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Cloning and Sequencing the Full-length cDNA of Annexin from Strawberry Fruit 被引量：6
1
作者 王关林 杨怀义 +2 位作者 夏然 方宏筠 景士西 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第8期874-876,共3页
采用RACE技术从草莓 (FragariaananassaDuch .)成熟果实中分离克隆了膜联蛋白 (annexin)基因的cDNA 5′_端未知序列 ,并通过测序确定了翻译的起始密码位点、终止密码位点及完整的读码框 ,从而首次获得了草莓果实膜联蛋白基因的cDNA全序... 采用RACE技术从草莓 (FragariaananassaDuch .)成熟果实中分离克隆了膜联蛋白 (annexin)基因的cDNA 5′_端未知序列 ,并通过测序确定了翻译的起始密码位点、终止密码位点及完整的读码框 ,从而首次获得了草莓果实膜联蛋白基因的cDNA全序列 ,命名为annfaf(annexinofFragariaananassafruit)基因。 展开更多
关键词 STRAWBERRY annexin protein of fruit cDNA clone annfaf ( annexin of Fragaria ananassa fruit) gene
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细胞凋亡检测蛋白AnnexinV的制备纯化和初步评价 被引量：2
2
作者 陈大明 谢虹 +8 位作者 祁本忠 张颖梅 贾兵 杨红伟 罗志福 张锦荣 金小海 王凡 马大龙 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 2004年第z1期182-187,共6页
文章利用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达了人重组AnnexinV,建立了批量获得AnnexinV工程菌诱导表达的最佳温度、时间和包涵体的操作程序。通过SDS PAGE分析和得到的AnnexinV标记上FITC后能对地塞米松引起Balb/c小鼠胸腺单细胞产生的... 文章利用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达了人重组AnnexinV,建立了批量获得AnnexinV工程菌诱导表达的最佳温度、时间和包涵体的操作程序。通过SDS PAGE分析和得到的AnnexinV标记上FITC后能对地塞米松引起Balb/c小鼠胸腺单细胞产生的凋亡进行有效检测的实验表明:经过离子层析纯化后得到了高纯度、有生物活性的人重组AnnexinV纯品。细胞结合分析的结果显示:AnnexinV的KD值为8.53nmol/L,RT为8.79nmol/L。 展开更多
关键词 细胞凋亡 annexin V 诱导表达和纯化 FITG-annexin V 细胞结合分析
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钙磷脂结合蛋白annexin A2与肿瘤发生发展 被引量：5
3
作者 樊素珍 苑中甫 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2009年第1期55-58,共4页
annexins是一组钙离子依赖的磷脂结合蛋白。钙磷脂结合蛋白annexin A2是annexins家族的成员之一,在细胞质和细胞核中具有非常广泛的生物学功能。annexin A2是一种纤溶酶受体,与细胞的增殖、凋亡有关,具有RNA结合的特性,与DNA合成、复制... annexins是一组钙离子依赖的磷脂结合蛋白。钙磷脂结合蛋白annexin A2是annexins家族的成员之一,在细胞质和细胞核中具有非常广泛的生物学功能。annexin A2是一种纤溶酶受体,与细胞的增殖、凋亡有关,具有RNA结合的特性,与DNA合成、复制有关。已有研究证实,其与多种肿瘤的发生发展、浸润、远处转移均有不同程度相关,且不同肿瘤中表达各异。其在多种组织中为癌基因,部分组织中为抑癌基因。介绍近年有关annexin A2在肿瘤发生发展领域的研究进展,为肿瘤早期诊断、治疗和预后判断提供新线索。 展开更多
关键词 annexinS annexin A2 肿瘤 细胞 基因 免疫组织化学
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维持性血液透析患者血清脑钠肽水平与外周血T细胞AnnexinⅤ及心室结构和功能的关系
4
作者 施红萍 葛玉英 王秋妹 《浙江临床医学》 2025年第4期552-554,共3页
