期刊文献+
共找到100篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
ADRA2B gene insertion/deletion polymorphism and artery compliance 被引量:1
1
作者 ZHANG Hai-feng LI Xin-li +7 位作者 XIE Si-feng ZHU Jian WANG Zhen-zhen LIANG Li-rong CAO Ke-jiang DE Wei YUAN Li HUANG Jun 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2005年第21期1797-1802,共6页
Background The ADRA2B gene insertion/deletion (I/D) polymorphism is associated with various cardiovascular and metabolic phenotypes. Large (C1) and small (C2) artery compliance, assessed by pulse wave analysis, ... Background The ADRA2B gene insertion/deletion (I/D) polymorphism is associated with various cardiovascular and metabolic phenotypes. Large (C1) and small (C2) artery compliance, assessed by pulse wave analysis, is considered as sensitive markers or risk factors for cardiovascular disease. Therefore whether the ADRA2B I/D polymorphism is associated with CI and C2 need to be investigated. Methods A total of 227 men and 243 women were enrolled in a Chinese family-based study. C1 and C2 were measured by pulse wave analysis. ADRA2B genotypes were determined by polymerase chain reaction. Statistical methods included generalized estimation equations and quantitative transmission disequilibrium test. Results The II (31.9%), ID (46.8%) and DD (21.3%) genotype frequencies were in Hardy-Weinberg equilibrium (P = 0. 73 ). The covariates selected by stepwise regression for C1 and C2 were age, systolic pressure and gender. The population based association analysis showed that C1 and C2 were not associated with ADRA2B genotype both before (C1 : P =0. 28; C2: P =0. 27) and after (C1 : P =0. 58; C2: P =0. 18) the adjustment. The family-based analyses of 128 informative offspring showed that transmission of the D-allele was not associated with C1 orC2, both before (CI: P=0.42; C2: P=0.85) and after (CI: P=0.31; C2: P= 0. 82) the adjustment. Conclusion The study do not support that the ADRA2B gene I/D polymorphism has a major gene effect on C1 or C2 in the Chinese population of current sample size. 展开更多
关键词 large artery compliance small artery compliance ADRA2b gene
原文传递
Lack of association between ADRA2B-4825 gene insertion/deletion poly- morphism and migraine in Chinese Han population
