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红娘子蛋白提取工艺优化及其对肝癌细胞Bel-7402的影响
1
作者 姜蓉 李正龙 王淑敏 《特产研究》 2025年第2期73-80,共8页
本研究旨在优化红娘子蛋白提取工艺,考察红娘子生品及炮制品蛋白成分对肝癌细胞Bel-7402的影响。试验以蛋白含量为评价指标,考察料液比、超声时间、溶液pH对红娘子蛋白提取的影响,通过正交试验优选最佳提取工艺。体外研究红娘子生品及... 本研究旨在优化红娘子蛋白提取工艺,考察红娘子生品及炮制品蛋白成分对肝癌细胞Bel-7402的影响。试验以蛋白含量为评价指标,考察料液比、超声时间、溶液pH对红娘子蛋白提取的影响,通过正交试验优选最佳提取工艺。体外研究红娘子生品及炮制品蛋白成分对Bel-7402肝癌细胞的影响,CellCountingKit-8检测对细胞活力影响;细胞集落研究对细胞增殖能力影响;划痕试验检测对细胞迁移能力影响;AnnexinV-FITC/PI双染法检测对细胞凋亡影响;WesternBlotting检测相关凋亡蛋白的作用机制。红娘子蛋白最佳提取工艺为红娘子粉末加20倍体积水溶液(pH为10.8),冰水浴超声提取150min。生品及炮制品蛋白可显著降低Bel-7402肝癌细胞存活率,具有良好的抑制肝癌细胞增殖能力,可显著抑制肝癌细胞迁移;显著增加Bel-7402肝癌细胞凋亡率,可促进凋亡相关蛋白BCL2-AssociatedX(Bax)和Caspase-3表达,降低B-cell lymphoma-2(Bcl-2)蛋白表达。优化的红娘子蛋白提取工艺稳定,蛋白含量可达240.55mg/g。红娘子生品及炮制品蛋白成分均具有较好的抑制Bel-7402肝癌细胞迁移及增殖的能力,其机制可能是通过上调抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达、下调促凋亡蛋白Bax蛋白表达,激活Caspase级联反应,上调效应子Caspase-3蛋白表达,从而促进细胞凋亡,且炮制品蛋白效果优于生品蛋白。 展开更多
关键词 红娘子 蛋白质 提取工艺 肝癌细胞BEL-7402 细胞凋亡
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脂质体介导姜黄素抑制Bel-7402细胞增殖和诱导其凋亡的作用 被引量：7
2
作者 李瀚旻 晏雪生 +1 位作者 明安萍 彭亚琴 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2005年第4期214-217,共4页
目的:研究提高姜黄素治疗肝癌生物学效应的新技术和新方法。方法:对比观察脂质体姜黄素水溶制剂对人肝癌细胞(Bel7402)凋亡及凋亡相关调控基因Bax、Bcl2的影响。MTT(四甲基偶氮唑蓝)法观察脂质体姜黄素对Bel7402细胞增殖的抑制作用。原... 目的:研究提高姜黄素治疗肝癌生物学效应的新技术和新方法。方法:对比观察脂质体姜黄素水溶制剂对人肝癌细胞(Bel7402)凋亡及凋亡相关调控基因Bax、Bcl2的影响。MTT(四甲基偶氮唑蓝)法观察脂质体姜黄素对Bel7402细胞增殖的抑制作用。原位末端标记法(TUNEL技术)观察脂质体姜黄素诱导Bel7402细胞凋亡的作用。免疫组织化学染色(SABC)法检测脂质体姜黄素对Bax和Bcl2基因表达的影响。结果:10μg/ml、5μg/ml、2.5μg/ml脂质体姜黄素对Bel7402细胞增殖有显著抑制作用,P<0.01,其抑制率分别为38.67%、26.67%和17.33%,与同浓度的姜黄素的抑制率(29.33%、20.00%、5.33%)比较,差异有显著性意义(P<0.05);增殖抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,3个有效浓度组间差异均有显著性意义(P<0.05)。10μg/ml、5μg/ml、2.5μg/ml脂质体姜黄素处理组Bel7402细胞凋亡率分别为68.9%、43.4%、26.9%,与同浓度姜黄素组的Bel7402细胞凋亡率(53.3%、30.2%、14.9%)比较,差异有显著性意义(P<0.05)。脂质体姜黄素对细胞凋亡相关基因Bax、Bcl2表达的影响,与对照组比较差异无显著性意义。结论:脂质体能显著提高姜黄素对Bel7402细胞增殖的抑制和诱导其凋亡的作用。脂质体姜黄素对Bax、Bcl2的表达无显著影响。 展开更多
关键词 姜黄素/药效学 脂质体/药效学 BEL-7402细胞 细胞凋亡 原位末端标记 免疫组织化学 Bcl-2基因 Bel-7402细胞增殖 脂质体介导 凋亡相关
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基因芯片分析筛选BEL-7402与BEL-7402/FU细胞中的差异miRNA表达基因 被引量：3
3
