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多杀性巴氏杆菌传统致弱疫苗的研究进展 被引量：5
1
作者 许青原 关丽君 +2 位作者 张俊峰 薛云 赵战勤 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第6期642-649,共8页
多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是巴氏杆菌科巴氏杆菌属的一种革兰阴性小杆菌,可感染多种动物,引起出血性败血症或传染性肺炎;该菌是一种重要的动物细菌性传染病病原,在世界范围内广泛存在并致病,还可通过犬或猫咬伤、抓痕... 多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是巴氏杆菌科巴氏杆菌属的一种革兰阴性小杆菌,可感染多种动物,引起出血性败血症或传染性肺炎;该菌是一种重要的动物细菌性传染病病原,在世界范围内广泛存在并致病,还可通过犬或猫咬伤、抓痕或舔舐等引起人类感染。根据荚膜抗原的不同可将Pm分为A、B、D、E及F共5种血清型;不同荚膜血清型的Pm具有宿主偏好性,从猪、牛及羊源分离的多以A、D型Pm为主[1-2],从禽、兔、犬、猫及骆驼、鹿等动物分离的多以A型Pm为主[3]。Pm可致多种动物患病,包括牛出血性败血症、猪萎缩性鼻炎、羊肺炎等家畜疾病,家禽禽霍乱,以及兔传染性鼻炎等。抗生素类药物的广泛应用,曾使动物细菌性传染病得到了有效控制,但也产生了严重的耐药性、食品安全及公共卫生问题。2020年以来,我国兽用抗菌药物的减量使用政策逐步实施[4-5],对动物细菌性传染病的防控提出了更高要求。因此,免疫接种仍是防治动物细菌性传染病的主要手段。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 传统致弱疫苗
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大口黑鲈蛙虹彩病毒传代致弱株免疫效果评价 被引量：1
2
作者 高铭悦 楚馨 +4 位作者 刘思玉 姚嘉赟 蔺凌云 沈锦玉 潘晓艺 《水生生物学报》 北大核心 2025年第6期21-31,共11页
为研究大口黑鲈蛙虹彩病毒(Largemouth Bass Ranavirus,LMBV)传代致弱毒株LMBV-ZJDSS-F110的特性,研究开展了该病毒的复制效率、毒力、体内病毒载量变化、比较基因组、免疫保护率、免疫后免疫相关基因表达和毒力返强等试验。结果显示:采... 为研究大口黑鲈蛙虹彩病毒(Largemouth Bass Ranavirus,LMBV)传代致弱毒株LMBV-ZJDSS-F110的特性,研究开展了该病毒的复制效率、毒力、体内病毒载量变化、比较基因组、免疫保护率、免疫后免疫相关基因表达和毒力返强等试验。结果显示:采用FHM培养,F110代次毒滴度可达109.1 TCID50/mL,以剂量108.0 TCID50/mL×0.1 mL注射大口黑鲈,未见死亡。不同代次毒株体内组织病毒载量测试,结果显示:传代毒F5、F45和F110在7d时脾脏和鳃的病毒载量要高于3d,而F90在两时间点的病毒载量变化不显著,表明传代毒F90相较于F45,F110相较于F90都出现了特性改变。不同代次毒株F5与F110比较基因组学分析显示:LMBV-ZJDSSF110出现了10处变异,其中有7处可能引起编码区的变化。将传代弱毒F110通过注射和浸泡免疫大口黑鲈,结果显示108.0 TCID50/mL浓度组都获得了对强毒F5株70%免疫保护率,而头肾中免疫因子(TNF-α、CD8b、IgM、IgT、IFN-γ)基因表达量在免疫后14d达到峰值,且注射组显著高于浸泡免疫组,其中IFN-γ表达量接近对照组的50倍。活体传代毒力返强测试结果显示,F110活体盲传5代未引起死亡。以上研究表明,LMBVZJDSS-F110是一株安全有效的弱毒疫苗株,为大口黑鲈蛙虹彩病毒病的免疫预防提供了路径。 展开更多
关键词 弱毒疫苗 免疫因子 传代致弱 大口黑鲈蛙虹彩病毒 免疫途径
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研究破解马传贫疫苗致弱关键因素
3
《甘肃畜牧兽医》 2025年第2期120-120,共1页