目的探究维持性血液透析患者血清脑钠肽(BNP)水平与外周血T细胞AnnexinⅤ及心室结构和功能的关系。方法本研究纳入80例维持性血液透析患者(透析组)和80例健康体检人群(健康组)。检测健康组以及透析组透析前后血清BNP、甲状旁腺激素(iPTH... 目的探究维持性血液透析患者血清脑钠肽(BNP)水平与外周血T细胞AnnexinⅤ及心室结构和功能的关系。方法本研究纳入80例维持性血液透析患者(透析组)和80例健康体检人群(健康组)。检测健康组以及透析组透析前后血清BNP、甲状旁腺激素(iPTH)、血红蛋白(Hb)、血清钙离子(Ca^(2+))、血磷(P)的水平和左室舒张末期内径(LVDd)、左室收缩末期内径(LVDs)、左室后壁厚度(LVPW)、室间隔厚度(IVST)、右室内径(RV)、左室射血分数(LVEF),计算左心室心肌重量指数(LVMI),检测外周血T细胞Annexin V水平。结果与健康组比较,血液透析组患者的BNP、iPTH及P水平均升高,Hb水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者的Ca^(2+)水平差异无统计学意义(P>0.05);相关性分析显示,BNP水平与P含量呈正相关(r=0.364,P<0.05),与Hb浓度呈负相关(r=-0.416,P<0.05),与iPTH及Ca^(2+)水平无相关关系(r=-0.134,-0.089,P>0.05)。与健康组比较,血液透析组患者的LVDd、LVDs、LVPW、IVST、LVMI及RV水平均上升,而LVEF水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,BNP水平与LVDd(r=0.374,P<0.05)、LVDs(r=0.314,P<0.05)、IVST(r=0.297,P<0.05)、LVMI(r=0.402,P<0.05)及RV(r=0.349,P<0.05)均呈正相关,与LVEF和LVPW(r=-0.014,0.021,P>0.05)无相关性。血液透析组患者外周血T细胞水平低于健康组,Annexin V水平高于健康组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论BNP水平与左、右心室收缩功能障碍密切相关,同时与外周血T细胞凋亡和Annexin V表达相关;BNP有助于提高临床医师预测左室肥厚和左室收缩功能障碍。 展开更多
关键词 血液透析 血清脑钠肽 心室结构和功能 外周血T细胞 annexinⅤ
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大肠癌组织中annexinⅠ mRNA及蛋白的表达和意义 被引量：1
5
作者 曲利娟 梁莉 丁彦青 《诊断病理学杂志》 CSCD 2007年第3期211-214,共4页
目的探讨大肠癌组织中annexinⅠ(AnxⅠ)的表达及意义。方法应用原位杂交和免疫组化方法,从mRNA及蛋白两个水平上检测95例大肠癌及35例正常大肠黏膜组织AnxⅠ的表达情况。结果大肠癌组AnxⅠmRNA表达较正常组下调,而大肠癌组AnxⅠ蛋白表... 目的探讨大肠癌组织中annexinⅠ(AnxⅠ)的表达及意义。方法应用原位杂交和免疫组化方法,从mRNA及蛋白两个水平上检测95例大肠癌及35例正常大肠黏膜组织AnxⅠ的表达情况。结果大肠癌组AnxⅠmRNA表达较正常组下调,而大肠癌组AnxⅠ蛋白表达较正常组上调,两组差异极显著(P<0.01)。在mRNA水平,表达与肿瘤分化程度呈正相关(P<0.05),与有无淋巴结转移和组织学类型无关。在蛋白水平,表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与组织学类型和分化程度无关。原发癌与淋巴结转移癌两个水平表达差异均不显著(P>0.05)。结论AnxⅠ与大肠癌发生发展和转移密切相关,可作为反映大肠癌生物学行为和判断预后的重要指征。 展开更多
关键词 大肠癌 annexinⅠ MRNA 蛋白质annexinⅠ 转移
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AnnexinⅡ的遗传学研究 被引量：3
6
作者 黄昀 傅松滨 《国外医学（遗传学分册）》 CAS 2004年第6期330-333,共4页
Annexins蛋白是一类具有典型生物学特征的大分子,参与一系列与Ca2+相关的生物学活动。AnnexinⅡ作为该家族的成员,同样参与了多种生物学活动,现在已经受到越来越多的关注。本文就Annexins家族、AnnexinⅡ的生物学特征以及生物学功能的... Annexins蛋白是一类具有典型生物学特征的大分子,参与一系列与Ca2+相关的生物学活动。AnnexinⅡ作为该家族的成员,同样参与了多种生物学活动,现在已经受到越来越多的关注。本文就Annexins家族、AnnexinⅡ的生物学特征以及生物学功能的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 遗传学 annexins蛋白 annexinⅡ 生物学功能 肿瘤细胞
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Annexin A2单克隆抗体抗肿瘤活性的实验研究
7
作者 陈赛 聂纪芹 +1 位作者 李聪 谭超 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期478-484,共7页