作者 殷杰 杨晓燕 +4 位作者 虞佳 向琼 李倩 唐惠芳 雷小勇 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2012年第5期374-378,共5页
目的:探讨2种肝癌细胞BEL-7402细胞及BEL-7402/FU细胞中差异表达的miRNA并对其基因表达谱进行生物学信息分析。方法:采用TRIzol一步法提取BEL-7402细胞及BEL-7402/FU细胞的总RNA,并纯化mRNA,反转录合成荧光分子Hy3标记的cDNA探针,与基... 目的:探讨2种肝癌细胞BEL-7402细胞及BEL-7402/FU细胞中差异表达的miRNA并对其基因表达谱进行生物学信息分析。方法:采用TRIzol一步法提取BEL-7402细胞及BEL-7402/FU细胞的总RNA,并纯化mRNA,反转录合成荧光分子Hy3标记的cDNA探针,与基因芯片杂交;采用Genepix Pro 6.0图像分析软件对芯片图像进行分析,把图像信号转化为数字信号,然后以差异为2倍的标准来确定差异表达基因。结果:在333个基因表达谱的筛选中,发现有2个基因表达水平显著上调,331个基因表达水平显著下调。结论:miR-122,miR-195等基因组对表达肝癌细胞耐药基因表达谱有显著的影响,可能参与肝癌耐药的发生、发展。 展开更多
关键词 基因芯片 差异表达 BEL-7402细胞 BEL-7402 FU细胞 MIRNA
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水红花子不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402增殖抑制作用的研究 被引量：4
4
作者 陈红淑 冯耀荣 +2 位作者 童晔玲 余美荣 李昌煜 《中国中医药科技》 CAS 2013年第6期607-608,共2页
目的:观察水红花子不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402生长的抑制作用,筛选其有效作用部位。方法:采用系统溶剂法制备水红花子不同提取物,MTT法观察水红花子不同浓度的各提取物对人肝癌细胞Bel-7402增殖的的抑制作用;通过光学显微镜、透射... 目的:观察水红花子不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402生长的抑制作用,筛选其有效作用部位。方法:采用系统溶剂法制备水红花子不同提取物,MTT法观察水红花子不同浓度的各提取物对人肝癌细胞Bel-7402增殖的的抑制作用;通过光学显微镜、透射电镜观察凋亡细胞的形态学及超微结构的改变,并用流式细胞仪检测其乙酸乙酯提取物对该细胞周期分布及凋亡的影响。结果:水红花子石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取物对人肝癌细胞Bel-7402均有一定的抑制作用,其中乙酸乙酯提取物抑制作用最明显,呈现较好的剂量-效应曲线;流式细胞仪检测发现水红花子乙酸乙酯提取物可阻滞Bel-7402细胞周期于G0/G1期,诱导肿瘤细胞凋亡。结论:水红花子乙酸乙酯提取物可能是其抗肝癌作用的有效部位之一。 展开更多
关键词 水红花子 药理学Bel-7402 药物作用 Bel一7402 超微结构体外研究
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蒺藜皂苷对人肝癌细胞BEL7402生长抑制和诱导凋亡作用的研究 被引量：17
5
作者 孙斌 瞿伟菁 +3 位作者 张晓玲 杨煌建 庄秀园 章平 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期681-684,共4页
目的 :探讨蒺藜皂苷 (STT)对体外培养的人肝癌细胞BEL 74 0 2的增殖抑制作用及诱导凋亡作用。方法 :应用MTT与SRB法检测蒺藜皂苷对人肝癌细胞BEL 74 0 2的抑制作用 ,采用形态学观察以及流式细胞术 (FCM)检测了STT诱导人肝癌细胞BEL 74 ... 目的 :探讨蒺藜皂苷 (STT)对体外培养的人肝癌细胞BEL 74 0 2的增殖抑制作用及诱导凋亡作用。方法 :应用MTT与SRB法检测蒺藜皂苷对人肝癌细胞BEL 74 0 2的抑制作用 ,采用形态学观察以及流式细胞术 (FCM)检测了STT诱导人肝癌细胞BEL 74 0 2凋亡的效应 ,采用流式细胞术检测BEL 74 0 2细胞Bcl 2蛋白表达。结果 :①STT能够剂量依赖地抑制人肝癌细胞BEL 74 0 2的增殖 ;②细胞显现典型的凋亡形态学改变 ,FCM出现凋亡峰 ;③STT能降低BEL 74 0 2细胞的Bcl 2蛋白表达。结论 :STT在体外能抑制BEL 74 0 2细胞的增殖并能诱导细胞凋亡 ,其诱导凋亡作用的途径之一是下调Bcl 2蛋白表达。 展开更多
关键词 蒺藜皂苷 肝癌细胞 BEL-7402 生长抑制 细胞凋亡 肿瘤 STT
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白头翁皂苷调节Bel-7402人肝癌异体移植瘤裸鼠能量代谢的研究 被引量：21
