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基于滚环扩增的实时定量荧光/紫外照射可视化双模态信号输出生物传感器检测大肠埃希氏菌O157:H7
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作者 张敬鑫 汤嘉宁 +8 位作者 韩冰妍 王毅佳 张思琪 池林叶 王洁 韩爱云 邓蕊 李亚楠 陈永民 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第4期368-375,共8页
为开发一种可视化、特异性好、灵敏度高的检测食品中大肠埃希氏菌(Escherichia coli)O157:H7的方法,该研究选择Escherichia coli O157:H7的rfbE基因作为目的序列,针对目的序列设计环状探针和捕获探针,当环状探针与目的序列完全互补杂交,... 为开发一种可视化、特异性好、灵敏度高的检测食品中大肠埃希氏菌(Escherichia coli)O157:H7的方法,该研究选择Escherichia coli O157:H7的rfbE基因作为目的序列,针对目的序列设计环状探针和捕获探针,当环状探针与目的序列完全互补杂交,在DNA连接酶的作用下环化连接,捕获探针作为引物在Phi 29 DNA聚合酶的作用下引发滚环扩增产生长的单链DNA,SYBR GreenⅡ结合单链DNA后荧光信号显著增强,其荧光强度与单链DNA的数量相关,结合实时定量荧光变化可以实现实验室的实时定量信号监测,也可在检测现场在紫外灯的照射下实现定性的信号可视化输出。结果显示,该方法具有实时定量输出模式下较宽的分析范围,线性范围5×10^(-3)~5×10^(-1)ng/μL微生物基因组DNA;具有高的灵敏度,现场可视化模式/实验室荧光实时定量PCR输出模式最低检测限分别为7.5×10^(-3)ng/μL和5.048×10^(-3)ng/μL微生物基因组DNA;该方法可实现不与非O157:H7大肠埃希氏菌同属间和种属间的交叉反应,特异性良好。该检测方法对人工污染食品样品进行检测,验证了其潜在应用价值。该双模态检测技术在食品中大肠埃希氏菌O157:H7的检测方面具有良好的实用性和明显的优势。 展开更多
关键词 滚环扩增 大肠埃希氏菌E.coli O157:H7 双模态信号输出生物传感器 实时荧光 可视化
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两种纳米铁氧化物对大肠杆菌O157:H7碳源代谢的差异性调控
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作者 刘单鹏 汤宇晴 +4 位作者 蒋宇 赵升 王远鹏 石淮毓 欧阳凯 《环境科学学报》 北大核心 2026年第1期436-445,共10页
土壤中的病原菌可通过鞭毛、荚膜等特殊结构定殖于矿物表面形成生态位,其碳代谢适应性直接影响环境存活率与致病风险.以肠出血性大肠杆菌O157:H7为模式菌,通过紫外分光光度法、等温微量热分析及ATP定量检测,结合菌落计数验证,系统评估... 土壤中的病原菌可通过鞭毛、荚膜等特殊结构定殖于矿物表面形成生态位,其碳代谢适应性直接影响环境存活率与致病风险.以肠出血性大肠杆菌O157:H7为模式菌,通过紫外分光光度法、等温微量热分析及ATP定量检测,结合菌落计数验证,系统评估了温度(28°Cvs 37°C)及纳米颗粒浓度(0.1~10 mg·mL^(-1))对大肠杆菌O157:H7葡萄糖代谢的影响,揭示了纳米针铁矿与纳米赤铁矿对其碳源代谢的调控规律.结果表明,等温培养条件下,各体系大肠杆菌O157:H7葡萄糖代谢速率呈显著组间差异(纳米赤铁矿组>纯菌对照组>纳米针铁矿组);37°C条件下病原菌代谢活性显著高于28°C条件下,证实其为适宜代谢温度.纳米赤铁矿呈浓度依赖性促进作用,10 mg·mL^(-1)组代谢速率可达纯菌体系的1.3~12.3倍,并伴随ATP合成峰前移及生物量显著增加;纳米针铁矿则表现出显著抑制作用,10 mg·mL^(-1)组代谢速率降低至纯菌体系的27%~69%,ATP积累速率减缓且细胞增殖受抑.以上研究结果可为评估土壤矿物-病原菌互作及控制食源性致病菌传播提供理论依据. 展开更多
关键词 土壤 纳米铁氧化物 病原菌 大肠杆菌O157:H7 碳源代谢
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牛至精油气相熏蒸抑制亚致死态大肠杆菌O157:H7修复及其对解冻猪肉品质的影响
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作者 牛力源 吴小桥 +3 位作者 霍遵屹 吕静 相启森 张志坚 《肉类研究》 北大核心 2026年第1期10-17,共8页
