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靶向CD74单抗增强宫颈癌新辅助化疗效果分析
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作者 李楠楠 Mutangala Muloye Guy +6 位作者 郝以平 冯莲莲 杨思远 于艺 崔保霞 王丽凤 张腾 《现代妇产科进展》 2025年第7期528-536,共9页
目的:探究化疗药物(顺铂)通过诱导肿瘤细胞内CD74表达影响宫颈癌细胞顺铂药物疗效的机制。方法:临床收集宫颈癌标本用于单细胞测序及免疫组化染色。对3例患者的9例样本进行单细胞RNA测序,经数据质控后对测序数据进行分析,包括数据的降... 目的:探究化疗药物(顺铂)通过诱导肿瘤细胞内CD74表达影响宫颈癌细胞顺铂药物疗效的机制。方法:临床收集宫颈癌标本用于单细胞测序及免疫组化染色。对3例患者的9例样本进行单细胞RNA测序,经数据质控后对测序数据进行分析,包括数据的降维注释、肿瘤细胞亚群的重新聚类、肿瘤细胞亚群的干性分析及拟时序分析等。免疫组化法检测样本中CD74表达,肿瘤增殖、迁移、侵袭、凋亡实验用于验证两组的生物学功能改变。结果:单细胞测序结果将样本分为7个细胞簇,分别是肿瘤细胞、间充质干细胞、成纤维细胞、内皮细胞、T细胞、髓系细胞和B细胞。对肿瘤细胞重新降维聚类,分为16个肿瘤亚群,分析CD74在7个细胞簇的分布及表达,发现CD74在治疗后的肿瘤上皮细胞中表达明显上调。额外收集50例新辅助化疗治疗前后的宫颈癌标本,根据患者对铂类化疗药物的敏感性分为化疗敏感组及化疗耐药组。免疫组化结果提示,铂类化疗药物治疗后,化疗敏感组患者宫颈癌组织中CD74表达水平无明显统计学意义,而化疗耐药组患者宫颈癌组织中CD74表达水平明显升高(P<0.001)。细胞生物学实验提示,应用铂类药物并抑制肿瘤细胞中CD74表达可降低肿瘤侵袭、迁移及增殖能力,增强细胞凋亡水平。结论:CD74在NACT治疗后的肿瘤细胞中的表达上调,靶向CD74抗体可作为局部晚期宫颈癌新辅助化疗的补充用药。 展开更多
关键词 cd74 新辅助化疗 单细胞测序 宫颈癌
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脓毒症急性肾损伤患者血清miR-146a USF2 sCD74水平与病情严重程度的相关性及对预后的影响
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作者 张梅香 左志刚 刘秀娟 《河北医学》 2025年第7期1158-1164,共7页
目的:探讨脓毒症急性肾损伤(AKI)患者血清微小核糖核酸-146a(miR-146a)、上游刺激因子2(USF2)、可溶性CD74(sCD74)水平与病情严重程度的相关性及对预后的影响。方法:选取秦皇岛市第一医院2022年1月至2024年1月脓毒症AKI患者144例,根据28... 目的:探讨脓毒症急性肾损伤(AKI)患者血清微小核糖核酸-146a(miR-146a)、上游刺激因子2(USF2)、可溶性CD74(sCD74)水平与病情严重程度的相关性及对预后的影响。方法:选取秦皇岛市第一医院2022年1月至2024年1月脓毒症AKI患者144例,根据28d预后分为预后良好组与预后不良组,比较两组临床资料、血清miR-146a、USF2、sCD74水平,采用Spearman相关系数分析血清miR-146a、USF2、sCD74与脓毒症严重程度、AKI严重程度的相关性,偏相关性分析血清miR-146a、USF2、sCD74与预后的关系,受试者工作特征(ROC)曲线评价各指标对预后的预测价值。结果:预后不良组脓毒症严重程度、AKI严重程度、APACHEⅡ、SOFA评分高于预后良好组(P<0.05);预后不良组血清miR-146a、USF2、sCD74水平高于预后良好组(P<0.05);脓毒症休克患者血清miR-146a、USF2、sCD74水平高于脓毒症患者(P<0.05);重度AKI患者血清miR-146a、USF2、sCD74水平高于轻度AKI患者(P<0.05);血清miR-146a、USF2、sCD74与脓毒症严重程度、AKI严重程度均呈正相关(P<0.05);偏相关性分析,血清miR-146a、USF2、sCD74与预后显著相关(P<0.05);ROC曲线分析,血清miR-146a、USF2、sCD74预测脓毒症AKI患者预后的AUC为0.776、0.751、0.780,Youden指数为0.438、0.406、0.479,敏感度为64.58%、64.58%、70.83%,特异度为79.17%、76.04%、77.08%;血清miR-146a、USF2、sCD74联合预测脓毒症AKI患者预后的AUC为0.922,Youden指数为0.771,敏感度为89.58%,特异度为87.50%,较各指标单独预测价值显著提高(Z=3.741、4.120、3.192,P均<0.001)。结论:脓毒症AKI患者血清miR-146a、USF2、sCD74水平与脓毒症和AKI严重程度显著相关,是预后的独立预测因子,联合检测时能提高预测价值。 展开更多
关键词 脓毒症 急性肾损伤 微小核糖核酸-146a 上游刺激因子2 可溶性cd74
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血清sCD74、LBP评估老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者预后的价值 被引量:1
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作者 刘巧艳 王永锋 +3 位作者 王萍 肖林萍 王娟 谢晓燕 《转化医学杂志》 2025年第1期1-5,共5页