6
作者 罗颖颖 陈兰英 +5 位作者 简晖 崔亚茹 谢欣序 刘鹏 杨世林 郭建生 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期973-977,共5页
目的考察白头翁Pulsatilla chinensis皂苷对人肝癌Bel-7402荷瘤裸鼠异体移植瘤的抑制作用,并从能量代谢角度探讨其作用机制。方法制备人肝癌Bel-7402裸鼠异体移植瘤模型,通过肿瘤体积、抑瘤率观察白头翁皂苷的体内抗肿瘤活性;生物化学... 目的考察白头翁Pulsatilla chinensis皂苷对人肝癌Bel-7402荷瘤裸鼠异体移植瘤的抑制作用,并从能量代谢角度探讨其作用机制。方法制备人肝癌Bel-7402裸鼠异体移植瘤模型,通过肿瘤体积、抑瘤率观察白头翁皂苷的体内抗肿瘤活性;生物化学法检测瘤块组织乳酸及ATP的量以观察白头翁皂苷对能量代谢的调节作用;ELISA法检测白头翁皂苷对能量代谢相关酶变化的影响;Western blotting法检测白头翁皂苷对能量代谢调控蛋白缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。结果白头翁皂苷能较好地抑制肝癌荷瘤裸鼠异体移植瘤的生长,可明显减小肿瘤体积,白头翁皂苷400、200、100 mg/kg抑瘤率依次为42.8%、31.5%、14.9%,呈剂量依赖关系,且对血液白细胞(WBC)无明显影响;白头翁皂苷能明显降低瘤块组织中乳酸和ATP的量;白头翁皂苷可降低糖酵解关键酶己糖激酶-II(HK-II)、磷酸果糖激酶(PFK)及丙酮酸激酶(PK)的量,提高三羧酸循环关键酶琥珀酸脱氢酶(SDH)的量;Western blotting检测结果显示白头翁皂苷可明显降低瘤块组织HIF-1α蛋白的表达。结论白头翁皂苷具有较好的体内抗肿瘤作用,其可能通过HIF-1α通路调节肿瘤细胞能量代谢,来达到抑制肿瘤生长的作用。 展开更多
关键词 白头翁皂苷 Bel-7402肝癌 抗肿瘤 能量代谢 糖酵解
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温阳散结中药诱导BEL-7402细胞凋亡的初步研究 被引量：23
7
作者 张侠 刘端棋 +2 位作者 刘彦珠 王沛 陈信义 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第7期428-430,共3页
目的 :探讨温阳散结中药的抗肿瘤机制 ,研究温阳散结中药诱导BEL 740 2细胞凋亡作用。方法 :采用细胞形态学、原位末端标记和流式细胞技术 ,观察温阳散结中药对BEL 740 2细胞的影响。结果 :BEL 740 2细胞经中药处理后 ,光镜下可见凋亡... 目的 :探讨温阳散结中药的抗肿瘤机制 ,研究温阳散结中药诱导BEL 740 2细胞凋亡作用。方法 :采用细胞形态学、原位末端标记和流式细胞技术 ,观察温阳散结中药对BEL 740 2细胞的影响。结果 :BEL 740 2细胞经中药处理后 ,光镜下可见凋亡细胞的形态学特征性改变 ,TUNEL标记阳性 ,流式细胞仪分析DNA含量 ,在非凋亡细胞二倍体峰 (G1)之前细胞出现典型的凋亡细胞峰 (Ap峰 )。 0 0 0 5g·ml-1中药组和 0 0 1g·ml-1中药组发生凋亡的细胞数分别为 13 9%和 2 1 6 %。结论 :温阳散结中药可诱导BEL 740 2细胞发生凋亡 ,并有随浓度升高作用增强的趋势 ,实验结果表明 ,诱导肿瘤细胞凋亡可能是温阳散结中药治疗肝癌的作用机理之一。 展开更多
关键词 BEL-7402细胞 浊国阳散结中药 细胞凋亡 肝癌
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高良姜素诱导肝癌BEL-7402细胞凋亡的研究 被引量：20
8
作者 罗辉 马超 +3 位作者 汪亚君 陈杰 刘江琴 张海涛 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1204-1207,共4页
目的：研究高良姜素诱导肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡。方法：MTT法测定BEL-7402细胞毒性及细胞生长，荧光显微镜观察细胞形态学的变化，流式细胞仪分析细胞周期和线粒体膜电位的变化。发色底物法检测Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活... 目的：研究高良姜素诱导肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡。方法：MTT法测定BEL-7402细胞毒性及细胞生长，荧光显微镜观察细胞形态学的变化，流式细胞仪分析细胞周期和线粒体膜电位的变化。发色底物法检测Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活性变化。