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定志小丸对血管性痴呆小鼠PINK1/PARKIN/MEF2D线粒体自噬通路的影响 被引量:1
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作者 邓敏贞 王宇 +5 位作者 宁振求 胡达峰 王凯 王成毅 孙景波 程骁 《中药新药与临床药理》 北大核心 2025年第3期328-337,共10页
目的研究定志小丸对血管性痴呆(VD)小鼠PTEN诱导假定激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶PARK2(PARKIN)/肌细胞增强因子2D(MEF2D)线粒体自噬通路的影响。方法采用双侧颈总动脉夹闭再灌注方法复制VD小鼠模型。将ICR小鼠随机分为假手术组、模型组... 目的研究定志小丸对血管性痴呆(VD)小鼠PTEN诱导假定激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶PARK2(PARKIN)/肌细胞增强因子2D(MEF2D)线粒体自噬通路的影响。方法采用双侧颈总动脉夹闭再灌注方法复制VD小鼠模型。将ICR小鼠随机分为假手术组、模型组、盐酸多奈哌齐组(1 mg·kg^(-1),灌胃给药)、PINK1抑制剂组(20 mg·kg^(-1)环孢菌素A,腹腔注射给药)及定志小丸低、中、高剂量组(0.71、1.43、2.56 g·kg^(-1),灌胃给药),每组6只,每天1次,连续给药4周。采用Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力;ELISA法检测海马组织乙酰胆碱酯酶(AchE)、活性氧(ROS)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、紧密连接蛋白1(ZO-1)水平及血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、中枢神经特异性蛋白(S100β)水平;qRT-PCR及Western Blot法检测海马组织中PINK1、PARKIN、MEF2D、Bcl-2同源结构域蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)、螯合体1(p62)mRNA及蛋白表达水平;HE及尼氏染色法观察海马组织病理变化。结果与假手术组比较,模型组小鼠的逃逸潜伏期显著延长(P<0.01),穿越平台次数显著减少(P<0.01);海马组织AchE、ROS、IL-1β、TNF-α水平显著升高(P<0.01),GPX4、ZO-1水平显著降低(P<0.01);血清NSE、MMP9、S100β水平显著升高(P<0.01);海马组织中PINK1、PARKIN、Beclin-1、LC3B mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.01),MEF2D、p62 mRNA及蛋白表达显著下调(P<0.01);海马CA1区神经元排列疏松,细胞核呈三角形或不规则形状,或出现溶解现象,细胞出现较为明显的变性;海马CA1区的尼氏体数量和层数明显减少,排列较为紊乱,甚至出现空泡结构。与模型组比较,各给药组小鼠的逃逸潜伏期显著缩短(P<0.01),穿越平台次数显著增加(P<0.01);海马组织AchE、ROS、IL-1β、TNF-α水平显著降低(P<0.01),GPX4、ZO-1水平显著升高(P<0.01);血清NSE、MMP9、S100β水平显著降低(P<0.01);海马组织中PINK1、PARKIN、Beclin-1、LC3B mRNA表达显著下调(P<0.01),MEF2D、p62 mRNA表达显著上调(P<0.01);小鼠海马CA1区神经元排列更为紧密,核固缩现象有所缓解,发生变性的细胞数量减少;海马CA1区的尼氏体数量均有所增加,细胞层数损失减少,排列相对紧密有序。与模型组比较,定志小丸各剂量组及PINK1抑制剂组小鼠海马组织中PINK1、PARKIN蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01);定志小丸各剂量组的Beclin-1蛋白表达显著下调(P<0.01),p62蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01);定志小丸中、高剂量组及PINK1抑制剂组的MEF2D蛋白表达显著上调(P<0.01);定志小丸中、高剂量组的LC3B蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论定志小丸对VD小鼠具有海马神经元保护作用,能降低氧化应激和炎症反应,其机制可能与调控PINK1/PARKIN/MEF2D线粒体自噬通路相关。 展开更多
关键词 定志小丸 血管性痴呆 PINK1/PARKIN/mef2D通路 线粒体自噬 氧化应激 炎症反应 小鼠
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MEF2C在骨组织发育与代谢中的多效性作用
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作者 肖豪杰 黄睿奇 +3 位作者 林圣傑 李金旸 衣雪洁 高海宁 《生理学报》 北大核心 2025年第2期374-384,共11页