目的 探讨血清可溶性CD74(sCD74)、脂多糖结合蛋白(LBP)对评估老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者预后的价值。方法 选取2022年1月至2024年1月中国人民解放军空军第九八六医院收治的119例老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者设为疾病组,根据119例患... 目的 探讨血清可溶性CD74(sCD74)、脂多糖结合蛋白(LBP)对评估老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者预后的价值。方法 选取2022年1月至2024年1月中国人民解放军空军第九八六医院收治的119例老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者设为疾病组,根据119例患者28 d转归情况,分为生存组88例和死亡组31例。另选取同期入院体检的100名健康人设为对照组。检测2组及不同预后老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者血清sCD74、LBP水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清s CD74、LBP对预后的评估价值,应用多因素Logistics回归分析探讨患者预后相关因素。结果 疾病组血清sCD74、LBP水平均高于对照组(P <0.05)。死亡组血清sCD74、LBP水平均高于生存组(P <0.05)。血清sCD74、LBP及两者联合评估患者预后的曲线下面积(AUC)(95%CI)分别为0.741(0.696~0.786)、0.829(0.784~0.874)、0.922(0.877~0.972)。死亡组白细胞计数、白细胞介素6、白细胞介素10、肿瘤坏死因子水平和急性生理与慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)评分≥20分、机械通气时间<10 d比例高于生存组(P <0.05)。多因素分析显示,APACHEⅡ评分≥20分(OR=2.578,95%CI:1.219~5.451)、血清sCD74≥76.79 ng/mL(OR=3.200,95%CI:1.798~5.693)、血清LBP≥123.63 ng/mL(OR=4.129,95%CI:1.867~9.132)是患者预后危险因素(P <0.05)。结论 高sCD74、LBP水平与老年重症肺炎合并呼吸衰竭患者预后密切相关,两指标联合监测对患者病情、治疗及预后有重要意义。 展开更多
关键词 重症肺炎 呼吸衰竭 老年人 可溶性cd74 脂多糖结合蛋白
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老年慢性心力衰竭患者合并肺部感染的病原学特征及血清sCD74、IL-6表达变化
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作者 李克凡 白现英 +2 位作者 薛云 刘向芹 张凯 《热带医学杂志》 2025年第3期370-373,共4页
目的探讨老年慢性心力衰竭(CHF)患者合并肺部感染的病原学特征及血清可溶性CD74(sCD74)、白细胞介素-6(IL-6)表达变化,为CHF患者的临床治疗及合并症的管理提供更为有力的科学依据。方法选取2023年1月-2024年2月邢台市中心医院收治的102... 目的探讨老年慢性心力衰竭(CHF)患者合并肺部感染的病原学特征及血清可溶性CD74(sCD74)、白细胞介素-6(IL-6)表达变化,为CHF患者的临床治疗及合并症的管理提供更为有力的科学依据。方法选取2023年1月-2024年2月邢台市中心医院收治的102例老年CHF患者,根据是否合并肺部感染将其分为未感染组(n=63)和感染组(n=39)。采集感染组患者痰液样本进行病原菌的培养与鉴定;比较两组患者血清sCD74、IL-6水平。受试者工作特性(ROC)曲线分析sCD74、IL-6对老年CHF患者合并肺部感染的评估价值。结果39例老年CHF合并肺部感染患者分离出病原菌77株,其中革兰阴性菌53株(68.83%),以肺炎克雷伯菌为主;革兰阳性菌20株(25.97%),以肺炎链球菌为主;真菌4株(5.19%),以白假丝酵母菌为主。感染组患者血清sCD74、IL-6水平显著高于未感染组,差异均有统计学意义(t=10.068、11.645,P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清sCD74、IL-6评估老年CHF患者合并肺部感染的曲线下面积(AUC)分别为0.752、0.831,两者联合预测的AUC为0.913,高于单个指标。结论CHF合并肺部感染以革兰阴性菌感染为主,血清中sCD74、IL-6水平升高与老年CHF患者合并肺部感染密切相关。 展开更多
关键词 老年 慢性心力衰竭 肺部感染 病原菌 可溶性cd74 白细胞介素-6
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支气管哮喘患者血清sCD74、LBP水平与急性发作的关系
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作者 陈娣 刘元明 +4 位作者 何正平 李琳雪 涂涛 党垚 文璐 《保健医学研究与实践》 2024年第12期50-55,共6页
