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一种高效获取基因5′末端的RACE方法 被引量:40
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作者 罗聪 何新华 +2 位作者 陈虎 韦泳丽 李明娟 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期409-414,共6页
RACE技术是一种快速高效克隆基因5′末端和3′末端的方法,是获取基因全长的主要手段之一,但是RACE技术本身也存在一些缺点。我们在前人改良的RACE技术基础上进一步优化RACE技术,获得了一种操作简单、快速、高效、成本低廉的改良RACE方法... RACE技术是一种快速高效克隆基因5′末端和3′末端的方法,是获取基因全长的主要手段之一,但是RACE技术本身也存在一些缺点。我们在前人改良的RACE技术基础上进一步优化RACE技术,获得了一种操作简单、快速、高效、成本低廉的改良RACE方法,该方法适合于大量基因5′末端的获取,可以在普通实验室推广应用。 展开更多
关键词 race TDT 方法改良
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利用Y-RACE法进行棉花胚珠cDNA末端快速扩增 被引量:4
2
作者 肖月华 罗明 +4 位作者 方卫国 罗克明 侯磊 罗小英 裴炎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期688-692,共5页
在YADE(Y shapedadaptordependentextension)方法的基础上 ,设计了一种新的cDNA末端快速扩增方法 ,称为Y RACE法 .利用该方法只需一次cDNA合成就能进行多个基因的 3′和 5′末端的扩增 .分别利用Y RACE方法和RACE试剂盒 (TaKaRa)扩增了... 在YADE(Y shapedadaptordependentextension)方法的基础上 ,设计了一种新的cDNA末端快速扩增方法 ,称为Y RACE法 .利用该方法只需一次cDNA合成就能进行多个基因的 3′和 5′末端的扩增 .分别利用Y RACE方法和RACE试剂盒 (TaKaRa)扩增了一个棉花胚珠cDNA片段F0 2 7的末端序列 .序列比较表明 ,用Y RACE方法扩增的末端序列较试剂盒所得序列在最末端稍短 ,但同样能进行正确拼接并获得全长编码序列 .对Y RACE法的优缺点和可能的改进作了进一步讨论 . 展开更多
关键词 Y-race 棉花 胚珠 CDNA末端 快速扩增
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利用改良RACE方法克隆木薯淀粉合成关键酶AGPase小亚基基因的研究
3
作者 郭雅静 罗兴录 +1 位作者 钟建崑 陈会鲜 《中国农学通报》 CSCD 2014年第27期252-257,共6页
首次从木薯中分离克隆出AGPase小亚基的基因5’端cDNA序列,最终为进一步成功获得木薯淀粉合成关键酶AGPase小亚基基因的cDNA全长序列提供依据。本研究以木薯作为试验材料,设计锚定引物,并根据木薯AGPase小亚基基因已知序列设计PCR特异引... 首次从木薯中分离克隆出AGPase小亚基的基因5’端cDNA序列,最终为进一步成功获得木薯淀粉合成关键酶AGPase小亚基基因的cDNA全长序列提供依据。本研究以木薯作为试验材料,设计锚定引物,并根据木薯AGPase小亚基基因已知序列设计PCR特异引物,利用逆转录引物AUP1反转录总RNA,然后分离纯化反转录产物,通过对三大酶促反应(逆转录反应,TdT加尾,巢式及降落PCR技术)的具体改良,并将其与传统方法进行比较。利用改良后方法,首次成功获得木薯淀粉合成关键酶AGPase小亚基基因5’端cDNA序列。同时,本研究通过对RACE技术的改良与传统方法相比,在操作上更加简单、快速;在序列获得上更加高效;在试验成本上更加低廉。本研究可以高效且快速的成功获得木薯淀粉关键酶AGPase小亚基基因5’端序列,具有一定的实用性及简便性。 展开更多
关键词 木薯 AGPase小亚基基因 克隆 5’端 改良race方法
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不同方法制备的RNA模板对杜仲肉桂醇脱氢酶基因5'-RACE扩增的影响
4
作者 李晓毓 《黄山学院学报》 2008年第5期64-65,共2页
比较研究了分别以Trizol、改良CTAB法和热硼酸盐法制备的杜仲叶片RNA为模板进行肉桂醇脱氢酶基因5'末端扩增的不同效果。实验发现以改良CTAB法提取的RNA做模板时,得到的5'RACE产物特异性强,条带亮而清晰,效果最好。
