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APE1/Ref-1线粒体定位机制的研究 被引量:2
1
作者 朱剑武 李梦侠 王东 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期2125-2127,2124,共4页
APE1/Ref-1是一种重要的多功能蛋白,主要功能是DNA修复和转录因子的氧化还原调控。目前认为,核编码基因的线粒体主动转运主要依靠线粒体外膜和内膜上一系列转运酶复合体,称为外膜转运酶(translocase of outer membrane,TOM)和内膜转... APE1/Ref-1是一种重要的多功能蛋白,主要功能是DNA修复和转录因子的氧化还原调控。目前认为,核编码基因的线粒体主动转运主要依靠线粒体外膜和内膜上一系列转运酶复合体,称为外膜转运酶(translocase of outer membrane,TOM)和内膜转运酶(translocase of inner membrane,TIM)。基本过.程为线粒体外膜TOM复合体中的受体亚基,包括TOM20、TOM22和TOM70识别前体蛋白上的线粒体定位信号,而后通过TOM40等亚基形成的共同转运通道(general import pore,G1P)进入线粒体。 展开更多
关键词 ape1/ref-1 MTS TOM 线粒体定位
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人胰腺癌吉西他滨耐药细胞株APE1/Ref-1表达升高 被引量:1
2
作者 聂佳佳 熊光苏 吴叔明 《胃肠病学》 2015年第7期403-406,共4页
背景:吉西他滨是中晚期胰腺癌的主要化疗药物,但由于胰腺癌对吉西他滨存在高度先天性和获得性耐药,吉西他滨不能明显改善胰腺癌患者的预后。目的:探讨DNA损伤修复及其碱基切除修复途径中的关键酶人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1/氧化还原因... 背景:吉西他滨是中晚期胰腺癌的主要化疗药物,但由于胰腺癌对吉西他滨存在高度先天性和获得性耐药,吉西他滨不能明显改善胰腺癌患者的预后。目的:探讨DNA损伤修复及其碱基切除修复途径中的关键酶人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1/氧化还原因子-1(APE1/Ref-1)表达与胰腺癌吉西他滨耐药之间的关系。方法:应用前期研究建立的人胰腺癌吉西他滨耐药细胞株SW1990-0.5(耐药指数9.32)及其亲本细胞株SW1990,以彗星实验评估两者经吉西他滨作用后的DNA损伤程度,real-time PCR和蛋白质印迹法检测APE1/Ref-1 mRNA和蛋白表达。结果:经吉西他滨作用24 h,SW1990-0.5和SW1990细胞的彗星实验OTM值分别为0.32±0.13和26.96±6.83,相对于SW1990细胞,SW1990-0.5细胞的APE1/Ref-1 mRNA表达量为2.48±0.49,两者APE1/Ref-1蛋白相对表达量分别为1.57±0.08和0.84±0.06,组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:DNA损伤修复可能与胰腺癌吉西他滨耐药相关,APE1/Ref-1表达上调可能是通过修复DNA损伤参与胰腺癌对吉西他滨耐药。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 吉西他滨 抗药性 肿瘤 DNA修复 ape1/ref-1
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APE1/Ref-1在胃癌组织中的表达及意义 被引量:2
3
作者 郭云娣 陈建华 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1675-1676,共2页
目的探讨脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子(APE1/Ref-1)蛋白在胃癌组织中的表达及意义。方法利用组织芯片技术和免疫组化EnVision法检测APE1/Ref-1蛋白在99例胃癌组织中的表达。其中,无淋巴结转移者27例,有淋巴结转移者72例。结果 A... 目的探讨脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子(APE1/Ref-1)蛋白在胃癌组织中的表达及意义。方法利用组织芯片技术和免疫组化EnVision法检测APE1/Ref-1蛋白在99例胃癌组织中的表达。其中,无淋巴结转移者27例,有淋巴结转移者72例。结果 APE1/Ref-1在胃癌中的阳性表达率为63.64%。其在无淋巴结转移者为37.01%,明显低于有淋巴结转移者的73.61%(P<0.05)。结论 APE1/Ref-1可能通过对增强胃癌组织DNA碱基损伤的修复而参与了胃癌的浸润及转移的机制。 展开更多