目的探讨支气管哮喘患者血清可溶性CD74(sCD74)、脂多糖结合蛋白(LBP)水平与急性发作的关系,以期为临床决策的制定提供参考。方法选取2021年1月—2023年12月四川某医院收治的74例支气管哮喘急性发作期患者(急性组)和46例支气管哮喘缓解... 目的探讨支气管哮喘患者血清可溶性CD74(sCD74)、脂多糖结合蛋白(LBP)水平与急性发作的关系,以期为临床决策的制定提供参考。方法选取2021年1月—2023年12月四川某医院收治的74例支气管哮喘急性发作期患者(急性组)和46例支气管哮喘缓解期患者(缓解组),以及同期60例健康体检者(对照组)作为研究对象。检测所有研究对象入院时的血清sCD74、LBP水平,分析急性发作期患者血清sCD74、LBP与肺功能指标[第一秒用力呼气量与用力肺活量比值(FEV_(1)/FVC)、最大呼气流量占预计值百分比(PEF%pred)]的相关性,采用多因素logistic回归分析支气管哮喘急性发作的影响因素,并采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清sCD74、LBP对支气管哮喘急性发作的评估价值。结果3组研究对象sCD74、LBP水平及FEV_(1)/FVC、PEF%pred比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。两两比较结果显示,急性组患者血清sCD74、LBP水平高于缓解组和对照组,缓解组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组患者FEV_(1)/FVC、PEF%pred均高于缓解组和急性组,缓解组高于急性组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同病情严重程度的患者血清sCD74、LBP水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两两比较结果显示,随着病情加重,患者血清sCD74、LBP水平逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。相关分析结果显示,急性组患者血清sCD74、LBP与FEV_(1)/FVC、PEF%pred均呈负相关(P<0.05)。以支气管哮喘患者是否急性发作作为因变量,以FEV_(1)/FVC、PEF%pred、血清sCD74、LBP作为自变量进行多因素logistic回归分析,结果显示,FEV_(1)/FVC越高(OR=0.613)、PEF%pred越高(OR=0.597),支气管哮喘患者急性发作的风险越小,而血清sCD74水平越高(OR=2.787)、血清LBP水平越高(OR=3.846),支气管哮喘患者急性发作的风险越大(P<0.05)。血清sCD74、LBP以及二者联合评估支气管哮喘患者急性发作的曲线下面积(AUC)(95%CI)分别为0.763(0.718~0.813)、0.821(0.771~0.866)、0.904(0.859~0.954)。结论sCD74和LBP在支气管哮喘患者血清中均呈高表达,并且与急性发作及病情严重程度存在显著关联。 展开更多
关键词 支气管哮喘 急性发作期 可溶性cd74 脂多糖结合蛋白
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靶向CD74的嵌合抗原受体T细胞的抗白血病细胞作用研究
6
作者 刘一鸣 谢乐灵 +3 位作者 邢海燕 唐克晶 王敏 饶青 《生物技术进展》 2024年第3期501-505,共5页
嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T)疗法目前已应用于血液肿瘤的治疗,前期研究发现CD74在白血病患者白血病干细胞中高表达,为了探索其对白血病细胞的杀伤作用,通过CD74 CAR表达载体的构建、慢病毒载体的包装及... 嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T)疗法目前已应用于血液肿瘤的治疗,前期研究发现CD74在白血病患者白血病干细胞中高表达,为了探索其对白血病细胞的杀伤作用,通过CD74 CAR表达载体的构建、慢病毒载体的包装及T细胞的感染,制备CD74 CAR-T细胞。利用体外杀伤实验及细胞因子的释放检测确定CAR-T细胞对CD74^(+)的白血病细胞的特异性杀伤作用。结果显示,CD74 CAR-T分别与CD74^(+)的THP-1及CD74^(-)的K562白血病细胞共培养时,THP-1细胞可被清除,而对CD74^(-)的K562细胞无明显杀伤作用。CD74 CAR-T细胞可被CD74^(+)的THP-1细胞有效激活,通过细胞因子释放途径有效杀伤白血病细胞。研究成功构建了靶向CD74^(+)的白血病细胞的CAR-T细胞,为白血病的免疫治疗提供了新的靶点和免疫治疗策略。 展开更多
关键词 嵌合抗原受体修饰的T细胞 cd74 急性髓系白血病 白血病干细胞
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胰腺导管腺癌中CD74的表达及临床意义 被引量:6
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作者 史敏 陈颖 +3 位作者 赵晨燕 张晶 倪灿荣 朱明华 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期689-692,共4页
