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发根农杆菌介导的草莓遗传转化体系构建
1
作者 朱雨萱 姚明军 +5 位作者 李斌 王瑛皎 张连曦 毕晓艺 连红莉 许鹏博 《果树学报》 北大核心 2026年第1期196-210,共15页
【目的】建立草莓高效、经济、快速的发根农杆菌转化体系。【方法】以发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)Ar.1193、Ar.Qual、C58C1、K599为转化菌株,选取八倍体栽培草莓粉玉和二倍体森林草莓rg40、Ruegen为试验材料,采用匍匐茎子株... 【目的】建立草莓高效、经济、快速的发根农杆菌转化体系。【方法】以发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)Ar.1193、Ar.Qual、C58C1、K599为转化菌株,选取八倍体栽培草莓粉玉和二倍体森林草莓rg40、Ruegen为试验材料,采用匍匐茎子株划伤法、短缩茎穿刺法、下胚轴侵染法3种外植体处理方法,结合35S::RUBY视觉报告基因,系统评估不同菌株的毛状根转化效率。【结果】在3种不同处理方法下,4种发根农杆菌均可诱导不同草莓外植体产生转基因阳性毛状根,其中菌株Ar.1193在3种处理方式中均表现最佳。栽培草莓粉玉采用匍匐茎子株划伤法产生的阳性毛状根诱导率高达79.41%,森林草莓rg40采用短缩茎穿刺法产生的阳性毛状根诱导率达到73.33%,森林草莓Ruegen采用下胚轴侵染法产生的阳性毛状根诱导率为14.38%。【结论】采用3种不同处理方法,筛选出最适宜诱导草莓毛状根的菌株为Ar.1193。初步建立了草莓毛状根培养体系,为后续草莓的遗传转化体系提供了科学依据。 展开更多
关键词 草莓 发根农杆菌 RUBY基因 遗传转化
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发根农杆菌介导龙葵遗传转化体系优化
2
作者 张静静 骆海霞 +1 位作者 洪艳苹 赵世成 《植物研究》 北大核心 2026年第1期111-119,共9页
该研究旨在通过建立发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)介导的龙葵(Solanum nigrum)遗传转化体系,提高遗传转化效率及总黄酮含量。研究以龙葵叶片为外植体,探究菌株类型、菌液浓度等因素对龙葵毛状根诱导率的影响。基于该体系,构建... 该研究旨在通过建立发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)介导的龙葵(Solanum nigrum)遗传转化体系,提高遗传转化效率及总黄酮含量。研究以龙葵叶片为外植体,探究菌株类型、菌液浓度等因素对龙葵毛状根诱导率的影响。基于该体系,构建重组质粒PBI121-6flag-SnCHI,通过农杆菌介导,诱导转SnCHI基因的毛状根,考察龙葵毛状根转SnCHI基因后的总黄酮含量变化。研究结果表明:菌株Ar.1193在OD600为1.0、侵染25 min、共培养24 h条件下,龙葵毛状根诱导率可达88.49%。对转SnCHI基因毛状根进行qRT-PCR检测,发现其基因表达水平是空白组的28.81倍;测定转SnCHI基因毛状根的总黄酮含量,发现转SnCHI基因毛状根的总黄酮含量最高达空白组的4.14倍。成功建立龙葵遗传转化体系,对SnCHI基因的功能进行研究,为同属植物的组织培养和遗传转化研究提供参考。 展开更多
关键词 龙葵 毛状根 发根农杆菌 遗传转化体系 黄酮类化合物
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黄瓜发根农杆菌转化体系的建立
3
作者 樊颖伦 徐风琳 +3 位作者 周慧珍 刘欣欣 杨欣玥 吕山花 《分子植物育种》 北大核心 2025年第1期113-118,共6页