关键词 RNA制备 改良CTAB法 5′-race
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巴哈越野赛车车架结构设计与工程结构分析 被引量:1
5
作者 尚家杰 杨智杰 +1 位作者 原言和 迟媛 《机械设计与制造》 北大核心 2025年第9期225-228,232,共5页
在保证车架设计结构安全、合理的前提下,依据BSC(Baja SAE China中国汽车工程学会巴哈大赛)赛事规则,设计一款赛车车架结构。因其特有桁架结构及受力复杂,为保证设计过程中有效控制强度和刚度,运用CATIA建模,利用ANSYS中Workbench模块... 在保证车架设计结构安全、合理的前提下,依据BSC(Baja SAE China中国汽车工程学会巴哈大赛)赛事规则,设计一款赛车车架结构。因其特有桁架结构及受力复杂,为保证设计过程中有效控制强度和刚度,运用CATIA建模,利用ANSYS中Workbench模块对优化前后车架分别进行静载及弯曲工况下应力及变形分析。最终计算得到优化后车架弯曲刚度和扭转刚度分别为129030.01N·m^(2)和2962.07N·m/(°)。并运用Modal模块对车架进行自由和约束模态分析,根据分析结果对车架进行优化及对比分析,使赛车车架减重3.274kg。结合比赛实地测试表明,该车架的强度及刚度满足设计要求及相关行业标准。研究方法可为以轻量化和良好人机交互为目标的相关设计进入性能验证阶段提供指导,也为具有同类越野车车架和复杂结构设计及分析提供参考。 展开更多
关键词 巴哈赛车 车架 设计 工程结构 有限元法 优化
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Linux内核中的数据竞争及其检测方法
6
作者 郑世杰 杜春来 《软件》 2025年第7期10-12,共3页
随着计算机系统高度并行化发展,Linux内核作为应用最广泛的开源操作系统内核,其并发安全性成为影响系统可靠性与安全性的核心因素。本文研究Linux内核中的数据竞争问题及其安全影响。通过实际案例展示了数据竞争的实际表现,以“Dirty CO... 随着计算机系统高度并行化发展,Linux内核作为应用最广泛的开源操作系统内核,其并发安全性成为影响系统可靠性与安全性的核心因素。本文研究Linux内核中的数据竞争问题及其安全影响。通过实际案例展示了数据竞争的实际表现,以“Dirty COW”漏洞为例,剖析了数据竞争的成因及安全影响,对比评估了静态分析、动态分析和机器学习方法的检测优劣。 展开更多
关键词 LINUX内核 数据竞争 检测方法
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环下润滑供油通道流量分配特性的数值研究 被引量:1
7
作者 朱泽韬 吕亚国 +2 位作者 朱鹏飞 曹逸韬 刘振侠 《航空动力学报》 北大核心 2025年第1期90-100,共11页
为探究环下润滑供油通道滑油流量分配特性,采用volume of fluid(VOF)方法对轴心射流收油环内部两相流动进行了计算,获得了供油通道内油膜形成过程与流场特征,重点讨论了供油温度、主轴转速、供油流量及供油孔径组合对流量分配的影响规律... 为探究环下润滑供油通道滑油流量分配特性,采用volume of fluid(VOF)方法对轴心射流收油环内部两相流动进行了计算,获得了供油通道内油膜形成过程与流场特征,重点讨论了供油温度、主轴转速、供油流量及供油孔径组合对流量分配的影响规律,建立了临界孔径比的无量纲关联式。结果表明:滑油射流冲击收油环中心后形成油膜,其边缘断裂形成油带、油矢甩至侧壁面,最终油膜铺满整个端面;计算工况范围内,滑油分配主要受供油流量及孔径影响,各出口流量随供油流量上升均呈线性增加,滑油分配比随供油流量增加而平均降低15.05%;滑油分配比随下游孔径与孔径比的增加而上升;当无量纲供油流量越大且下游无量纲孔径越小时,临界孔径比越高并趋近于1,当无量纲供油流量降低或下游无量纲孔径增大时,临界孔径比则下降。 展开更多
关键词 环下润滑 供油通道 流量分配特性 临界孔径比 VOF方法
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大豆细菌性疫病菌生理小种及其鉴定方法研究 被引量:6
8
作者 李永镐 张明厚 张原 《大豆科学》 CSCD 北大核心 1996年第2期136-140,共5页