关键词 ape1/ref-1蛋白 胃癌
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APE1/Ref-1在肿瘤治疗中的应用前景
4
作者 多健 韩秀鑫 +1 位作者 应国光 王国文 《天津医科大学学报》 2011年第4期574-577,共4页
脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1/氧化还原因子-1(apurinic/apyrimidinic endonuclease/redox factor-1,APE1/Ref-1)是生物体中一种重要酶类,是一个多功能蛋白。APE1在DNA碱基切除修复途径(BER)中作为人类中最主要的AP(脱嘌呤脱... 脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1/氧化还原因子-1(apurinic/apyrimidinic endonuclease/redox factor-1,APE1/Ref-1)是生物体中一种重要酶类,是一个多功能蛋白。APE1在DNA碱基切除修复途径(BER)中作为人类中最主要的AP(脱嘌呤脱嘌啶)内切酶,占到AP内切酶活性总体的95%,是保护细胞免除多种DNA损伤药物毒性作用的必须酶。 展开更多
关键词 ape1/ref-1 DNA损伤修复 肿瘤 靶向治疗
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APE1/Ref-1表达在小鼠放射性肺损伤形成中的变化特点 被引量:1
5
作者 余舒亮 王东 +6 位作者 林俐 卿毅 杨宇馨 廖玲 李梦侠 曾林立 李增鹏 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第18期2301-2303,F0002,共4页
目的观察小鼠放射性肺损伤过程中DNA损伤修复关键酶脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子(apurinic/aprimidinic endonuclease/redox factor-1,APE1/Ref-1)表达的动态变化,初步探讨APE1/Ref-1在放射性肺损伤发生、发展中的作用。方法... 目的观察小鼠放射性肺损伤过程中DNA损伤修复关键酶脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子(apurinic/aprimidinic endonuclease/redox factor-1,APE1/Ref-1)表达的动态变化,初步探讨APE1/Ref-1在放射性肺损伤发生、发展中的作用。方法雌性昆明小鼠30只,随机分为照射组18只和对照组12只。照射组用8MV直线加速器给予小鼠全胸20Gy单次照射,对照组佯装照射。在照射后1、3、7、14、28、56d共6个时相点,分批活杀小鼠(照射组3只,对照组2只),观察其全肺大体形态改变,取右肺组织,光镜下观察组织形态学变化,免疫组化SP法检测APE1/Ref-1;取左肺组织,Western blot方法检测APE1/Ref-1蛋白表达。结果正常小鼠肺组织上皮细胞和内皮细胞中APE1/Ref-1呈胞核表达为主,而在小鼠放射性肺损伤不同阶段肺组织上皮细胞和内皮细胞中APE1/Ref-1表达特征有所改变,呈核浆共同表达和胞浆表达为主;并且APE1/Ref-1表达呈现先增高后降低的趋势,照射后1d开始升高,3d达高峰,且明显高于对照组,此后随着小鼠放射性肺损伤发展逐渐降低,28d降至对照组水平,56d明显低于对照组。结论电离辐射可以刺激APE1/Ref-1蛋白的表达并使其表达发生由核内转向浆内和先增高后降低的特征改变,表明APE1/Ref-1可能在放射性肺损伤修复过程中起着重要作用。 展开更多
关键词 ape1/ref-1 电离辐射 放射性肺损伤
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人APE1/Ref-1基因真核表达质粒的构建和鉴定 被引量:1
6
作者 谭永红 王东 +1 位作者 李增鹏 杨宇馨 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第19期1918-1920,共3页