黄瓜是根癌农杆菌介导遗传转化获得转基因植株较为困难的物种之一,尽管黄瓜的基因组测序已经完成,但大多数基因的功能尚未确定。发根农杆菌介导的毛状根转化能高效地诱导植物产生转基因根,为研究相关基因在根中的生物学功能提供了一种... 黄瓜是根癌农杆菌介导遗传转化获得转基因植株较为困难的物种之一,尽管黄瓜的基因组测序已经完成,但大多数基因的功能尚未确定。发根农杆菌介导的毛状根转化能高效地诱导植物产生转基因根,为研究相关基因在根中的生物学功能提供了一种方便、快捷的途径。本研究建立了由发根农杆菌介导的高效、快速的适用于在黄瓜活体上诱导产生转基因根的转化方法。利用携带红色荧光蛋白基因DsRed2的发根农杆菌K599穿刺接种不同基因型黄瓜幼苗的下胚轴,在高湿状态下培养2周左右。在3种不同基因型黄瓜幼苗的下胚轴穿刺部位生长出毛状根,通过红色荧光蛋白观察及PCR验证,表明89%~94%的穿刺植株携带有转基因毛状根,新生毛状根中转基因根的比例约为55%。由此建立了在活体黄瓜下胚轴诱导产生转基因根的方法,红色荧光蛋白基因DsRed2可以作为报告基因来筛选转基因根与非转基因根,剪去非转基因根和主根后进行移栽种植,即为携带有转基因根而地上茎为非转基因的野生型黄瓜植株,该方法为大规模分析黄瓜根中相关基因的功能、地上-地下信号转导等研究奠定了基础。 展开更多
关键词 黄瓜 发根农杆菌 转基因根 红色荧光蛋白
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棉花发根农杆菌转化体系的建立及生根优化 被引量：3
4
作者 汪炜檬 魏云晓 +4 位作者 唐云霓 刘苗苗 陈全家 邓晓娟 张锐 《中国农业科学》 北大核心 2025年第8期1479-1493,共15页
【背景】棉花是全球最主要的农作物之一,生物工程技术应用极大地提高了分子育种的效率,但棉花遗传转化目前存在受基因型限制、时间长和转化方法单一等问题。【目的】建立由发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)介导的高效棉花遗传转化... 【背景】棉花是全球最主要的农作物之一,生物工程技术应用极大地提高了分子育种的效率,但棉花遗传转化目前存在受基因型限制、时间长和转化方法单一等问题。【目的】建立由发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)介导的高效棉花遗传转化体系,丰富棉花遗传育种方法。【方法】以常用的棉花受体WC和R18为主要试验材料,利用mRUBY作为报告基因,通过诱导生根的激素组合和浓度的筛选优化、不同外植体和不同基因型棉花生根体系差异分析来对发根农杆菌介导的生根过程进行优化,在此基础上建立稳定的遗传转化体系,并将该体系应用于基因编辑。【结果】在生根培养基(RIM)中添加萘乙酸(naphthaleneacetic acid,NAA)和洛伐他汀(lovastatin)比单独添加NAA,或添加NAA+吲哚-3-丁酸(indole-3-butyric acid,IBA)、NAA+Lovastatin+IBA更易生根,进一步筛选出最适合诱导出毛状根的萘乙酸和洛伐他汀浓度均为2 mg·L^(-1)。子叶是最易诱导生根的外植体,WC子叶、子叶节和下胚轴单位材料的生根效率分别为398%、72%和39%,且子叶诱导生根时间最短(7 d),比子叶节至少短3 d,比下胚轴至少短8 d;R18最适合诱导生根的外植体也是子叶,但生根数量存在差异。基因型比较表明WC、R18、农大棉8号(NDM8)、新陆早61号(XLZ61)、Gb-1和Gb-2每片子叶在侵染后20 d的生根效率分别为398%、116%、199%、103%、57%和0,陆地棉的生根效率均在100%以上,海岛棉在100%以下,其中Gb-2在侵染后35 d才开始生根,陆地棉中常用的受体品种又表现出生根效率略高于生产品种的趋势。遗传转化的阳性率与生根率之间存在一定的差异,侵染后20 d NDM8、XLZ61、Gb-1和Gb-2的转化阳性率依次为59.8%、16.0%、38.5%和0。此外,以获得的阳性根作为后续试验的外植体,进行非胚性愈伤和胚性愈伤诱导,获得了转mRUBY植株,建立了完整的遗传转化体系,且发现植株颜色深浅和mRUBY表达量成正相关;同时获得了GhGI被编辑的棉花植株。【结论】优化了发根农杆菌介导的棉花生根过程,并建立了棉花遗传转化体系,同时成功将该体系应用于基因编辑,获得了转mRUBY和转GhGI的棉花植株。 展开更多