根据在国际通用鉴别品种上的反应,将黑龙江省15个供试的大豆细菌性疫病菌菌株划分为小种1和小种4,其中小种4为优势小种,占供试菌株的86.67%。复叶喷雾接种和单叶压力接种法的鉴定结果一致。讨论了复叶喷雾接种鉴定大豆细... 根据在国际通用鉴别品种上的反应,将黑龙江省15个供试的大豆细菌性疫病菌菌株划分为小种1和小种4,其中小种4为优势小种,占供试菌株的86.67%。复叶喷雾接种和单叶压力接种法的鉴定结果一致。讨论了复叶喷雾接种鉴定大豆细菌性疫病菌生理小种的优越性和可行性。供试的大豆品种多数对小种1具有抗性,但对小种4均表现感病。 展开更多
关键词 大豆 细菌性疫病菌 生理小种 鉴定
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日本晚樱同源异型基因PrseAP3的克隆及其在单瓣与重瓣花中的表达分析 被引量:8
9
作者 刘志雄 于先泥 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期578-583,共6页
用同源克隆的方法和3′RACE技术,从日本晚樱(Prunus lannesiana)中分离得到了1个AP3同源基因PrseAP3的cDNA全长,GenBank登录号为JF710371。其cDNA全长977bp,包括1个编码235个氨基酸共708bp的开放阅读框。序列比对和分子系统发生分析表明... 用同源克隆的方法和3′RACE技术,从日本晚樱(Prunus lannesiana)中分离得到了1个AP3同源基因PrseAP3的cDNA全长,GenBank登录号为JF710371。其cDNA全长977bp,包括1个编码235个氨基酸共708bp的开放阅读框。序列比对和分子系统发生分析表明,PrseAP3是拟南芥的AP3同源基因,其蛋白质的C末端具有2个保守基元:PI-derived模体和paleoAP3模体,属B类转录因子中paleoAP3进化系。半定量RT-PCR分析表明,PrseAP3主要在单瓣日本晚樱品种大岛的萼片、花瓣和雄蕊中表达;在重瓣品种一叶的花瓣、雄蕊和叶化心皮中表达。其表达组织特异性在2个品种间表现出明显的差异,并与拟南芥的AP3基因有一定的差别。 展开更多
关键词 日本晚樱 花发育 花同源异型基因 APETALA3 同源克隆 3′race技术 半定量RT-PCR
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太湖地区水稻地方品种籼粳分类方法的比较 被引量:7
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作者 汤陵华 孙加祥 +1 位作者 宇田津徹朗 佐藤洋一朗 《江苏农业学报》 CSCD 2003年第3期139-144,共6页
 取太湖地区水稻地方品种99份(籼稻49份,粳稻50份)。比较分析了由品种的酚反应、氯酸钾抗性和稃毛长综合计算的判别值Z1;由硅酸体形态计算的Z2;根据叶绿体DNA电泳谱带判别栽培稻亚种类型的效果。结果表明:用叶绿体DNA判别栽培稻亚种类...  取太湖地区水稻地方品种99份(籼稻49份,粳稻50份)。比较分析了由品种的酚反应、氯酸钾抗性和稃毛长综合计算的判别值Z1;由硅酸体形态计算的Z2;根据叶绿体DNA电泳谱带判别栽培稻亚种类型的效果。结果表明:用叶绿体DNA判别栽培稻亚种类型的准确率最高,达95%;根据特性分类系数(Z1)划分籼粳类型的准确率次之,达86%;根据硅酸体形态分类系数(Z2)的判别准确率最低,为73%。 展开更多
关键词 太湖地区 水稻 地方品种 籼粳 分类方法 分类系数 判别准确率
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武术短兵竞赛存在问题与对策 被引量:10
11
作者 戴小平 梁亚东 《武汉体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2009年第11期82-85,共4页
运用文献资料法,对目前武术短兵运动出现的困境进行分析,认为影响武术短兵发展的主要原因是项目不能突出中华武术的特色、规则使用了不适宜的连击条款、兵器的安全性能出现问题,提出了相应的对策和创新方式思路。
关键词 武术短兵 竞赛 创新方式
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刺五加内生青霉鲨烯合酶基因的克隆与序列分析 被引量:1
12
作者 邢朝斌 何闪 +3 位作者 朱金丽 龙月红 梁能松 李宝财 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1136-1144,共9页