弱毒疫苗株是由一株强毒株经体内、体外长期培育驯化制备而成。其祖代强毒株对马和驴100%致死,发病动物表现为各组织器官强烈的炎症反应。而弱毒疫苗接种后不引起组织器官的炎症风暴,是病毒致弱的重要表现之一。近日,中国农业科学院哈... 弱毒疫苗株是由一株强毒株经体内、体外长期培育驯化制备而成。其祖代强毒株对马和驴100%致死,发病动物表现为各组织器官强烈的炎症反应。而弱毒疫苗接种后不引起组织器官的炎症风暴,是病毒致弱的重要表现之一。近日,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所首次揭示了马传染性贫血病毒疫苗株通过精细调控NLRP3炎症小体通路减弱宿主炎症反应的关键分子机制。相关研究成果发表在《公共图书馆·病原(PloSPathogens)》上。 展开更多
关键词 致弱关键因素 弱毒疫苗株 马传贫疫苗
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化学致弱柔嫩艾美耳球虫杂交F2株免疫性能研究 被引量：1
4
作者 刘春杰 张春 +3 位作者 徐晶 杨桂连 蔡亚南 赵权 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期225-228,232,共5页
采用化学致弱剂致弱柔嫩艾美耳球虫杂交F2株卵囊。将致弱的卵囊分别饲喂3组7日龄AA肉仔鸡进行免疫,免疫剂量分别为4×103,8×103,16×103个/只。首免7日龄,二免14日龄,二免剂量与首免相同。二免后第7 d用吉林野毒株卵囊进... 采用化学致弱剂致弱柔嫩艾美耳球虫杂交F2株卵囊。将致弱的卵囊分别饲喂3组7日龄AA肉仔鸡进行免疫,免疫剂量分别为4×103,8×103,16×103个/只。首免7日龄,二免14日龄,二免剂量与首免相同。二免后第7 d用吉林野毒株卵囊进行攻虫,剂量为5×104个/只。攻虫后第7 d以存活率、相对增重率、病变值、抗球虫指数(ACI)、卵囊值、粪便计分等指标测定化学致弱剂致弱卵囊后免疫性能。结果表明:采用化学致弱剂致弱杂交F2株卵囊后的免疫效果明显高于非致弱免疫组和对照组,尤其免疫剂量为8×103个/只时致弱杂交F2株卵囊免疫效果最佳。 展开更多
关键词 肉仔鸡 化学致弱剂 致弱 柔嫩艾美耳球虫 免疫性能
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用反向遗传操作技术产生致弱的H5亚型重组流感病毒 被引量：22
5
作者 卢建红 龙进学 +3 位作者 邵卫星 韦栋平 刘秀梵 张艳梅 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期53-57,共5页
选择一株鹅源H5N1亚型禽流感病毒 (AIV) ,缺失其HA基因裂解序列的 4个碱性氨基酸、使HA裂解模式由高致病性的PQRERRRKKR↓GL突变为低致病性的PQRESR↓GL ,将修饰的HA基因克隆入转录 表达载体pHW2 0 0 0、构建质粒pHW5 2 4_HA ,将该毒株... 选择一株鹅源H5N1亚型禽流感病毒 (AIV) ,缺失其HA基因裂解序列的 4个碱性氨基酸、使HA裂解模式由高致病性的PQRERRRKKR↓GL突变为低致病性的PQRESR↓GL ,将修饰的HA基因克隆入转录 表达载体pHW2 0 0 0、构建质粒pHW5 2 4_HA ,将该毒株和H9N2亚型毒株的NA全基因分别克隆入pHW2 0 0 0 ,构建质粒pHW5 0 6_NA和pHW2 0 6_NA。将pHW5 2 4_HA与pHW5 0 6_NA或pHW2 0 6_NA组合、均用A WSN 33(H1N1)提供 6个内部基因 ,两个组合的 8个质粒分别共转染COS_1细胞 ,产生了H5N1和H5N2两个亚型的基因重排病毒。通过在鸡胚中的连续传代和适应 ,2个重组病毒血凝价上升到 1∶2 9、表面基因稳定、对 6周龄SPF鸡不表现致病性 ,H5N2重组病毒对鸡胚的毒力低于H5N1病毒。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H5亚型 反向遗传操作技术 基因重排 致弱
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日本血吸虫97kDa DNA疫苗与致弱尾蚴疫苗诱导免疫应答特征的比较研究 被引量：21