关键词 棉花 遗传转化 发根农杆菌 毛状根 基因编辑
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发根农杆菌转化青蒿影响因素的研究 被引量：9
5
作者 刘本叶 叶和春 +4 位作者 李国凤 贾燕涛 麻密 陈建林 张艳萍 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1998年第4期349-353,共5页
对叶盘法转化过程中各种影响因素进行研究．结果表明：发根农杆菌种类、基本培养基和青蒿株系对转化率有明显影响，而培养基ｐＨ在５．２～５．８对转化率没有明显影响；发根农杆菌ＡＴＣＣ１５８３４的转化率最高；基本培养基中ＭＳ效... 对叶盘法转化过程中各种影响因素进行研究．结果表明：发根农杆菌种类、基本培养基和青蒿株系对转化率有明显影响，而培养基ｐＨ在５．２～５．８对转化率没有明显影响；发根农杆菌ＡＴＣＣ１５８３４的转化率最高；基本培养基中ＭＳ效果最好；青蒿株系０２５对发根农杆菌最敏感；处于对数生长期的发根农杆菌（Ｄ６６０ｎｍ＝０．７５）稀释５倍后用来转化效果最好；幼嫩的叶片的转化率比成熟叶片高；向共培养培养基中加入乙酰丁香酮等酚类物质对转化没有促进作用．在最适的转化条件下，发根农杆菌ＡＴＣＣ１５８３４对青蒿株系０２５的转化率可达到１００％．ＰＣＲ检测证明，青蒿发根基因组中含有发根农杆菌Ｒｉ质粒ＴＤＮＡ上的ｒｏｌＣ片段． 展开更多
关键词 青蒿 发根农杆菌 发根诱导率 RI质粒 发根
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发根农杆菌介导的芜菁高效遗传转化体系建立 被引量：2
6
作者 马曦 张金睿 +7 位作者 庄红梅 陈巍 张蜜 袁晓琪 易小芳 王聪聪 王海云 王燕 《园艺学报》 北大核心 2025年第5期1389-1398,共10页
芜菁(Brassica rapa var.rapa L.)存在再生困难、转化效率低等问题。以新疆柯坪白皮芜菁为试材,对外植体类型、菌液侵染浓度、侵染与共培养时间及乙酰丁香酮(AS)浓度等进行筛选,建立发根农杆菌介导的芜菁毛状根转化体系。以6 d苗龄的芜... 芜菁(Brassica rapa var.rapa L.)存在再生困难、转化效率低等问题。以新疆柯坪白皮芜菁为试材,对外植体类型、菌液侵染浓度、侵染与共培养时间及乙酰丁香酮(AS)浓度等进行筛选,建立发根农杆菌介导的芜菁毛状根转化体系。以6 d苗龄的芜菁无根苗为外植体,采用添加200μmol·L^(-1)AS,菌液浓度OD600值为0.4时侵染12min,共培养36h后再转入含有400mg·L^(-1)羧苄青霉素(Carb)的MS抑菌培养基的转化效率最高,并将可视化标记RUBY应用于转基因阳性毛状根高效筛选。基于该体系结合生长发育调节因子(developmental regulators,DRs)成功获得稳定的阳性转基因芜菁植株,阳性转化效率可达10.61%,从种子萌发、芽再生到生根整个过程可以在3个月内完成。 展开更多
关键词 芜菁 发根农杆菌 毛状根 RUBY 发育调节因子
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胡萝卜发根培养甘薯茎线虫体系研究 被引量：6
7
作者 肖翔 阮龙 +4 位作者 王钰 潘燕 余增亮 吴跃进 许安 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期67-70,共4页
利用发根农杆菌转化的胡萝卜发根建立了甘薯茎线虫的单寄主培养体系,观察了甘薯茎线虫的行为及生活史.结果表明:在胡萝卜发根上培养甘薯茎线虫,便于研究其行为,可以清楚地观察到线虫在根毛处自由取食及侵入发根内部活动情况;雌虫可以正... 利用发根农杆菌转化的胡萝卜发根建立了甘薯茎线虫的单寄主培养体系,观察了甘薯茎线虫的行为及生活史.结果表明:在胡萝卜发根上培养甘薯茎线虫,便于研究其行为,可以清楚地观察到线虫在根毛处自由取食及侵入发根内部活动情况;雌虫可以正常产卵,线虫在20～25天内完成正常的生活史.基于观察到的上述结果,初步证实了所构建的胡萝卜发根培养甘薯茎线虫体系的可行性. 展开更多