目的研究人膜联蛋白A2(Annexin A2)单克隆抗体的抗肿瘤活性,探讨Annexin A2在肿瘤发生发展中的作用。方法表达纯化Annexin A2重组蛋白,免疫小鼠及细胞融合制备单克隆抗体,用间接ELISA检测抗体的效价,Western blot和免疫共沉淀检测抗体... 目的研究人膜联蛋白A2(Annexin A2)单克隆抗体的抗肿瘤活性,探讨Annexin A2在肿瘤发生发展中的作用。方法表达纯化Annexin A2重组蛋白,免疫小鼠及细胞融合制备单克隆抗体,用间接ELISA检测抗体的效价,Western blot和免疫共沉淀检测抗体的特异性。MTT法检测外源性Annexin A2抗体对肿瘤细胞生长的影响,流式细胞术检测其对肿瘤细胞周期的影响,RT-PCR及Quantitative real-time PCR检测对肿瘤细胞周期相关基因的影响,transwell检测其对HepG2细胞的侵袭及迁移的影响。结果 Annexin A2重组蛋白免疫小鼠,获得效价高的单克隆抗体。MTT结果显示,与对照细胞相比,外源抗体能够抑制HepG2细胞的生长。细胞周期相关检测结果显示,Annexin A2蛋白的表达与肿瘤细胞的生长周期相关基因具有相关性。transwell结果显示,外源抗体的处理抑制HepG2细胞的迁移,但促进了HepG2细胞的侵袭。结论 Annexin A2重组蛋白免疫Balb/c小鼠后,获得高滴度特异性的单克隆抗体。获得的Annexin A2单克隆抗体具有抑制生长迁移作用,为肿瘤的诊断及治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 人源annexin A2基因片段 annexin A2单克隆抗体 抗肿瘤
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按摩对大鼠骨骼肌急性钝挫伤后膜修复蛋白dysferlin和annexin A1表达的影响 被引量：9
8
作者 田源 唐成林 +6 位作者 黄思琴 张毅 袁海洲 曹净 高睿琦 唐念珍 杨辉 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期841-846,共6页
目的:研究大鼠骨骼肌急性钝挫伤后,按摩对细胞膜特异性修复蛋白dysferlin和annexin A1表达的影响,探讨按摩促进骨骼肌急性损伤修复的可能机制。方法:42只成年SD雄性大鼠随机抽取6只作为正常对照组,其余36只为模型组。模型组在建立右下... 目的:研究大鼠骨骼肌急性钝挫伤后,按摩对细胞膜特异性修复蛋白dysferlin和annexin A1表达的影响,探讨按摩促进骨骼肌急性损伤修复的可能机制。方法:42只成年SD雄性大鼠随机抽取6只作为正常对照组,其余36只为模型组。模型组在建立右下肢急性腓肠肌钝挫伤模型后,随机分为自然恢复组和按摩治疗组,根据治疗时间分为损伤后7d、14d、21d三个时间点,每个时间点6只。正常对照组和自然恢复组不做治疗;按摩治疗组在建模后48h开始每天于损伤局部行按摩治疗。免疫荧光双标法标记dysferlin和annexin A1,运用激光共聚焦显微镜摄片,观察其在细胞内分布及表达;运用蛋白质印迹法检测其表达量。结果:激光共聚焦显微镜结果显示:正常肌细胞中两种荧光信号主要分布于近细胞膜周围,强度较弱,无共表达现象;模型组各时间点,两种荧光信号强度均明显增加,胞浆内也有弥散性分布,随时间的延长,信号强度逐渐减弱,细胞膜共表达现象增加;其中按摩治疗组荧光信号强度较同时期自然恢复组减弱明显,细胞膜上共表达现象增多。蛋白质印记结果显示:模型组各时间点较正常对照组,dysferlin和annexin A1蛋白表达升高,差异显著;随着时间的延长,模型组蛋白表达量均下降,自然恢复组和按摩治疗组在损伤后14d和21d比较,差异均有显著性意义(P<0.05);损伤后21d,自然恢复组较按摩治疗组dysferlin表达量比较,差异有显著性意义(P<0.05);损伤后14d和21d,自然恢复组较按摩治疗组annexin A1表达量比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:这可能是其促进肌细胞膜修复相关机制之一。 展开更多
关键词 DYSFERLIN annexin A1 急性钝挫伤 按摩 膜修复
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河南食管癌高发区食管癌及癌旁组织AnnexinⅡ表达失调变化 被引量：9
9
作者 齐义军 王立东 +6 位作者 焦新英 冯笑山 范宗民 高珊珊 何欣 李吉林 常扶保 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第7期730-736,共7页