人体内骨的发育过程以及成年后骨量的维持受多种生物因子调控。肌细胞增强因子2C(myocyte enhancer factor 2C,MEF2C)作为诸多调控骨组织发育和平衡因子中的一员,已被证明在骨发育以及骨代谢过程中发挥关键作用。然而关于该因子对骨组... 人体内骨的发育过程以及成年后骨量的维持受多种生物因子调控。肌细胞增强因子2C(myocyte enhancer factor 2C,MEF2C)作为诸多调控骨组织发育和平衡因子中的一员,已被证明在骨发育以及骨代谢过程中发挥关键作用。然而关于该因子对骨组织的影响鲜少有系统性的整理与总结。为更好地了解MEF2C对骨组织产生的效应,本文系统梳理了MEF2C在骨发育以及骨代谢中的作用。在骨发育过程中,MEF2C促进神经嵴细胞(neural crest cells,NC)发育为颅面软骨,且直接促进软骨肥大。对于骨代谢,在不同类型的骨细胞中,MEF2C展现出差异化的调控模式,对骨形成过程既有促进也有其他潜在的调控作用,但对破骨细胞目前只确定了其促进作用。鉴于MEF2C对骨组织的复杂效应,本文也讨论了MEF2C对部分骨病的影响,为骨组织的生理学研究及骨性疾病的预防提供理论参考。 展开更多
关键词 mef2C 软骨 成骨细胞 破骨细胞 骨病
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关岭牛MEF2A启动子甲基化负向调控mRNA转录
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作者 孙金魁 许厚强 《华北农学报》 北大核心 2025年第4期203-209,共7页
肌肉生成依赖于各种细胞内外的信号和因子的相互调控,通过组织和细胞水平探究肌细胞增强因子2A(MEF2A)表达量与其启动子甲基化的调控关系,为关岭牛的遗传发育提供理论参考。以关岭牛为试验对象,首先对关岭牛组织MEF2A表达量与其启动子... 肌肉生成依赖于各种细胞内外的信号和因子的相互调控,通过组织和细胞水平探究肌细胞增强因子2A(MEF2A)表达量与其启动子甲基化的调控关系,为关岭牛的遗传发育提供理论参考。以关岭牛为试验对象,首先对关岭牛组织MEF2A表达量与其启动子甲基化水平联合分析。其次,将MEF2A基因的干扰和超表达载体转染至关岭牛原代成肌细胞内,分析MEF2A表达量变化对其启动子甲基化水平的影响。结果表明,关岭牛犊牛各组织MEF2A表达量高于成年牛,而犊牛组织MEF2A甲基化率低于成年牛,DNMT1表达量趋势与之一致。此外,MEF2A表达量升高导致其甲基化率降低,降低MEF2A表达量则导致其甲基化率升高。从组织和细胞两方面证实关岭牛MEF2A基因表达水平与其甲基化率呈负相关,为遗传标记辅助牛的遗传改良提供了理论依据。 展开更多
关键词 关岭牛 mef2A 启动子 DNA甲基化 成肌细胞
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MEF2D在神经系统疾病中的研究进展
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作者 焦腾飞 热娜·阿不都萨拉木(综述) 韩登峰(审校) 《中风与神经疾病杂志》 2025年第3期279-283,共5页
神经系统疾病是影响全球人类疾病负担的一个重要原因,但是有关神经系统疾病的发生发展机制的研究尚不完全清楚,但大多数的研究发现与人体基因的变异表达有关。MEF2D作为MEF2家族基因中的一个重要基因,在生理和病理过程中都发挥着重要作... 神经系统疾病是影响全球人类疾病负担的一个重要原因,但是有关神经系统疾病的发生发展机制的研究尚不完全清楚,但大多数的研究发现与人体基因的变异表达有关。MEF2D作为MEF2家族基因中的一个重要基因,在生理和病理过程中都发挥着重要作用。相关研究发现MEF2D可以参与神经元的存活,并能调节神经元对刺激的反应,可以参与神经系统疾病的致病过程。本综述主要总结了MEF2D在常见神经系统疾病中的进展研究。 展开更多
关键词 mef2D 神经系统疾病 研究进展
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基于生物信息学探讨MEF2C在铁死亡相关哮喘中的分子机制
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作者 姜海松 宋艺兰 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第3期199-203,共5页