结果：高良姜素对BEL-7402细胞IC50为30．15mg／L，BEL．7402细胞生长曲线表明，高良姜素浓度增高，生长率明显下降。细胞凋亡可在20～80mg／L高良姜素处理后24h出现。凋亡细胞主要表现为核染色质固缩，荧光染色增强。高良姜素阻断细胞于G1期，线粒体膜电位降低。Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9被激活，呈时间依赖性改变。高良姜素处理BEL-7402细胞6h时Caspase-9活性最高，而Caspase-6活性在12h达峰值，Caspase-3活性峰值时间在18h。结论：高良姜素可以诱导BEL-7402细胞发生凋亡，其途径可能是通过线粒体旁路。 展开更多
关键词 高良姜素 BEL-7402 荧光 凋亡 线粒体膜电位
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蜂毒素对人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤生长及肿瘤血管生成的影响 被引量：26
9
作者 宋长城 吕祥 +3 位作者 程彬彬 杜娟 李柏 凌昌全 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1315-1322,共8页
背景与目的:蜂毒素体外抗骨肉瘤、白血病及宫颈癌的研究已有报道。我们先前的实验发现蜂毒素能够抑制人肝癌细胞株BEL-7402细胞增殖,并诱导其凋亡。本研究拟探讨蜂毒素在裸小鼠体内的抗肝癌作用及其对肿瘤血管生成的影响。方法:建立人肝... 背景与目的:蜂毒素体外抗骨肉瘤、白血病及宫颈癌的研究已有报道。我们先前的实验发现蜂毒素能够抑制人肝癌细胞株BEL-7402细胞增殖,并诱导其凋亡。本研究拟探讨蜂毒素在裸小鼠体内的抗肝癌作用及其对肿瘤血管生成的影响。方法:建立人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为5组:生理盐水对照组(10ml/kg)、阳性对照组(沙利度胺,200mg/kg)、蜂毒素低剂量组(40μg/kg)、蜂毒素中剂量组(60μg/kg)和蜂毒素高剂量组(80μg/kg)。测量各组裸鼠肿瘤体积,观察蜂毒素的体内抗肿瘤作用。光镜下观察肿瘤组织及瘤内血管形态。采用免疫组织化学SABC法检测微血管密度(microvessel density,MVD)及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和核转录因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)蛋白表达。应用实时荧光定量PCR法检测BEL-7402细胞VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达。结果:蜂毒素低、中、高剂量组裸鼠肿瘤相对体积(V/V0)分别为4.42±0.58、3.47±0.97和3.06±1.23,与生理盐水对照组(V/V0为9.06±1.45)相比,蜂毒素处理组肿瘤体积明显缩小(P<0.01)。与生理盐水对照组MVD(16.50±2.35)比较,蜂毒素低、中、高剂量组肿瘤组织MVD(11.33±1.86、9.17±1.17和6.67±1.21)明显降低(P<0.01)。显微镜下可见蜂毒素各剂量组肿瘤组织呈片状坏死,肿瘤间质内可见肿瘤血管,并有血管破坏现象。蜂毒素低、中、高剂量组肿瘤组织VEGF(2.59±0.27、2.61±0.17和1.55±0.22)、bFGF(2.45±0.78、2.27±0.36和2.10±0.27)及NF-κB(2.79±0.29、2.71±0.66和2.26±0.56)阳性表达指数均低于生理盐水对照组(3.80±0.60、4.43±0.34和4.98±0.63)(P<0.01)。实时荧光定量PCR检测显示,蜂毒素能够抑制BEL-7402细胞VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达。结论:蜂毒素能够明显抑制人肝癌BEL-7402细胞裸鼠移植瘤的生长,影响NF-κB表达、下调VEGF和bFGF的表达、抑制肝癌血管生成可能是其抗肿瘤作用的重要机理之一。 展开更多
关键词 蜂毒素/药理学 BEL-7402细胞移植瘤 血管生成抑制剂 小鼠
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白花蛇舌草体外对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402抗肿瘤活性的研究 被引量：41
10
作者 于春艳 李薇 +3 位作者 刘玉和 盖小东 张维瑜 陆军 《北华大学学报（自然科学版）》 CAS 2004年第3期221-223,共3页