关键词 甘薯茎线虫 发根农杆菌 单寄主培养 胡萝卜发根 甘薯 发根培养 胡萝卜 体系研究 农杆菌转化 培养体系 活动情况 生活史 寄主
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发根农杆菌介导的桑遗传转化体系的优化 被引量：1
8
作者 吴敏 廖扬振 +3 位作者 皮继岚 刘尚煜 魏渊 欧阳臻 《山东农业科学》 北大核心 2025年第3期27-36,共10页
本研究在已有桑遗传转化体系的基础上对其进行优化,以提高转化效率,为后续桑基因功能研究及分子育种奠定基础。首先分别从发根农杆菌种类、外植体类型、预培养时间、侵染时间和共培养时间五个方面对农杆菌介导的桑遗传转化体系进行优化... 本研究在已有桑遗传转化体系的基础上对其进行优化,以提高转化效率,为后续桑基因功能研究及分子育种奠定基础。首先分别从发根农杆菌种类、外植体类型、预培养时间、侵染时间和共培养时间五个方面对农杆菌介导的桑遗传转化体系进行优化,再构建MaCYP90A-pBI121质粒转入农杆菌诱导发根以验证优化体系的稳定性。结果表明,优化后的桑遗传转化条件为:采用OD_(600)为0.6的农杆菌LBA9402菌液侵染预培养2 d的无菌桑苗真叶10 min,共培养时间为2 d。在此优化条件下,毛状根诱导率可达到84.51%。同时利用该体系将重组质粒MaCYP90A-pBI121转化至桑叶中,经荧光定量PCR分析,阳性转基因毛状根中MaCYP90A基因表达量为空白对照的39.97倍。综上,本研究成功对已有桑遗传转化体系进行了优化,毛状根诱导率相比优化前(30.21%)提高了1.8倍,可为后续桑基因功能研究、次生代谢物合成途径解析以及分子育种提供技术支撑。 展开更多
关键词 桑 遗传转化体系 发根农杆菌 毛状根诱导 转基因
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金银花发根诱导初探 被引量：1
9
作者 袁靖 何钢 +2 位作者 王晓明 李樊 喻林华 《经济林研究》 2007年第1期55-58,共4页
研究了发根农杆菌的菌株类型、菌种浓度、浸染时间、预培养和共培养时间等对金银花发根诱导的影响。结果表明:农杆菌R1000培养OD600至0．6左右,稀释40倍浸染4 min时,诱导率最高,诱导率达58％。金银花外植体预培养5 d,与农杆菌共培养3 d... 研究了发根农杆菌的菌株类型、菌种浓度、浸染时间、预培养和共培养时间等对金银花发根诱导的影响。结果表明:农杆菌R1000培养OD600至0．6左右,稀释40倍浸染4 min时,诱导率最高,诱导率达58％。金银花外植体预培养5 d,与农杆菌共培养3 d,然后转入含500 mg／L羧苄青霉素的培养基杀菌培养是最适合的。 展开更多
关键词 金银花 发根 发根农杆菌 发根诱导率
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发根农杆菌介导的蓝莓遗传转化体系的建立
10
作者 邬婷婷 刘凉琴 +5 位作者 姜燕琴 葛春峰 田亮亮 刘梦溪 曾其龙 於虹 《果树学报》 北大核心 2025年第8期1897-1904,共8页
【目的】建立蓝莓(Vaccinium corymbosum)简单、快速、经济的发根农杆菌转化体系。【方法】以蓝美1号蓝莓地栽植株当年生绿枝的茎段为外植体,使用携带GFP过表达质粒的发根农杆菌K599,在不同菌液浓度及不同添加剂组合(乙酰丁香酮和表面... 【目的】建立蓝莓(Vaccinium corymbosum)简单、快速、经济的发根农杆菌转化体系。【方法】以蓝美1号蓝莓地栽植株当年生绿枝的茎段为外植体,使用携带GFP过表达质粒的发根农杆菌K599,在不同菌液浓度及不同添加剂组合(乙酰丁香酮和表面活性剂)的筛选条件下,通过注射蓝莓茎段的芽点及两端切口进行侵染,利用GFP荧光检测和DNA检测进行转基因株系验证。【结果】GFP荧光检测发现茎段芽点及下端切口处分别产生表达荧光信号的侧芽及毛状根;在菌液OD600值为0.5~1.5的浓度区间,OD600值为1.0时诱导率最高达42.31%;不同添加剂组合对诱导率具有较大影响,200μmol·L-1乙酰丁香酮加0.05%表面活性剂的添加剂组合中诱导率最高达42.50%;最早在培养45 d时取材鉴定蓝莓遗传转化株系,从20个随机样本中测得14株转化植株,预期最高转化率为29.75%。【结论】建立了简单、快速的发根农杆菌介导的蓝美1号蓝莓遗传转化体系,为蓝莓的基因功能研究和良种选育提供技术支持。 展开更多