背景与目的:作者对河南食管癌高发区正常人和食管癌患者蛋白质组差异蛋白分析发现AnnexinⅡ是主要差异候选蛋白之一。本研究通过分析该地区食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)及癌旁形态学正常食管上皮(normal epitheli... 背景与目的:作者对河南食管癌高发区正常人和食管癌患者蛋白质组差异蛋白分析发现AnnexinⅡ是主要差异候选蛋白之一。本研究通过分析该地区食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)及癌旁形态学正常食管上皮(normal epithelium,NOR)、基底细胞过度增生(basal cell hyperplasia,BCH)、不典型增生(dysplasia,DYS)和原位癌(carcinoma in situ,CIS)中AnnexinⅡ动态表达状况,探讨AnnexinⅡ在ESCC癌变过程中的作用及机制。方法:采用ABC免疫组织化学法分析了河南食管癌高发区33例ESCC手术标本和癌旁NOR,以及BCH、DYS和CIS中AnnexinⅡ蛋白表达变化;另应用RT-PCR方法检测了ESCC手术标本和癌旁NOR中AnnexinⅡ mRNA差异表达情况。结果:在90.6%的NOR中有AnnexinⅡ蛋白表达,免疫染色评分≥4,随着病变加重其表达下降,CIS时AnnexinⅡ蛋白完全失表达的比例达到了50.0%。高分化SCC时AnnexinⅡ蛋白表达又升高,而后随着SCC失分化表达逐渐降低,低分化SCC中45.4%病灶AnnexinⅡ失表达。但RT-PCR并没有检测到NOR和SCC中AnnexinⅡ mRNA的差异表达。结论:AnnexinⅡ表达增强或降低可能与癌前病变逆转或进展相关,并有可能成为高危人群筛查及食管癌早期诊断的分子指标。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞状上皮癌 癌前病变 annexinⅡ 免疫组化 肿瘤相关基因
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Annexin A1在胃癌中的表达及其与胃癌预后的关系 被引量：10
10
作者 张珑涓 李斌 +5 位作者 谢至 陈连周 黄晓卉 苏乔 李雯 毕颎 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期237-241,共5页
【目的】通过检测Annexin A1蛋白在胃癌原发灶和转移灶中表达,探讨Annexin A1表达的病理临床意义及对预后的影响。【方法】构建组织芯片包含胃癌原发灶及相应的转移灶70对、癌旁组织30例,应用免疫组化方法检测Annexin A1在胃癌组织芯片... 【目的】通过检测Annexin A1蛋白在胃癌原发灶和转移灶中表达,探讨Annexin A1表达的病理临床意义及对预后的影响。【方法】构建组织芯片包含胃癌原发灶及相应的转移灶70对、癌旁组织30例,应用免疫组化方法检测Annexin A1在胃癌组织芯片中的表达,结合病理临床资料及生存资料,分析Annexin A1表达与病理临床参数的相关性。【结果】Annexin A1在癌旁组织中不表达,在胃癌原发灶中的阳性表达率为4/70(5.7%),淋巴结转移灶中的表达率为17/70(24.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移灶ANXA1的表达与TNM高分期相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示淋巴结转移灶ANXA1表达阳性组患者生存时间较阴性组短,差异有统计学意义(P<0.05)。logistic回归多因素分析ANXA1表达阳性是胃癌早期死亡的危险因素。【结论】Annexin A1的表达与肿瘤的远处转移、胃癌患者的早期死亡密切相关。 展开更多
关键词 胃癌 annexin A1 转移 预后
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Annexin B1与磷脂酰丝氨酸的结合活性 被引量：6
11
作者 王芳 张毅 +4 位作者 颜宏利 高远舰 刘凡 贺艳 孙树汉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期44-46,共3页
目的 :研究 annexin B1与磷脂酰丝氨酸的结合活性。方法 :在大肠杆菌中表达 annexin B1蛋白 ,经离子交换层析得纯品 ;选用 U937细胞 ,以过氧化氢诱导凋亡 ,制备小鼠洗涤血小板 ,凝血酶激活 ;以异硫氰酸荧光黄 (FITC)标记的 annexin B1... 目的 :研究 annexin B1与磷脂酰丝氨酸的结合活性。方法 :在大肠杆菌中表达 annexin B1蛋白 ,经离子交换层析得纯品 ;选用 U937细胞 ,以过氧化氢诱导凋亡 ,制备小鼠洗涤血小板 ,凝血酶激活 ;以异硫氰酸荧光黄 (FITC)标记的 annexin B1检测凋亡细胞和活化血小板。结果 :FITC标记的 annexin B1既能与凋亡细胞特异性结合 ,又能与活化血小板特异性结合 ,结合活性接近 annexin 。结论 :研究表明 annexin B1可结合于凋亡细胞和活化血小板膜上的磷脂酰丝氨酸 (PS) ,而非其他膜成分 ,也进一步阐明 annexin 展开更多
关键词 annexin B1 磷脂酰丝氨酸 结合活性 血小板活化 细胞凋亡