【目的】克隆刺五加内生青霉Penicillium minioluteum P116-1a的鲨烯合酶(Squalene synthase,SS)基因。【方法】采用cDNA 5末端快速扩增(Rapid Amplification ofcDNA 5 Ends,5 RACE)技术扩增P.minioluteum P116-1a SS基因的全长cDNA序列... 【目的】克隆刺五加内生青霉Penicillium minioluteum P116-1a的鲨烯合酶(Squalene synthase,SS)基因。【方法】采用cDNA 5末端快速扩增(Rapid Amplification ofcDNA 5 Ends,5 RACE)技术扩增P.minioluteum P116-1a SS基因的全长cDNA序列和DNA序列;运用生物信息学方法对该基因进行分析,预测其编码蛋白的结构与功能;并通过RT-PCR法和SDS-PAGE法检测SS的表达情况。【结果】P.minioluteum P116-1a的SS基因含有4个外显子和3个内含子,开放阅读框长1 416 bp,编码471个氨基酸,预测蛋白含67.73%的α螺旋,5.31%的延伸链,2.97%的β折叠,23.99%的无规则卷曲,含有鲨烯合酶和八氢番茄红素合成酶的特异性识别区域,定位于内质网膜。与P.marneffei和Talaromyces stipitatus中SS蛋白的氨基酸同源性达90%以上。不同温度下SS的表达情况不同。【结论】首次在刺五加内生青霉P.minioluteum P116-1a中克隆到SS基因,为进一步研究P.minioluteum P116-1a提高刺五加皂苷含量的机制奠定基础。 展开更多
关键词 PENICILLIUM minioluteum P116-1a 鲨烯合酶 克隆 5’race技术
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两种检测HBV RNA方法在核苷(酸)类似物经治和初治慢性乙型肝炎患者中的相关性和一致性评价 被引量:3
13
作者 王雪刚 张新枝 +5 位作者 杨澍 甘苏琴 刘诗 郝坤艳 周彬 于乐成 《肝脏》 2020年第7期736-742,共7页
目的比较RACE法和Sansure法检测核苷(酸)类似物经治和初治慢性乙型肝炎患者HBV RNA定量值的相关性和一致性。方法纳入南方医科大学南方医院门诊随访的慢性乙型肝炎患者并收集患者血清学、病毒学和生化数据。采集患者血清分别用RACE法和S... 目的比较RACE法和Sansure法检测核苷(酸)类似物经治和初治慢性乙型肝炎患者HBV RNA定量值的相关性和一致性。方法纳入南方医科大学南方医院门诊随访的慢性乙型肝炎患者并收集患者血清学、病毒学和生化数据。采集患者血清分别用RACE法和Sansure法检测HBV RNA水平,分析两者检测值的相关性和一致性。结果共入组101例慢性乙型肝炎患者,其中接受核苷(酸)类似物治疗62例,未曾接受核苷(酸)类似物治疗39例。治疗和未治疗组的HBsAg和HBV DNA水平存在显著差异,HBV RNA水平差异有统计学意义。两种方法相比,RACE法比Sansure法检测到的阳性患者更多(60/101和56/101),平均检测值更高(3.16和2.53 lg拷贝/mL)。HBV DNA水平与HBV RNA水平在治疗组没有相关性(RACE法R^2=0.4406,Sansure法R^2=0.5081),在未治疗组显著相关(RACE法R^2=0.8448,Sansure法R^2=0.8667)。RACE法和Sansure法HBV RNA检测值显著相关(R^2=0.8740);此外,两种HBV RNA检测方法Bland-Altman分析显示,95%一致性界限的范围较窄(在治疗组为-1.789~0.22 lg拷贝/mL,在未治疗组为-2.25~0.53 lg拷贝/mL);以RACE法为基准,Sansure法的偏差在治疗组为-0.78 lg拷贝/mL,在未治疗组为-0.86 lg拷贝/mL。两种方法线性回归后方程:Y(Sansure法)=0.9189X(RACE法)-0.3754。结论两种HBV RNA检测方法的相关性显著,一致性较好,可用线性回归方程互算;两种HBV RNA检测方法均可有效弥补血清HBV DNA检测对指导慢性乙型肝炎临床诊治方面的不足。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 HBV RNA race Sansure法 相关性 一致性
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罗汉果果实RNA的提取及SgDHAR基因的克隆与表达 被引量:10
14
作者 韦荣昌 赵欢 +5 位作者 马小军 密克 莫长明 潘丽梅 白隆华 唐其 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期115-123,共9页