关键词 蓝美1号 遗传转化 发根农杆菌
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发根农杆菌介导的黄瓜CsPIP2;4过表达复合植株获得及耐盐性鉴定
11
作者 陈思 陈梅 +2 位作者 赖梦霞 杜长霞 樊怀福 《河北农业大学学报》 北大核心 2025年第3期58-64,共7页
为明确CsPIP2;4在黄瓜盐胁迫耐性中的功能,本研究将含有pCAMBIA2300s载体的空质粒和pCAMBIA2300s:CsPIP2;4质粒分别转入发根农杆菌K599菌株中,通过下胚轴注射法获得根系CsPIP2;4过表达(OP)复合植株和空载(EV)复合植株。比较了盐胁迫处理... 为明确CsPIP2;4在黄瓜盐胁迫耐性中的功能,本研究将含有pCAMBIA2300s载体的空质粒和pCAMBIA2300s:CsPIP2;4质粒分别转入发根农杆菌K599菌株中,通过下胚轴注射法获得根系CsPIP2;4过表达(OP)复合植株和空载(EV)复合植株。比较了盐胁迫处理后2个不同复合植株形态特征,丙二醛(MDA)、可溶性糖和可溶性蛋白含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性差异。结果表明:与EV复合植株相比,盐胁迫下OP复合黄瓜植株长势更好,叶片失绿和边缘焦枯症状较轻,根系更发达。同时,叶片MDA含量和SOD活性降低,可溶性蛋白含量和可溶性糖含量升高,在胁迫7 d后各指标均达到显著或极显著差异水平。综上可知,CsPIP2;4正调控黄瓜植株的耐盐性且与其促进可溶性糖和可溶性蛋白等渗透调节物质积累密切相关。 展开更多
关键词 黄瓜 CsPIP2 4 发根农杆菌 复合植株 盐胁迫
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发根农杆菌介导的唐古特大黄遗传转化体系构建
12
作者 孙晴 张会轩 +3 位作者 李欣 李毅 刘宝龙 胡延萍 《植物生理学报》 北大核心 2025年第8期1171-1179,共9页
唐古特大黄(Rheum tanguticum)是《中国药典》收载的三种“正品大黄”之一。本研究采用四因素三水平正交试验方法,探讨菌液浓度、外植体类型、乙酰丁香酮浓度和共培养时间四个关键因素对唐古特大黄毛状根诱导的影响,并针对5种不同的发... 唐古特大黄(Rheum tanguticum)是《中国药典》收载的三种“正品大黄”之一。本研究采用四因素三水平正交试验方法,探讨菌液浓度、外植体类型、乙酰丁香酮浓度和共培养时间四个关键因素对唐古特大黄毛状根诱导的影响,并针对5种不同的发根农杆菌菌株和侵染时间进行试验。结果表明,菌液浓度(OD_(600))为0.4、外植体为胚轴、乙酰丁香酮浓度为100 mg·L^(-1)、共培养时间为4 d时毛状根诱导率最高。PCR技术检测诱导出的毛状根,初步证实了发根农杆菌Ri质粒中的rol C基因已整合到唐古特大黄毛状根中。此外,我们构建过表达载体进行毛状根遗传转化,经PCR扩增初步确认目的基因已整合到唐古特大黄毛状根中。本研究建立了发根农杆菌介导的唐古特大黄遗传转化体系,为唐古特大黄基因功能研究和毛状根次生代谢产物的产业化提供技术参考。 展开更多
关键词 唐古特大黄 发根农杆菌 遗传转化 毛状根 诱导率
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发根农杆菌介导的叶用莴苣毛状根转化体系的建立 被引量：1
13
作者 屈阿艳 曹佳琰 +1 位作者 王惠玉 韩莹琰 《北京农学院学报》 2025年第2期21-27,共7页