目的构建含人APE1/Ref-1基因全长cDNA片段的真核表达质粒pcDNA3.1^+APE1,以期进一步研究该基因对细胞DNA损伤的保护作用。方法采用RT-PCR法定向克隆人APE1/Ref-1基因全长cDNA片段,构建pGM-T Easy/APE1质粒,测序鉴定APE1/Ref-1基因cDNA... 目的构建含人APE1/Ref-1基因全长cDNA片段的真核表达质粒pcDNA3.1^+APE1,以期进一步研究该基因对细胞DNA损伤的保护作用。方法采用RT-PCR法定向克隆人APE1/Ref-1基因全长cDNA片段,构建pGM-T Easy/APE1质粒,测序鉴定APE1/Ref-1基因cDNA序列正确后,将目的片断亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1^+上,构成pcDNA3.1^+APE1表达质粒,并用Western blotting法检测转染人脐静脉内皮细胞APE1/Ref-1蛋白的表达水平。结果经酶切及测序证实APE1/ Ref-1基因真核表达质粒pcDNA3.1^+APE1构建成功,Western blotting法检测到转染pcDNA3.1^+APE1后,细胞内APE1/Ref-1蛋白表达明显增加。结论成功构建含人APE1/Ref-1基因全长cDNA片段的真核表达质粒,为探讨APE1/Ref-1对细胞电离辐射损伤的保护作用奠定了基础。 展开更多
关键词 ape1/ref-1 真核表达载体 DNA损伤 电离辐射
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siRNA沉默APE1/Ref-1基因增强人胰腺癌细胞株对吉西他滨的敏感性 被引量:1
7
作者 孙慧玲 熊光苏 吴叔明 《胃肠病学》 2009年第10期580-584,共5页
背景:人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1(APE1/Ref-1)基因与肿瘤的化放疗抵抗和预后密切相关,是肿瘤基因治疗的理想靶点。目的:以RNA干扰技术靶向沉默人胰腺癌细胞株APE1/Ref-1基因,观察该方法对细胞增殖和凋亡的影响及其能否增... 背景:人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1(APE1/Ref-1)基因与肿瘤的化放疗抵抗和预后密切相关,是肿瘤基因治疗的理想靶点。目的:以RNA干扰技术靶向沉默人胰腺癌细胞株APE1/Ref-1基因,观察该方法对细胞增殖和凋亡的影响及其能否增强胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性。方法:将靶向APE1/Ref-1基因的小干扰RNA(siRNA)转染人胰腺癌细胞株SW1990,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测APE1/Ref-1基因和蛋白表达,CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞仪和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡情况。结果:转染APE1 siRNA后,SW1990细胞APE1/Ref-1 mRNA和蛋白表达显著减低,蛋白表达抑制率为55.4%±3.6%;24 h、48 h和72 h时细胞增殖抑制率分别为41.7%±2.8%、24.8%±3.7%和21.3%±9.8%;吉西他滨组、si-APE1组和联合组均可见明显细胞凋亡,联合组早期凋亡率显著高于两者单用和空白对照组(19.8%±3.5%对7.7%±1.1%、8.4%±1.0%和2.7%±1.4%,P<0.05),凋亡核形态学变化最为明显。结论:沉默APE1/Ref-1基因能抑制SW1990细胞增殖,促进细胞凋亡,显著提高细胞对吉西他滨的敏感性。RN Ai沉默APE1/Ref-1基因联合吉西他滨化疗可能成为胰腺癌治疗的新的选择。 展开更多
关键词 基因 ape1/ref-1 RNA 小分子干扰 基因沉默 胰腺肿瘤 吉西他滨
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中国东部地区人群APE1/Ref-1基因启动子-141T/G遗传变异与脑胶质瘤临床研究 被引量:1
8
作者 徐斌斌 周可可 杜固宏 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2013年第4期44-49,共6页