针对罗汉果果实富含酚类、多糖、油脂和蛋白质等特点,从3种常用的RNA提取方法中优选出改良Trizol法,应用该法得到的RNA纯度高(OD260/280=2.01;OD260/230=2.02)、完整性好(RIN=9.50)、得率高(260μg·g-1)。以该法提取的RNA为模板,通... 针对罗汉果果实富含酚类、多糖、油脂和蛋白质等特点,从3种常用的RNA提取方法中优选出改良Trizol法,应用该法得到的RNA纯度高(OD260/280=2.01;OD260/230=2.02)、完整性好(RIN=9.50)、得率高(260μg·g-1)。以该法提取的RNA为模板,通过RACE和RT-PCR技术克隆罗汉果脱氢抗坏血酸还原酶基因全长,其长度为1 252 bp,开放阅读框(ORF)为819 bp,命名为SgDHAR,GenBank登录号为KC907731,编码一条272个氨基酸的肽链,理论分子量为30.217 7 kD,等电点为8.76。该蛋白与GenBank中已登录的DHAR序列比对显示与黄瓜同源性最高(87%)。应用实时荧光定量PCR对SgDHAR在罗汉果不同组织及不同倍性中的表达模式分析发现,该基因主要在果实和茎中表达,其次是花,根中的表达量最低;在三倍体中的表达量为二倍体的6.83倍,推测该基因可能参与了三倍体无籽罗汉果的败育过程。 展开更多
关键词 罗汉果 改良Trizol法 DHAR基因 race 生物信息学
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甜菜M14品系花期cDNA文库的构建及特异表达基因的筛选 被引量:5
15
作者 马春泉 张莹 +5 位作者 崔颖 王冰 王玉婷 刘金玲 王宏建 李海英 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期408-411,共4页
构建了甜菜M14品系在花期的ZAP表达载体的cDNA文库,利用抑制消减杂交方法所获得的M14品系特异表达的2个EST片段为探针筛选cDNA文库,获得了M14品系特异表达cDNA片段Me-86和Me-84;进一步利用RACE技术获得了基因M14-86 cDNA片段的全长序列... 构建了甜菜M14品系在花期的ZAP表达载体的cDNA文库,利用抑制消减杂交方法所获得的M14品系特异表达的2个EST片段为探针筛选cDNA文库,获得了M14品系特异表达cDNA片段Me-86和Me-84;进一步利用RACE技术获得了基因M14-86 cDNA片段的全长序列。生物信息学分析表明M14品系特异表达基因M14-86的cDNA片段与cDNA片段Me-84分别与大花马齿苋(Portulaca grandiflora)及瓶子草(Sarracenia purpurea)的26S核糖体RNA具有很高的同源性。 展开更多
关键词 CDNA文库 EST 表达载体 噬菌斑原位杂交 race技术
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呼吸方法对大学生运动员800m、1000m成绩的影响 被引量:4
16
作者 孙志新 张健 王厚雷 《四川体育科学》 2015年第3期53-56,共4页
现阶段800m、1000m是我国中小学的体育达标项目,同时也是我国高校的体能测试项目,即作为国家学生体质测试标准将1000m(男生)与800m(女生)作为测试指标之一,1000m(男生)与800m(女生)测试在高校是必修课,学校将其作为国家学生体质测试标... 现阶段800m、1000m是我国中小学的体育达标项目,同时也是我国高校的体能测试项目,即作为国家学生体质测试标准将1000m(男生)与800m(女生)作为测试指标之一,1000m(男生)与800m(女生)测试在高校是必修课,学校将其作为国家学生体质测试标准的测试指标。在体育课的考核内容在多年的教学实践中发现,学生的参与少且抵触情绪大,使1000m(男生)与800m(女生)的测试对测试学生来说是一件很头疼的事情。本研究以聊城大学田径队甲组运动员为例,对大学生运动员800m、1000m跑呼吸方法的进行研究,为800、1000米跑提供科学的呼吸理论依据。 展开更多
关键词 田径 中长跑 呼吸方法 成绩
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体育专业学生跨栏恐惧心理调查及训练对策 被引量:9
17
作者 林永捷 《漳州师范学院学报(自然科学版)》 2007年第4期111-114,共4页
在跨栏跑教学与训练中必须重视运动员心理变化的研究,采用相应、合理的教学手段和训练方法,以适应和调节运动员的心理过程,这对提高教学质量、训练水平以及竞赛具有重要意义.