目的基于生物信息学方法筛选铁死亡相关哮喘的关键基因,并探讨其在哮喘发生中的分子机制。方法通过GEO数据库获取哮喘相关数据集,并在铁死亡数据库(FerrDB)中下载铁死亡相关基因,两者取交集得到铁死亡相关哮喘差异表达基因。通过LASSO... 目的基于生物信息学方法筛选铁死亡相关哮喘的关键基因,并探讨其在哮喘发生中的分子机制。方法通过GEO数据库获取哮喘相关数据集,并在铁死亡数据库(FerrDB)中下载铁死亡相关基因,两者取交集得到铁死亡相关哮喘差异表达基因。通过LASSO回归和SVM-RFE算法进一步筛选核心基因。对上述筛选所得基因进行分子生物学验证,并通过哮喘小鼠中的miRNA微阵列数据联合miRWalk与TargetScan预测上游miRNA。结果首先从GSE43696数据集中筛选出在中、重度哮喘中表型一致的差异表达基因212个,其中包含5种铁死亡相关基因,分别为HCAR1、NOS2、MEF2C、IL6和NOX1。SVM-RFE算法显示,MEF2C对模型的影响最大,实验验证后发现其mRNA与蛋白产物的表达在哮喘小鼠中均下调,且主要在气道上皮细胞核内表达。靶向MEF2C的miRNA预测分析结果发现在哮喘小鼠中上调miR-2861表达可能靶向MEF2C,且miR-2861的表达在IL-17A敲除后显著下调。结论MEF2C是铁死亡相关哮喘的关键调控因子,其表达下调可能与IL-17A介导的miR-2861表达上调有关。 展开更多
关键词 哮喘 铁死亡 生物信息学 mef2C 白细胞介素-17A
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MEF2C基因1~3号外显子缺失致5q14.3微缺失综合征患儿的分子遗传学分析
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作者 朱心怡 祝建军 +1 位作者 姜湖铃 李素萍 《中国优生与遗传杂志》 2025年第8期1799-1804,共6页
目的 探讨5q14.3微缺失综合征患儿的临床表型和遗传学机制,为家系遗传咨询和再生育指导提供依据。方法 采用单核苷酸多态性微阵列(SNP-array)技术,对1例全面发育迟缓患儿进行诊断,并结合染色体核型和全外显子组测序技术(WES)分析,检测... 目的 探讨5q14.3微缺失综合征患儿的临床表型和遗传学机制,为家系遗传咨询和再生育指导提供依据。方法 采用单核苷酸多态性微阵列(SNP-array)技术,对1例全面发育迟缓患儿进行诊断,并结合染色体核型和全外显子组测序技术(WES)分析,检测到的微小变异通过实时荧光定量PCR(qPCR)验证并进行文献回顾。结果 患儿主要临床表现为全面发育迟缓,癫痫发作,伴颈静脉窝和拇指卷曲畸形。SNP-array检测提示患儿5q14.3区存在大小为128 kb的杂合缺失,涉及MEF2C基因1~4号外显子。其染色体核型分析结果未见异常。全外显子组测序(WES)检测显示患儿MEF2C基因2~3号外显子缺失变异。qPCR结果证实患儿MEF2C基因1~3号外显子杂合缺失,患儿父母均不携带该变异。经检索,目前国内外共报道了8例仅因MEF2C基因缺失而致病的病例。结论 患儿仅存在MEF2C基因1-3号外显子杂合缺失,该小片段缺失导致了5q14.3微缺失综合征。该患儿是国内外报道的该综合征合并颈静脉窝畸形特征,缺失片段最小的病例。SNP-array、WES等多种技术结合应用可为遗传学诊断提供依据。 展开更多
关键词 5q14.3微缺失综合征 mef2C基因 全面发育迟缓 颈静脉窝畸形 遗传学分析
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南阳黄牛肌肉发育过程中的MyoD和MEF2基因的表达变化研究 被引量:12
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作者 祁艳霞 张小辉 +2 位作者 庞有志 王玉琴 廖辉 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期558-561,共4页
利用荧光实时定量PCR技术分析了南阳黄牛3月龄到24月龄间背最长肌组织中MyoD和MEF2基因家族的表达变化情况.结果表明,MyoD基因的表达呈先升高后降低的趋势,在18月龄时表达量最高.MEF2A基因在3月龄时表达量最低,在12月龄和18月龄时表达... 利用荧光实时定量PCR技术分析了南阳黄牛3月龄到24月龄间背最长肌组织中MyoD和MEF2基因家族的表达变化情况.结果表明,MyoD基因的表达呈先升高后降低的趋势,在18月龄时表达量最高.MEF2A基因在3月龄时表达量最低,在12月龄和18月龄时表达量显著升高,随后表达量下降;MEF2B基因的表达呈持续上升趋势;MEF2C基因在3月龄时表达量最低,在肌肉发育过程中表达量变化比较小;MEF2D基因表现出明显的先升高后降低趋势,18月龄和24月龄时的表达量比3月龄时显著高. 展开更多
关键词 肌肉发育 MYOD mef2
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不同强度运动对AMPKα2三种不同基因状态鼠MEF2/GLUT4 DNA结合活性的影响 被引量:12
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作者 龚豪杰 谢谨 +2 位作者 张楠 姚璐 张缨 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2011年第2期55-63,共9页