6
作者 陈家旭 刘述先 +2 位作者 曹建平 宋光承 徐裕信 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期257-261,共5页
目的　对比观察日本血吸虫大陆株副肌球蛋白基因疫苗 (Sjc97DNA)与紫外线致弱尾蚴 (UVC)疫苗免疫C5 7BL 6小鼠诱导的抗感染保护力及免疫应答特征。　方法　以Sjc97DNA核酸疫苗经后腿胫前肌免疫C5 7BL 6小鼠共 2次 ,每次间隔 3wk ,末次... 目的　对比观察日本血吸虫大陆株副肌球蛋白基因疫苗 (Sjc97DNA)与紫外线致弱尾蚴 (UVC)疫苗免疫C5 7BL 6小鼠诱导的抗感染保护力及免疫应答特征。　方法　以Sjc97DNA核酸疫苗经后腿胫前肌免疫C5 7BL 6小鼠共 2次 ,每次间隔 3wk ,末次免疫后 3wk攻击感染日本血吸虫尾蚴 ;UVC疫苗接种同种小鼠后 5wk攻击感染上述等量尾蚴。均于攻击感染后 7wk计数虫负荷及肝卵负荷。并设空质粒对照及感染对照组。用ELISA分析免疫鼠攻击感染前后血清特异性IgG、IgA及亚型抗体水平 ,以及脾淋巴细胞体外诱生的细胞因子水平。　 结果　Sjc97DNA疫苗及UVC疫苗免疫小鼠均诱生出以Th1型免疫应答为主的IL 2、IFN γ及特异性抗AWA、SEAIgG2a、IgG2b亚型及IgA抗体 ,UVC疫苗组小鼠各细胞因子及抗体水平均显著高于Sjc97DNA疫苗组 ,但两疫苗组均未测及IL 4。攻击感染后 ,Sjc97DNA疫苗组的减虫率 3 6.3 %、减卵率 42 .4% ,明显低于UVC疫苗组的 66.9%和 75 .6%。攻击感染后 7wk ,两疫苗组小鼠Th2型免疫应答虽有所增强 ,但仍以Th1型免疫应答占优势 ;而空质粒对照组和感染对照组小鼠则以Th2型免疫应答为主。　结论　核酸疫苗与紫外线致弱尾蚴疫苗均能诱导产生抗感染免疫保护力 ,致弱尾蚴疫苗的免疫保护力高于Sjc97DNA。两疫苗诱导的抗感染? 展开更多
关键词 日本血吸虫 副肌球蛋白 核酸疫苗 紫外线致弱尾蚴 免疫效应 血吸虫病
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传染性法氏囊病超强毒Gx株的致弱研究 被引量：12
7
作者 曾祥伟 王笑梅 +2 位作者 高宏雷 付朝阳 魏萍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期140-144,共5页
本研究成功将鸡传染性法氏囊病超强毒vvIBDVGx株通过SPF鸡胚的快速培育及鸡胚成纤维细胞传代致弱 ,揭示了vvIBDV从超强毒力向弱毒力转化过程中 ,其主要结构蛋白VP2基因核苷酸及推导的氨基酸序列的变化规律。对不同代次细胞毒进行了序列... 本研究成功将鸡传染性法氏囊病超强毒vvIBDVGx株通过SPF鸡胚的快速培育及鸡胚成纤维细胞传代致弱 ,揭示了vvIBDV从超强毒力向弱毒力转化过程中 ,其主要结构蛋白VP2基因核苷酸及推导的氨基酸序列的变化规律。对不同代次细胞毒进行了序列分析 ,发现细胞毒在第 7代以前 ,VP2基因序列没有改变 ,与欧洲标准超强毒氨基酸同源性达 10 0 % ;细胞毒第 8代 ,有个别核苷酸发生了改变 ,但没有影响氨基酸序列 ;细胞毒第 9代是变化复杂的过渡代 ;10代毒VP2基因与欧洲标准弱毒Cu_1氨基酸序列同源性达 97% ;以后的细胞适应毒至 2 0代 ,其VP2基因序列不再改变。致病性实验表明原代毒对 4周龄SPF鸡致死率为 6 4 % ,细胞毒第 5代的致死率为 6 0 % ,而 2 0代毒对鸡无致病性 ,在鸡体内连续传代 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病超强毒 传代致弱 VP2 基因 VVIBDV Gx株
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鸡传染性法氏囊病超强毒致弱株的生物学特性研究 被引量：9
8
作者 王笑梅 王秀荣 +2 位作者 陈冠春 尹训南 邱冬 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第6期436-438,共3页