2
作者 倪健强 贾莎莎 +4 位作者 刘民 陈守恭 姜玉婷 董万利 高玉振 《Neuroscience Bulletin》 SCIE CAS CSCD 2010年第4期322-326,共5页
Objective The present study aimed to estimate the association between susceptibility to migraine and the 12nucleotide insertion/deletion (indel) polymorphism in promoter region ofα 2B -adrenergic receptor gene (AD... Objective The present study aimed to estimate the association between susceptibility to migraine and the 12nucleotide insertion/deletion (indel) polymorphism in promoter region ofα 2B -adrenergic receptor gene (ADRA2B).Methods A case-control study was carried out in Chinese Han population,including 368 cases of migraine and 517 controls.Genomic DNA was extracted from blood samples,and DNA fragments containing the site of polymorphism were amplified by PCR.Data were adjusted for sex,age,migraine history and family history,and analyzed using a logistic regression model.Results There was no association between indel polymorphism and migraine,at either the allele or the genotype level.Conclusion These findings do not support a functional significance of ADRA2B indel polymorphism at position-4825 relative to the start codon in the far upstream region of the promoter in the present migraine subjects. 展开更多
关键词 MIGRAINE promoter ofα 2b -adrenergic receptor gene insertion/deletion polymorphism genetic association
原文传递
酿酒酵母基因转录区核小体缺乏序列对人干扰素α-2b基因表达的影响
3
作者 王淑妍 李宏 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 2025年第5期558-568,共11页
基因编码序列中同义密码子的使用与基因表达紧密相关。将人干扰素α-2b基因编码序列中的密码子替换成酿酒酵母高表达基因的最适同义密码子,并通过RT-qPCR、蛋白质印迹分析和ELISA等方法对比分析了IFNα-2b基因的表达水平。结果显示,优化... 基因编码序列中同义密码子的使用与基因表达紧密相关。将人干扰素α-2b基因编码序列中的密码子替换成酿酒酵母高表达基因的最适同义密码子,并通过RT-qPCR、蛋白质印迹分析和ELISA等方法对比分析了IFNα-2b基因的表达水平。结果显示,优化后IFNα-2b基因的mRNA相对表达水平和蛋白质表达水平显著提高。已知酿酒酵母基因转录调控区±1核小体和它们之间的核小体缺乏区域(NDR)在基因表达调控中具有重要作用,为了考察NDR序列长度对外源基因表达水平的影响,选取了6个酵母基因的转录调控区,以该区域内±1核小体和它们之间的NDR序列作为外源基因的转录调控序列,构建了IFNα-2b基因表达系统。结果显示:在构建的6个调控序列中,将长NDR序列剪短后,IFNα-2b基因的mRNA相对表达水平和蛋白质表达水平显著降低;将短NDR序列加长后,IFNα-2b基因的mRNA相对表达水平和蛋白质表达水平显著提高。研究表明,以±1核小体和NDR序列为转录调控序列构建的表达体系可以调控外源基因的表达水平,该方法为调控外源基因表达提供了一种新的研究思路。 展开更多
关键词 酿酒酵母 人干扰素Α-2b 密码子优化 核小体缺乏区域 基因表达与调控
原文传递
卷烟全烟气暴露对BEAS-2B细胞生物学效应影响的转录组学分析
4
