂ的预计大小的基因产物外，疫苗株Ｍ４１则扩增出１３Ｋｂ的基因产物，与实际设计相符。经酶切分析、分子杂交及序列分析鉴定证实我们获得的ＰＣＲ产物为ＩＢＶ的核蛋白基因。
Thispaperdescribedthatapairofconservativesequenceswaschosenasprimers,thereversetranscripitionpolymerasechianreaction(RTPCR)wasdevelopedforamplificationof9 IBVstrains8 strainsoflocalIBVisolatedinChinawereamplificatedwithdesiringsize15KbofNPgeneproductbyRTPCRwhilevaccinestrainsofM41weregeneratedadesiredsize 13Kbofitsproduct(byRTPCR)ThePCRproducts(13Kb)weredigestedintotwospecificfragmentsthesizeof04Kband09Kb/01Kband12KbwithtworestrictionenzymesBgIIPVUIIdigertionsTheresultswereshowedthattheRTPCRMethodcandifferentiatedvaccinestrainsfromIBVstrainsisolated inChina
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
1999年第3期161-163,共3页
Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine
基金
国家攀登计划B类项目