将vvIBDV国内分离株-G株经SPF鸡胚和鸡胚成纤维细胞连续传代致弱，得到适应细胞的致弱株。暂命名为IBDVGt。其毒价为2.0×108PFU／ml以上，具有较好的抗原性，对鸡无致病性。返祖试验及病理组织学试验证明，致弱株可在鸡体内连续传... 将vvIBDV国内分离株-G株经SPF鸡胚和鸡胚成纤维细胞连续传代致弱，得到适应细胞的致弱株。暂命名为IBDVGt。其毒价为2.0×108PFU／ml以上，具有较好的抗原性，对鸡无致病性。返祖试验及病理组织学试验证明，致弱株可在鸡体内连续传至4代，未有返强现象。 展开更多
关键词 鸡 IBD 致弱 生物学特性
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紫外线致弱童虫免疫家兔血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 被引量：8
9
作者 李小红 刘述先 +3 位作者 宋光承 徐裕信 曹建平 陈家旭 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期80-82,共3页
目的　用致弱疫苗免疫血清、感染血清筛选文库获取新的日本血吸虫特异性未知抗原基因。　方法　用紫外线致弱童虫免疫兔血清、感染血清免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,对阳性重组子进行克隆、测序 ,利用软件对核酸序列进行分析 ,确定... 目的　用致弱疫苗免疫血清、感染血清筛选文库获取新的日本血吸虫特异性未知抗原基因。　方法　用紫外线致弱童虫免疫兔血清、感染血清免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,对阳性重组子进行克隆、测序 ,利用软件对核酸序列进行分析 ,确定目的基因。　结果　筛选出 6种蛋白分子基因 :3 磷酸甘油醛脱氢酶 (GAPDH) ,丝氨酸蛋白酶抑制剂 (serpin) ,线粒体编码蛋白 ,肌球蛋白 (myosin)部分重链基因以及两个未知新基因。 展开更多
关键词 紫外线 日本血吸虫 CDNA文库 致弱疫苗 核酸序列
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用反向遗传技术致弱基因VIId型鹅源新城疫病毒ZJI株 被引量：7
10
作者 胡顺林 孙庆 +4 位作者 吴艳涛 张艳梅 刘秀梵 刘玉良 王曲直 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期197-200,共4页
将新城疫病毒ZJI株基因组cDNA全长分成7个片段,依次连接并克隆至TVT7R转录载体中,构建了含ZJI株全基因组cDNA的转录载体(pNDV/ZJI),pNDV/ZJI与3个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了具有感染性的新城疫... 将新城疫病毒ZJI株基因组cDNA全长分成7个片段,依次连接并克隆至TVT7R转录载体中,构建了含ZJI株全基因组cDNA的转录载体(pNDV/ZJI),pNDV/ZJI与3个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了具有感染性的新城疫病毒粒子。设计两对引物,经overlapPCR方法将该毒株F蛋白裂解位点的112、115和117位碱性氨基酸突变成弱毒株特征的非碱性氨基酸后,替换pNDV/ZJI上的对应序列,构建了转录载体pNDV/ZJIFM,将pNDV/ZJIFM与3个辅助表达质粒共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了致弱的基因VIId型鹅源新城疫病毒NDV/ZJIFM,获救病毒的鸡胚最小致死剂量平均死亡时间(MDT)大于120h,同时该病毒的脑内接种致病指数(ICPI)为0.16,上述结果表明,获救病毒的毒力已被致弱,是一个较为理想的疫苗候选株。 展开更多
关键词 新城疫病毒 拯救 致弱 基因Ⅶd型
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致弱尾蚴免疫血清与日本血吸虫不同发育阶段抗原免疫反应性的研究 被引量：11
11