目的:研究不同强度跑台运动对AMPKα2三种不同基因状态鼠MEF2/GLUT4DNA结合活性及GLUT4基因表达的影响,以探讨运动提高骨骼肌MEF2/GLUT4DNA结合活性及GLUT4基因表达可能机制。方法:野生小鼠和AMPKα2高表达转基因小鼠,AMPKα2基因敲除... 目的:研究不同强度跑台运动对AMPKα2三种不同基因状态鼠MEF2/GLUT4DNA结合活性及GLUT4基因表达的影响,以探讨运动提高骨骼肌MEF2/GLUT4DNA结合活性及GLUT4基因表达可能机制。方法:野生小鼠和AMPKα2高表达转基因小鼠,AMPKα2基因敲除小鼠各30只,分别随机分为安静对照组、低强度(12m/min)跑台运动组和高强度(20/min)跑台运动组。运动时间均为1h。运动后3h取材。Westernblot法测定AMPK(THr72)磷酸化水平。CHIP法测定MEF2/GLUT4DNA结合活性。Real-TimePCR法测定GLUT4mRNA含量。结果:1)野生鼠1h不同强度跑台运动后,GLUT4基因表达量显著增加的同时,伴随着骨骼肌核内MEF2/GLUT4DNA结合活性的显著增加;2)AMPKα2高表达转基因鼠1h不同强度跑台运动后,其骨骼肌细胞核内MEF2/GLUT4DNA结合活性及GLUT4基因表达量,均比野生鼠增加更为显著;3)AMPKα2敲除鼠1h不同强度跑台运动后,骨骼肌核内MEF2/GLUT4DNA结合活性显著低于野生鼠,但GLUT4基因表达量与野生鼠相比没有显著差异。结论:1)运动通过提高MEF2/GLUT4DNA结合活性而提高GLUT4表达;2)AMPKα2参与调解了运动诱导的MEF2/GLUT4DNA结合活性及GLUT4基因表达量的升高;3)虽然AMPKα2参与调节了运动诱导的MEF2/GLUT4DNA结合活性的提高,但机体还可以募集其他的信号通路代偿AMPKα2对GLUT4表达的调节作用。 展开更多
关键词 AMPKα2高表达转基因小鼠 AMPKα2基因敲除小鼠 mef2 GLUT4 动物实验
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优质鸡MEF2A基因的SNPs检测及其与屠体性状的相关研究 被引量:12
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作者 周艳 刘益平 +2 位作者 蒋小松 杜华锐 朱庆 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1164-1170,共7页
为了解优质鸡MEF2A基因SNPs与屠体性状的相关性,以240只大恒优质肉鸡为材料,应用12对引物,采用PCR-SSCP技术对肌细胞特异性增强子因子2A(MEF2A)基因进行多态性检测。结果在该研究群体中检测到MEF2A基因的3个SNPs位点46 023 nt(C→T,SNP1... 为了解优质鸡MEF2A基因SNPs与屠体性状的相关性,以240只大恒优质肉鸡为材料,应用12对引物,采用PCR-SSCP技术对肌细胞特异性增强子因子2A(MEF2A)基因进行多态性检测。结果在该研究群体中检测到MEF2A基因的3个SNPs位点46 023 nt(C→T,SNP1)、72 626 nt(G→A,SNP2)和89 232 nt(G→T,SNP3)。关联分析结果表明,MEF2A基因3个SNPs位点及其双倍型对部分屠体性状有显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)影响。最小二乘分析结果表明,SNP1中,基因型A2A2个体的活体质量、屠体质量、胸肌质量和腹脂质量最小二乘均值显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)大于A1A1个体;SNP2中,基因型B1B1个体的活体质量、屠体质量、胸肌质量、腿肌质量和腹脂质量的最小二乘均值显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)大于B2B2个体;SNP3中的基因型C1C1个体的半净膛率显著高于基因型C2C2个体(P<0.05)。双倍型H1H2组合的活体质量、屠体质量、胸肌质量和腿肌质量的最小二乘均值均高于其他双倍型组合。H5H5双倍型的活体质量、屠体质量和胸肌质量的最小二乘均值均为最低。初步推断MEF2A基因可以作为影响鸡屠体性状的分子标记。 展开更多
关键词 mef2A基因 SNPS 单倍型 屠宰性状
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MyoG和MEF2a基因多态性聚合效应对鸭屠宰性状的影响 被引量:11
10
作者 赵忠海 李辉 +3 位作者 易恒洁 杨胜林 彭邦星 卜小雁 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第18期3649-3661,共13页
【目的】探讨Myo G和MEF2a基因聚合效应对鸭屠宰性状的影响,为进一步确定与鸭屠宰性状相关的分子遗传标记提供研究基础,为鸭屠宰性状的多基因聚合育种提供依据。【方法】试验以240只三穗鸭为研究素材,扩增Myo G和MEF2a基因并进行PCR产... 【目的】探讨Myo G和MEF2a基因聚合效应对鸭屠宰性状的影响,为进一步确定与鸭屠宰性状相关的分子遗传标记提供研究基础,为鸭屠宰性状的多基因聚合育种提供依据。【方法】试验以240只三穗鸭为研究素材,扩增Myo G和MEF2a基因并进行PCR产物直接测序以检测两基因所有外显子的单核苷酸突变(SNPs)位点。运用SPSS 18.0软件中的GLM统计模型对Myo G和MEF2a基因的SNPs所对应的不同基因型与三穗鸭屠宰性状进行关联分析,根据单基因关联分析结果,将对屠宰性状存在显著影响的Myo G和MEF2a基因的多态位点利用软件PHASE2.0构建聚合基因型,再进行聚合基因型与屠宰性状的关联分析。