目的检测CD74蛋白在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)组织中的表达并探讨其临床意义。方法收集59例PDAC和23例慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)的存档石蜡包埋标本。HE染色、镜下观察神经纤维周围淋巴细胞病灶... 目的检测CD74蛋白在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)组织中的表达并探讨其临床意义。方法收集59例PDAC和23例慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)的存档石蜡包埋标本。HE染色、镜下观察神经纤维周围淋巴细胞病灶。免疫组化检测CD74的表达,统计分析其与PDAC临床病理参数的关系。结果 PDAC神经纤维周围淋巴细胞病灶发生率为67.8%。CD74在肿瘤细胞中阳性表达率为61%(36/59),明显高于CP导管上皮(13%,3/23,P=0.000)。CD74表达与神经纤维淋巴细胞病灶密切相关(P=0.009),与其它临床病理参数无关。CD74阳性的PDAC患者术后生存时间明显短于CD74阴性患者(P=0.006 9)。CD74在肿瘤细胞中的表达(P=0.009;rs=2.590)及pT(P=0.022;rs=1.482)为影响PDAC患者预后的独立危险因素。结论 CD74在胰腺导管腺癌组织中高表达与神经纤维周围淋巴细胞病灶及肿瘤预后相关,可能成为PDAC预后相关的分子靶标。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 胰腺导管腺癌 cd74 免疫组化 预后
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血清HSP70、sCD74对脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征的预测价值 被引量:14
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作者 刘海梅 龙晓凤 +2 位作者 郑真真 郭文宴 刘杜萍 《山东医药》 CAS 2021年第22期14-17,共4页
目的探讨血清热休克蛋白70(HSP70)、可溶性CD74(sCD74)和对脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的预测价值。方法选择154例脓毒症患者,其中49例并发ARDS(ARDS组),105例未并发ARDS(NARDS组)。入院后第2天检测血清HSP70、sCD74水平,收集... 目的探讨血清热休克蛋白70(HSP70)、可溶性CD74(sCD74)和对脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的预测价值。方法选择154例脓毒症患者,其中49例并发ARDS(ARDS组),105例未并发ARDS(NARDS组)。入院后第2天检测血清HSP70、sCD74水平,收集临床资料,分析影响脓毒症并发ARDS的危险因素及HSP70、sCD74、HSP70+sCD74预测脓毒症并发ARDS的价值。结果ARDS组血清HSP70水平低于NARDS组(P<0.001),血清sCD74水平高于NARDS组(P<0.01)。Logistic回归分析结果显示,肺部感染、高APACHEⅡ评分、低水平HSP70和高水平sCD74是脓毒症并发ARDS的危险因素(P均<0.01)。HSP70+sCD74预测脓毒症患者并发ARDS的AUC为0.956,高于单独HSP70、sCD74的0.779、0.762(P均<0.05)。结论脓毒症并发ARDS患者血清HSP70水平降低,sCD74水平升高,低水平HSP70、高水平sCD74与脓毒症患者并发ARDS有关,HSP70、sCD74可作为脓毒症患者并发ARDS的预测指标。 展开更多
关键词 脓毒症 急性呼吸窘迫综合征 热休克蛋白70 可溶性cd74
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巨噬细胞移动抑制因子及其受体CD74在宫颈癌组织中的表达及意义 被引量:8
9
作者 连俊芳 吴素慧 +2 位作者 尚海霞 张丽丽 高艳艳 《中国药物与临床》 CAS 2011年第7期755-757,共3页
目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及其受体CD74在宫颈癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SABC法和半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测86例宫颈癌组织(63例无淋巴结转移,23例淋巴结转移)和21例正常宫颈组织中MIF、CD74... 目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及其受体CD74在宫颈癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SABC法和半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测86例宫颈癌组织(63例无淋巴结转移,23例淋巴结转移)和21例正常宫颈组织中MIF、CD74蛋白及mRNA的表达并分析。结果 MIF、CD74mRNA在宫颈癌中的表达显著高于在正常宫颈组织中的表达(P<0.01),且在有转移的宫颈癌中的表达高于无转移的宫颈癌组织(P<0.01)。MIF及CD74在宫颈癌组织中的表达高于其在正常宫颈组织中的表达(P<0.01),且在宫颈癌转移组中的表达更高(P<0.01)。结论 MIF、CD74在宫颈癌的发生发展中起重要作用,且在促进宫颈癌转移中发挥及其重要的作用。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 免疫组织化学 聚合酶链反应 巨噬细胞移动抑制因子 cd74
