期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到5,039篇文章
< 1 2 … 250 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
3种食源性致病菌SDS-PMA-mRT-qPCR检测方法建立及其在乳品中的应用
1
作者 刘霈霖 匙辰鹏 +1 位作者 王雁伟 艾鹏飞 《食品工业科技》 北大核心 2026年第1期311-317,共7页
本研究利用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)联合叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)预处理样品后,采用多重实时荧光定量PCR(multiple real-time quantitative polymerase chain reaction,m RTqPCR)方法快速、准确检测... 本研究利用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)联合叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)预处理样品后,采用多重实时荧光定量PCR(multiple real-time quantitative polymerase chain reaction,m RTqPCR)方法快速、准确检测乳制品中沙门氏菌、单增李斯特菌和产志贺毒素大肠埃希氏菌3种食源性致病菌。通过对沙门氏菌中的invA基因、单增李斯特菌中的hly基因和产志贺毒素大肠埃希氏菌中的stx基因的保守序列分别设计特异性引物和探针,建立mRT-qPCR反应体系,探讨PMA预处理消除由死菌造成的检测的假阳性结果,并对检测的特异性、检出限、稳定性以及模拟样品中的检测效果进行了研究。结果表明,PMA结合SDS的预处理能有效排除死菌对mRT-qPCR检测结果的干扰,最佳PMA浓度为20μmol/L;建立的mRT-qPCR方法特异性强,在18株非目标菌的干扰下仅对3种目标菌进行特异性扩增;灵敏度高,3种目标菌的检出限均为10^(2) CFU/mL;稳定性好,不同批次内和批次间的重复性检测的变异系数均小于1%;对不同污染乳品的检测结果与国家标准中的培养法一致,检测周期约7 h。本研究建立的SDS-PMA-mRT-qPCR方法可以实现对沙门氏菌、单增李斯特菌和产志贺毒素大肠埃希氏菌的快速检测,为乳品安全提供技术支持。 展开更多
关键词 多重实时荧光定量PCR(mRT-qPCR) 叠氮溴化丙锭 沙门氏菌 单增李斯特菌 产志贺毒素大肠埃希氏菌
在线阅读 下载PDF
沙门氏菌智能可视化SEA检测方法的建立
2
作者 孙笑天 王俊颖 +4 位作者 龚莹婷 孟静南 李真 赵岩岩 翟立公 《食品工业科技》 北大核心 2026年第1期300-310,共11页
目的:建立一种基于链交换等温扩增技术(strand exchange amplification,SEA)与手机端检测程序(application,APP)结合的快速、可视化检测沙门氏菌的方法。方法:优化了富集样品核酸的壳寡糖修饰的二氧化硅膜(chitosan-modified silica mem... 目的:建立一种基于链交换等温扩增技术(strand exchange amplification,SEA)与手机端检测程序(application,APP)结合的快速、可视化检测沙门氏菌的方法。方法:优化了富集样品核酸的壳寡糖修饰的二氧化硅膜(chitosan-modified silica membrane,CMSM),设计SEA等温扩增反应的引物,通过中性红显色开发的智能手机APP“沙门智检”,并对方法的特异性、灵敏度、抗干扰能力和人工污染检测能力进行评估。结果:该检测平台对沙门氏菌的检测表现出较强的特异性,基因组DNA灵敏度为10 pg/μL,菌落灵敏度为1.5×10^(2) CFU/mL,对猪肉自然背景菌群的干扰具有较好的抗性,人工污染猪肉样品中的检测灵敏度为3.57×10^(2) CFU/mL。结论:本研究建立的SEA智能可视化检测体系具有快速、灵敏、高特异性及智能可视化检测沙门氏菌的特点,可为食品中沙门氏菌的现场可视化快速筛查提供一种新型简便的策略。 展开更多
关键词 沙门氏菌 链交换等温扩增 壳寡糖 可视化检测
在线阅读 下载PDF
基于微流控芯片的鼠伤寒沙门氏菌免疫磁分离 被引量：1
3
作者 金彦 王敬依 +4 位作者 程佳宁 于乐民 张壁臣 张一博 许童羽 《食品科学》 EI CAS 北大核心 2025年第1期200-209,共10页