在冷冻肉的加工与流通过程中,冷冻胁迫环境会诱导肉中有害微生物处于亚致死损伤状态,其在肉品解冻、加工等环节极易恢复生长繁殖,对消费者健康造成潜在威胁。本研究首先采用选择性平板计数法,阐明冷冻胁迫下猪肉中亚致死态大肠杆菌O157... 在冷冻肉的加工与流通过程中,冷冻胁迫环境会诱导肉中有害微生物处于亚致死损伤状态,其在肉品解冻、加工等环节极易恢复生长繁殖,对消费者健康造成潜在威胁。本研究首先采用选择性平板计数法,阐明冷冻胁迫下猪肉中亚致死态大肠杆菌O157:H7的形成规律,然后通过测定不同溶剂中6种植物源抑菌剂气相熏蒸对大肠杆菌O157:H7的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),筛选最适抑菌剂及其溶剂,探究其对解冻猪肉中亚致死态大肠杆菌O157:H7修复的影响,并通过测定菌落总数、pH值、色泽、质构特性和硫代巴比妥酸反应物值等指标,对解冻猪肉品质进行评价。结果表明:在-20℃下,猪肉中大肠杆菌O157:H7的亚致死率随冻藏时间的延长显著提高(P<0.05);以丙二醇或无水乙醇为溶剂的牛至精油气相熏蒸对大肠杆菌O157:H7的抑制效果最好,MIC分别为625、312.5μL/L;将冻藏15 d的猪肉解冻并冷藏24 h后发现,仅使用丙二醇解冻的猪肉中亚致死态大肠杆菌O157:H7逐渐修复,与之相比,使用2×MIC、4×MIC和6×MIC牛至精油气相熏蒸处理后,猪肉中选择性培养基大肠杆菌O157:H7菌落数分别降低0.30、0.33、0.58(lg(CFU/g)),说明牛至精油气相熏蒸显著抑制了解冻猪肉中亚致死态大肠杆菌O157:H7的修复;当牛至精油含量为6×MIC时,还可有效降低解冻猪肉的菌落总数,延缓脂质氧化进程,较好地维持猪肉的pH值、色泽和质构特性。 展开更多
关键词 牛至精油 气相熏蒸 大肠杆菌O157:H7 亚致死损伤 解冻猪肉
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产MBLs奶牛源致病性大肠杆菌O157:H12菌株的分子特性和致病性分析
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作者 张哲 袁紫婧 +2 位作者 张启文 吴利军 张付贤 《食品科学》 北大核心 2026年第6期155-166,共12页
为探究湖北某奶牛场犊牛腹泻病因,从奶牛场采集粪便、肛拭子和牛奶样品,通过病原筛查和分离鉴定,进一步采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定、多位点序列分型(multi-locus sequence typing,MLST)分析等方法对分离菌... 为探究湖北某奶牛场犊牛腹泻病因,从奶牛场采集粪便、肛拭子和牛奶样品,通过病原筛查和分离鉴定,进一步采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定、多位点序列分型(multi-locus sequence typing,MLST)分析等方法对分离菌株进行分子分型鉴定,并进行致病性和耐药性分析。结果表明,16份肛拭子、21份粪便和12份牛奶样本中分离出4株优势菌株,经16S rRNA和PCR鉴定后,其中3株菌为同一株大肠杆菌O157(Escherichia coli O157),命名为JZ-0720;MLST分析确定分离菌株为ST10型;血清学和PCR鉴定确定分离菌株为E.coli O157:H12型。分离菌株JZ-0720携带XJrfbE、uspA和stx13种毒力基因,对Vero细胞能产生类似E.coli O157:H7的毒素效果;小鼠感染分离菌株JZ-0720后多个器官出现不同程度的病变,低剂量感染则导致小鼠腹泻,高剂量感染可致小鼠死亡,其半数致死剂量为5.36×10^(8) CFU/mL;分离菌株JZ-0720携带gyrA、bla-CTX、bla-TEM、bla-NDM和aadA15种耐药基因,对新霉素、红霉素等药物耐药;双协同药敏实验显示,分离菌株产金属β-内酰胺酶(metallo-β-lactamases,MBLs)而不产超广谱β-内酰胺酶;中药乌梅、艾叶对JZ-0720有很好的抑菌效果。综上,本研究分离得到1株血清型为E.coli O157:H12型的奶牛源致病性大肠杆菌且MLST分型为ST10型,携带多种毒力基因和耐药基因,进行人工感染可致小鼠腹泻,对中药乌梅、艾叶以及多种抗生素敏感。研究结果可为E.coli O157非H7型大肠杆菌的防治研究提供参考依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H12 分离鉴定 致病性 耐药性
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编烟量对赣烟157不同部位烟叶烘烤时长与品质的影响
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作者 刘勇 杨新士 +5 位作者 张雄峰 张小仁 李卓 陈仁霄 赖劲鹏 李立新 《作物研究》 2026年第1期73-80,共8页