目的研究中国东部地区人群APEl/Ref-1基因启动子-141T/G遗传变异与脑胶质瘤相关性。方法采用MassARRAY SequenomSNP时间飞行质谱生物芯片系统检测中国东部766例胶质瘤患者(241例胶质母细胞瘤,284例星型细胞瘤l~3级,241例其他胶质... 目的研究中国东部地区人群APEl/Ref-1基因启动子-141T/G遗传变异与脑胶质瘤相关性。方法采用MassARRAY SequenomSNP时间飞行质谱生物芯片系统检测中国东部766例胶质瘤患者(241例胶质母细胞瘤,284例星型细胞瘤l~3级,241例其他胶质瘤)和824例非肿瘤对照组的APEl/Ref-1-141T/G多态性。并使用非条件logistic回归分析计算比数比(ORs)和95%可信区间(CIs)。结果APEl/Ref-1基因启动子-141T/G多态性与胶质瘤之间无明显联系。组织学分层分析结果提示等位基因G显著降低胶质瘤风险(OR=0.80,95%CI=0.65~0.98,P=0.032)。与携带TT个体相比,携带-141GG基因型的个体患胶质母细胞瘤的风险低(OR=0.54,95%CI 0.34~0.87,P=0.012)。结论APE1/Ref-1启动子特异遗传变异可能调节个体胶质母细胞瘤而非其他类型胶质瘤的发生风险。 展开更多
关键词 DNA修复 胶质瘤 ape1/ref-1 临床研究
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APE1/Ref-1、EGR-1在食管鳞癌中的表达及相关性研究 被引量:4
9
作者 韩立杰 董稚明 +1 位作者 刘伟 魏冬冬 《河北医药》 CAS 2017年第5期671-674,共4页
目的本研究旨在明确APE1/Ref-1和EGR-1在食管鳞癌及癌旁组织中的表达情况,并结合临床资料评估其表达与组织分级和临床分期之间的关系,为进一步研究食管鳞癌的发生发展机制提供参考依据,并为食管鳞癌的预防、诊治提供临床指标。方法随机... 目的本研究旨在明确APE1/Ref-1和EGR-1在食管鳞癌及癌旁组织中的表达情况,并结合临床资料评估其表达与组织分级和临床分期之间的关系,为进一步研究食管鳞癌的发生发展机制提供参考依据,并为食管鳞癌的预防、诊治提供临床指标。方法随机选取2009至2010年接受胸外科手术治疗的86例食管癌标本,术前均未经放化疗等任何抗癌治疗。采用免疫组织化学法(S-P法)测定APE1/Ref-1的蛋白、EGR-1的蛋白表达情况,对其相关性进行分析。结果 APE1/Ref-1在ESCC组织中细胞质和细胞核联合阳性表达率为68.6%明显高于癌旁组织的联合阳性表达率8.1%,差异有统计学意义(P<0.01)。APE1/Ref-1在癌旁组织中的细胞核阳性表达率为91.9%明显高于ESCC组织的24.4%,差异有统计学意义(P<0.01)。EGR-1在ESCC组织的阳性表达率显著低于癌旁组织(P<0.01)。结论在ESCC中,APE1/Ref-1胞核胞质联合表达率随着组织学分级降低和临床分期的升高有增强的趋势,EGR-1的阳性表达率随着组织学分级降低和临床分期的升高有降低的趋势。 展开更多
关键词 apel/ref-1 EGR-1 免疫组织化学 食管鳞状细胞癌
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局部晚期非小细胞肺癌患者血清中Ape1/Ref-1、ICAM-1及IL-17A水平与放射性肺炎发生的相关性研究 被引量:31
10
作者 郭雷鸣 丁高峰 +3 位作者 徐文才 葛红 蒋月 陆寓非 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期383-388,共6页
背景与目的放射性肺炎主要表现为肺泡上皮及内皮细胞损伤、细胞炎性因子异常表达、纤维母细胞异常增殖及纤维基质合成,其发生与多种细胞因子水平异常相关,这些细胞因子亦可作为预测放射性肺炎发生的生物学指标。本研究评价局部晚期非小... 背景与目的放射性肺炎主要表现为肺泡上皮及内皮细胞损伤、细胞炎性因子异常表达、纤维母细胞异常增殖及纤维基质合成,其发生与多种细胞因子水平异常相关,这些细胞因子亦可作为预测放射性肺炎发生的生物学指标。本研究评价局部晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)同步放化疗患者放疗前和放疗后血清中脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1/redox factor-1,Ape1/Ref-1)、细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecules 1,ICAM-1)和白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)水平的变化与放射性肺炎发生的相关性。