关键词 跨栏跑 恐惧 手段 方法 心理调节
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面孔加工的结构编码阶段异族效应的加工方式:ERPs研究 被引量:1
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作者 李诸洋 韩仁生 刘璐 《心理科学》 CSSCI CSCD 北大核心 2014年第6期1308-1312,共5页
实验采用事件相关电位(ERPs)技术,以大学生为被试,运用非洲、欧洲、亚洲三个不同种族的面孔照片,探究异族效应与加工方式的关系。行为实验结果显示,被试对非洲面孔的反应时快于欧洲面孔,且两者均快于亚洲面孔。ERP研究结果显示,亚洲面孔... 实验采用事件相关电位(ERPs)技术,以大学生为被试,运用非洲、欧洲、亚洲三个不同种族的面孔照片,探究异族效应与加工方式的关系。行为实验结果显示,被试对非洲面孔的反应时快于欧洲面孔,且两者均快于亚洲面孔。ERP研究结果显示,亚洲面孔的N170波幅显著小于非洲和欧洲面孔的波幅,后两者的N170波幅没有差异,而且亚洲面孔的倒置效应最大。研究结果说明相对于异族面孔,本族面孔更多地使用构型编码的加工方式,且N170成分表现出右半球优势。 展开更多
关键词 事件相关电位(ERPs) N170 异族效应 加工方式
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基于简化Jones-Harris方法的球轴承接触角研究 被引量:13
19
作者 张学宁 韩勤锴 褚福磊 《振动与冲击》 EI CSCD 北大核心 2013年第13期170-175,共6页
作为球轴承重要的结构参数之一,接触角对轴承组件的载荷分布、运动关系、润滑、摩擦等都有重要的影响。将求解惯性力所涉及的变量耦合关系进行简化,提出了用于研究球轴承接触角特性的简化Jones-Harris方法(SJHM),通过预先给定内圈偏转角... 作为球轴承重要的结构参数之一,接触角对轴承组件的载荷分布、运动关系、润滑、摩擦等都有重要的影响。将求解惯性力所涉及的变量耦合关系进行简化,提出了用于研究球轴承接触角特性的简化Jones-Harris方法(SJHM),通过预先给定内圈偏转角,克服了直接迭代法难以考虑内圈偏转角对接触角影响规律的不足。以b218轴承为对象,验证了SJHM方法的有效性;在此基础上,分析了多种因素对接触角的影响规律。研究结果表明:相比陀螺力矩的影响,离心力对内、外接触角的影响更加显著;接触角对轴承内圈偏转角的变化非常敏感,内圈偏转角会使同一个滚动体的内、外接触角同时增大或减小。 展开更多
关键词 球轴承 接触角 简化Jones-Harris方法 内圈偏转角 惯性力
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对中外优秀中长跑运动员战术谋略的研究 被引量:6
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作者 任保国 房游光 刘希友 《中国体育科技》 北大核心 1998年第4期31-35,共5页
本交通过对中外优秀中长跑运动员比赛战术谋略的比较研究,探讨了中长跑运动员战术谋略的过程、运用方法和运用原则。
关键词 中长跑 战术谋略 运用方法 运用原则
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