为解决多雨生态条件下江西烟区赣烟157的烘烤编烟量适配问题,以下部叶(第3~5叶位)、中部叶(第8~10叶位)和上部叶(第15~17叶位)为材料,设置不同的编烟量处理,系统分析编烟量对烟叶烘烤质量的影响。结果表明:编烟量对烘烤时长和烟叶品质... 为解决多雨生态条件下江西烟区赣烟157的烘烤编烟量适配问题,以下部叶(第3~5叶位)、中部叶(第8~10叶位)和上部叶(第15~17叶位)为材料,设置不同的编烟量处理,系统分析编烟量对烟叶烘烤质量的影响。结果表明:编烟量对烘烤时长和烟叶品质的影响较大,并且其影响具有明显的部位差异。随着单杆编烟量增加,烘烤时间缩短(下部叶9 h,中上部叶5.5~8 h),但过快烘烤不利于品质形成。下部叶为X120处理(120片/杆,320杆/烤)的桔黄烟率最高(52.65%),烤青率最低(10.41%),感官评吸质量得分最高(72.4);中部叶为C130处理(130片/杆,340杆/烤)的挂灰率较低,油分与色度最佳,香气量得分最高(16.5);上部叶为B140处理(140片/杆,350杆/烤)的桔黄烟率(64.16%)和感官评吸质量得分(73.5)最高。编烟量对烟叶多数化学成分无显著影响,但X120处理显著降低了下部叶的淀粉含量。质体色素及香气物质总量均表现为下部叶>中部叶>上部叶,X140处理(140片/杆,320杆/烤)可显著促进下部叶的色素降解,其致香物质总量最高;B120处理(120片/杆,408杆/烤)则有利于上部叶苯丙氨酸类降解产物积累。可见,赣烟157的适宜编烟量明显低于传统品种K326和云烟87,下部叶120片/杆、中部叶130片/杆和上部叶140片/杆可协调烘烤效率、外观质量与感官品质。本研究可为多雨生态区赣烟157的烘烤提供技术支撑。 展开更多
关键词 烤烟 编烟量 烘烤 赣烟157
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超声联合紫外处理对大肠杆菌O157:H7的杀菌作用及机制
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作者 陈怡 吴雨豪 +2 位作者 周建伟 刘东红 吕瑞玲 《食品科学》 北大核心 2025年第19期10-17,共8页
旨在探究超声联合紫外对大肠杆菌O157:H7的杀菌效率、协同效果及内在机理。探究超声联合紫外杀菌动力学模型、细微观结构变化、细胞膜性质改变及氧化应激水平等方面,结果发现超声联合紫外处理40 s杀灭了8.3(lg(CFU/mL))的大肠杆菌O157:... 旨在探究超声联合紫外对大肠杆菌O157:H7的杀菌效率、协同效果及内在机理。探究超声联合紫外杀菌动力学模型、细微观结构变化、细胞膜性质改变及氧化应激水平等方面,结果发现超声联合紫外处理40 s杀灭了8.3(lg(CFU/mL))的大肠杆菌O157:H7,处理后细胞形态受损显著,细胞内容物流失。联合处理短时间内引起了细胞的应激反应,细胞酯酶活性增强、ATP含量上升、活性氧水平提高、DNA受损。综上所述,超声和紫外联合处理具有显著的协同杀菌效果,通过空化效应增强细胞结构损伤使得紫外直接作用DNA并且共同加剧了氧化应激干扰生物代谢,从而达到协同杀菌的目的。 展开更多
关键词 超声 紫外 大肠杆菌O157:H7 杀菌机制 协同效应
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一株不产志贺毒素的肠出血性大肠埃希菌O157:H7检测分析
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作者 李桂满 史亚辉 +6 位作者 欧阳方竹 柯碧霞 刘佳俊 朱海明 颜瑾 李柏生 何冬梅 《华南预防医学》 2025年第7期796-799,805,共5页
目的对菌株CICC10907肠出血性大肠埃希菌O157:H7进行生化特征、血清学鉴定和毒力基因检测。方法采用传统的生化鉴定方法对菌株CICC10907进行鉴定和血清分型;用2种不同的荧光PCR检测试剂和PCR熔解曲线法对CICC10907进行志贺毒素stx基因... 目的对菌株CICC10907肠出血性大肠埃希菌O157:H7进行生化特征、血清学鉴定和毒力基因检测。方法采用传统的生化鉴定方法对菌株CICC10907进行鉴定和血清分型;用2种不同的荧光PCR检测试剂和PCR熔解曲线法对CICC10907进行志贺毒素stx基因和其他毒力基因进行检测;使用全基因组测序分析其MLST型(Mul⁃tilocus sequence typing,MLST)、血清型和毒力基因预测。结果传统的生化鉴定结果显示CICC10907为大肠埃希菌,血清型为O157:H7;3种PCR检测方法结果一致,CICC10907不产志贺毒素stx,毒力基因astA、eae/escV和uidA为阳性;全基因组测序分析结果显示CICC10907的ST型为11,血清型为O157:H7,含有astA、eae、espA、espP、hlyE、katP、tir和toxB基因,不含stx1和stx2毒力基因。结论编号为CICC10907的肠出血性大肠埃希菌O157:H7为一株不产志贺毒素stx的菌株,且具有O157:H7特异性的毒力基因,这将为今后检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7的毒力基因提供重要参考。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 O157:H7 生化鉴定 血清型 志贺毒素 基因测序
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一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7的全基因组测序及毒力和耐药基因分析