【结果】在试验群体中一共发现8个SNPs,其中在Myo G基因中有6个SNPs被找到,MEF2a基因中找到2个SNPs位点,在所有突变位点中,其中Myo G基因的g.2977G>C位点发生的G/C突变使密码子由GAG变为GAC,所编码的氨基酸由谷氨酸变成天冬氨酸;而MEF2a基因中的两个多态位点,g.47915G>A位点发生的G/A突变使密码子由GAA变为AAA,编码的氨基酸由谷氨酸变成赖氨酸,g.47918G>A位点的G/A突变引起的密码子由GAT变成AAT,所编码的氨基酸由天冬氨酸变成天冬酰胺。剩下的5个突变位点均属于同义突变,并未引起编码氨基酸的改变。此外,进行χ2适合性检验,除了Myo G基因的g.1131C>T位点和MEF2a基因的g.47915G>A、g.47918G>A位点未处于Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05)外,其他的突变位点均处于平衡状态。单基因关联分析结果表明,Myo G基因g.1131C>T和g.2204G>A突变分别对胸肌率、体重和全净膛重有着显著影响,其所对应的纯合子基因型CC、GG型为优势基因型。MEF2a基因g.47915G>A/g.47918G>A位点影响全净膛率,GA基因型个体属于优势基因型个体。通过挑选出与屠宰性状(胸肌率、体重、全净膛重和全净膛率)有关联的Myo G基因g.1131C>T/g.2204G>A位点与MEF2a基因g.47915G>A/g.47918G>A进行聚合效应分析,结果显示,聚合后的8种聚合基因型个体的全净膛率,在各基因型间无显著差异(P>0.05),TTGAGA基因型的平均值最高,其次为CCGGGA基因型;其他3个指标各基因型间差异达到了显著,其中体重和全净膛重存在正相关,都是CCGAGA基因型的平均值最高,CTGGGA基因型的平均值次之;CCGGGG基因型的胸肌率平均值最高,其次是CCGGGA基因型。结果显示,单个基因的平均值最高的基因型分别为CC、GG和GA,在两基因聚合后在4个指标中CCGGGA基因型都不是最优的组合,说明两个基因间存在互作效应。【结论】两个基因间存在互作效应,所以用单个基因分子标记进行选育可能会顾此失彼,不能收到良好的效果,但是本研究的聚合优势基因型个体偏少,有待于进一步扩大样本进行验证分析,进行更多基因的聚合效应分析。 展开更多
关键词 MYOG基因 mef2a基因 屠宰性状 聚合效应
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MEF2与肌肉发生 被引量:7
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作者 程震龙 朱大海 张志谦 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期581-585,共5页
MEF2属于MADS(MCM1,agamous,deficiens,serum response factor)框转录因子家族,在肌肉发生过程中起着重要的调节作用。本文综述了肌肉发生过程中MEF2,基因的表达调控、MEF2蛋白活性调节及其激活靶基因表达等,着重阐述了MEF2在钙调素... MEF2属于MADS(MCM1,agamous,deficiens,serum response factor)框转录因子家族,在肌肉发生过程中起着重要的调节作用。本文综述了肌肉发生过程中MEF2,基因的表达调控、MEF2蛋白活性调节及其激活靶基因表达等,着重阐述了MEF2在钙调素一钙调磷酸酶与TGF-β-Smad通路中的作用,并分析了MEF2成为肌肉发生中承接信号分子与结构蛋白之间桥梁的原因。 展开更多
关键词 mef2 肌肉发生 信号传导 胚胎发育
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MEF2a基因在肌肉组织中的表达研究 被引量:6
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作者 高智晟 杨龙 +2 位作者 张冬杰 刘娣 刘玉芬 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第4期21-23,共3页
分别取90日龄、180日龄和270日龄大白猪心肌、背肌和腿肌,提取总RNA,设计并合成猪MEF2a引物,以β肌动蛋白作为内参,利用Real-time PCR方法检测不同日龄大白猪肌肉组织中MEF2a基因mRNA的表达。结果表明,不同日龄大白猪的心肌和背肌中,ME... 分别取90日龄、180日龄和270日龄大白猪心肌、背肌和腿肌,提取总RNA,设计并合成猪MEF2a引物,以β肌动蛋白作为内参,利用Real-time PCR方法检测不同日龄大白猪肌肉组织中MEF2a基因mRNA的表达。结果表明,不同日龄大白猪的心肌和背肌中,MEF2a基因mRNA的表达水平无显著差异,在腿肌中有显著差异(P<0.05)。从90日龄到270日龄,MEF2a基因在心肌、背肌和腿肌的表达水平均差异显著(P<0.05),腿肌最高,其次是背肌,心肌最低。据此推测,MEF2a基因在猪成体后的肌肉组织中,主要是促进Ⅰ型肌纤维的生成,而不再是介导细胞分化。 展开更多