作者 吕志跃 汪世平 +9 位作者 彭先楚 刘立鹏 李文凯 徐绍锐 周松华 余俊龙 戴橄 姜孝新 肖小芹 曾少华 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第3期197-201,共5页
目的　通过比较分析日本血吸虫不同发育阶段抗原的异同 ,并以致弱尾蚴免疫血清识别不同发育阶段抗原 ,筛选具有保护性免疫作用的抗原分子。方法　分离制备日本血吸虫未成熟虫卵、成熟虫卵、尾蚴、雄性成虫、雌性成虫等不同发育阶段的抗... 目的　通过比较分析日本血吸虫不同发育阶段抗原的异同 ,并以致弱尾蚴免疫血清识别不同发育阶段抗原 ,筛选具有保护性免疫作用的抗原分子。方法　分离制备日本血吸虫未成熟虫卵、成熟虫卵、尾蚴、雄性成虫、雌性成虫等不同发育阶段的抗原 ;采用ELISA分别测定正常尾蚴感染兔血清、紫外线照射致弱尾蚴免疫兔血清抗原的抗体水平 ;通过SDS PAGE电泳和免疫印迹技术 ,分析正常尾蚴感染血清与紫外线照射致弱尾蚴免疫兔血清对不同发育阶段的免疫反应性。结果与结论　SDS-PAGE结果显示未成熟虫卵抗原、成熟虫卵抗原、尾蚴抗原、雄性成虫抗原、雌性成虫抗原蛋白之间互有异同。间接ELISA试验显示致弱尾蚴免疫血清同样能诱导宿主产生高滴度的抗体水平。致弱尾蚴免疫血清共筛选出 2 3种具免疫学活性的抗原分子 ,分子量分别为 :2 4 .5kDa、2 8kDa、36kDa、4 3kDa、4 4kDa、4 8kDa、5 4kDa、5 8.5kDa、6 0kDa、6 2kDa、6 6kDa、6 8kDa、70kDa、75kDa、79kDa、85kDa、87kDa、91kDa、95kDa、97kDa、10 5kDa、10 8kDa、110kDa。其中未成熟虫卵和成熟虫卵抗原各占 11种 ,尾蚴抗原分子 4种 ,雄性成虫抗原分子 3种 ,雌性成虫抗原分子 6种 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 致弱尾蚴 期抗原 免疫反应性
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UV致弱日本血吸虫尾蚴诱导C57BL/6小鼠免疫保护作用的研究 被引量：9
12
作者 胡姝颖 张美娟 +7 位作者 郭彩琴 单昊 张素华 张媛媛 侯敏 季旻珺 吴海玮 吴观陵 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第3期181-185,共5页
目的研究紫外线(UV)致弱日本血吸虫尾蚴诱导C57BL/6小鼠的免疫保护作用。方法分别观察不同UV强度(300、400和500μW/cm2照射的日本血吸虫尾蚴经腹部皮肤免疫)、不同免疫剂量(8、24和300条UV致弱尾蚴经腹部皮肤免疫)、不同免疫位点(300... 目的研究紫外线(UV)致弱日本血吸虫尾蚴诱导C57BL/6小鼠的免疫保护作用。方法分别观察不同UV强度(300、400和500μW/cm2照射的日本血吸虫尾蚴经腹部皮肤免疫)、不同免疫剂量(8、24和300条UV致弱尾蚴经腹部皮肤免疫)、不同免疫位点(300条UV致弱尾蚴经腹部和耳廓皮肤免疫)和不同免疫次数(100条UV致弱尾蚴经腹部皮肤免疫3次)诱导C57BL/6小鼠抗血吸虫攻击感染(40条正常尾蚴经腹部皮肤感染)的保护力。同时观察免疫后小鼠的体液免疫应答变化。结果300、400和500μW/cm2UV照射的日本血吸虫尾蚴免疫C57BL/6小鼠诱导产生的减虫率分别为2.72%、11.37%和10.38%;8、24和300条致弱尾蚴免疫小鼠诱导产生的减虫率分别为38.67%、7.54%和16.36%;300条致弱尾蚴经腹部和耳廓皮肤免疫诱导小鼠产生的减虫率分别为16.36%和16.14%;100条致弱尾蚴免疫3次,诱导小鼠产生减虫率为4.88%。对300条UV照射尾蚴免疫后小鼠的体液免疫应答动态观察显示,与感染对照组相比,免疫组血清中可溶性成虫抗原(SWA)和可溶性虫卵抗原(SEA)特异的IgG于免疫后2周开始升高,正常尾蚴抗原(SCA)特异的IgG于免疫1周后开始升高,SWA和SCA特异的IgG随免疫次数的增加而升高。结论UV致弱日本血吸虫尾蚴免疫C57BL/6小鼠能诱导其产生高水平的体液免疫应答,但保护力水平较低,提示C57BL/6小鼠为对UV致弱日本血吸虫尾蚴的低应答品系。 展开更多
关键词 血吸虫 日本 C57BL/6小鼠 紫外线致弱尾蚴 保护力 体液免疫