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作者 周艳 万启旸 +3 位作者 朱树娇 张辉 包红朵 王冉 《广东农业科学》 2025年第2期58-70,共13页
[目的]分析一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1的全基因组信息及其毒力和耐药基因。[方法]基于Nanopore三代测序技术平台和Illumina二代测序技术平台对猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1进行全基因组测序,利用Prokka软... [目的]分析一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1的全基因组信息及其毒力和耐药基因。[方法]基于Nanopore三代测序技术平台和Illumina二代测序技术平台对猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1进行全基因组测序,利用Prokka软件预测基因组序列信息,并通过UniProt、KEGG、KEGG Pathway、GO、Pfam、COG、TIGERfams、RefSeq和NR数据库进行基因预测和注释,再利用碳水化合物酶(CAZy)、病原与宿主互作(PHI)、毒力因子(VFDB)和耐药基因(CARD)数据库进行基因功能分析。[结果]肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1基因组大小为5404747 bp,GC含量为50.49%,该菌株含有3个质粒;共预测到5674个蛋白质编码基因,包含22个rRNA(7个23S rRNA、7个16S rRNA、8个5S rRNA)、1个tmRNA、102个tRNA基因和282个小RNA分子;预测出9个CRISPR序列、273个重复序列;KEGG、KEGG Pathway、NR、UniProt、GO、COG、Pfam、RefSeq和TIGERfams数据库分别注释到1712、1693、5265、5264、4029、4294、4688、5252和2741个基因;CAZy数据库注释筛选出100个基因,PHI数据库注释筛选出2354个基因,VFDB数据库注释筛选出的毒力基因主要包括菌毛、鞭毛、Ⅱ型分泌系统、Ⅲ型分泌系统、Ⅵ型分泌系统、紧密黏附素、铁转运系统、脂多糖、荚膜、侵袭素和外毒素;CARD数据库注释筛选出的耐药基因与多重耐药外排泵、大环内酯类抗生素、四环素、多粘菌素、杆菌肽、氨基糖苷类抗生素、肽类抗生素及甲硝唑相关。[结论]获得一株肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1全基因组序列,序列分析表明该菌株携带大量毒力基因与耐药基因。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 食源性人兽共患病 全基因组测序 基因 功能注释
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食品中大肠杆菌O157:H7快速检测方法的比较
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作者 朱建英 孔德军 +2 位作者 金杨慧娜 徐黎慧 华思佳 《食品安全导刊》 2025年第25期156-158,共3页
大肠杆菌O157:H7作为高危食源性致病菌,其快速检测对食源性疾病防控至关重要。本文针对食品中大肠杆菌O157:H7的快速检测,分析了免疫分析、分子生物学等方法的灵敏度和成本差异,力求能为不同检测需求提供方法选择依据。
关键词 食品安全 大肠杆菌O157:H7 快速检测 技术适用性
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肠出血性大肠杆菌(EHEC) O157∶H7志贺毒素研究进展 被引量:15
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作者 陈洪章 邹全明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期83-85,共3页
关键词 肠出血性大肠杆菌 志贺毒素 O157:H7 O157:H7感染 大肠杆菌O157 革兰氏阴性杆菌 法定报告传染病 公共卫生问题
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东台市肠出血性大肠埃希菌O157感染监测 被引量:5
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作者 吴银华 阮凌霆 +5 位作者 蒋力 季月 王迎庆 万亚军 吉根娣 开学俊 《中国预防医学杂志》 CAS 2005年第1期30-32,共3页