关键词 mef2a基因 肌肉发生 REAL-TIME PCR
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猪MEF2a基因的克隆与表达 被引量:4
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作者 高智晟 杨龙 +1 位作者 张冬杰 刘娣 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1157-1163,共7页
为了进一步了解猪MEF2a基因的结构与功能,本研究采用生物信息学结合RT-PCR的方法,克隆了猪的MEF2a基因,获得了它的2个变异体序列。结果表明,猪MEF2a variant 1基因cDNA长1 524 bp(EF576923),编码508个氨基酸,分子量为54.481 ku;variant ... 为了进一步了解猪MEF2a基因的结构与功能,本研究采用生物信息学结合RT-PCR的方法,克隆了猪的MEF2a基因,获得了它的2个变异体序列。结果表明,猪MEF2a variant 1基因cDNA长1 524 bp(EF576923),编码508个氨基酸,分子量为54.481 ku;variant 2基因cDNA长1 416 bp(EF576922),编码471个氨基酸,分子量为50.846 ku。MEF2a两个变异体的氨基酸序列同源性为86.79%,第1aa^77aa和第132aa^470aa完全一致,第78aa^131aa是高变区,variant2与variant1相比,在第224aa^258aa处存在34个氨基酸(102 bp)的缺失。利用Real-ti me PCR方法检测了MEF2a的表达。结果表明,MEF2a mRNA是一个广谱表达基因,在心、肝、胃、脾、肾、肺、大肠、小肠、背肌和腿肌中都能检测到,在腿肌中优势表达。MEF2a variant1与马和家鼠构成一个小类群,而variant 2与牛和人构成了另外一个小类群,推测MEF2a基因在进化过程中发生了较为明显的变异。 展开更多
关键词 mef2a 克隆 REAL-TIME PCR
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MEF2C介导microRNA-214发挥抑制心肌细胞肥大的作用 被引量:4
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作者 唐春梅 朱杰宁 +8 位作者 朱文思 林秋雄 胡志琴 符永恒 张梦珍 邓春玉 谭虹虹 吴书林 单志新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1345-1350,共6页
目的:研究微小RNA-214(mi R-214)对心肌细胞肥大的调控作用及其可能的作用靶基因。方法:建立血管紧张素Ⅱ(angiotensin-Ⅱ,Ang-Ⅱ)诱导的C57BL/6乳小鼠心室肌细胞肥大模型;双萤光素酶报告基因实验检测mi R-214与潜在靶基因MEF2C 3’端... 目的:研究微小RNA-214(mi R-214)对心肌细胞肥大的调控作用及其可能的作用靶基因。方法:建立血管紧张素Ⅱ(angiotensin-Ⅱ,Ang-Ⅱ)诱导的C57BL/6乳小鼠心室肌细胞肥大模型;双萤光素酶报告基因实验检测mi R-214与潜在靶基因MEF2C 3’端非翻译区(3’UTR)的结合作用;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和Western blot法分别检测MEF2C及肥厚标志物的m RNA和蛋白表达水平。结果:心肌肥厚标志物ANP、ACTA1和β-MHC,以及mi R-214的表达在Ang-II诱导肥大的小鼠心肌细胞中显著增强;双萤光素酶报告基因实验提示mi R-214与MEF2C 3’UTR相互作用,证实mi R-214可在转录水平抑制MEF2C的表达,MEF2C蛋白水平在肥大的心肌细胞中显著上调;过表达mi R-214及沉默MEF2C均能一致性地抑制Ang-Ⅱ诱导的心肌细胞中肥大标志物的表达。结论:MEF2C是mi R-214的靶基因,并介导了mi R-214发挥抑制心肌细胞肥大的作用。 展开更多
关键词 心肌肥厚 微小RNA-214 mef2C 心肌细胞
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中国人群MEF2A基因突变与冠心病易感性的关系 被引量:3
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作者 李婧 杨钧国 +2 位作者 李伟 杜容 田莉 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期470-473,共4页