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传染性法氏囊病超强毒Gx株VP5基因在病毒致弱过程中的变异研究 被引量：8
13
作者 张厚双 王笑梅 +3 位作者 高宏雷 付朝阳 曾祥伟 鞠玉琳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期25-28,共4页
利用SPF鸡胚对鸡传染性法氏囊病超强毒 (vvIBDV)Gx株进行培育 ,通过鸡胚成纤维细胞对病毒进行传代致弱 ,对其非结构蛋白VP5基因核苷酸及推导的氨基酸序列进行分析 ,从而揭示vvIBDVGx从超强毒力向弱毒力转化过程中基因的序列变化规律。... 利用SPF鸡胚对鸡传染性法氏囊病超强毒 (vvIBDV)Gx株进行培育 ,通过鸡胚成纤维细胞对病毒进行传代致弱 ,对其非结构蛋白VP5基因核苷酸及推导的氨基酸序列进行分析 ,从而揭示vvIBDVGx从超强毒力向弱毒力转化过程中基因的序列变化规律。对不同代次细胞毒序列分析的结果表明 ,细胞毒在第 8代以前 ,VP5基因序列没有改变 ,与欧洲标准超强毒氨基酸同源性达 98%以上 ;细胞毒第 9代核苷酸和氨基酸序列发生了改变 ;10代毒VP5基因与欧洲标准弱毒Cu_1氨基酸序列同源性达 99% ;细胞适应毒传至 2 0代 ,其VP5基因序列不再改变。从而说明 。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病超强毒VP5基因 致弱 变异
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犬细小病毒黑龙江株(CPV-YN)的分离、鉴定及致弱的研究 被引量：5
14
作者 刘大飞 王牟平 +9 位作者 司微 曲连东 高艳 刘立奎 柴洪亮 林欢 刘春国 刘大程 华育平 张洪英 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期875-878,共4页
为研制犬细小病毒(CPV)致弱疫苗,本研究通过将犬的组织样品接种CRFK细胞进行病毒分离,并对分离毒株进行了一系列鉴定。鉴定结果显示,分离的病毒在CRFK细胞上可产生明显的细胞病变(CPE),并且电镜下可以观察到典型的细小病毒粒子;HA效价... 为研制犬细小病毒(CPV)致弱疫苗,本研究通过将犬的组织样品接种CRFK细胞进行病毒分离,并对分离毒株进行了一系列鉴定。鉴定结果显示,分离的病毒在CRFK细胞上可产生明显的细胞病变(CPE),并且电镜下可以观察到典型的细小病毒粒子;HA效价可达到1∶256。回归动物试验显示该分离株可导致犬出现明显的CPV感染症状,PCR鉴定也进一步确定所分离的病毒为CPV(命名为CPV-YN株)。将CPV-YN株接种CRFK细胞连续传代至110代,在传代过程中,病毒的滴度逐渐提高,由初始的105.5 TCID50/0.1 mL逐渐增加到107.1 TCID50/0.1 mL。同时,CPV对犬的致病力逐渐降低。免疫效力试验结果表明,CPV-YNR可以对用同源强毒攻击的犬提供免疫保护作用,可作为理想的疫苗候选病毒株。 展开更多
关键词 犬细小病毒 分离与鉴定 致弱
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反向遗传操作技术产生全禽源致弱的H5N1亚型禽流感病毒的免疫保护性试验 被引量：7
15
作者 石火英 张小荣 +2 位作者 孙学辉 刘慧谋 刘秀梵 《中国家禽》 北大核心 2005年第17期11-13,共3页
利用反向遗传操作技术产生致弱的8基因全禽源的H5N1亚型禽流感病毒rgF-H5△N1,经甲醛灭活制成油苗免疫SPF鸡和有母源抗体的商品鸡。比较拯救的重配病毒rgF-H5△N1和野毒H5N1亚型禽流感病毒油苗免疫后的抗体应答水平、攻毒后发病率和死... 利用反向遗传操作技术产生致弱的8基因全禽源的H5N1亚型禽流感病毒rgF-H5△N1,经甲醛灭活制成油苗免疫SPF鸡和有母源抗体的商品鸡。比较拯救的重配病毒rgF-H5△N1和野毒H5N1亚型禽流感病毒油苗免疫后的抗体应答水平、攻毒后发病率和死亡率等指标,评价其免疫和交叉免疫保护作用。结果表明:反向遗传操作技术为构建新型的流感疫苗株提供了更好的方法。 展开更多