【目的】探明叶用莴苣毛状根诱导体系,找寻快速高效的莴苣根系转化技术。【方法】将过表达载体pROKⅡ(含有报告基因GFP)和pBI121(含有报告基因GUS)导入发根农杆菌K599,侵染叶用莴苣‘S39’幼苗下胚轴,并通过常规PCR、GUS染色、体式荧光... 【目的】探明叶用莴苣毛状根诱导体系,找寻快速高效的莴苣根系转化技术。【方法】将过表达载体pROKⅡ(含有报告基因GFP)和pBI121(含有报告基因GUS)导入发根农杆菌K599,侵染叶用莴苣‘S39’幼苗下胚轴,并通过常规PCR、GUS染色、体式荧光显微镜检测和手持式荧光仪检测等方法,评价该转化体系的效果。【结果】利用发根农杆菌K599可实现一个月内叶用莴苣根的稳定转化,其中,侵染子叶期幼苗效果最佳,其毛状根系诱导率可达100%,阳性毛状根植株的转化效率约为40%。【结论】发根农杆菌介导的叶用莴苣毛状根遗传转化体系,具有转化周期短,操作简易,转化率高的特点,可以用于目标基因功能的快速验证,为叶用莴苣根系相关基因的研究提供有力的技术支持。 展开更多
关键词 叶用莴苣 发根农杆菌 毛状根
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发根农杆菌介导的野葛毛状根遗传转化体系 被引量：2
14
作者 曾文丹 严华兵 +8 位作者 吴正丹 尚小红 曹升 陆柳 英肖亮 施平丽 程冬 龙紫媛 李婕宇 《植物学报》 北大核心 2025年第3期425-434,共10页
为建立高效的野葛(Puerarialobata)毛状根遗传转化体系,以野葛组培苗为外植体,探讨不同因素对野葛毛状根遗传转化效率的影响。结果表明,基因型是建立野葛毛状根高效遗传转化体系的主要限制因子;发根农杆菌K599为最适宜的菌株;以培养5–1... 为建立高效的野葛(Puerarialobata)毛状根遗传转化体系,以野葛组培苗为外植体,探讨不同因素对野葛毛状根遗传转化效率的影响。结果表明,基因型是建立野葛毛状根高效遗传转化体系的主要限制因子;发根农杆菌K599为最适宜的菌株;以培养5–13代组培苗继代培养8天、第1–2节位刚展开的幼嫩叶片为最佳外植体材料,预培养3天,菌液侵染15分钟,毛状根诱导率最高,可达22.4%。野葛毛状根继代增殖的最佳培养基类型为固体培养基,其毛状根鲜重是液体培养基中毛状根鲜重的75倍;PCR检测和荧光显微观察结果显示,GFP及rolB基因在野葛毛状根基因组中稳定表达,共转化率为80%。研究初步建立了发根农杆菌介导的野葛毛状根遗传转化体系,旨在为野葛基因功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 野葛 发根农杆菌 毛状根 遗传转化
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发根农杆菌介导的水角遗传转化体系的建立
15
作者 周荟森 谭德冠 +4 位作者 王英 付莉莉 于颖 孙雪飘 张家明 《热带生物学报(中英文)》 2025年第5期755-764,共10页
水角(Hydrocera triflora)是重要的濒危水生植物,耐旱性差是导致其濒危的重要因素。本研究拟建立水角遗传转化体系,并对其进行遗传改良,以期减轻其濒危程度。首次建立并优化了发根农杆菌介导的水角遗传转化体系。在优化该转化体系研究中... 水角(Hydrocera triflora)是重要的濒危水生植物,耐旱性差是导致其濒危的重要因素。本研究拟建立水角遗传转化体系,并对其进行遗传改良,以期减轻其濒危程度。首次建立并优化了发根农杆菌介导的水角遗传转化体系。在优化该转化体系研究中,发现水培扦插转化法较优,菌株K599转化率最高,带顶芽插穗作侵染外植体转化效果较优。优化的转化体系转化率高达63.3%。构建了过表达海藻糖合成酶MeTPS6基因的载体并获得其转基因植株。3%(m/m)polyethylene glycol-6000(PEG-6000)溶液处理3 d,发现转基因植株生长正常,而对照叶片出现萎蔫。经检测转基因植株毛状根的海藻糖含量显著高于对照。这些结果表明过表达MeTPS6转基因水角的耐旱能力得到显著改善。本研究结果为水角的性状改良和基因功能验证提供基础,也为其他水生植物高效转化体系的建立提供技术借鉴。 展开更多