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胃腺癌中CD74蛋白的表达及其临床意义 被引量:5
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作者 崔丽娟 刘智 +1 位作者 夏勤 李林丰 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1273-1275,共3页
目的探讨CD74蛋白在胃腺癌组织中的表达及其临床意义,为临床医师判断肿瘤预后及靶向治疗提供新的可行性参考指标。方法选取手术切除胃腺癌患者58例不伴HP感染,同时选取正常胃黏膜20例作为对照。采用免疫组化SP两步法检测胃腺癌组织中CD7... 目的探讨CD74蛋白在胃腺癌组织中的表达及其临床意义,为临床医师判断肿瘤预后及靶向治疗提供新的可行性参考指标。方法选取手术切除胃腺癌患者58例不伴HP感染,同时选取正常胃黏膜20例作为对照。采用免疫组化SP两步法检测胃腺癌组织中CD74的表达,分析其与各临床病理特征间的关系。结果胃腺癌中CD74的阳性检出率(74.1%)高于正常组(13.3%),差异有统计学意义。CD74在胃腺癌患者中表达增高与肿瘤分期及淋巴结转移有关,与患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度、肿瘤分化程度、有/无复发无关。CD74阳性检出率随肿瘤分期增高而上升,伴淋巴结转移的患者CD74阳性检出率较未转移者高(P<0.001)。CD74阳性者生存时间比CD74阴性者生存时间短(P=0.007)。结论 CD74可作为胃腺癌预后判断的一项独立指标及新的治疗靶点,CD74阳性胃腺癌患者预后较差。 展开更多
关键词 胃肿瘤 腺癌 cd74 免疫组织化学 预后
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急性呼吸窘迫综合征患者血清可溶性CD74水平变化及意义 被引量:3
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作者 赵大国 徐华 +2 位作者 郭强 金钧 凌春华 《山东医药》 CAS 2018年第37期33-35,共3页
目的观察急性呼吸窘迫综合征患者血清可溶性CD74(s CD74)水平变化,并探讨其临床意义。方法呼吸窘迫综合征患者93例作为观察组,根据氧合指数将患者分为轻度组20例、中度组42例、重度组31例;同期体检健康者50例作为对照组。检测各组血清s ... 目的观察急性呼吸窘迫综合征患者血清可溶性CD74(s CD74)水平变化,并探讨其临床意义。方法呼吸窘迫综合征患者93例作为观察组,根据氧合指数将患者分为轻度组20例、中度组42例、重度组31例;同期体检健康者50例作为对照组。检测各组血清s CD74、白细胞介素6(IL-6)、IL-10、IL-13,分析各组以上指标的变化,用Pearson相关分析各指标相关关系;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,用ROC曲线下面积(AUC)分析指标的诊断价值。结果观察组血清s CD740、IL-6、IL-10、IL-13水平均高于对照组(P均<0. 05)。轻、中、重度组血清s CD74、IL-6、IL-10、IL-13水平比较差异有统计学意义(P均<0. 05)。趋势检验结果显示血清s CD74、IL-6、IL-10、IL-13水平均随病情由轻到重呈现线性增加趋势(P均<0. 05)。观察组血清s CD74水平与IL-6、IL-10、IL-13均呈正相关(r分别为0. 643、0. 618、0. 604,P均<0. 05)。血清s CD74诊断急性呼吸窘迫综合征的AUC最大,均高于其他指标(P均<0. 05),且血清s CD74、IL-6、IL-10、IL-13联合检测诊断急性呼吸窘迫综合征的AUC亦高于上述各项指标单独检测(P均<0. 05)。结论急性呼吸窘迫综合征患者血清s CD74水平升高;与血清s CD74、IL-6、IL-10、IL-13联合检测可对急性呼吸窘迫综合征患者病情严重程度进行评估。 展开更多
关键词 急性呼吸窘迫综合征 可溶性cd74 白细胞介素6 白细胞介素10 白细胞介素13
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应用DNA shuffling及T7噬菌体展示技术定向进化并筛选鉴定sCD74突变体 被引量:2
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作者 臧家涛 李淑慧 +2 位作者 李鹏 陈安 胡川闽 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期694-697,共4页
目的利用DNA shuffling技术,结合T7噬菌体表面展示技术,定向进化MIF受体sCD74,以获得高亲和力突变体基因。方法定点突变的牛、小鼠、人CD74胞外同源区基因以DNaseⅠ消化,回收25—50bp片段进行DNA shuffling;将500bp shuffling产物... 目的利用DNA shuffling技术,结合T7噬菌体表面展示技术,定向进化MIF受体sCD74,以获得高亲和力突变体基因。方法定点突变的牛、小鼠、人CD74胞外同源区基因以DNaseⅠ消化,回收25—50bp片段进行DNA shuffling;将500bp shuffling产物经限制性酶切后与T7噬菌体DNA连接,与T7 package extracts组建噬菌体文库;采用竞争淘洗方法进行5轮筛选,富集得到高亲和力结合MIF的噬菌体;挑取20株噬菌体单克隆进行基因克隆并测序,对测序结果进行生物信息学分析,同时以竞争ELISA初步鉴定进化效果。结果20株噬菌体单克隆具有相同的sCD74突变基因,为相同克隆,将此克隆命名为sHCD74m,其基因命名为sHCD74mD;竞争性ELISA分析显示其MIF结合力提高。结论得到了与MIF高亲和力结合的sCD74突变体基因sHCD74mD。 展开更多