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Annexin Ⅰ在α粒子转化细胞及肺癌组织中高表达 被引量：8
12
作者 彭少华 吴德昌 +3 位作者 李刚 项晓琼 楼铁柱 赵永良 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第6期507-511,共5页
目的：探讨Ａｎｎｅｘｉｎ　Ⅰ表达与肺癌及细胞转化的关系。方法：Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹检测永生化 人支气管上皮 ＢＥＰ２Ｄ细胞及α粒子照射转化后 ＢＥＰ２Ｄ细胞中 Ａｎｎｅｘｎｉ　Ⅰ在 ｍＲＮＡ和蛋白质水... 目的：探讨Ａｎｎｅｘｉｎ　Ⅰ表达与肺癌及细胞转化的关系。方法：Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹检测永生化 人支气管上皮 ＢＥＰ２Ｄ细胞及α粒子照射转化后 ＢＥＰ２Ｄ细胞中 Ａｎｎｅｘｎｉ　Ⅰ在 ｍＲＮＡ和蛋白质水平的表达，细胞免疫 化学检测 Ａｎｎｅｘｉｎ　Ⅰ在 ＢＥＰ２Ｄ细胞中的分布。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测肺癌病人正常组织与肿瘤组织中 Ａｎｎｅｘｉｎ　Ⅰ蛋白质的 表达。结果： Ａｎｎｅｘｉｎ　Ⅰ在α粒子照射转化后 ＢＥＰ２Ｄ细胞中 ｍＲＮＡ和蛋白质水平上的表达光密度均为永生化人支气 管上皮 ＢＥＰ２Ｄ细胞的 １.５倍； Ａｎｎｅｘｉｎ　Ⅰ在 ＢＥＰ２Ｄ细胞中分布于胞浆及细胞膜。本研究收集了 ８例肺鳞癌、４例肺腺 癌病人的肺肿瘤组织及正常组织，Ａｎｎｅｘｉｎ　Ⅰ在肺癌组织中的表达明显高于正常组织（Ｐ＜０.０１），Ａｎｎｅｘｉｎ　Ⅰ在肿瘤 组织中表达的光密度与正常肺组织之比为 ２．７。结论： Ａｎｎｅｘｉｎ　Ⅰ在肺癌组织过表达，表明 Ａｎｎｅｘｉｎ　Ⅰ可能与肺癌及 细胞恶性转化的发生发展有关。永生化及α粒子照射恶转 ＢＥＰ２Ｄ细胞为进一步研究 Ａｎｎｅｘｉｎ　Ⅰ在恶性转化中的作 用提供了良好的模型。 展开更多
关键词 annexin I 肺肿瘤 EBP2D细胞 α粒子照射
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肾透明细胞癌中AnnexinⅡ的表达及其临床意义 被引量：7
13
作者 杨谨 程婷婷 +2 位作者 王丽娜 陈威 李旭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期59-62,共4页
目的:探讨AnnexinⅡ在人肾透明细胞癌和癌旁组织样本中的表达情况及其临床意义。方法:采用Western blot方法检测29例新鲜肾透明细胞癌及相应癌旁组织中AnnexinⅡ蛋白的表达;采用免疫组织化学方法检测120例肾透明细胞癌及相应癌旁组织中A... 目的:探讨AnnexinⅡ在人肾透明细胞癌和癌旁组织样本中的表达情况及其临床意义。方法:采用Western blot方法检测29例新鲜肾透明细胞癌及相应癌旁组织中AnnexinⅡ蛋白的表达;采用免疫组织化学方法检测120例肾透明细胞癌及相应癌旁组织中AnnexinⅡ的表达情况,并将结果与患者的临床病理参数及预后进行相关性分析。结果:AnnexinⅡ在肾透明细胞癌及相应癌旁组织中均有表达,前者的表达水平较后者显著升高(P<0.01);免疫组织化学显示肾透明细胞癌组织中,AnnexinⅡ的阳性表达率高达67.5%,与癌旁组织存在明显差异(P<0.01);AnnexinⅡ在肾透明细胞癌组织中以胞膜表达为主,其表达状况与肾透明细胞癌患者的临床分期(P<0.05),组织学分级(P<0.05),肾被膜受侵(P<0.01)和远地转移(P<0.01)紧密相关;并且AnnexinⅡ的表达状况与肾透明细胞癌患者的5年生存率显著相关。结论:AnnexinⅡ在肾透明细胞癌组织中过表达,其与肾癌的发展密切相关,在肾癌的侵袭及转移过程中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 annexinⅡ 转移潜能 透明细胞癌 肾癌
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Annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的比较 被引量：49
14
作者 张伟 梁智辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1209-1212,共4页
目的比较annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的优缺点。方法用DEX诱导胸腺细胞凋亡和H2O2诱导K562细胞系细胞凋亡,应用Hoechst33342/PI和annexin V-FITC/PI双色标记流式细胞术检测体系检测细胞凋亡... 目的比较annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的优缺点。方法用DEX诱导胸腺细胞凋亡和H2O2诱导K562细胞系细胞凋亡,应用Hoechst33342/PI和annexin V-FITC/PI双色标记流式细胞术检测体系检测细胞凋亡情况。结果 Annexin V-FITC/PI双标记法能准确地反映2种模型中的细胞凋亡情况,与其检测原理一致;而Hoechst33342/PI双标记法虽能准确反映DEX诱导胸腺细胞的凋亡情况,但在检测H2O2诱导的K562细胞凋亡时,其早期凋亡细胞的分布与其检测原理明显不符。结论与annexin-V-FITC/PI双标记法相比,Hoechst33342/PI双标记法有一定的局限性。 展开更多