方法 68例晚期NSCLC患者均行同步放化疗,每位患者正常组织受照剂量相同。在治疗前及治疗后第14周,采用ELISA法检测血清中Ape1/Ref-1、ICAM-1及IL-17A水平。应用美国肿瘤放射治疗协作组和欧洲肿瘤治疗研究协作组(Radiation Therapy Oncology Group/European Organization For Research and Treatment,RTOG/EORTC)诊断分级标准作为急性和晚期肺放射损伤分级标准评价,评价终点≥2级判定为放射性肺炎。结果 18例发生放射性肺炎,50例无放射性肺炎发生。放射性肺炎组放疗前后Ape1/Ref-1水平无显著性变化(P>0.05);放射性肺炎组与非放射性肺炎组Ape1/Ref-1水平无显著性变化(P>0.05)。与放疗前相比,放疗后放射性肺炎组ICAM-1水平上调幅度比非放射性肺炎组ICAM-1水平上调幅度大(P<0.05)。放射性肺炎组患者的IL-17A水平在放疗后显著上升(P<0.05),而非放射性肺炎组IL-17A水平放疗前后水平无显著性变化(P>0.05);放疗后,放射性肺炎组IL-17A水平比非放射性肺炎显著性升高(P<0.05)。相关性分析发现放疗前后ICAM-1的变化与放射性肺炎的发生无明显相关性,而IL-17A的变化与放射性肺炎的发生具有明显相关性。结论晚期NSCLC患者同步放化疗时,在严格限制正常组织受照剂量的同时,血清IL-17A可能是放射性肺炎的预测因子。 展开更多
关键词 放射性肺炎 ape1/ref-1 ICAM-1 IL-17A
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APE1/Ref-1与肿瘤的研究进展 被引量:5
11
作者 徐海燕 辛晓燕 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第11期2426-2429,共4页
脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1又称氧化还原因子-1,是一种双功能酶,不仅具有核酸内切酶活性,发挥DNA修复功能,而且具有氧化还原功能,调控多种重要转录因子的活性。目前研究发现APE1/Ref-1在人体多种肿瘤中表达且与肿瘤的发生、发展及预后相关... 脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1又称氧化还原因子-1,是一种双功能酶,不仅具有核酸内切酶活性,发挥DNA修复功能,而且具有氧化还原功能,调控多种重要转录因子的活性。目前研究发现APE1/Ref-1在人体多种肿瘤中表达且与肿瘤的发生、发展及预后相关。APE1/Ref-1可能成为极具潜力的肿瘤基因治疗的新靶点。本文就APE1/Ref-1的结构、功能及在肿瘤研究方面的进展作了一系列的回顾与总结。 展开更多
关键词 ape1 ref-1 结构 功能 肿瘤
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APE1/Ref-1基因结构及功能的研究进展 被引量:5
12
作者 刘传 应明真 王雅杰 《医学研究杂志》 2013年第3期176-178,共3页
APEl/Ref-1(又称APEXl或Ref-1,本文统称APEl),是大肠杆菌Xth(ExoⅢ)哺乳类同源物、细胞对氧化应激主要反应因子,DNA在各种内源性或外源性物质包括化疗药物引起损伤后,APEl通过DNA碱基切除修复通路中脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶... APEl/Ref-1(又称APEXl或Ref-1,本文统称APEl),是大肠杆菌Xth(ExoⅢ)哺乳类同源物、细胞对氧化应激主要反应因子,DNA在各种内源性或外源性物质包括化疗药物引起损伤后,APEl通过DNA碱基切除修复通路中脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶发挥重要的作用。当受损的碱基去除后,APEl主要切断脱碱基位点以利于修复功能。 展开更多
关键词 ref-1 基因结构 碱基切除修复 脱嘧啶核酸内切酶 外源性物质 大肠杆菌 氧化应激 化疗药物
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双功能基因APE1/Ref-1:肿瘤治疗的新靶点 被引量:4
13
作者 王东 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第19期1911-1912,1914,共3页
脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子(apurinic/aprimidinic endonuclease/redox factor-1,APE1/Ref-1)是一个生物大分子功能复合体的范例,它不仅是DNA碱基切除修复(base excision repair,BER)途径的主要限速酶,而且是一... 脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子(apurinic/aprimidinic endonuclease/redox factor-1,APE1/Ref-1)是一个生物大分子功能复合体的范例,它不仅是DNA碱基切除修复(base excision repair,BER)途径的主要限速酶,而且是一种重要的氧化还原因子,通过调控多种转录因子氧化还原状态而改变其转录活性。APE1/Ref-1参与多种重要的细胞生物学过程,是DNA损伤修复、氧化应激和转录因子调控基因表达的重要枢纽分子,对细胞凋亡、增殖和分化有重要的影响。 展开更多
关键词 ref-1 ape1 肿瘤治疗 功能基因 DNA损伤修复 新靶点 氧化还原状态 脱嘧啶核酸内切酶
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晚期肺癌血清Ape1/Ref-1表达及其对阿帕替尼联合三线化疗疗效的预测价值 被引量:2
14
作者 王祥 丁纪涛 刘洋 《实用癌症杂志》 2023年第9期1421-1424,共4页
目的探讨晚期肺癌血清Ape1/Ref-1的表达及其对阿帕替尼联合三线化疗疗效的预测价值。方法收集70例晚期肺癌患者病例资料。采用随机数字表法进行分组,即对照组和研究组,均35例。对照组采用常规三线化疗治疗。研究组在对照组的基础上再予... 目的探讨晚期肺癌血清Ape1/Ref-1的表达及其对阿帕替尼联合三线化疗疗效的预测价值。方法收集70例晚期肺癌患者病例资料。采用随机数字表法进行分组,即对照组和研究组,均35例。对照组采用常规三线化疗治疗。研究组在对照组的基础上再予以阿帕替尼药物治疗。结果晚期肺癌组织Ape1/Ref-1蛋白阳性表达(91.43%)显著高于癌旁组织(χ^(2)=33.600,P=0.000)。化疗前,两组晚期肺癌患者Ape1/Ref-1蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);化疗后,两组Ape1/Ref-1蛋白相对表达量均明显低于化疗前,进一步组间比较,研究组Ape1/Ref-1蛋白相对表达量明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Ape1/Ref-1阴性组生存率(87.50%)显著高于Ape1/Ref-1阳性组(χ^(2)=3.949,P=0.047),研究组累积生存率(91.43%)显著高于对照组(χ^(2)=10.096,P=0.001)。结论Ape1/Ref-1在晚期肺癌组织中呈现高表达,其表达越低,阿帕替尼联合三线化疗疗效越好。 展开更多
关键词 ape1/ref-1 晚期肺癌 阿帕替尼 三线化疗 疗效预测
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姜黄素对缺血/再灌注大鼠APE/Ref-1表达及细胞凋亡的影响 被引量:3
15
作者 王智 薛荣亮 +2 位作者 赵红霞 高慧 魏欣 《山东医药》 CAS 2013年第37期1-3,11,共4页
目的观察姜黄素对大鼠全脑缺血/再灌注损伤后海马神经元凋亡与DNA修复蛋白APE/Ref-1表达的影响,探讨其对脑缺血损伤后的保护作用。方法将144只雄性SD大鼠随机平均分为假手术组(SO组)、缺血/再灌注组(IR组)和姜黄素干预组(CU组)各48只。... 目的观察姜黄素对大鼠全脑缺血/再灌注损伤后海马神经元凋亡与DNA修复蛋白APE/Ref-1表达的影响,探讨其对脑缺血损伤后的保护作用。方法将144只雄性SD大鼠随机平均分为假手术组(SO组)、缺血/再灌注组(IR组)和姜黄素干预组(CU组)各48只。建立大鼠全脑缺血/再灌注模型,CU组于再灌注后即刻经腹腔注射姜黄素。分别于再灌注后2、6、12、24、48、72 h处死大鼠,提取大鼠脑组织。原位末端标记法检测海马CA1区的细胞凋亡情况;免疫组化SABC法检测APE/Ref-1的表达。结果 SO组神经元细胞凋亡较少,IR组凋亡的神经元细胞于再灌注6 h开始增多,48 h细胞凋亡率达到最高。与SO组比较,IR组细胞凋亡率增高(P<0.01)。CU组在再灌注6 h后的各时点神经元细胞凋亡较IR组少(P均<0.01)。SO组APE/Ref-1阳性细胞在各时点较多;IR组于再灌注后2 h APE/Ref-1阳性细胞开始出现明显减少,一直持续至72 h,与SO组比较有统计学差异(P均<0.01);CU组APE/Ref-1阳性细胞率各时点与IR组比较均有统计学差异(P均<0.01)。结论姜黄素发挥脑保护作用的机制可能与减缓DNA修复蛋白APE/Ref-1表达的下降和阻止脑缺血/再灌注损伤区神经元细胞的凋亡有关。 展开更多