目的探讨白花蛇舌草在体外对肝癌多药耐药细胞Bell-7402生长活性的抑制作用.方法 MTT法检测白花蛇舌草提取物对Bel-7402生长的抑制作用,有无逆转Bel-7402的多药耐药性;用淋巴细胞转化实验检测白花蛇舌草提取物能刺激T淋巴细胞增殖,并筛... 目的探讨白花蛇舌草在体外对肝癌多药耐药细胞Bell-7402生长活性的抑制作用.方法 MTT法检测白花蛇舌草提取物对Bel-7402生长的抑制作用,有无逆转Bel-7402的多药耐药性;用淋巴细胞转化实验检测白花蛇舌草提取物能刺激T淋巴细胞增殖,并筛选出药物的安全剂量范围;集落形成实验观察体外抗癌药物的敏感性.结果白花蛇舌草提取物对肝癌多药耐药细胞Bel-7402的生长具有明显的抑制作用,且这种作用是剂量依赖关系.结论白花蛇舌草提取物在体外对人肝癌多药耐药细胞Be1-7402有抑制作用. 展开更多
关键词 白花蛇舌草 BEL-7402 淋巴细胞转化 多药耐药
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虫草素对人肝癌Bel-7402细胞抑制及作用机制的研究 被引量：25
11
作者 卢群 罗少洪 +1 位作者 何伟彬 梅文杰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1477-1477,共1页
虫草素是虫草的主要活性成分,具有抗肿瘤、抑菌、抑制病毒、抑制蛋白质激酶活性等作用[1-2]。研究证明虫草素能抑制mRNA的合成,诱导细胞凋亡,促进细胞分化,对多种肿瘤细胞的生长具有抑制作用[1-2]。诱导肿瘤细胞凋亡以及作用靶点已成研... 虫草素是虫草的主要活性成分,具有抗肿瘤、抑菌、抑制病毒、抑制蛋白质激酶活性等作用[1-2]。研究证明虫草素能抑制mRNA的合成,诱导细胞凋亡,促进细胞分化,对多种肿瘤细胞的生长具有抑制作用[1-2]。诱导肿瘤细胞凋亡以及作用靶点已成研究的焦点。为探讨虫草素诱导肿瘤细胞凋亡的新靶点。 展开更多
关键词 虫草素 人肝癌Bel-7402细胞 抑制 凋亡 机制 P53 BCL-2
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根皮素诱导肝癌BEL-7402细胞凋亡 被引量：18
12
作者 罗辉 汪亚君 +2 位作者 陈杰 刘江琴 张海涛 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1249-1251,共3页
目的研究根皮素诱导肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡。方法MTT法测定BEL-7402细胞毒性,荧光显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞仪分析细胞周期和线粒体膜电位的变化。发色底物法检测Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活性变化。结果根皮素... 目的研究根皮素诱导肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡。方法MTT法测定BEL-7402细胞毒性,荧光显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞仪分析细胞周期和线粒体膜电位的变化。发色底物法检测Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活性变化。结果根皮素对BEL-7402细胞IC50在89.23μg/mL。BEL-7402细胞生长曲线表明,根皮素浓度增高,生长率明显下降。细胞凋亡可在40-160μg/mL根皮素处理后24h出现。凋亡细胞主要表现为核染色质固缩,荧光染色增强。根皮素阻断细胞于G1期,线粒体膜电位降低。Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9被激活,呈时间依赖性改变。根皮素处理BEL-7402细胞12hCaspase-9活性最高,而Caspase-6活性在18h达峰值,Caspase-3活性峰值时间在24h后。结论根皮素可以诱导BEL-7402细胞发生凋亡,途径可能是通过线粒体旁路。 展开更多
关键词 根皮素 BEL-7402 细胞凋亡 线粒体膜电位
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消瘤平移合剂含药血清诱导肝癌H-7402细胞凋亡的实验研究 被引量：19
13
作者 李秀荣 张丹 +1 位作者 齐元富 孙兆贵 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期684-687,共4页