关键词 反向遗传操作技术 禽流感病毒 疫苗 免疫保护作用 H5N1亚型 操作技术 反向遗传 保护性试验 致弱 禽源
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致弱日本血吸虫尾蚴感染小鼠皮肤组织中CD11c分子的动态表达 被引量：4
16
作者 刘文琪 邓江波 +3 位作者 吴晓茜 曾明 魏瑶 李雍龙 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2004年第5期323-325,F002,共4页
目的　探讨照射致弱的日本血吸虫尾蚴感染后小鼠皮肤组织中 CD11c分子的表达及在感染早期的动态变化。方法　 2 4只小鼠分为两组 ,一组感染正常尾蚴 10 0条 ,一组感染紫外线照射致弱的尾蚴 10 0条 ,于感染后的第 1、2、6、8、10天取感... 目的　探讨照射致弱的日本血吸虫尾蚴感染后小鼠皮肤组织中 CD11c分子的表达及在感染早期的动态变化。方法　 2 4只小鼠分为两组 ,一组感染正常尾蚴 10 0条 ,一组感染紫外线照射致弱的尾蚴 10 0条 ,于感染后的第 1、2、6、8、10天取感染处的皮肤组织 ,应用免疫组织化学技术观察感染处皮肤组织中 CD11c分子的表达 ,并分析其动态变化。结果　小鼠感染处皮肤组织中有 CD11c分子的表达。感染正常和致弱尾蚴的小鼠皮肤组织内 CD11c分子的表达都于第 2天达到高峰 ,且致弱尾蚴组较正常尾蚴组高。感染后第 4～ 10天 ,两组中 CD11c表达都逐渐下降。结论　照射致弱的血吸虫尾蚴感染小鼠的皮肤组织高表达 CD11c分子。 展开更多
关键词 日本血吸虫 致弱尾蚴 CD11c分子 动态表达
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黄瓜花叶病毒致弱卫星RNA对辅助病毒含量的影响 被引量：6
17
作者 柴立红 陈集双 陈子元 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第8期752-755,共4页
为研究黄瓜花叶病毒 (CMV)弱病毒株的基因组RNA和卫星RNA的含量变化 ,将一个卫星RNA介导的CMV弱病毒株NDM 1与CMV强毒株在 4种寄主系统上进行对照实验 .采用RNA点杂交方法 ,检测从早期接种病毒到大田释放阶段 (病毒接种后 5到 4 0天 ) ... 为研究黄瓜花叶病毒 (CMV)弱病毒株的基因组RNA和卫星RNA的含量变化 ,将一个卫星RNA介导的CMV弱病毒株NDM 1与CMV强毒株在 4种寄主系统上进行对照实验 .采用RNA点杂交方法 ,检测从早期接种病毒到大田释放阶段 (病毒接种后 5到 4 0天 ) ,寄主植物叶组织中的基因组RNA和卫星RNA的相对含量变化 .结果显示 :弱病毒株NDM 1基因组RNA和卫星RNA负荷量具有寄主效应和时间效应 ,趋势一致但程度不同 .它们在番茄上的变化规律不同于其他寄主而且病毒的致弱效果最明显 :在接种后的 5～ 10天 (生产上接种育苗的保护期 ) ,基因组RNA和卫星RNA相对含量上升 ,到 4 0天 (大田释放期 )时回落至最低 .比较NDM 1于不同时间在各寄主上的卫星RNA和基因组RNA的相对比值 :在 4 0天时 ,寄主番茄上的相对比值达 15 8,与在其他寄主上和其他时间段比较均有显著差异 ,即此时卫星RNA达到含量优势 .说明弱病毒NDM 1在番茄上的致弱机制为 :卫星RNA的大量复制对CMV基因组RNA产生抑制作用 . 展开更多
关键词 致弱卫星RNA 寄主效应 黄瓜花叶病毒 RNA点杂交 寄主植物 叶组织
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传染性法氏囊病病毒超强毒株致弱的分子生物学特征 被引量：9
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作者 许信刚 王笑梅 +1 位作者 李健强 童光志 《西北农业学报》 CSCD 2000年第3期12-15,22,共5页