关键词 再灌注损伤 ape ref-1 姜黄素 大鼠
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PC12细胞APE/ref-1cDNA的克隆和表达 被引量:3
16
作者 谢振华 王爱民 +1 位作者 刘长振 马春 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期585-589,共5页
APE Ref 1是双功能核蛋白 ,它既能在碱基切除修复过程中切除脱嘌呤 脱嘌啶位点 ,又能促进包括AP 1、Myb和NF κB等受氧化还原调节的转录因子对DNA的结合 .从PC12细胞中抽提总RNA ,经逆转录PCR(RT PCR)扩增出APE ref 1cDNA并克隆到pQE3 ... APE Ref 1是双功能核蛋白 ,它既能在碱基切除修复过程中切除脱嘌呤 脱嘌啶位点 ,又能促进包括AP 1、Myb和NF κB等受氧化还原调节的转录因子对DNA的结合 .从PC12细胞中抽提总RNA ,经逆转录PCR(RT PCR)扩增出APE ref 1cDNA并克隆到pQE3 1表达质粒上的BamHⅠ和PstⅠ位点间 .经测序表明 ,PC12细胞的APE ref 1cDNA以正确的阅读框架重组进入表达质粒 ,表达重组质粒pQE3 1 APE在宿主菌BL2 1中得到稳定表达 .SDS PAGE鉴定表明 ,带 6个组氨酸的融合蛋白分子量为 3 8kD ,并经Ni NTA琼脂糖亲和纯化得到电泳纯融合蛋白 .Western印迹证明重组蛋白为APE ref 1融合蛋白 . 展开更多
关键词 PC12细胞 ape/ref-1 RT-PCR 克隆 表达 限速酶
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吉西他滨对人肺癌A549细胞株CN-Ⅱ,APE/Ref-1mRNA和蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 宋东 周曙光 +3 位作者 刘玥 李晓栋 王姗姗 唐小龙 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期246-249,共4页
【目的】研究人肺癌A549细胞株在吉西他滨化疗时CN-Ⅱ,APE/Ref-1基因表达的变化,并探讨其在肺癌化疗耐药中所起的作用。【方法】不同浓度吉西他滨0、10、20、40及60μmol/L作用人肺癌A549细胞株24h,分别以RT-PCR及Western blot方法测定... 【目的】研究人肺癌A549细胞株在吉西他滨化疗时CN-Ⅱ,APE/Ref-1基因表达的变化,并探讨其在肺癌化疗耐药中所起的作用。【方法】不同浓度吉西他滨0、10、20、40及60μmol/L作用人肺癌A549细胞株24h,分别以RT-PCR及Western blot方法测定用药后CN-Ⅱ和APE/Ref-1的mRNA及蛋白表达情况。【结果】吉西他滨作用人肺癌A549细胞株24h后,CN-Ⅱ和APE/Ref-1的mRNA及蛋白表达水平均明显上升,并与吉西他滨的浓度呈正相关(CN-ⅡRT-PCR:r=0.687,P=0.009;Western blot:r=0.594,P=0.021;APE/Ref-1RT-PCR:r=0.669,P=0.010;Western blot:r=0.562,P=0.029)。【结论】CN-Ⅱ和APE/Ref-1在肺癌化疗时表达明显增强,可能与化疗耐药性的产生有关,并提示针对CN-Ⅱ和APE/Ref-1的靶向干预可能有助于提高肺癌的化疗敏感性。 展开更多
关键词 吉西他滨 CN-Ⅱ ape/ref-1 肺癌 化疗耐药性
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肾细胞癌中Ref-1/APE的表达特点及其意义 被引量:5
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作者 王志新 张刚 +2 位作者 连树林 张海英 孔祥波 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第13期1277-1278,共2页