目的 :观察消瘤平移合剂含药血清对肝癌H 74 0 2细胞凋亡的诱导作用。方法 :运用血清药理学方法 ,选择不同浓度的含药血清与人肝癌H 74 0 2细胞共同孵育 ,于不同时间观察 ,并与空白血清作对照。结果 :消瘤平移合剂含药血清可显著抑制H 7... 目的 :观察消瘤平移合剂含药血清对肝癌H 74 0 2细胞凋亡的诱导作用。方法 :运用血清药理学方法 ,选择不同浓度的含药血清与人肝癌H 74 0 2细胞共同孵育 ,于不同时间观察 ,并与空白血清作对照。结果 :消瘤平移合剂含药血清可显著抑制H 74 0 2细胞的增长 ;H 74 0 2细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变 ,流式细胞仪检测可见亚G1峰 ,凋亡呈含药血清浓度、时间依赖性特点 ,对照组及 5 %、10 %含药血清作用 2 4h ,其凋亡率分别为 0 4 9%、5 5 8%、8 4 6% ,4 8h凋亡率分别为 0 83%、11 5 8%、14 2 5 % ;bcl 2基因检测显示bcl 2基因表达受抑。结论 :消瘤平移合剂可通过诱导肿瘤细胞凋亡 ,发挥其临床抗肿瘤、抗转移的作用。 展开更多
关键词 消瘤平移合剂 血清药理学 细胞凋亡 H-7402细胞株 肝癌 中药 抗肿瘤药 实验研究
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脂蟾毒配基通过线粒体途径诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的研究 被引量：20
14
作者 黄应申 肖军军 +3 位作者 孟书聪 董晓敏 王传社 果德安 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第20期1141-1145,共5页
目的:探讨中药蟾酥主要成份之一脂蟾毒配基(Resibufogenin,RG)诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养Bel-7402细胞,采用酸性磷酸酶法检测RG对细胞增殖抑制作用;吖啶橙荧光染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡... 目的:探讨中药蟾酥主要成份之一脂蟾毒配基(Resibufogenin,RG)诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养Bel-7402细胞,采用酸性磷酸酶法检测RG对细胞增殖抑制作用;吖啶橙荧光染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位(△ψm)变化;WesternBlot检测与细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果:RG显著抑制细胞增殖,其作用24、48、72h的IC50分别为3.8、1.8、1.2"mol/L;经10"mol/LRG处理24h后,癌细胞出现凋亡的形态变化,其凋亡率明显高于对照组细胞;RG引起△ψm下降,释放入胞质中的细胞色素c(cytochromec,CytC)增多,促进Caspase-3蛋白活化,抑制Bcl-2蛋白表达,诱导细胞凋亡。结论:RG诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡,其诱导凋亡作用可能通过线粒体通路实现。 展开更多
关键词 脂蟾毒配基 细胞凋亡 人肝癌Bel-7402细胞 线粒体跨膜电位(△ψm)
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榄香烯对人肝癌细胞7402、宫颈癌细胞Hela的凋亡诱导作用及下调Bcl-2蛋白表达 被引量：26
15
作者 孙等军 方琴 王季石 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期403-405,共3页
目的　研究中药榄香烯对人肝癌细胞 740 2、宫颈癌细胞Hela的体外抑瘤效应及其作用机制。方法　应用MTT比色法观察榄香烯对细胞的生长抑制作用 ;荧光显微镜和透射电镜观察细胞结构的改变 ;DNA凝胶电泳和流式细胞术等分析细胞凋亡、周期... 目的　研究中药榄香烯对人肝癌细胞 740 2、宫颈癌细胞Hela的体外抑瘤效应及其作用机制。方法　应用MTT比色法观察榄香烯对细胞的生长抑制作用 ;荧光显微镜和透射电镜观察细胞结构的改变 ;DNA凝胶电泳和流式细胞术等分析细胞凋亡、周期变化及Bcl 2蛋白表达情况。结果　榄香烯对 740 2和Hela细胞有较强的体外增殖抑制作用。榄香烯能诱导 740 2和Hela细胞凋亡 ,同时伴随有Bcl 2蛋白表达下调。结论　榄香烯对 740 2、Hela细胞有较强的抗瘤效应 ,其可能与Bcl 展开更多
关键词 榄香烯 细胞凋亡 HELA细胞 BCL-2蛋白 肝癌 7402细胞 宫颈癌
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柴胡提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度和细胞内VCR蓄积的影响 被引量：17