关键词 凋亡 annexin V-FITC/PI Hoechst33342/PI 流式细胞术
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pcDNA3.1-Annexin A1真核表达载体对结直肠癌细胞迁移、侵袭的影响 被引量：4
15
作者 杨晓群 葛慧娟 +4 位作者 汪佳祺 余宏宇 何金 刘惠敏 蔡在龙 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期264-268,共5页
目的探讨Annexin A1对结直肠癌细胞迁移、侵袭能力的影响。方法构建重组质粒pcDNA3.1-AnnexinA1,转染至结直肠癌细胞株SW480中,G418筛选稳定表达株,实时荧光定量PCR、蛋白质印迹检测转染前后Annexin A1mR-NA及蛋白表达;以空载体转染组... 目的探讨Annexin A1对结直肠癌细胞迁移、侵袭能力的影响。方法构建重组质粒pcDNA3.1-AnnexinA1,转染至结直肠癌细胞株SW480中,G418筛选稳定表达株,实时荧光定量PCR、蛋白质印迹检测转染前后Annexin A1mR-NA及蛋白表达;以空载体转染组及未转染SW480细胞作为对照,通过划痕修复实验和Transwell细胞侵袭实验对转染前后细胞的迁移和侵袭能力进行比较观察和分析。结果成功构建重组质粒pcDNA3.1-Annexin A1载体;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测结果均显示,重组体pcDNA3.1-Annexin A1稳定转染细胞株中Annexin A1mRNA及蛋白表达均明显高于空载体转染及未转染组细胞(P<0.01),而后两者间比较差异无统计学意义(P>0.05);重组体pcDNA3.1-Annexin A1转染组SW480细胞的迁移率(0.415±0.002)明显高于空载体转染组(0.267±0.003)及未转染组细胞(0.271±0.002),差异具有统计学意义(P<0.05),而后两者间差异无统计学意义(P>0.05);与空载体转染组(162.80±12.07)及未转染组(164.25±9.50)相比,重组体pcDNA3.1-Annexin A1转染组穿膜细胞数(221.75±12.07)增多,差异具有统计学意义(P<0.05).结论人Annexin A1基因表达上调能提高结直肠癌细胞迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 annexin A基因 真核表达载体 划痕修复 Transwell侵袭实验 结直肠癌 转染细胞 侵袭能力 细胞迁移 实时荧光定量
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Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡实验 被引量：5
16
作者 魏远 王宏刚 +4 位作者 陈成彬 王春国 宋文芹 李登文 赵立青 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期119-122,共4页
课程组面向本科生开设了利用Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡的实验项目。该实验加入化疗药物依托泊苷(简称VP-16)诱导Jurkat细胞发生凋亡,使用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况,在荧光显微镜下拍照计数。实验结... 课程组面向本科生开设了利用Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡的实验项目。该实验加入化疗药物依托泊苷(简称VP-16)诱导Jurkat细胞发生凋亡,使用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况,在荧光显微镜下拍照计数。实验结果表明:紫外光激发下,早期凋亡细胞呈现绿色荧光,而晚期凋亡细胞和坏死细胞呈现红色荧光;对细胞计数可知,对照组各时期细胞数符合正常范围,经药物处理后,各时期细胞凋亡率随药物浓度升高而升高,其中早期和晚期凋亡细胞占比最高;在高浓度药物处理后,细胞被大幅度杀伤,仅剩余几个早期凋亡细胞。实验将Annexin V-FITC/PI试剂盒与荧光显微镜结合使用,突破了教学经费、规模和仪器等条件局限,实验成本相对较低,适于大班教学,实验结果直观便捷,能够让学生深入、系统地掌握细胞凋亡的实验原理和检测方法,符合本科生实验项目的综合性高、设计性强和研究性佳的特点,切实提升细胞生物学实验课程的质量和水平。 展开更多