作者 赵俊伟 许亚龙 +2 位作者 李泽之 谢复炜 李翔 《基因组学与应用生物学》 北大核心 2025年第4期418-428,共11页
为了研究卷烟全烟气诱导BEAS-2B细胞生物学效应的分子机制,采用CCK-8法测试卷烟全烟气暴露下的细胞存活率,利用高通量测序技术对暴露后的细胞进行转录组测序,并利用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术对测序结果进行... 为了研究卷烟全烟气诱导BEAS-2B细胞生物学效应的分子机制,采用CCK-8法测试卷烟全烟气暴露下的细胞存活率,利用高通量测序技术对暴露后的细胞进行转录组测序,并利用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术对测序结果进行验证,对测序数据进行差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)分析、GO和KEGG通路分析以及基因共表达网络分析。结果显示,随着卷烟全烟气染毒剂量增加,细胞存活率呈现逐渐降低的趋势,并且具有明显的剂量-效应关系;与细胞对照组相比,卷烟全烟气暴露组共获得239个DEGs,其中126个上调,113个下调;所选的7个DEGs的RT-qPCR结果与转录组测序数据一致;GO和KEGG分析结果显示,DEGs主要参与了细胞因子介导的信号通路、对外源性刺激的反应、炎症反应、细胞凋亡过程、细胞凋亡过程的正向调控和细胞间信号传递等多个生物学过程。DEGs主要富集在TNF信号通路、程序性坏死、铁死亡、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等炎症和氧化应激相关的信号通路。HMOX1、IL1A、MMP1、CXCL1、SOCS3、CSF1、NQO1、CYP1A1、CYP1B1、FOSL1和AREG等为卷烟全烟气诱导细胞生物学效应的枢纽基因。这些结果为揭示卷烟烟气诱导细胞生物学效应的分子机制提供了理论依据。 展开更多
关键词 卷烟烟气 转录组测序 BEAS-2b细胞 差异表达基因(DEGs) 信号通路
原文传递
结核分枝杆菌Rv3621c基因编码蛋白PPE65克隆表达及其对BEAS-2B细胞增殖和TGF-β表达水平的影响
5
作者 黄俊程 薄新文 +7 位作者 李静 陈旭珂 赵家欣 张艳艳 冯昕炜 孙艳 王正荣 齐萌 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第10期1025-1033,共9页
目的探究结核分枝杆菌PPE65蛋白的分子生物学功能,为结核病防控提供基础数据。方法通过生物信息学软件预测PPE65基因编码蛋白的基本生物学性质;利用NCBI网站获取结核分枝杆菌Rv3621c基因及PPE65蛋白序列的基本信息,以H37Rv基因组为模板,... 目的探究结核分枝杆菌PPE65蛋白的分子生物学功能,为结核病防控提供基础数据。方法通过生物信息学软件预测PPE65基因编码蛋白的基本生物学性质;利用NCBI网站获取结核分枝杆菌Rv3621c基因及PPE65蛋白序列的基本信息,以H37Rv基因组为模板,PCR法扩增Rv3621c基因,将其构建到pET22b(+)表达载体,将构建成功的pET22b(+)-PPE65重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中经IPTG诱导表达;对PPE65重组蛋白进行可溶性分析、纯化和鉴定;使用不同浓度PPE65蛋白处理BEAS-2B细胞24 h,经CCK-8细胞增殖检测试剂盒检测其细胞数量。结果PPE65由413个氨基酸组成,蛋白的分子式为C_(1819)H_(2810)N_(482)O_(556)S_(11),相对分子质量为40679.88,理论等电点为4.60,脂肪族指数为81.94,为稳定蛋白,亲水性平均值为0.319,预测为疏水性蛋白,无信号肽和跨膜区。二级结构由α-螺旋(Hh)53.03%;β-折叠(Ee)2.66%,无规则卷曲(Cc)44.31%构成。预测出有38个B细胞抗原表位和22个CTL和Th细胞抗原表位。PPE65基因全长为1308 bp,经双酶切和测序鉴定pET22b(+)-PPE65重组质粒构建正确;经SDS-PAGE分析发现该蛋白以包涵体形式存在,纯化后蛋白在43.7 kDa处出现单一条带。Western blot结果显示,可与小鼠源性His单克隆抗体特异结合,证实PPE65蛋白成功表达。经2.5~20μg/mL梯度浓度的PPE65蛋白处理BEAS-2B细胞后,各试验组细胞数量随着浓度升高呈现上升趋势,与PBS组相比,各试验组TGF-β相对表达量水平显著升高(t_(2.5)=4.893,P<0.001,t_(5.0)=4.640,P<0.05,t_(10)=7.535,P<0.05,t_(20)=16.44,P<0.0001)。结论本研究解析了PPE65蛋白的结构特征,经原核表达和纯化获得重组蛋白,并促进BEAS-2B细胞增殖,其机制可能与抑制TGF-β/Smad信号通路活化有关,为揭示PPE65蛋白在结核感染过程中的作用及调控机制提供理论依据。 展开更多