关键词 水角 发根农杆菌 遗传转化 转基因复合植株 耐旱
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发根农杆菌介导的茄科作物转化体系研究进展
16
作者 段宇 胡博文 《辣椒杂志》 2025年第3期11-19,共9页
茄科作物作为全球重要作物,涵盖马铃薯、番茄、辣椒、烟草等关键粮食、蔬菜及经济作物,其产量和品质直接影响农业发展与人类健康。然而,茄科作物在生产过程中常面临生物胁迫和非生物胁迫等问题,需通过基因编辑、转基因等遗传改良技术提... 茄科作物作为全球重要作物,涵盖马铃薯、番茄、辣椒、烟草等关键粮食、蔬菜及经济作物,其产量和品质直接影响农业发展与人类健康。然而,茄科作物在生产过程中常面临生物胁迫和非生物胁迫等问题,需通过基因编辑、转基因等遗传改良技术提升其抗逆性和产量。发根农杆菌介导的转化因其宿主范围广、操作简便、无需组织培养、稳定遗传且适用于根系相关基因功能解析,已成为茄科作物分子育种和基因功能研究的重要工具。综述了发根农杆菌Ri质粒的分类与结构特征及其在茄科作物中的应用,重点探讨了发根农杆菌在基因功能验证与抗性育种中的创新实践,并对其未来发展方向进行了展望,以期为茄科作物改良提供理论参考。 展开更多
关键词 发根农杆菌 茄科作物 转化体系
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青蒿发根生长及青蒿素生物合成动态的研究 被引量：14
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作者 刘本叶 叶和春 +4 位作者 李国凤 陈大华 耿飒 张艳萍 陈建林 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期401-404,共4页
从７４７条发根农杆菌ＡＴＣＣ１５８３４转化的青蒿株系０２５发根中，筛选出７个生长较快的发根系，这７个系在生长速度和青蒿素含量上均有显著差异，其中发根系ＨＲ９青蒿素产率最高，达到每月３３２５ｍｇ／Ｌ。青蒿发根的生长... 从７４７条发根农杆菌ＡＴＣＣ１５８３４转化的青蒿株系０２５发根中，筛选出７个生长较快的发根系，这７个系在生长速度和青蒿素含量上均有显著差异，其中发根系ＨＲ９青蒿素产率最高，达到每月３３２５ｍｇ／Ｌ。青蒿发根的生长量和青蒿素含量极显著高于未转化根和愈伤组织。青蒿发根在分批培养中没有明显的迟滞期，接种后第７天进入指数生长期，第１１天生长最快，第２０天进入稳定期。青蒿发根中青蒿素含量呈明显的“与生长相关”特性，在指数生长期，青蒿素含量缓慢下降，生长速度减缓后，青蒿素含量上升，发根生长停止后，继续延长培养时间，青蒿素含量也不再提高。在分批培养中，青蒿发根适宜的培养时间为２１ｄ。 展开更多
关键词 青蒿 发根 发根农杆菌 青蒿素 生物合成
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发根农杆菌诱导人参产生发根及离体发根中人参皂甙含量的测定 被引量：19
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作者 赵寿经 杨振堂 +2 位作者 李昌禹 臧埔 申玉华 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期57-63,共7页
发根农杆菌A4菌株诱导人参 (PanaxginsengC .A .Meyer)产生发根 ,诱导率 31 .6%。转化发根可在无任何激素的MS培养基上快速生长 ,且具有分枝性强、丛生、无向地性等特点。通过对液体培养条件的选择 ,发现人参发根在 1 /2MS液体培养基上 ... 发根农杆菌A4菌株诱导人参 (PanaxginsengC .A .Meyer)产生发根 ,诱导率 31 .6%。转化发根可在无任何激素的MS培养基上快速生长 ,且具有分枝性强、丛生、无向地性等特点。通过对液体培养条件的选择 ,发现人参发根在 1 /2MS液体培养基上 ( 2 5℃、1 1 0r/min摇床上暗培养 )获得最大生长速率 ,经 1 4d培养 ,人参发根鲜重增加了 7.97倍。利用高效液相色谱法测定发根中人参皂甙含量发现 ,发根系R992 3中人参单体皂甙Rb1 含量达到 1 0 .38mg/g ,超过栽培六年生人参根中Rb1 含量 ( 6.45mg/g)。用高压纸电泳方法在人参发根中检测到农杆碱及甘露碱的存在。Southern点杂交证明 :本研究获得的人参发根确已被A4菌株Ri质粒的T -DNA所转化 ,并被整合到人参发根DNA上。 展开更多