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作者 韩晓红 盖晓东 +1 位作者 薛延军 陈淼 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期314-317,共4页
目的:测定中药柴胡(BupleurumChineseDC,BCDC)提取物对人肝癌BEL-7402细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)和长春新碱(Vincristine,VCR)浓度的影响,探索柴胡提取物逆转BEL-7402细胞多药耐药的机制。方法:以Fura2/AM为细胞内钙离子的荧光指示... 目的:测定中药柴胡(BupleurumChineseDC,BCDC)提取物对人肝癌BEL-7402细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)和长春新碱(Vincristine,VCR)浓度的影响,探索柴胡提取物逆转BEL-7402细胞多药耐药的机制。方法:以Fura2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,用双波长荧光分光光度计分别测定不同条件下的BEL7402细胞内[Ca2+]i。高效液相色谱法测定BCDC作用于BEL-7402后细胞内VCR蓄积情况的变化。结果:柴胡提取物可使人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度下降(P<0.001),可使细胞内VCR浓度升高(P<0.01)。结论:柴胡提取物可以增加VCR在BEL7402细胞内的积聚浓度,部分逆转BEL7402细胞的多药耐药(multidrugresistance,MDR)。钙离子通道阻滞作用可能为柴胡提取物逆转BEL7402细胞多药耐药的机制之一。 展开更多
关键词 柴胡提取物 治疗应用 细胞内游离钙 FURA-2/AM 高效液相色谱法 BEL-7402细胞
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胡桃醌对人肝癌BEL-7402细胞亚显微结构的影响 被引量：11
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作者 陈丽 那顺巴雅尔 +2 位作者 张建 于娟 顾为望 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1208-1211,共4页
目的了解胡桃醌对人肝癌BEL-7402细胞亚显微结构的影响。方法12.5μmol/L胡桃醌作用于BEL-7402细胞24h后固定,分别行HE染色、考马斯亮蓝染色、扫描电镜及透射电镜样品制备。结果12.5μmol/L胡桃醌处理组细胞形态和细胞骨架发生改变。扫... 目的了解胡桃醌对人肝癌BEL-7402细胞亚显微结构的影响。方法12.5μmol/L胡桃醌作用于BEL-7402细胞24h后固定,分别行HE染色、考马斯亮蓝染色、扫描电镜及透射电镜样品制备。结果12.5μmol/L胡桃醌处理组细胞形态和细胞骨架发生改变。扫描电镜结果显示BEL-7402细胞胞体体积缩小,与周围细胞群脱离,表面微绒毛卷曲、畸变、小球结构逐渐增多,细胞间连接逐渐断裂,细胞间隙增宽,有凋亡小体形成。透射电镜结果显示胡桃醌作用BEL-7402细胞24h后,细胞内质网扩大,线粒体结构疏松,胞核核仁裂解,凋亡小体形成。结论胡桃醌能有效改变人肝癌BEL-7402细胞亚显微结构,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 BEL-7402 细胞骨架 亚显微结构 细胞凋亡
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苦参碱诱导人肝癌细胞BEL-7402自吞噬性死亡 被引量：15
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作者 皇甫超申 刘彬 +1 位作者 马永超 邓锦波 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1347-1350,共4页
目的研究苦参碱诱导人肝癌BEL-7402细胞自吞噬和自吞噬性死亡作用。方法体外培养人肝癌BEL-7402细胞,应用MTT法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术测定细胞凋亡,自噬体标记物LC3免疫荧光定量检测自吞噬,透射电镜分析细胞自吞噬死亡超微结构... 目的研究苦参碱诱导人肝癌BEL-7402细胞自吞噬和自吞噬性死亡作用。方法体外培养人肝癌BEL-7402细胞,应用MTT法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术测定细胞凋亡,自噬体标记物LC3免疫荧光定量检测自吞噬,透射电镜分析细胞自吞噬死亡超微结构改变。结果苦参碱抑制细胞增殖呈质量浓度依赖性,作用48h的IC50值为1.1mg/mL;0.6～1.6mg/mL苦参碱作用12h可诱导BEL-7402细胞凋亡逐渐增多,1.2mg/mL作用12h时细胞凋亡率达(44.88±0.78)%;1.2mg/mL苦参碱持续作用可以诱导自吞噬阳性细胞逐渐增多,作用12h时自吞噬阳性细胞达(63.16±0.29)%;超微结构显示细胞凋亡呈现自噬性细胞死亡特点。结论苦参碱体外能诱导BEL-7402细胞自吞噬和自噬性死亡。 展开更多