关键词 Rv3621c基因 PPE65蛋白 结核分枝杆菌 生物信息学 原核表达 BEAS-2b细胞
暂未订购
我国不同CMV分离物2b基因片段的RT-PCR扩增及其序列比较 被引量:11
6
作者 庄木 王晓武 +3 位作者 谢丙炎 郑文光 冯兰香 方智远 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期146-150,共5页
本研究根据黄瓜花叶病毒2b基因的保守序列设计引物,利用一步RT-PCR技术对多个不同寄主和不同地理来源的黄瓜花叶病毒分离物的2b基因片段进行扩增,获得了含该基因全长约90%的cDNA片段(300bp)。序列测定与比较分析结果表明,国内不同CMV... 本研究根据黄瓜花叶病毒2b基因的保守序列设计引物,利用一步RT-PCR技术对多个不同寄主和不同地理来源的黄瓜花叶病毒分离物的2b基因片段进行扩增,获得了含该基因全长约90%的cDNA片段(300bp)。序列测定与比较分析结果表明,国内不同CMV分离物2b基因片段核酸序列同源性达93%以上,推测的氨基酸序列同源性超过90%,且均属于亚组Ⅰ。 展开更多
关键词 CMV分离物 2b基因 基因片段 RT-PCR扩增 黄瓜 花叶病毒 氨基酸 序列同源性
在线阅读 下载PDF
短发夹结构RNA对口蹄疫病毒2B基因瞬时表达的抑制 被引量:9
7
作者 崔丽瑾 王兴龙 +6 位作者 任林柱 伍晓慧 郎需龙 张辉 梅英武 李晓燕 卜朝阳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期532-535,共4页
为探讨siRNA在哺乳动物细胞中对口蹄疫病毒(FMDV)2B基因的抑制作用,针对WFL株FMDV的2B基因,设计了4个siRNA,并将shRNA表达模板插入pSilencer1.0-U6载体,构建shRNA表达质粒,将其与含绿色荧光蛋白报告基因的pEGFP+2B融合表达质粒瞬时共转... 为探讨siRNA在哺乳动物细胞中对口蹄疫病毒(FMDV)2B基因的抑制作用,针对WFL株FMDV的2B基因,设计了4个siRNA,并将shRNA表达模板插入pSilencer1.0-U6载体,构建shRNA表达质粒,将其与含绿色荧光蛋白报告基因的pEGFP+2B融合表达质粒瞬时共转染BHK-21细胞,以荧光显微镜和流式细胞仪检测荧光表达量的变化,以实时定量RT-PCR法检测对2B基因mRNA的抑制作用。结果表明,本试验所构建的针对2B基因的shRNA表达载体可以在BHK-21细胞中抑制2B基因的瞬时表达。 展开更多
关键词 FMDV RNA干扰 2b基因
在线阅读 下载PDF
黄瓜花叶病毒反义2b基因构建及其转基因初步研究 被引量:3
8
作者 庄木 王晓武 +4 位作者 谢丙炎 杨宝军 方智远 黄和艳 郭淑华 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期811-813,共3页
研究构建了CMV反义2b基因的植物表达载体pZM6.2,通过农杆菌侵染的叶盘转化法导入烟草,分子检测证实获得了转反义2b基因的SR1烟草转基因植株,初步的CMV攻毒试验表明反义2b基因可介导对CMV的抗性。在此基础上,将pZM6.2转化番茄品种‘红玛... 研究构建了CMV反义2b基因的植物表达载体pZM6.2,通过农杆菌侵染的叶盘转化法导入烟草,分子检测证实获得了转反义2b基因的SR1烟草转基因植株,初步的CMV攻毒试验表明反义2b基因可介导对CMV的抗性。在此基础上,将pZM6.2转化番茄品种‘红玛瑙213’,获得了卡那霉素抗性苗,PCR检测表明得到了PCR阳性转化株。 展开更多
关键词 黄瓜花叶病毒 反义2b基因 转基因番茄
在线阅读 下载PDF
侵染广东辣椒的黄瓜花叶病毒的CP及2b基因序列分析 被引量:3
9
作者 许东林 周国辉 宋晓兵 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期51-54,共4页
对侵染广东省阳西县田间辣椒的黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic wirus,CMV)的CP及2b基因进行序列分析,结果表明其CP基因与CMV亚组Ⅰ、亚组Ⅱ各株系之间的核苷酸同源率分别为90.9%~93.8%和76.1%~76.9%。氨基酸同源率分别为92.... 对侵染广东省阳西县田间辣椒的黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic wirus,CMV)的CP及2b基因进行序列分析,结果表明其CP基因与CMV亚组Ⅰ、亚组Ⅱ各株系之间的核苷酸同源率分别为90.9%~93.8%和76.1%~76.9%。氨基酸同源率分别为92.7%~97.7%和72.4%~78.1%;其2b基因与CMV亚组Ⅰ、亚组Ⅱ之间的核苷酸同源率分别为83.9%~90.2%和64.0%~67.7%,氨基酸同源率分别为79.3%~85.7%和50.5%~53.5%,由此确认该CMV分离物属于亚组Ⅰ成员.此外,CMV亚组Ⅰ成员的CP及2b基因中分别具有一段长为102bp及54bp的高度保守序列,这为转基因诱导寄主转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing,PTGS)CMV育种研究提供了参考. 展开更多