目的 为掌握肠出血性大肠埃希菌O15 7在东台市家禽、家畜中的带菌,腹泻病人中的感染和自来水厂水源水中的污染情况。方法 2 0 0 0 -2 0 0 2年,分别在流行季节采集家禽、家畜和腹泻病人粪便及自来水厂水源水,应用免疫磁珠浓集、山梨醇... 目的 为掌握肠出血性大肠埃希菌O15 7在东台市家禽、家畜中的带菌,腹泻病人中的感染和自来水厂水源水中的污染情况。方法 2 0 0 0 -2 0 0 2年,分别在流行季节采集家禽、家畜和腹泻病人粪便及自来水厂水源水,应用免疫磁珠浓集、山梨醇麦康凯平板分离、生化和血清学反应进行鉴定。结果 3年间东台市采集的6种动物粪便有4种中检出肠出血性大肠埃希菌O15 7,其阳性率牛为11 .3 2 %、羊为10 . 5 8%、猪为9. 3 5 %、鸡为7 .73 %。腹泻病人的阳性率为1 .5 7%。采集的178份自来水厂水源水、60只苍蝇标本中均未分离出肠出血性大肠埃希菌O15 7。3株自动物粪便分离株具有至少2种混合型毒力基因。75株肠出血性大肠埃希菌O15 7菌株对15种抗生素存在不同的耐药率。结论 东台市家禽、家畜和腹泻病人中存在肠出血性大肠埃希菌O15 7感染,且存在流行的潜在危险。 展开更多
关键词 大肠埃希菌O157 东台市 感染监测 肠出血性大肠埃希菌 自来水厂 O157菌株 O157感染 动物粪便 2002年 血清学反应 水源水 污染情况 流行季节 免疫磁珠 腹泻病人 毒力基因 潜在危险 阳性率 家禽 家畜 采集 人粪便 山梨醇 混合型 分离株 耐药率 抗生素 人中
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朝天椒新品种云朝天椒157的选育
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作者 张芮豪 杜磊 +2 位作者 胡华冉 钟秋月 桂敏 《中国蔬菜》 北大核心 2025年第12期190-193,共4页
云朝天椒157是以雄性不育系(33B-1024)-4-3-1-1A为母本,以恢复系04160002-6-1-1为父本培育出的三系配套单生朝天椒新品种。植株生长势、分枝性强,平均株高76.0 cm,始花节位第10.8节。果实指形,中大果型,平均果长10.20 cm,果肩宽1.27 cm... 云朝天椒157是以雄性不育系(33B-1024)-4-3-1-1A为母本,以恢复系04160002-6-1-1为父本培育出的三系配套单生朝天椒新品种。植株生长势、分枝性强,平均株高76.0 cm,始花节位第10.8节。果实指形,中大果型,平均果长10.20 cm,果肩宽1.27 cm,果肉厚0.15 cm,单果质量6.77 g;商品果鲜红色,硬度高,果面光滑,光泽度好,味辣,辣椒素含量3558.7 mg·kg^(-1),VC含量1704.3 mg·kg^(-1)。中熟,每667 m^(2)鲜椒产量1500 kg左右,对病毒病和炭疽病的抗性强于对照艳红,适合云南朝天椒产区及气候相似区域春夏季栽培以及西双版纳等热区冬季栽培。 展开更多
关键词 朝天椒 云朝天椒157 三系杂交种
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新疆地区不同动物源E.coli O157:H7遗传进化分析及耐药性与成膜能力研究
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作者 王燕 张凌 +4 位作者 刘怡帆 马万鹏 秦天 王伟 苏战强 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第4期685-692,共8页
新疆不同动物都携带大肠杆菌O157:H7(E.coliO157:H7),但是这些菌株之间的联系不清楚。为了解E.coli O157:H7的进化分群、优势遗传谱系的分布、生物膜形成能力、携带可移动遗传元件情况及其耐药谱,对E.coli O157:H7用多重PCR法鉴定系统... 新疆不同动物都携带大肠杆菌O157:H7(E.coliO157:H7),但是这些菌株之间的联系不清楚。为了解E.coli O157:H7的进化分群、优势遗传谱系的分布、生物膜形成能力、携带可移动遗传元件情况及其耐药谱,对E.coli O157:H7用多重PCR法鉴定系统进化分群,通过多位点序列分型(multilocussequencetyping,MLST)方案检测E.coliO157ST型,结晶紫微孔板法测定生物被膜形成能力(BF),Kirby-Bauer法检测耐药情况,PCR法检测耐药、质粒复制子、整合子基因。结果显示新疆46.7%(7/15)的E.coliO157:H7属于A群,53.3%(8/15)属于E群,羊源以A群流行为主(4/6),牛源以E群为主(6/7);共检测出6种ST型,分别为ST11(8/15)、ST-206(1/15)、ST-6126(3/15)、ST-1640(1/15)、ST-178(1/15)、ST-4550(1/15);有2株具有中等成膜能力,2株具有弱成膜能力,10株无成膜能力;均为多重耐药菌株,对林可霉素、苯唑西林、克林霉素、万古霉素、麦迪霉素和头孢噻吩完全耐药,多黏菌素B、氨苄西林、青霉素G、红霉素耐药率为88%~94%,具有高度耐药性;检测到5种耐药基因,分别是acrA(66.66%,10/15)、tolC(73.33%,11/15)、qurS(13.33%,2/15)、floR和qurA(6.67%,1/15);4种质粒复制子,分别是IncP(66.66%,10/15)、IncFrepB(86.67%,13/15)、IncFIA(6.67%,1/15)、IncFIB(66.66%,10/15);2种Ⅰ类整合子,分别是ISCR1(33.33%,5/15)、ISECP1(20%,3/15)。结果显示,新疆地区的E.coliO157:H7以A群和E群流行为主,羊源以A群流行为主,牛源以E群为主,ST型分布较广,其中以ST11型为主,生物膜成膜能力较弱,耐药性强,均为多重耐药菌株,耐药基因以外排泵为主,耐药基因传播元件较多。 展开更多