关键词 细胞凋亡 实验教学 annexin V-FITC/PI检测法 荧光显微镜 药物诱导
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Annexin5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌过程中StarD7表达的影响 被引量：4
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作者 靖俊 林钗英 +2 位作者 伊男 伏海燕 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第2期123-128,共6页
目的先前研究发现annexin 5刺激大鼠睾丸间质细胞后,3β-羟类固醇脱氢酶(3βbeta-hydroxysteroid dehydro-genase,3β-HSD)及睾酮水平都增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在联系。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾... 目的先前研究发现annexin 5刺激大鼠睾丸间质细胞后,3β-羟类固醇脱氢酶(3βbeta-hydroxysteroid dehydro-genase,3β-HSD)及睾酮水平都增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在联系。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌过程中的StarD7(START domain containing 7)表达的影响,探讨annexin 5影响睾酮分泌的机制。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,1nmol/L的annexin 5处理间质细胞24h,分别提取细胞总mRNA和总蛋白。RT-PCR检测StarD7的mRNA表达改变。Western blotting方法分析睾丸间质细胞中StarD7的蛋白表达变化。收取细胞爬片,利用免疫细胞化学的方法对StarD7在睾丸间质细胞中进行定位。结果与对照组相比,在mRNA水平上,加药组StarD7 mRNA的表达增加了44.5%(1.10±0.02 vs 1.59±0.09,P<0.05)。在蛋白水平上,加药组StarD7蛋白的表达增加了44.3%(1.49±0.10 vs 2.15±0.16,P<0.05)。StarD7主要定位在大鼠睾丸间质细胞的胞浆内,加药组的染色强度明显强于对照组。结论 StarD7在基因和蛋白水平均受annexin 5的调控,结合先前发现annexin 5可调控睾丸间质细胞睾酮合成的结果,提示annexin 5调控睾酮合成可能是通过调控StarD7的表达来实现的。 展开更多
关键词 annexin 5 StarD7 睾酮 间质细胞
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Annexin A2基因沉默对肺癌细胞转移能力的影响 被引量：4
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作者 高昕 王述民 +1 位作者 曲家骐 刘博 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1082-1086,共5页
目的:研究膜联蛋白A2(Annexin A2)基因沉默对体外培养的肺腺癌细胞系转移能力的影响。方法:体外培养4种转移潜能不同的肺腺癌细胞,采用Transwell迁移模型观察细胞的迁移能力。采用RT-PCR和Western blot分析分别检测细胞中Annexin A2 mRN... 目的:研究膜联蛋白A2(Annexin A2)基因沉默对体外培养的肺腺癌细胞系转移能力的影响。方法:体外培养4种转移潜能不同的肺腺癌细胞,采用Transwell迁移模型观察细胞的迁移能力。采用RT-PCR和Western blot分析分别检测细胞中Annexin A2 mRNA及蛋白的表达。应用RNA干扰技术沉默细胞中Annexin A2表达,观察Annexin A2基因沉默前后细胞迁移能力的变化以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)表达的变化。结果:Annexin A2在高转移潜能的肺腺癌细胞系中呈高表达状态(P<0.01)。Annexin A2基因沉默后,高转移潜能的肺腺癌细胞的迁移能力下降(P<0.05)。p-mTOR在高转移潜能的肺癌细胞中呈明显高表达(P<0.01),Annexin A2基因沉默后,细胞中p-mTOR表达明显下降(P<0.01)。结论:Annexin A2基因沉默显著抑制肺癌细胞的转移能力,Annexin A2对肺腺癌细胞转移能力的调控可能与其激活mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 annexin A2 肺腺癌细胞 转移 MTOR