关键词 辣椒 黄瓜花叶病毒 CP基因 2b基因 序列分析
在线阅读 下载PDF
低温对黄瓜花叶病毒CMV-BG株系2b基因多态性的影响 被引量:2
10
作者 张兴桃 温国蕾 +3 位作者 王晓丹 赵爽 庄木 李艳红 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期51-57,共7页
本文将黄瓜花叶病毒CMV-BG株系侵染普通烟草的不同单株后,放在不同温度下培养,30d后对接种植株症状进行对比观察,并对2b基因表达进行了检测及其序列测定分析。结果表明:被CMV-BG株系侵染的植株在低温条件下,植株新生的大部分叶片严重畸... 本文将黄瓜花叶病毒CMV-BG株系侵染普通烟草的不同单株后,放在不同温度下培养,30d后对接种植株症状进行对比观察,并对2b基因表达进行了检测及其序列测定分析。结果表明:被CMV-BG株系侵染的植株在低温条件下,植株新生的大部分叶片严重畸形,而CMV-BG株系2b基因的表达与不同温度条件没有相关性;CMV2b基因序列与源分离物CMV-BG序列相比发生了较明显的变异,它们作为一组序列与分离物SF/GF/SY等的相似性甚至高于源BG序列;此外,尽管来自2组植物中的病毒序列变化均未表现正选择(positive selection),但来自低温培养的侵染植株的2b基因的多态性明显高于常温条件培养的植株,发生非同义突变的位点数目也高于同义突变的位点数目。因此认为,低温有助于加强CMV-BG株系2b基因的多态性。 展开更多
关键词 黄瓜花叶病毒CMV-BG株系 2b基因多态性 低温
原文传递
妊娠糖尿病患者血糖、血脂水平与CDKN2A/2B基因多态性的相关性 被引量:7
11
作者 刘杰 王淑贞 +2 位作者 王巧莲 杜建国 王贝贝 《标记免疫分析与临床》 CAS 2018年第9期1360-1363,共4页
目的探讨妊娠糖尿病患者血糖、血脂水平与CDKN2A/2B基因多态性的相关性。方法选取2015年1月至2017年1月我院内分泌科、产科收治的妊娠期糖尿病患者120例(GDM组),同时选取同期在我院产科门诊检查糖耐量试验正常的孕妇120例作为对照。检... 目的探讨妊娠糖尿病患者血糖、血脂水平与CDKN2A/2B基因多态性的相关性。方法选取2015年1月至2017年1月我院内分泌科、产科收治的妊娠期糖尿病患者120例(GDM组),同时选取同期在我院产科门诊检查糖耐量试验正常的孕妇120例作为对照。检测两组孕妇CDKN2A/2B基因多态性,并对妊娠期糖尿病患者血糖、血脂水平与CDKN2A/2B基因多态性的相关性进行分析。结果妊娠期糖尿病患者TT、TC基因型的总胆固醇(TC)、空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)高于CC基因型,差异有统计学意义(P<0.05);TT、TC基因型的高密度脂蛋白(HDL)低于CC基因型,差异有统计学意义(P<0.05);两组孕妇CDKN2A/2B基因TT、TC、CC 3种基因型分布差异有统计学意义(P<0.05);GDM组危险等位基因T分布频率显著高于健康对照组(P <0.05)。结论 CDKN2A/2B基因可能是妊娠糖尿病的易感基因之一,TC、TG、LDL、HDL、FBG与CDKN2A/2B基因多态性具有相关性。 展开更多
关键词 妊娠糖尿病 CDKN2A/2b基因多态性 血糖 血脂
暂未订购
Construction of Recombinant Adenovirus Vector Containing CEVB2L Gene 被引量:2
12
作者 邵洪泽 毛文智 +4 位作者 宋阳 李琳 程荣华 孙健 孙强 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2010年第3期94-97,共4页
[Objective] Sheep contagious ecthyma virus B2L gene recombinant adenovirus was built by adenovirus vector system.[Method] Genome DNA extracted from sheep contagious ecthyma virus strain JLSY04 as a template,Gene fragm... [Objective] Sheep contagious ecthyma virus B2L gene recombinant adenovirus was built by adenovirus vector system.