关键词 E.coliO157H7 分群 MLST 耐药性 质粒复制子 整合子
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Eu-TRFM免疫层析试纸条检测大肠杆菌O157:H7方法的建立
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作者 冯昭仪 吴娅芳 +4 位作者 王英林 赵思远 程家洛 郭旭东 刘箐 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第2期163-172,共10页
【目的】建立一种快速、高效且灵敏的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测方法。【方法】运用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)介导法,以时间分辨荧光微球为标记物与抗体进行偶联,使用荧光读取仪定量分析检测大肠... 【目的】建立一种快速、高效且灵敏的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测方法。【方法】运用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)介导法,以时间分辨荧光微球为标记物与抗体进行偶联,使用荧光读取仪定量分析检测大肠杆菌O157:H7。通过对缓冲液的标记pH、时间分辨荧光微球探针添加量、T线抗体质量浓度以及样本与标记抗体的孵育时间进行优化来提高检测灵敏度。【结果】在最优条件下,大肠杆菌O157:H7的检测灵敏度可达3.2×10^(3)CFU/mL,比传统胶体金免疫层析方法提高了10~1000倍,并且与其他8株常见的食源性致病菌不存在交叉反应。另外,该方法在人工污染的饮用水、牛奶和牛肉实际样品检测中均表现出良好的检测性能。【结论】该Eu-TRFM免疫层析试纸条适用于大肠杆菌O157:H7的检测。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H7 时间分辨荧光微球 免疫层析试纸条 检测
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肠出血性大肠杆菌O157 EspA的研究进展
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作者 王庆旭 毛旭虎 邹全明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期73-74,80,共3页
关键词 肠出血性大肠杆菌 大肠杆菌O157 O157:H7感染 O157:H7大肠杆菌 溶血性尿毒综合征 syndrome 血小板减少性紫癜 出血性结肠炎 人类感染 Vero毒素
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长链非编码RNA RNF157-AS1在肺腺癌中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 姚羽 林敏杰 +1 位作者 金文芳 吕艳玲 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第6期582-586,共5页
目的探讨长链非编码RNA RNF157-AS1在肺腺癌组织中的表达及其临床意义,以期为肺腺癌的早期诊断提供潜在靶标。方法以生物信息学方法分析RNF157-AS1在肺腺癌中的表达及其与肺腺癌患者分期、性别、年龄、吸烟状态情况之间的关系。收集40... 目的探讨长链非编码RNA RNF157-AS1在肺腺癌组织中的表达及其临床意义,以期为肺腺癌的早期诊断提供潜在靶标。方法以生物信息学方法分析RNF157-AS1在肺腺癌中的表达及其与肺腺癌患者分期、性别、年龄、吸烟状态情况之间的关系。收集40对肺腺癌及其配对癌旁组织,根据RNF157-AS1在肺腺癌组织中的表达,以中位表达值为界,分为RNF157-AS1高表达组和低表达组;根据肿瘤大小,按T分期进行分组(T1,肿瘤最大径≤3 cm;T2,肿瘤最大径>3 cm,≤5 cm;T3,肿瘤最大径>5 cm);根据淋巴结转移情况,按N分期进行分组(N0,无淋巴结转移;N1,肺内淋巴结转移;N2,纵膈淋巴结转移);根据肿瘤整体情况,按TNM分期进行分组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)。比较肺腺癌组织及癌旁组织中RNF157-AS1的表达差异;结合患者的临床信息,分析RNF157-AS1表达与临床病理特征的关系。结果GEPIA数据库中,RNF157-AS1在肺腺癌组织中的表达高于正常组织(P<0.01);UALCAN数据分析表明,RNF157-AS1在肺腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01),且在女性患者及有吸烟史的患者中表达更高(P<0.01)。在收集的40对肺腺癌及癌旁组织中,RNF157-AS1在肿瘤中的表达明显上调(P<0.01),结合患者的临床病理信息进一步分析表明,RNF157-AS1的表达与患者的年龄无明显相关性(P>0.05),而与患者的性别、吸烟史、肿瘤大小、有无淋巴结转移以及TNM分期均存在相关性(P<0.05)。结论长链非编码RNA RNF157-AS1在肺腺癌组织中高表达并且与患者的临床病理特征相关,有望成为肺腺癌潜在的生物标志物。 展开更多