开发一种用于鼠伤寒沙门氏菌快速分离与富集的免疫磁分离微流控系统,该系统由微流控芯片、微控制器、电磁分离与混合模块组成,具备电磁驱动混合和磁分离功能,能够实现免疫磁珠与鼠伤寒沙门氏菌的快速孵育、分离与富集。在最优条件下,可... 开发一种用于鼠伤寒沙门氏菌快速分离与富集的免疫磁分离微流控系统,该系统由微流控芯片、微控制器、电磁分离与混合模块组成,具备电磁驱动混合和磁分离功能,能够实现免疫磁珠与鼠伤寒沙门氏菌的快速孵育、分离与富集。在最优条件下,可以在13 min内实现对牛奶样品中浓度范围为2×10^(1)~2×10^(6) CFU/m L鼠伤寒沙门氏菌的快速捕获与分离,捕获率在33.3%~67.5%之间,最低检测限为20 CFU/m L。因此,这种高度集成的免疫磁分离微流控系统能够从复杂食品基质中迅速、准确地富集目标细菌,为食源性致病菌的快速检测提供了有效的解决方案,对于应对食源性疾病引发的公共卫生问题具有重要意义。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门氏菌 免疫磁珠 免疫磁分离 主动电磁混合 微流控芯片
在线阅读 下载PDF
马铃薯葡萄糖琼脂与孟加拉红琼脂培养基检测霉菌的效果比较 被引量：1
4
作者 陆峥 张晓嫒 +3 位作者 董葵 王丽丽 牟椿頔 崔霞 《食品安全质量检测学报》 2025年第6期59-65,共7页
目的 比较马铃薯葡萄糖琼脂与孟加拉红琼脂两种计数培养基的霉菌计数效果。方法 分别使用马铃薯葡萄糖琼脂培养基与孟加拉红琼脂培养基对20株霉菌标准菌株、15株常见食源性致病菌标准菌株进行生长率、特异性及选择性比较,并应用两种培... 目的 比较马铃薯葡萄糖琼脂与孟加拉红琼脂两种计数培养基的霉菌计数效果。方法 分别使用马铃薯葡萄糖琼脂培养基与孟加拉红琼脂培养基对20株霉菌标准菌株、15株常见食源性致病菌标准菌株进行生长率、特异性及选择性比较,并应用两种培养基对36件实际食品样品和174件食品接触环境冰箱涂抹样品进行计数效果对比。结果 测试的20种霉菌标准菌株在马铃薯葡萄糖琼脂与孟加拉红琼脂两种培养基的生长率PR值均大于0.7、选择性G值均小于1,但在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上霉菌具有更为典型的菌落形态,其特异性优于孟加拉红琼脂培养基。在实际样品检测中马铃薯葡萄糖琼脂培养基检出率较高,与孟加拉红培养基相比差异性显著(χ^(2)=13.551, P=0.001),特别是在低污染的样品检测中具有较高的检出率(χ^(2)=9.929, P=0.001),但是对于高污染样品,使用孟加拉红琼脂培养基更便于计数。结论 使用单一培养基会影响计数结果,建议在食品样品进行霉菌计数时,同时应用两种培养基或根据污染程度选择适当的计数培养基。 展开更多
关键词 霉菌 孟加拉红琼脂培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 计数检测
原文传递
冷藏肉中致病菌的三重ERA快速检测
5
作者 杨艳歌 吴占文 +6 位作者 刘通 王帅 魏莹 赵健淞 李红娜 李涛 张峰 《华南理工大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期135-146,共12页
肉类食品因富含营养,常成为微生物滋生的理想环境,即使在低温储存下,多数微生物也依然保持活性和保留部分毒力,故对肉类食品进行致病菌筛查至关重要。该研究基于酶促重组等温扩增技术(ERA),开发三重荧光ERA快速检测方法,并对方法的特异... 肉类食品因富含营养,常成为微生物滋生的理想环境,即使在低温储存下,多数微生物也依然保持活性和保留部分毒力,故对肉类食品进行致病菌筛查至关重要。该研究基于酶促重组等温扩增技术(ERA),开发三重荧光ERA快速检测方法,并对方法的特异性、灵敏度、检出限进行性能分析,然后对市售冷藏肉开展方法的适用性验证,并与行业标准SN/T 1870—2016实时荧光聚合酶链式反应(PCR)方法进行结果比对。结果显示:成功构建了一种针对冷藏肉类中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌3种关键致病菌的三重荧光ERA快速检测方法;经过优化,该方法能在12 min内通过单次反应同时完成3种致病菌的快速检测;最低检出限低至10^(-3)ng/μL;对于人工模拟污染样品,经过6 h的前增菌,采用该方法可同时检出污染量为1 CFU/m L的3种致病菌;对市售冷藏肉品的抽检结果显示,金黄色葡萄球菌检出率为19.35%,沙门氏菌检出率为12.90%,单核细胞增生李斯特氏菌检出率为6.45%,与行业标准SN/T 1870—2016的检测结果吻合,充分证明了该方法的准确性与适用性。该研究不仅有助于降低食源性致病菌引发的疾病风险,还可为未来食源性致病菌现场快速检测提供坚实的技术支撑。 展开更多