关键词 苦参碱 自噬 自噬性死亡 肝癌细胞BEL-7402
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三种蟾毒单体对SMMC-7721和BEL-7402人肝癌细胞生长的抑制作用 被引量：57
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作者 苏永华 尹西才 +2 位作者 谢觉民 高波 凌昌全 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期393-395,共3页
目的:探讨蟾蜍中主要蟾毒内酯类成分蟾毒灵、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基的抗肝癌作用及机制。方法:以SMMC-7721、BEL-7402人肝癌细胞为靶细胞,以丝裂霉素为阳性对照药物,应用四甲基偶氮唑盐比色法、锥虫蓝染色和DNA染色分析法观察这3种蟾... 目的:探讨蟾蜍中主要蟾毒内酯类成分蟾毒灵、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基的抗肝癌作用及机制。方法:以SMMC-7721、BEL-7402人肝癌细胞为靶细胞,以丝裂霉素为阳性对照药物,应用四甲基偶氮唑盐比色法、锥虫蓝染色和DNA染色分析法观察这3种蟾毒单体对肝癌细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。结果:蟾毒灵和华蟾酥毒基对上述肝癌细胞具有明显生长抑制作用,华蟾酥毒基较蟾毒灵作用略弱,但两者达到相同生长抑制效果所需浓度均低于丝裂霉素,酯蟾毒配基只有在较高浓度下才显示对肝癌细胞的生长抑制作用;不同浓度蟾毒灵、华蟾酥毒基对人肝癌细胞细胞膜具有破坏作用;可使人肝癌细胞阻止于G2/M期,使处于S期的细胞比例降低,并有明显诱导肝癌细胞凋亡作用。结论:蟾毒灵、华蟾酥毒基对上述人肝癌细胞具有明显生长抑制作用,具有对肝癌细胞膜的直接破坏作用和诱导凋亡作用;酯蟾毒配基抗肿瘤作用较弱。 展开更多
关键词 蟾毒单体 SMMC—7721 BEL—7402 肝癌 细胞生长 抑制作用
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大蒜素诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡 被引量：23
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作者 邵红莲 辛华 +3 位作者 翟玉梅 高选 王茜 高海青 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期290-291,T016,共3页
目的　探讨大蒜素诱导人肝癌BEL 740 2细胞凋亡作用。　方法　MTT法检测大蒜素对BEL 740 2细胞的生长抑制作用 ,光镜、电镜、流式细胞术观察大蒜素诱导BLE 740 2细胞凋亡作用。　结果　 10、2 0、40ml L大蒜素皆能抑制BEL 740 2细胞生... 目的　探讨大蒜素诱导人肝癌BEL 740 2细胞凋亡作用。　方法　MTT法检测大蒜素对BEL 740 2细胞的生长抑制作用 ,光镜、电镜、流式细胞术观察大蒜素诱导BLE 740 2细胞凋亡作用。　结果　 10、2 0、40ml L大蒜素皆能抑制BEL 740 2细胞生长 ,其抑制作用与剂量、作用时间呈正相关。 6 0mg L大蒜素作用 3h ,BEL 740 2细胞出现典型凋亡形态学变化 :细胞体积缩小 ,微绒毛消失 ,染色质浓聚、边集、裂解 ,细胞表面凸起多个小泡或小球状小体 ,凋亡细胞拒染台盼蓝等。台盼蓝染色计数对照组凋亡率 2 0 2± 0 37% ,诱导组凋亡率 78 48± 3 15 % ;流式细胞分析对照组凋亡率 1 78± 0 48% ,诱导组凋亡率 74 0 7± 3 94% ,对照组诱导前时G0 /G1 、S、G2 /M期细胞分别为47 6 6± 2 72 % ,2 2 0 6± 2 0 4% ,30 2 5± 3 78% ,皆低于 74 0 7± 3 94%。　结论　大蒜素诱导人肝癌BEL 740 2细胞凋亡 ,其诱导凋亡效果明显 ,并推测大蒜素诱导BEL 740 展开更多
关键词 大蒜素 肝癌细胞 细胞凋亡 BEL-7402
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