[Method] Genome DNA extracted from sheep contagious ecthyma virus strain JLSY04 as a template,Gene fragments obtained from B2L by PCR amplification;B2L gene cloning was cloned into PDNR-CMD vector,screening positive clones and plasmid CTC572-6 was obtained;CTC572-6 plasmid for homologous was recombined with the adenoviral vector.Screening positive clones and bacilli PCR,digestion and sequencing and so on were identified.[Result] After identified by enzyme digestion and gene sequencing,recombinant adenovirus vector CTC572Ade-30 of carrying sheep contagious ecthyma virus B2L gene was constructed successfully.[Conclusion] Which laid the foundation for sheep contagious ecthyma genetically engineered vaccine. 展开更多
关键词 CEV B2L gene Adenovirus vector
在线阅读 下载PDF
口蹄疫病毒2B基因绿色荧光蛋白融合表达质粒的构建及表达 被引量:1
13
作者 崔丽瑾 王兴龙 +6 位作者 梅英武 任林柱 闫广谋 张辉 郎需龙 段小宇 路浩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第9期756-758,共3页
目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光... 目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和2B基因转录水平。结果经双酶切及PCR鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与WFL株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有2B基因的转录。结论已成功构建了FMDV2B基因GFP融合表达质粒,并在BHK-21细胞中获得了表达。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 2b基因 绿色荧光蛋白 融合表达
在线阅读 下载PDF
重组黄瓜花叶病毒2b基因PVX侵染性载体的稳定性分析 被引量:1
14
作者 庄木 王晓武 +1 位作者 方智远 谢丙炎 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期420-425,共6页
本研究利用北京甘蓝CMV分离物(CMV-BG)全长2b基因,构建了含其正义和反义序列的PVX侵染性载体pVX2bS和pVX2bAS,并进行了它们与PVX侵染性载体间的共侵染稳定性实验。结果表明:pVX2bS和pVX2bAS能侵染本氏烟、SR1、Sam sun NN烟草、Shepody... 本研究利用北京甘蓝CMV分离物(CMV-BG)全长2b基因,构建了含其正义和反义序列的PVX侵染性载体pVX2bS和pVX2bAS,并进行了它们与PVX侵染性载体间的共侵染稳定性实验。结果表明:pVX2bS和pVX2bAS能侵染本氏烟、SR1、Sam sun NN烟草、Shepody马铃薯和中蔬5号番茄,与pSfinx相比,表现不同程度的症状延迟效应;pVX2bS和pVX2bAS在22℃/16℃(昼/夜温度)条件下,接种SR1烟草45d仍可检测到重组载体的存在;pVX2bS和pVX2bAS菌液混合接种15d后只能检测到正义或反义一种载体的随机表达,二者交互接种,后接种的一方不能表达。 展开更多
关键词 黄瓜花叶病毒 2b基因 PVX侵染性载体 侵染稳定性
在线阅读 下载PDF
人乳头瘤病毒E7与人干扰素α-2b融合基因在中国仓鼠卵巢细胞中的表达 被引量:1
15
作者 相文忠 王飞 +4 位作者 王群 刘丰 张兆松 苏川 毕志刚 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期430-432,共3页