关键词 肺腺癌 长链非编码RNA RNF157-AS1
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辣椒素改善大肠杆菌O157:H7感染的小鼠胃肠道炎症和肠道菌群结构
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作者 张婷 易金美 +3 位作者 吴中琴 王远亮 侯爱香 李宗军 《现代食品科技》 北大核心 2025年第6期67-77,共11页
该文研究了不同剂量辣椒素对大肠杆菌O157:H7感染小鼠胃肠道炎症和肠道菌群结构的改善作用。通过构建大肠杆菌O157:H7小鼠感染模型,将成功感染的小鼠随机分为对照组、感染组、辣椒素处理组(15、7.5、3.75 mg/kg),试验周期7 d。记录小鼠... 该文研究了不同剂量辣椒素对大肠杆菌O157:H7感染小鼠胃肠道炎症和肠道菌群结构的改善作用。通过构建大肠杆菌O157:H7小鼠感染模型,将成功感染的小鼠随机分为对照组、感染组、辣椒素处理组(15、7.5、3.75 mg/kg),试验周期7 d。记录小鼠摄食量和体质量,检测血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)白细胞介素-6(IL-6)和肠道中炎症标志物髓过氧化物酶(MPO)含量,观察结肠和胃组织病理变化,并通过16S rDNA测序检测小鼠肠道菌群的变化。研究发现,15 mg/kg辣椒素的摄入显著降低了大肠杆菌O157:H7感染小鼠血清和肠道的炎症因子含量,显著改善了胃肠道屏障损伤和炎症情况,显著增加了阿克曼氏菌属(Akkermansia)、厌氧小体属(Anaeroplasma)和鲸杆菌属(Cetobacterium)的丰度,其中Akkermansia的相对丰度较对照组提高了48%;显著降低了另枝菌属(Alistipes)、肠球菌属(Enterococcus)和约克氏菌属(Yokenella)等的丰度。综上所述,适当食用辣椒素含量为15 mg/kg的食物可以改善大肠杆菌O157:H7感染患者胃肠道炎症情况和肠道菌群结构。这可为大肠杆菌O157:H7感染患者的治疗和膳食方式提供指导意见。 展开更多
关键词 辣椒素 大肠杆菌O157:H7 胃肠道炎症 肠道微生物
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赤藓红B钠盐与噬菌体偶联对大肠杆菌O157∶H7的光动力灭活及杀菌机制研究
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作者 任宇 石慧 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第16期10-19,共10页
光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是一种新兴非热杀菌技术,但由于缺乏可食用光敏剂和优异的杀菌效果,限制其在食品工业中的应用。该研究将可食用光敏剂赤藓红B钠盐(erythrosine B,EB)和噬菌体ZCFSTP4(P4)合成偶联物(EBP),探究其杀... 光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是一种新兴非热杀菌技术,但由于缺乏可食用光敏剂和优异的杀菌效果,限制其在食品工业中的应用。该研究将可食用光敏剂赤藓红B钠盐(erythrosine B,EB)和噬菌体ZCFSTP4(P4)合成偶联物(EBP),探究其杀菌效果及机制。将P4和EB通过EDC/NHS法合成偶联物EBP,以大肠杆菌O157∶H7为研究对象,对不同光照时间和EBP浓度进行杀菌条件优化,利用光谱表征EBP合成情况,通过靶向实验检测EBP靶向识别能力,通过检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生能力和种类、细胞膜通透性、细胞质泄露情况、细胞内DNA和蛋白含量研究EBP杀菌机制。结果表明,15μmol/L EBP在60 min光照条件下具有协同杀菌效果;EBP合成成功,且能够特异性识别大肠杆菌O157∶H7;EBP和EB具有相似的ROS产生能力,主要通过Ⅰ型和Ⅱ型2种机制产生ROS,发挥PDT作用改变细胞膜通透性,造成细胞质外漏,导致细胞内DNA和蛋白大量减少。综上所述,EBP能靶向识别细菌并通过产生ROS破坏细胞膜结构,从而有效杀灭细菌,为PDT防控食源性致病菌提供参考。 展开更多
关键词 光动力杀菌 赤藓红B钠盐 噬菌体 偶联物 大肠杆菌O157∶H7 杀菌机制