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转移潜能不同人肝癌细胞系差异蛋白Annexin1的功能解析 被引量：4
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作者 崔杰峰 刘银坤 +7 位作者 代智 周海君 宋海燕 张丽君 张予 孙瑞霞 陈洁 汤钊猷 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1141-1149,共9页
解析比较蛋白质组学筛出的差异蛋白Annexin1的生物学功能,证实其是否在肝癌转移复发中发挥作用.分别以RT-PCR、蛋白质印迹及细胞免疫化学对差异蛋白Annexin1在转移潜能不同人肝癌细胞系中的表达情况进行再验证,然后构建Annexin1反义表... 解析比较蛋白质组学筛出的差异蛋白Annexin1的生物学功能,证实其是否在肝癌转移复发中发挥作用.分别以RT-PCR、蛋白质印迹及细胞免疫化学对差异蛋白Annexin1在转移潜能不同人肝癌细胞系中的表达情况进行再验证,然后构建Annexin1反义表达质粒,转染高转移潜能人肝癌细胞系MHCC97H,通过对MHCC97H细胞的运动、侵袭、凋亡、生长周期、MMPs分泌、克隆形成等系列检测,观察目的蛋白表达降低对其生物学行为的影响,特别是转移特性的影响.验证结果均证实Annexin1在有转移潜能人肝癌细胞系MHCC97L、MHCC97H中呈高表达.转染Annexin1反义重组表达质粒后,MHCC97H细胞中Annexin1的表达被成功抑制.依据MHCC97H/pcDNA3.1(+)ASAnnexin1,MHCC97H/pcDNA3.1(+),MHCC97H的检测排序,转染反义重组质粒后的MHCC97H细胞穿过上室底膜的细胞数(运动实验)分别为:11.13±3.31,18.88±2.03,21.86±3.38;穿过人工基底膜细胞数(侵袭实验)分别是:16.43±2.23,16.40±1.57,16.86±1.52;细胞平均集落形成率(克隆形成实验)分别为:(14.33±0.46)%,(19.35±0.49)%,(20.25±0.35)%;MHCC97H细胞凋亡比例(FCM分析)依次为22.2%,6.44%,6.97%;细胞周期各时相的比例依次为:G0-G1期79.5%/76.34%/80.5%,S期13.26%/14.4%/9.69%,G2-M期7.25%/9.26%/9.81%;细胞培养上清MMP9的定量结果依次为:26.37!g/L,28.00"g/L,31.90#g/L;MMP2定量结果依次为29.46$g/L,26.37%g/L,26.53&g/L.明胶酶谱分析细胞培养上清显示,转染Annexin1反义重组表达质粒的MHCC97H细胞分泌的MMP9活性与对照比变化不明显.综合上述结果发现,转染Annexin1反义表达质粒MHCC97H细胞运动能力及集落形成率明显降低,凋亡细胞的比例增加,而侵袭潜能,细胞周期时相,细胞分泌MMP2、MMP9的量均变化不明显.提示,差异蛋白Annexin1可能通过影响细胞凋亡和细胞运动在肝癌细胞侵袭转移过程中发挥作用. 展开更多
关键词 人肝癌细胞系 annexin1 转移
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Annexin B1:一种新的细胞凋亡检测用蛋白 被引量：8
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作者 张毅 郭瀛军 +3 位作者 王芳 高远舰 颜宏利 孙树汉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期333-334,共2页
目的 :为细胞凋亡研究提供一种新的检测用蛋白。 方法 :在大肠杆菌中表达AnnexinB1蛋白 ,经离子交换层析后得纯品 ,异硫氰酸荧光黄 (fluoresceinisothiocyanate,FITC)标记AnnexinB1;选用Jarkat细胞 ,羟基喜树碱诱导该细胞凋亡 ;以FITC... 目的 :为细胞凋亡研究提供一种新的检测用蛋白。 方法 :在大肠杆菌中表达AnnexinB1蛋白 ,经离子交换层析后得纯品 ,异硫氰酸荧光黄 (fluoresceinisothiocyanate,FITC)标记AnnexinB1;选用Jarkat细胞 ,羟基喜树碱诱导该细胞凋亡 ;以FITC标记的AnnexinB1检测凋亡细胞。 结果 :FITC标记的AnnexinB1与凋亡细胞膜表面磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)结合 ,使凋亡细胞呈阳性着色 ,能有效检测细胞凋亡。 结论 :开发得到了一种新的细胞凋亡检测用蛋白AnnexinB1,为推广高效快捷的凋亡检测技术提供国产试剂奠定了基础。 展开更多
关键词 annexinB1 细胞凋亡 检测用蛋白
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