目的探讨Ref-1/APE蛋白表达与肾细胞癌生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学方法检测58例肾细胞癌和11例正常肾组织中Ref-1/APE的表达。结果所有肾细胞癌和正常肾组织均有Ref-1/APE的表达,但在细胞内的表达定位有所不同,肾细胞癌阳... 目的探讨Ref-1/APE蛋白表达与肾细胞癌生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学方法检测58例肾细胞癌和11例正常肾组织中Ref-1/APE的表达。结果所有肾细胞癌和正常肾组织均有Ref-1/APE的表达,但在细胞内的表达定位有所不同,肾细胞癌阳性颗粒表达部位以细胞核为主,并且Ref-1/APE的表达定位与肿瘤分级、分期密切相关,差异有显著性(P<0.01);11例正常肾组织中仅见肾小管上皮细胞表达。结论Ref-1/APE基因可能与肾细胞癌的发生、发展有关。检测Ref-1/APE的表达及移位于细胞质的情况可能为肾细胞癌的恶性程度判定、预后评估及进一步治疗提供依据。 展开更多
关键词 肾细胞癌 ref-1/ape(氧化还原因子-1/脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶)
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APE/Ref-1在肿瘤治疗中的应用前景 被引量:5
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作者 张颖 王建 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第3期363-369,共7页
脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1(APE/Ref-1)是碱基切除修复途径的关键酶,主要负责修复氧化剂和烷化剂造成的DNA损伤。同时APE/Ref-1还能通过氧化还原功能保持多种转录因子处于激活的还原状态,并通过调控其DNA结合活性参与肿瘤... 脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1(APE/Ref-1)是碱基切除修复途径的关键酶,主要负责修复氧化剂和烷化剂造成的DNA损伤。同时APE/Ref-1还能通过氧化还原功能保持多种转录因子处于激活的还原状态,并通过调控其DNA结合活性参与肿瘤发生发展,这些因子包括AP-1(Fos/Jun)、NF-κB、HIF-1α、p53等。本文综合近年来国外的众多文献,从APE/Ref-1的结构功能入手,回顾总结APE/Ref-1与肿瘤之间相关性及其临床研究进展,提示APE/Ref-1是非常有潜力的肿瘤治疗靶点,在临床应用中有良好的发展前景。 展开更多
关键词 ape1基因 肿瘤 基因治疗
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大鼠耳蜗缺血再灌注后APE/Ref-1表达研究 被引量:1
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作者 姜振东 钟诚 +1 位作者 李太军 张学渊 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第1期147-150,共4页
目的观察APE/Ref-1在正常成年SD大鼠内耳蜗缺血再灌注后的表达变化。方法成年SD大鼠24只,随机分成2组(n=12),分别为假手术对照组、缺血再灌注组。各组动物于再灌注24h取出左侧耳蜗,每组随机4个耳蜗,石蜡包埋切片,行免疫组织化学观察APE/... 目的观察APE/Ref-1在正常成年SD大鼠内耳蜗缺血再灌注后的表达变化。方法成年SD大鼠24只,随机分成2组(n=12),分别为假手术对照组、缺血再灌注组。各组动物于再灌注24h取出左侧耳蜗,每组随机4个耳蜗,石蜡包埋切片,行免疫组织化学观察APE/Ref-1表达分布。各组余下耳蜗组织进行均浆,进行免疫印记实验,测定匀浆中APE/Ref-1蛋白表达。结果与假手术对照组相比,缺血再灌注组APE/Ref-1蛋白表达显著增加(P<0.05)。在假手术组大鼠耳蜗中,APE/Ref-1主要表达在正常螺旋神经节区,细胞内定位在细胞浆和细胞核,螺旋韧带和血管纹也可以见到表达。缺血再灌注组APE/Ref-1在耳蜗这些部位的表达显著增加。结论正常大鼠内耳表达APE/Ref-1,主要表达在螺旋神经节区。耳蜗缺血再灌注后,APE/Ref-1在内耳的表达显著增加,提示APE/Ref-1可能与耳蜗缺血再灌注氧化损伤密切相关。 展开更多
关键词 耳蜗 缺血再灌注 ape ref-1 氧化应激损伤
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