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罗伊氏乳杆菌素对大肠杆菌O157:H7感染小鼠的保护作用及肠道菌群的影响
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作者 王宇皓 周东明 +5 位作者 朱进 陈琼 孙学伟 张卓涵 杨展 王长军 《中国微生态学杂志》 北大核心 2025年第7期761-769,共9页
目的探究罗伊氏乳杆菌素(reuterin)对肠出血型大肠杆菌O157∶H7(EHEC O157∶H7)感染小鼠的保护效果及肠道菌群的影响。方法6周龄SPF级C57BL/6雄性实验小鼠,平均体重20 g,随机分为对照组(Control组)、模型组(EHEC组)、处理组(Reuterin组)... 目的探究罗伊氏乳杆菌素(reuterin)对肠出血型大肠杆菌O157∶H7(EHEC O157∶H7)感染小鼠的保护效果及肠道菌群的影响。方法6周龄SPF级C57BL/6雄性实验小鼠,平均体重20 g,随机分为对照组(Control组)、模型组(EHEC组)、处理组(Reuterin组),每组5只。两步发酵法提取制备reuterin,Reuterin组灌胃reuterin(浓度约210 mmol/L)300μL/d,连续7 d,随后EHEC组和Reuterin组灌胃EHEC O157∶H7菌液(浓度1×1010 CFU/mL)300μL 1次,间隔24 h后再灌胃1次。之后24 h内观察小鼠生理状态并麻醉处死,采集组织和粪便样本。采用HE染色观察结肠组织病理变化;检测小鼠氧化应激指标过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;采用qRT-PCR检测小鼠结肠组织炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、趋化因子-2(C-C motif ligand,CCL-2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-10的相对表达水平;对小鼠粪便进行16S rRNA基因测序并统计分析。结果Reuterin组与EHEC组相比,小鼠生理状态较好,结肠组织损伤情况减轻,病理状态比较接近Control组;抗氧化指标CAT(t=4.963,P=0.001)、SOD(t=2.464,P=0.039)水平显著升高,氧化指标MDA(t=2.446,P=0.040)水平降低,差异均有统计学意义;结肠组织炎症因子IL-1β(t=6.571,P<0.001)、IL-6(t=2.759,P=0.025)、CCL-2(t=2.306,P=0.049)、TNF-α(t=4.452,P=0.002)的相对表达水平显著降低,抗炎因子IL-10(t=6.206,P=0.001)的相对表达水平升高,差异均有统计学意义;16S rRNA基因测序显示reuterin影响了肠道微生物的整体结构,促进多种益生菌丰度的增加,抑制了致病菌的生长,并有利于肠道厌氧微生物的繁殖。结论Reuterin通过缓解氧化应激状态,减轻炎症反应,改变肠道菌群结构,增加益生菌的丰度,抑制致病菌的生长,对EHEC O157∶H7感染小鼠有一定的保护作用。 展开更多
关键词 罗伊氏乳杆菌素 肠出血型大肠杆菌O157:H7 感染 肠道菌群
原文传递
百里香油纳米乳液对大肠杆菌O157:H7抗菌效果及机理
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作者 郭鸣鸣 杨哲皓 +3 位作者 何巧 Balarabe BISMAIL 张欣慧 刘东红 《中国食品学报》 北大核心 2025年第12期12-22,共11页
以吐温80(T80)、十二烷基硫酸钠(SDS)和氯化十六烷基吡啶(CPC)为乳化剂,采用超声纳米乳化法,制备百里香精油纳米乳液(TEON),并以大肠杆菌O157:H7为目标菌,通过分析细菌细胞膜的结构和功能,ATP酶活性以及胞内ROS研究TEON的抗菌效果及机... 以吐温80(T80)、十二烷基硫酸钠(SDS)和氯化十六烷基吡啶(CPC)为乳化剂,采用超声纳米乳化法,制备百里香精油纳米乳液(TEON),并以大肠杆菌O157:H7为目标菌,通过分析细菌细胞膜的结构和功能,ATP酶活性以及胞内ROS研究TEON的抗菌效果及机理。结果显示,3种纳米精油乳液对大肠杆菌O157:H7的杀菌效果及作用方式存在较大差异。TEON-T80显著破坏细菌的外膜渗透性,并抑制ATP酶的活性。TEON-SDS具有优良的抗菌效果,在40 min内可杀灭大肠杆菌8.17 lg(CFU/mL)。此外,TEON-SDS还可扰乱细菌外膜和内膜的渗透性,破坏外膜流动性;而带正电的TEON-CPC可显著降低细菌外膜流动性和ATP酶活性,同时增加外膜疏水性,并产生大量的胞内活性氧(ROS),破坏细胞壁膜结构。本研究结果可为纳米精油乳液在食源性致病菌控制方面的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 百里香精油纳米乳液 乳化剂 大肠杆菌O157:H7 抗菌机理 细胞膜
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