关键词 DNA SHUFFLING 巨噬细胞移动抑制因子 cd74 噬菌体展示技术 MHC Ⅱ恒定链
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利用酵母双杂交系统鉴定MIF与CD74胞外片段间的相互作用 被引量:2
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作者 单志新 林秋雄 +6 位作者 邓春玉 谭虹虹 邝素娟 肖定璋 朱杰宁 符永恒 余细勇 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期2383-2386,2390,共5页
目的利用酵母双杂交系统鉴定巨噬细胞移动抑制因子(MIF)与Ⅱ型穿膜蛋白CD74胞外片段间可能的相互作用区域。方法利用分子克隆技术,分别构建以pGBKT7为载体的人全长MIF、MIF50-65、MIF1-50/65-115的重组诱饵质粒,以pGADT7为载体的人CD747... 目的利用酵母双杂交系统鉴定巨噬细胞移动抑制因子(MIF)与Ⅱ型穿膜蛋白CD74胞外片段间可能的相互作用区域。方法利用分子克隆技术,分别构建以pGBKT7为载体的人全长MIF、MIF50-65、MIF1-50/65-115的重组诱饵质粒,以pGADT7为载体的人CD7473-232、CD7473-109、CD74109-149、CD74149-232的重组激活域(AD)质粒。用PEG/LiAC法将上述重组诱饵质粒分别与重组AD质粒两两共转化感受态酵母菌AH109,分别观察在SD/-Trp-Leu、含X-α-gal的SD/-Trp-Leu-Ade-His培养基上生长情况。结果限制性内切酶酶切和DNA测序证实所构建的重组质粒全部正确。3种重组诱饵质粒转化的酵母菌AH109均可在SD/-trp上生长,4种重组AD质粒转化的酵母菌AH109均可在SD/-leu上生长,而且上述转化的酵母菌AH109均无自身转录激活活性。只有MIF、MIF50-65、MIF1-50/65-115与CD7473-232表达质粒共转化的酵母菌AH109可在SD/-Trp-Leu-Ade-His培养基上生长,能激活MEL1报告基因,使X-α-gal变蓝。结论MIF能以功能域MIF50-65非依赖性方式与完整的CD74胞外片段相互结合,进行细胞信号转导。 展开更多
关键词 酵母双杂交 巨噬细胞移动抑制因子 cd74 蛋白质相互作用 克隆 分子
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干扰素调节因子-1和CD74的表达变化与自发性高血压大鼠源大血管平滑肌细胞增殖相关 被引量:2
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作者 叶勇 熊绍虎 +4 位作者 张喜 刘艳春 孙瑜 杨向群 张传森 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期731-735,共5页
目的:借助体外模型验证IRF-1、CD74、CD36、GAP43、CYP2E1和TCA4基因表达变化是否与糖尿病大血管病变相关。方法:取自发性高血压大鼠胸主动脉平滑肌细胞,并将其分别培养于含不同浓度葡萄糖(5.5、15、25、30mmol/L和35mmol/L)、... 目的:借助体外模型验证IRF-1、CD74、CD36、GAP43、CYP2E1和TCA4基因表达变化是否与糖尿病大血管病变相关。方法:取自发性高血压大鼠胸主动脉平滑肌细胞,并将其分别培养于含不同浓度葡萄糖(5.5、15、25、30mmol/L和35mmol/L)、波动糖中(25mmol/L和5.5mmol/L葡萄糖交替,每一浓度持续12h)以及持续高糖(25mmol/L)中,48h后运用半定量RT—PCR检测IRF-1、CD74、CD36、CYP2E1和TCA4的表达变化,SPSS分析基因变化与平滑肌增殖的相关性。结果:葡萄糖浓度低于30mmol/L时,平滑肌细胞的增殖随糖浓度的增加而加速。持续高糖中培养平滑肌细胞自第6h起增殖明显。统计分析显示,CD74、IRF-1和GAP43的表达变化与平滑肌细胞的增殖存在相关性。结论:IRF-1和CD74参与调节糖尿病大血管病变中平滑肌细胞的增殖。 展开更多
关键词 干扰素调节因子-1 cd74 增殖 大血管平滑肌细胞 高糖 基因表达
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结肠腺癌中CD74的表达及临床意义 被引量:4
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作者 崔丽娟 李林丰 +2 位作者 夏勤 罗启翅 梁海桥 《诊断病理学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第10期614-617,621,共5页