关键词 人参发根 遗传转化 人参皂甙 液体培养 人参 含量测定 发根农杆菌
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发根农杆菌介导的金花茶毛状根活体遗传转化体系的建立
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作者 黄涵 喇燕菲 +2 位作者 岑东灿 徐增富 王翊 《基因组学与应用生物学》 北大核心 2025年第3期229-240,共12页
金花茶(Camellia petelotii)是我国特有的植物资源,具有较高的观赏价值和药用价值,建立转基因体系可为开展金花茶特定基因功能鉴定和金花茶性状遗传改良提供基本方法。本研究以金花茶成熟叶片为材料,分别以携带红色荧光蛋白基因DsRed2... 金花茶(Camellia petelotii)是我国特有的植物资源,具有较高的观赏价值和药用价值,建立转基因体系可为开展金花茶特定基因功能鉴定和金花茶性状遗传改良提供基本方法。本研究以金花茶成熟叶片为材料,分别以携带红色荧光蛋白基因DsRed2和发育调节因子GRF5的发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)进行离体转化,利用石蜡切片观察叶柄切口处愈伤组织和毛状根的细胞形态。结果表明,金花茶叶柄切口处在发根农杆菌侵染后22 d时就有愈伤组织出现,72 d时生根率达到10.00%左右,而ddH_(2)O对照处理的金花茶叶柄切口处愈伤组织形成的时间较晚,且无毛状根产生。同时,发根农杆菌K599可将外源基因DsRed2和发育调节因子GRF5转入毛状根基因组中,转基因效率为0.83%~3.33%。石蜡切片显示GRF5转基因金花茶愈伤组织中活性细胞较DsRed2转基因愈伤组织中的多,GRF5转基因毛状根中可观察到从内皮层产生毛状根原基,内皮层及中柱鞘细胞染色程度深,细胞活性强。本研究用携带荧光蛋白和发育调节因子基因的发根农杆菌侵染金花茶离体成熟叶片的叶柄切口,诱导金花茶产生转基因毛状根,初步建立了金花茶转基因毛状根诱导体系,为后续金花茶花色和药用次生代谢物含量等性状的遗传改良提供了新思路。 展开更多
关键词 金花茶 发根农杆菌 转基因毛状根 石蜡切片 离体叶片转化
原文传递
茶叶儿茶素对发根农杆菌的抑制作用及抗酚菌株筛选研究 被引量：11
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作者 毛清黎 施兆鹏 +2 位作者 李玲 刘仲华 朱旗 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期243-247,共5页
本文研究了茶叶儿茶素对发根农杆菌的抑制作用并进行了抗酚菌株的筛选。结果表明:儿茶素(TC80)对发根农杆菌有明显的抑制作用,其MIC90为25～100μg/ml,这阐明了茶树中富含儿茶素等多酚类是制约农杆菌介导法对茶树进行遗传转化的关键因... 本文研究了茶叶儿茶素对发根农杆菌的抑制作用并进行了抗酚菌株的筛选。结果表明:儿茶素(TC80)对发根农杆菌有明显的抑制作用,其MIC90为25～100μg/ml,这阐明了茶树中富含儿茶素等多酚类是制约农杆菌介导法对茶树进行遗传转化的关键因子。通过抗酚筛选获得的抗酚菌株R1000AP,其抗酚性提高10～40倍,其诱导茶树的发根频率提高46.5%(P<0.05)。 展开更多
关键词 儿茶素 发根农杆菌 抑制作用 抗酚菌株 筛选 发根频率
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