目的研究冠心病相关基因MEF2A在中国人群的突变和多态性位点。方法利用聚合酶链反应-单链构象多态性(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)和DNA测序技术检测210例冠心病(CAD)患者及190名... 目的研究冠心病相关基因MEF2A在中国人群的突变和多态性位点。方法利用聚合酶链反应-单链构象多态性(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)和DNA测序技术检测210例冠心病(CAD)患者及190名健康人MEF2A基因第11外显子。结果冠心病患者SSCP电泳条带异常样本测序分析发现突变:①密码子451G/T(147191位点G→T)杂合或纯合同义突变;②147108~147131位点之间分别发生1个氨基酸(Q)、2个氨基酸(QQ)、3个氨基酸(QQP)、6个氨基酸(425QQQQQQ430)、7个氨基酸(424QQQQQQQ430)缺失;③密码子435G/A(147143位点)杂合突变。密码子451G/T杂合或纯合同义突变以及氨基酸的缺失是基因多态性,密码子435G/A考虑为新的突变。结论中国人群在MEF2A基因第11外显子也存在多种基因多态性,其中6或7个氨基酸的缺失和1个147143位点突变可能与冠心病易感性有关。 展开更多
关键词 冠心病 mef2A基因 基因突变 多态性
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黄牛MEF2A基因克隆及真核表达载体构建 被引量:3
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作者 陈付英 李锋 +4 位作者 安森亚 牛晖 楚秋霞 王治方 徐照学 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期140-144,共5页
旨在克隆MEF2A基因和构建其真核表达载体,为黄牛种质资源保存利用以及肉牛转基因育种和产业化提供基因资源和育种素材。本研究通过RT-PCR克隆黄牛MEF2A基因CDS区,并将其插入到质粒载体pEGFP-C1的多克隆位点中,构建真核表达载体pEGFP-C1-... 旨在克隆MEF2A基因和构建其真核表达载体,为黄牛种质资源保存利用以及肉牛转基因育种和产业化提供基因资源和育种素材。本研究通过RT-PCR克隆黄牛MEF2A基因CDS区,并将其插入到质粒载体pEGFP-C1的多克隆位点中,构建真核表达载体pEGFP-C1-MEF2A。同时应用生物学软件分析MEF2A基因及其编码蛋白的生物学特性,了解其复杂的调控机能。结果,MEF2A基因的CDS区全长1 494bp,编码498个氨基酸残基。生物信息学分析表明,N端第2~56位氨基酸肽段为MADS-box结构域,第57~77位氨基酸肽段为MEF2结构域;C端没有明显的功能域。成功的构建了含有牛MEF2A基因的真核表达载体pEGFP-C1-MEF2A。 展开更多
关键词 mef2A基因 克隆 真核表达载体
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3个品种猪MEF2D基因启动子多态及其生物信息学分析 被引量:3
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作者 白优 张勇 +5 位作者 陈祥 张雄 李俊 何琦 杨红 陆静 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2017年第10期34-38,共5页
研究以从江香猪、杜×长×大外三元杂交猪及贵州宗地花猪为研究对象,采用混合DNA池结合直接测序技术筛选猪MEF2D基因5'UTR及第1外显子区SNPs位点;同时利用生物信息学软件分析SNPs位点对核心启动子区、Cp G岛和转录因子结合... 研究以从江香猪、杜×长×大外三元杂交猪及贵州宗地花猪为研究对象,采用混合DNA池结合直接测序技术筛选猪MEF2D基因5'UTR及第1外显子区SNPs位点;同时利用生物信息学软件分析SNPs位点对核心启动子区、Cp G岛和转录因子结合位点的影响。结果表明:在猪MEF2D基因5'UTR区共筛查到4个SNPs位点,分别为A-511G、T-453A、T-242G和T-180A;生物信息学软件预测发现T-453A和T-242G位点附近有重要转录因子结合位点消失和新位点生成,据此推测猪MEF2D基因5'UTR区的T-453A和T-242G位点对调控启动子功能元件可能存在重要影响。 展开更多
关键词 从江香猪 mef2D基因 SNP 启动子 生物信息学
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华贵栉孔扇贝MEF2Cs基因克隆及表达特征分析 被引量:2
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作者 朱克诚 刘宝锁 +3 位作者 曹明 郭华阳 张楠 张殿昌 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2018年第2期32-38,共7页