目的检测CD74蛋白在结肠腺癌中的表达,探讨其表达的临床意义及与预后的关系。方法应用免疫组化PV 9000法对53例结肠腺癌进行CD74免疫染色,同时选取结肠腺瘤38例、结肠炎11例及正常结肠黏膜26例作为对照,分析结肠腺癌中CD74的表达情况及... 目的检测CD74蛋白在结肠腺癌中的表达,探讨其表达的临床意义及与预后的关系。方法应用免疫组化PV 9000法对53例结肠腺癌进行CD74免疫染色,同时选取结肠腺瘤38例、结肠炎11例及正常结肠黏膜26例作为对照,分析结肠腺癌中CD74的表达情况及与临床病理参数的关系。结果结肠腺癌CD74的阳性率(79%)高于各对照组,与正常黏膜组(12%)和结肠炎组(31%)比较差异显著,与结肠腺瘤组(68%)比较差异不显著。CD74在结肠腺癌中的阳性强度高于正常组、结肠炎组和结肠腺瘤组,且差异显著。结肠腺癌中CD74阳性检出率与肿瘤组织学分级和分期有关,与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、浸润深度、有无淋/巴结转移无关;CD74阳性强度仅与肿瘤分化程度有关。CD74阳性的结肠腺癌患者5年生存率(57.1%)明显低于CD74阴性患者(81.8%),其中CD74阳性强度高的患者生存期比CD74阳性强度低的患者生存期短,Kaplan-Meier生存曲线分析差异显著。COX回归表明,CD74在结肠腺癌中的表达为影响结肠腺癌预后的独立危险因素(P<0.01)。结论CD74表达增高可能在结肠腺癌发生、发展中起重要作用,CD74阳性的结肠腺癌预后差。 展开更多
关键词 结肠癌 cd74 免疫组化 预后
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人Ⅱ型穿膜蛋白CD74基因片段的克隆及原核表达 被引量:2
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作者 单志新 林秋雄 +1 位作者 符永恒 余细勇 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B03期35-37,共3页
【目的】扩增、克隆人Ⅱ型穿膜蛋白 CD74基因片段,并在大肠杆菌中表达出具有生物活性的重组 CD74蛋白。【方法】根据人 CD74基因序列,设计、合成 PCR 引物,利用 RT-PCR 技术,从人 Raji B 细胞中扩增 CD74基因片段。将CD74基因定向插入... 【目的】扩增、克隆人Ⅱ型穿膜蛋白 CD74基因片段,并在大肠杆菌中表达出具有生物活性的重组 CD74蛋白。【方法】根据人 CD74基因序列,设计、合成 PCR 引物,利用 RT-PCR 技术,从人 Raji B 细胞中扩增 CD74基因片段。将CD74基因定向插入原核表达载体 pGEX-4T-1,构建重组表达载体 pGEX-4T-CD74,并转化工程菌 BL21(DE3)。用 IPTG 诱导BL21(DE3)中导入的 CD74基因的表达,并行 SDS-PAGE 和 Western blot 鉴定表达产物。用 GSTrap 亲合柱纯化重组 CD74蛋白,通过体外血管生成实验鉴定重组 CD74蛋白对巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的阻断作用。【结果】扩增出人 CD74基因片段,并成功构建了重组质粒 pGEX-4T-CD74。测序结果显示,克隆的 CD74 cDNA 长480bp,序列与文献报道一致。经 IPTG诱导,特异表达出可溶性的44 KDa 的重组蛋白,其可被人 CD74抗体识别。体外血管生成实验结果显示,重组 CD74蛋白能特异地阻断 MIF 的促血管生成作用。【结论】克隆了人 CD74基因片段,并在大肠杆菌中表达出具有生物活性的重组 CD74蛋白。 展开更多
关键词 cd74 人巨噬细胞移动抑制因子 克隆 分子 基因表达
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shRNA靶向抑制CD74基因对人肾透明细胞癌细胞786-O生物学行为的影响 被引量:2
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作者 纪世琪 孙志伟 +3 位作者 韩志兴 张海建 程文龙 赵玉千 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2016年第9期713-716,共4页
目的探讨抑制人CD74基因后对肾透明细胞癌786-O细胞生长和侵袭能力的影响。方法通过慢病毒lentivirus-CD74转染肾透明细胞癌786-O细胞后,MTT法检测786-O细胞活力的变化,利用流式细胞学检测肿瘤细胞的凋亡变化情况,Transwell小室实验检测... 目的探讨抑制人CD74基因后对肾透明细胞癌786-O细胞生长和侵袭能力的影响。方法通过慢病毒lentivirus-CD74转染肾透明细胞癌786-O细胞后,MTT法检测786-O细胞活力的变化,利用流式细胞学检测肿瘤细胞的凋亡变化情况,Transwell小室实验检测786-O细胞侵袭能力改变情况,采用Westernblot方法检测转染前后786-O细胞CD74及相关蛋白的变化情况。结果慢病毒转染786-O细胞后细胞中CD74蛋白水平表达明显低于对照组(P<0.05),抑制CD74蛋白表达水平后786-O细胞生长明显受到抑制,细胞活力降低,凋亡增加,细胞侵袭能力降低,且Survivin、MMP-2、MM-9蛋白也随之下降,其与对照组结果对比差异具有统计学差异(P<0.05)。结论利用慢病毒转染技术抑制CD74的表达可以抑制肾透明细胞癌786-O细胞的增值和侵袭能力,CD74基因可能作为癌基因在肾透明细胞癌中起作用。 展开更多
关键词 肾癌 肾透明细胞癌 cd74 增值 侵袭
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巨噬细胞迁移抑制因子受体CD74与乳腺癌转移及预后的相关性 被引量:4
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作者 张大伟 周亮 章勇 《中国临床医学》 2012年第5期542-544,共3页