目的:构建人乳头瘤病毒(HPV)11-E7及人干扰素(IFN)α-2b的真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达。方法:同时用KpnⅠ、EcoRⅠ酶切pET-32a-IFNα-2b-linker-HPV11-E7及pcDNA3.1,将酶切产物纯化回收,两者的回收产物进行连接反应... 目的:构建人乳头瘤病毒(HPV)11-E7及人干扰素(IFN)α-2b的真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达。方法:同时用KpnⅠ、EcoRⅠ酶切pET-32a-IFNα-2b-linker-HPV11-E7及pcDNA3.1,将酶切产物纯化回收,两者的回收产物进行连接反应。连接产物转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,随机挑选阳性克隆并提取质粒酶切鉴定;用脂质体法转染CHO细胞,用免疫荧光法检测融合基因的表达。结果:DNA测序结果显示,成功地将IFN-α-2b-linker-HPV11-E7装入pcDNA3.1的KpnⅠ、EcoRⅠ酶切位点之间,且其序列与设计完全一致;激光扫描共聚焦显微镜观察可见目的蛋白的表达。结论:成功地构建了HPV11-E7及IFNα-2b的真核表达载体,并在CHO细胞中表达,为提高DNA疫苗免疫效果的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 E7基因 干扰素Α-2b 融合基因
在线阅读 下载PDF
赫赛汀联合IFNα-2b对肾癌细胞耐药性的影响 被引量:1
16
作者 王家菁 胡志全 叶章群 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第15期23-25,共3页
目的了解赫赛汀联合干扰能α-2b(IFNα-2b)对肾癌细胞系在体外的杀伤抑制作用,同时检测肾癌细胞在药物作用前后人类表皮生长因子受体2(HER2)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达情况。方法肾癌细胞系通过细胞培养技术进行培养,用... 目的了解赫赛汀联合干扰能α-2b(IFNα-2b)对肾癌细胞系在体外的杀伤抑制作用,同时检测肾癌细胞在药物作用前后人类表皮生长因子受体2(HER2)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达情况。方法肾癌细胞系通过细胞培养技术进行培养,用四唑比色法观察赫赛汀联合干扰能对该细胞系的抑制杀伤效果,应用链霉抗生物素—过氧化物酶免疫组织化学(SP)法测定HER2、γ-GCS表达情况。结果赫赛汀联合IFNα-2b对肾癌细胞的生长抑制及耐药性呈时间和剂量依赖性。经药物处理后,HER2、γ-GCS表达明显下降(P<0.05)。结论赫赛汀能有效抑制肾癌细胞的生长,对瘤细胞的耐药性也有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 肾细胞癌 赫赛汀 干扰能α-2b 基因表达 耐药性 肿瘤细胞
暂未订购
CDKN2A/2B基因单核苷酸多态性与妊娠期糖尿病的相关性 被引量:2
17
作者 刘念 于祥远 +2 位作者 秦林原 张军 余红平 《广西医学》 CAS 2019年第13期1673-1677,共5页
目的探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子2A/2B(CDKN2A/2B)基因单核苷酸多态性(SNP)与妊娠期糖尿病(GDM)发生风险的关系。方法选择459例GDM患者为病例组,571例正常妊娠者为对照组。通过相关数据库及文献筛选CDKN2A/2B基因的7个候选SN... 目的探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子2A/2B(CDKN2A/2B)基因单核苷酸多态性(SNP)与妊娠期糖尿病(GDM)发生风险的关系。方法选择459例GDM患者为病例组,571例正常妊娠者为对照组。通过相关数据库及文献筛选CDKN2A/2B基因的7个候选SNP位点,并对其进行基因分型。采用多因素Logistic回归模型评估候选SNP位点与GDM的相关性,采用多因子降维法评估候选SNP位点的单独或联合作用对妊娠期女性发生GDM的影响。结果多因素回归分析结果显示,与携带CDKN2A/2B基因rs10811661位点CC基因型的孕妇比较,携带TC或TT基因型的孕妇GDM患病风险升高(均P<0.05);在显性遗传模型下,与CC基因型携带者比较,携带TC/TT基因型的孕妇发生GDM的风险升高(P<0.05)。多因子降维分析结果显示,最优单位点模型为rs10811661位点(P<0.05);SNP-SNP联合作用与GDM发病存在关联,rs10811661-rs7036656-rs1063192-rs3217986位点的交互作用可增加GDM发病风险(P<0.05)。结论 CDKN2A/2B基因rs10811661位点多态性与GDM发生有关,SNP单独和联合作用均可影响妊娠期女性对GDM的易感性。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子2A/2b基因 单核苷酸多态性 rs10811661位点 发病风险
暂未订购
沉默抑制子CMV 2b基因的克隆及其反向重复植物表达载体的构建 被引量:1
18
作者 宋培培 李爽 +3 位作者 檀根甲 贾琳 丁菲 江彤 《激光生物学报》 CAS CSCD 2010年第3期347-352,共6页