肌细胞增强因子(Myocyte enhancer factor-2,MEF2)是一种肌肉特异性转录因子,对脊椎动物肌纤维的形成和发育具有重要的调控作用。为了研究MEF2对华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)闭壳肌肌纤维形成和发育的调控作用,实验克隆了华贵栉孔扇贝... 肌细胞增强因子(Myocyte enhancer factor-2,MEF2)是一种肌肉特异性转录因子,对脊椎动物肌纤维的形成和发育具有重要的调控作用。为了研究MEF2对华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)闭壳肌肌纤维形成和发育的调控作用,实验克隆了华贵栉孔扇贝MEF2C和MEF2C-like c DNA序列,解析了其在不同组织和发育时期的表达调控规律,分析了盐度对其表达调控的影响。结果表明,MEF2C和MEF2C-like基因开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)长为1 302 bp和1 158 bp,分别编码433和358个氨基酸。氨基酸序列比对分析显示MADS和MEF2结构域高度同源,系统进化分析显示华贵栉孔扇贝和长牡蛎具有较近的亲缘关系。在不同组织和发育时期,华贵栉孔扇贝MEF2C和MEF2C-lik mRNA具有相似的表达规律,均在D型幼虫期及闭壳肌中显著高表达。在不同日龄的华贵栉孔扇贝闭壳肌中,MEF2Cs mRNA在60和120日龄表达水平显著升高。MEF2Cs mRNA在盐度为28时表达量最高,说明可能在此盐度下更适合华贵栉孔扇贝生长。 展开更多
关键词 华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis) mef2C和mef2Clike 序列比对 基因表达 闭壳肌
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兴义鸭MEF2A基因克隆及生物信息学分析 被引量:2
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作者 赵忠海 李辉 +5 位作者 彭邦星 陆曼 卜小雁 康建兵 师新彩 张蓉 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期806-810,共5页
为了获取鸭MEF2A基因完整编码区(CDS)序列,进一步揭示其遗传机理。本试验采用兴义鸭为研究对象,采用RT-PCR方法克隆获取MEF2A基因CDS区序列,经重组质粒测序、拼接,试验初步获得了兴义鸭MEF2A基因完整编码区序列,得到1 479 bp片段,包含... 为了获取鸭MEF2A基因完整编码区(CDS)序列,进一步揭示其遗传机理。本试验采用兴义鸭为研究对象,采用RT-PCR方法克隆获取MEF2A基因CDS区序列,经重组质粒测序、拼接,试验初步获得了兴义鸭MEF2A基因完整编码区序列,得到1 479 bp片段,包含起始密码子和终止密码子,编码492个氨基酸,表达蛋白分子量为53.14 k D。经序列对比,在G^(429)A、T^(661)A、A^(1423)G、A^(1426)G和G^(1467)A分别发生了单核苷酸突变,其中T^(661)A和A^(1423)G突变分别导致Cys(半胱氨酸)到Ser(丝氨酸)、Glu(谷氨酸)到Lys(赖氨酸)的改变,其他位点均属于同义突变。试验对兴义鸭MEF2A蛋白的理化性质及结构特点进行了简单分析,为下一步研究MEF2A蛋白特性及其作用机制奠定理论基础。 展开更多
关键词 mef2A基因 克隆 生物信息学 兴义鸭
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MEF2A基因单核苷酸多态性与早发冠心病血瘀证的相关性研究 被引量:3
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作者 李琳 李杰 +5 位作者 胡志希 简维雄 于文欣 候超 凌智 袁倩 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期1155-1158,共4页
目的:探讨肌细胞增强因子2A(Myocyte Enhancer Factor 2a,MEF2A)基因单核苷酸多态性(SNP)与早发冠心病血瘀证的相关性。方法:从MEF2A基因选取2个SNP位点rs2033547和rs34851361,建立基于飞行时间质谱分析技术(TOF-MS)的方法,对收集的早发... 目的:探讨肌细胞增强因子2A(Myocyte Enhancer Factor 2a,MEF2A)基因单核苷酸多态性(SNP)与早发冠心病血瘀证的相关性。方法:从MEF2A基因选取2个SNP位点rs2033547和rs34851361,建立基于飞行时间质谱分析技术(TOF-MS)的方法,对收集的早发CHD血瘀证组21例,早发CHD非血瘀组30例,非"早发冠心病"血瘀组25例与健康对照组20例,检测各SNP位点的等位基因和基因分型,对比各组等位基因和各基因型频率,并比较各临床资料。结果:rs2033547、rs34851361都有A和T两种等位基因,包括AA、TT、AT 3种基因型;MEF2A基因多态性位点rs2033547的A等位基因在早发CHD血瘀证组,早发CHD非血瘀证组和非"早发CHD"血瘀证组均高于健康对照组,但差异尚无统计学意义(P>0.05),这可能与样本量不足有关。而MEF2A基因多态性位点rs34851361基因型和等位基因在4组间相似,无统计学意义(P>0.05),两两比较亦无统计学意义(P>0.05)。结论:MEF2A基因多态性位点rs2033547和rs34851361非早发冠心病的易感基因位点。 展开更多
关键词 早发冠心病 mef2A基因 单核苷酸多态性 飞行时间质谱
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