目的:研究巨噬细胞迁移抑制因子受体CD74在乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231以及人乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌患者预后的关系。方法:应用荧光定量聚合酶链式反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)和蛋白... 目的:研究巨噬细胞迁移抑制因子受体CD74在乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231以及人乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌患者预后的关系。方法:应用荧光定量聚合酶链式反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)和蛋白质印迹(Western blotting)方法分别检测不同转移潜能乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231 CD74的mRNA和蛋白表达量,并比较CD74在两者间的表达差异;应用免疫组织化学检测89例乳腺癌组织中CD74的表达情况,分析CD74与乳腺癌患者总生存率和无瘤生存率的关系。结果:高转移潜能乳腺癌细胞株MDA-MB-231中CD74表达显著高于低转移潜能细胞株MCF-7(P<0.001)。CD74表达水平是乳腺癌总生存率(P=0.001)和无瘤生存率(P<0.001)的独立预测因素。结论:CD74的表达水平与乳腺癌患者预后呈负相关。 展开更多
关键词 乳腺癌 cd74 预后
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CD74与RUNX3在人胰腺癌细胞内存在相互作用 被引量:3
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作者 黄耀星 余丹纯 +3 位作者 孙小娟 江舒曼 李伟冬 贾林 《分子影像学杂志》 2019年第3期393-396,共4页
目的探讨CD74和RUNX3在人胰腺癌Capan-2细胞内是否存在相互作用。方法构建CD74-siRNA的慢病毒表达载体和空白载体,酶切鉴定正确后,分别转染人胰腺癌Capan-2细胞,使用Westernblot和RT-PCR等方法对CD74的表达进行检测验证;运用Westernblot... 目的探讨CD74和RUNX3在人胰腺癌Capan-2细胞内是否存在相互作用。方法构建CD74-siRNA的慢病毒表达载体和空白载体,酶切鉴定正确后,分别转染人胰腺癌Capan-2细胞,使用Westernblot和RT-PCR等方法对CD74的表达进行检测验证;运用Westernblot和RT-PCR等方法观察CD74低表达对RUNX3蛋白和mRNA表达的影响;利用免疫共沉淀法验证Capan-2细胞内CD74与RUNX3之间的相互作用。结果CD74在实验组Capan-2细胞中稳定低表达,实验组CD74蛋白(0.09±0.01vs2.78±0.04)、CD74mRNA(0.39±0.001vs1.00±0.00)低于对照组(P<0.05);抑制CD74可降低RUNX3蛋白和mRNA表达水平(P<0.05);CD74抗体免疫共沉淀下来的蛋白复合物中检测到RUNX3,同时RUNX3抗体免疫共沉淀下来的蛋白复合物中也检测到CD74。结论CD74和RUNX3在人胰腺癌Capan-2细胞内存在相互作用。 展开更多
关键词 cd74 RUNX3 免疫共沉淀 蛋白相互作用
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CD74介导巨噬细胞移动抑制因子对宫颈癌细胞生物学行为的影响 被引量:5
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作者 成荣杰 李楠 《中国实验诊断学》 2020年第10期1689-1693,共5页
目的观察巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及其受体CD74对宫颈鳞癌细胞株SiHa增殖、侵袭、转移等生物学行为的影响。方法培养人宫颈癌SiHa细胞,免疫细胞化学法检测细胞中MIF及CD74蛋白的表达情况;应用外源性人重组MIF(rhMIF)、抗-CD74单抗处... 目的观察巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及其受体CD74对宫颈鳞癌细胞株SiHa增殖、侵袭、转移等生物学行为的影响。方法培养人宫颈癌SiHa细胞,免疫细胞化学法检测细胞中MIF及CD74蛋白的表达情况;应用外源性人重组MIF(rhMIF)、抗-CD74单抗处理细胞,分别采用CCK-8法、细胞划痕实验及Transwell小室法观察MIF及CD74对癌细胞增殖、迁移及侵袭力的改变。结果免疫细胞化学法显示MIF及CD74蛋白均可在SiHa细胞中表达;rhMIF处理后细胞增殖力加强、呈时间-剂量依赖性,且细胞的体外迁移及侵袭力明显提升(P<0.05);当用抗CD74单抗预处理细胞后,可抑制MIF的促宫颈癌细胞恶性增殖作用,但对细胞的迁移及侵袭能力无明显影响。结论MIF具有调控SiHa细胞增殖、迁移及侵袭等生物学行为的作用,其中CD74介导MIF促进了癌细胞的恶性增殖力,提示两者在宫颈癌的发生发展中起重要作用。 展开更多
关键词 巨噬细胞移动抑制因子(MIF) 宫颈癌 cd74 增殖 侵袭
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