为了探索传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)超强毒株致弱的分子特征变化 ,采用 RT-PCR技术 ,从超强毒 ( vv IBDV)及其不同代次细胞传代致弱毒中扩增到编码 VP2蛋白的 c DNA高变区基因 ,并对其序列测定。将 vv IBDV及其致弱毒株 VP2高变区的氨... 为了探索传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)超强毒株致弱的分子特征变化 ,采用 RT-PCR技术 ,从超强毒 ( vv IBDV)及其不同代次细胞传代致弱毒中扩增到编码 VP2蛋白的 c DNA高变区基因 ,并对其序列测定。将 vv IBDV及其致弱毒株 VP2高变区的氨基酸与其它血清 I型毒株比较 ,发现 vv IBDV与其致弱毒株在VP2高变区的 2 2 2、2 4 2、2 53、2 56、2 71、2 79、2 84、2 94、2 99和 3 0 0位氨基酸发生了改变 ,而这些氨基酸的变化使亲水区和七肽区发生了改变 。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 超强毒 致弱毒 序列分析
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I型犬腺病毒黑龙江株(CAV-H)的分离、鉴定及致弱的研究 被引量：4
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作者 刘大飞 王牟平 +7 位作者 曲连东 高艳 刘立奎 柴洪亮 刘春国 杨天阔 华育平 张洪英 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期956-959,共4页
为研究犬腺病毒(CAV)致弱疫苗的免疫原性,本研究将病犬的组织样品接种于MDCK细胞内,进行病毒分离及鉴定。鉴定结果显示,分离的病毒在MDCK细胞内产生明显的细胞病变(CPE),电镜下可见典型的腺病毒粒子;回归动物试验显示,该分离株可导致犬... 为研究犬腺病毒(CAV)致弱疫苗的免疫原性,本研究将病犬的组织样品接种于MDCK细胞内,进行病毒分离及鉴定。鉴定结果显示,分离的病毒在MDCK细胞内产生明显的细胞病变(CPE),电镜下可见典型的腺病毒粒子;回归动物试验显示,该分离株可导致犬出现明显的CAV感染症状;PCR鉴定结果表明分离的病毒为CAV,命名为CAV-H株;将CAV-H株接种MDCK细胞连续传代至110代,在传代过程中,病毒滴度由初始105.0 TCID50/0.1 mL上升至107.0 TCID50/0.1 mL,而CAV对犬的致病力逐渐降低;免疫效力试验结果表明,CAV-H可对同源强毒攻击的犬提供完全的免疫保护作用,可作为理想的疫苗候选毒株。 展开更多
关键词 犬细小病毒 分离与鉴定 致弱
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紫外线致弱日本血吸虫尾蚴诱导BALB/c小鼠免疫保护作用研究 被引量：4
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作者 周霞 诸葛洪祥 +4 位作者 龚唯 骆伟 魏莉 杜海林 陈明中 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期446-448,482,共4页
目的观察紫外线(UV)致弱日本血吸虫尾蚴免疫BALB/c小鼠免疫保护作用。方法辐照致弱日本血吸虫尾蚴,经腹部皮肤用UV致弱日本血吸虫尾蚴免疫诱导BALB/c小鼠,3周后进行攻击感染,同时设正常感染对照组。攻击感染6周后解剖小鼠,计算减虫率、... 目的观察紫外线(UV)致弱日本血吸虫尾蚴免疫BALB/c小鼠免疫保护作用。方法辐照致弱日本血吸虫尾蚴,经腹部皮肤用UV致弱日本血吸虫尾蚴免疫诱导BALB/c小鼠,3周后进行攻击感染,同时设正常感染对照组。攻击感染6周后解剖小鼠,计算减虫率、减卵率,并观察虫体发育情况和肝组织细胞免疫应答情况。结果免疫组的减虫率和减卵率分别为37.90%和51.16%;免疫组小鼠体内虫体发育明显滞后于正常感染对照组内虫体;免疫组小鼠肝脏虫卵肉芽肿较正常组明显减少。结论UV致弱日本血吸虫尾蚴免疫BALB/c小鼠能诱导较好的免疫保护力。 展开更多
关键词 日本血吸虫 BALB/C小鼠 紫外线致弱尾蚴 免疫病理反应
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