从安徽亳州采集表现明显CMV症状的烟草样本,取ELISA检测阳性反应最强的样本提取总RNA。设计特异性引物扩增CMV RNA2部分片段,克隆并测序。其中包含的2b基因全长336个核苷酸,编码111个氨基酸。将来源于安徽烟草的CMV 2b基因与其它CMV 2b... 从安徽亳州采集表现明显CMV症状的烟草样本,取ELISA检测阳性反应最强的样本提取总RNA。设计特异性引物扩增CMV RNA2部分片段,克隆并测序。其中包含的2b基因全长336个核苷酸,编码111个氨基酸。将来源于安徽烟草的CMV 2b基因与其它CMV 2b基因进行序列比对,结果表明,来源于安徽烟草的CMV2b基因与来源于韩国的2b基因AF033667的核苷酸序列相似性最高,达98.8%。构建2b基因系统关系树,也表明来源于安徽烟草的CMV 2b基因与AF033667亲缘关系最近。以安徽CMV 2b为模板,分别扩增大小约为300 bp的正向片段CMV 2b(r)和反向片段CMV 2b(i)。先后将反向片段CMV 2b(i)和正向片段CMV 2b(r)分别插入载体pSK-In所含intron两侧,获得重组质粒pSK-2b(r)-In-2b(i)。再将含intron的正反向片段插入pBIN438,最终得到含CMV 2b部分序列反向重复的植物表达载体pBIN-2b(r)-In-2b(i)。 展开更多
关键词 CMV 2b基因 沉默抑制子 反向重复表达载体 构建
在线阅读 下载PDF
p16基因与干扰素α-2b对黑色素瘤细胞A375生长的影响 被引量:6
19
作者 金宛宛 马新华 +2 位作者 赵明 陈仕胜 高宇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第19期3122-3124,共3页
目的:探讨p16基因与干扰素(IFN)-α-2b对黑色素瘤A375细胞生长的影响。方法 :将pDC312CMV-p16质粒转染进黑色素瘤A375细胞;检测细胞内源性和外源性p16基因mRNA表达差异;予转染组与非转染组A375细胞不同浓度IFN-α-2b,光镜下观察细胞形... 目的:探讨p16基因与干扰素(IFN)-α-2b对黑色素瘤A375细胞生长的影响。方法 :将pDC312CMV-p16质粒转染进黑色素瘤A375细胞;检测细胞内源性和外源性p16基因mRNA表达差异;予转染组与非转染组A375细胞不同浓度IFN-α-2b,光镜下观察细胞形态变化;MTT检测IFN-α-2b对细胞生长的抑制作用。结果:未转染组无p16基因表达,转染组表达p16基因;转染组较非转染组细胞抑制率高,且差异有显著性(P<0.05)。光镜下,转染组及IFN-α-2b处理后A375细胞均呈凋亡状态。IFN-α-2b可抑制A375细胞增殖,抑制作用随浓度增加而增强(P<0.05);转染与给药存在交互效应(P<0.05)。结论:p16基因和IFN-α-2b均能抑制黑色素瘤A375细胞增殖,且存在交互作用。 展开更多
关键词 黑色素瘤 P16 干扰素Α-2b 转染
暂未订购
妊娠糖尿病与CDKN2A/2B基因多态性的相关性及危险因素研究 被引量:3
20
作者 胡娟 叶枫 《世界临床药物》 CAS 2016年第7期494-497,共4页
目的 探讨妊娠糖尿病(GDM)与CDKN2A/2B基因多态性的相关性及其危险因素。方法 以2015年1月~2015年12月就诊于我院妇产科的孕妇为研究对象,纳入GDM孕妇(GDM组)65例,同期糖耐量正常孕妇(NGT组)65例。检测两组孕妇CDKN2A/2B基因rs108... 目的 探讨妊娠糖尿病(GDM)与CDKN2A/2B基因多态性的相关性及其危险因素。方法 以2015年1月~2015年12月就诊于我院妇产科的孕妇为研究对象,纳入GDM孕妇(GDM组)65例,同期糖耐量正常孕妇(NGT组)65例。检测两组孕妇CDKN2A/2B基因rs10811661位点多态性,并对可能影响GDM的因素进行分析。结果 CDKN2A/2B基因rs10811661位点表现为CC/TC/TT三种基因型,CC、TC和TT基因型所占比例,NGT组分别为26.15%、43.08%和30.77%,GDM组分别为6.15%、49.23%和44.62%,两组基因型分布差异具有统计学意义(P=0.007)。NGT组和GDM组C和T等位基因分布频率分别为47.69%、52.31%和30.77%和69.23%,两组差异具有统计学意义(P=0.005)。携带T等位基因(TC+TT)的GDM发病率更高(P=0.002)。此外,携带T等位基因(TC+TT)、年龄、体质量指数(BMI)、C反应蛋白、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β),GDM组和NGT组比较差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论 GDM发病风险与CDKN2A/2B基因rs10811661位点多态性相关,而携带T等位基因、年龄、BMI、C反应蛋白、HOMA-IR和HOMA-β可能是GDM发病的独立危险因素。 展开更多
关键词 妊娠糖尿病 CDKN2A/2b 基因多态性 危险因素
原文传递
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部