关键词 冷藏肉品 食源性致病菌 三重荧光ERA 快速检测
在线阅读 下载PDF
基于PCR技术的食品微生物安全检测方法研究 被引量：1
6
作者 高庚渠 《食品安全导刊》 2025年第16期130-132,共3页
开展食品微生物检测不仅有利于减少食品安全事件发生,还可提高产品质量,推动食品行业可持续发展。聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)作为一种高效灵敏的分子生物学检测方法,具有特异性强、检测迅速及操作简单的优势。本文... 开展食品微生物检测不仅有利于减少食品安全事件发生,还可提高产品质量,推动食品行业可持续发展。聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)作为一种高效灵敏的分子生物学检测方法,具有特异性强、检测迅速及操作简单的优势。本文基于PCR技术在食品微生物安全检测中的应用现状展开研究,并探讨PCR技术在食品安全检测中的应用策略。分析认为,PCR技术在食品微生物安全检测中的应用仍存在样本处理复杂、引物与探针设计相对不足、检测技术类型较为单一等问题。基于此,提出优化样本处理方法、加强引物与探针设计、优化检测技术等策略,以期为保障食品微生物安全提供理论支持。 展开更多
关键词 聚合酶链式反应(PCR) 食品微生物安全检测 食源性致病菌 食品安全
在线阅读 下载PDF
PCR技术在食源性致病菌检测中的质量控制 被引量：1
7
作者 赵炳岩 《现代食品》 2025年第4期188-190,共3页
食源性致病菌种类多、来源广、危害大且繁殖迅速,现已成为危害食品安全的重要因子,因此,选择科学并高效的检测手段尤为重要[1]。PCR技术作为传统培养法的辅助手段,被广泛应用到食品检测中。本文从人员、环境和仪器设备等方面探讨了PCR... 食源性致病菌种类多、来源广、危害大且繁殖迅速,现已成为危害食品安全的重要因子,因此,选择科学并高效的检测手段尤为重要[1]。PCR技术作为传统培养法的辅助手段,被广泛应用到食品检测中。本文从人员、环境和仪器设备等方面探讨了PCR技术在食品检测中的质量控制工作,旨在提高PCR检测结果的准确性和可靠性,提高食源性致病菌的检出率,缩短检出时间,为食源性疾病或食物中毒疫情的流行病学调查和临床诊断提供病原学依据。 展开更多
关键词 食源性致病菌 PCR技术 质量控制 病原学依据
在线阅读 下载PDF
快速检测方法在食品微生物检测中的应用研究 被引量：1
8
作者 刘瑞锦 冯倩倩 王园园 《中国食品工业》 2025年第9期86-88,共3页
食品安全是公共卫生领域的重要议题,而微生物污染是导致食品安全问题的主要原因之一。随着科学技术的进步,快速检测方法应运而生,为食品微生物检测带来新的突破。本文基于当前主流的快速检测技术,深入探讨其在食品微生物检测领域的实际... 食品安全是公共卫生领域的重要议题,而微生物污染是导致食品安全问题的主要原因之一。随着科学技术的进步,快速检测方法应运而生,为食品微生物检测带来新的突破。本文基于当前主流的快速检测技术,深入探讨其在食品微生物检测领域的实际应用及其未来的发展趋势,旨在为食品安全监管体系提供坚实的技术支撑与参考依据。 展开更多
关键词 快速检测方法 食品微生物 食品安全
在线阅读 下载PDF
食品常见食源性致病菌污染调查数据分析 被引量：1
9
作者 薛英伟 乔璐 《中外食品工业》 2025年第5期17-19,共3页
本文旨在研究并分析2020年至2023年期间,鄂尔多斯市内不同种类的食源性致病菌的检出情况,及食源性致病菌在不同种类食品、不同采样地点食品中的检出情况,为鄂尔多斯市食品安全提供数据支持。2020年至2023年期间,选取了鄂尔多斯市的2075... 本文旨在研究并分析2020年至2023年期间,鄂尔多斯市内不同种类的食源性致病菌的检出情况,及食源性致病菌在不同种类食品、不同采样地点食品中的检出情况,为鄂尔多斯市食品安全提供数据支持。2020年至2023年期间,选取了鄂尔多斯市的2075份食品样本,对这些样本中不同种类的食源性致病菌检出情况进行了统计分析,并进一步探讨了食源性致病菌在不同种类食品、不同采样地点食品中的检出情况。结果显示,2020年至2023年,在针对本市的2075份食品样本进行的检测中,对比分析结果显示,各食源性致病菌检出率进行比较,有显著差异。在本市肉类产品中,相较于熟肉类食品,生肉类食品的食源性致病菌检出率显著更高,这一差异具有统计学意义。同时,对本市农贸市场、餐饮机构、超市及饭店中的食品进行食源性致病菌检测后发现,其检出率之间亦存在统计学上的显著差异。由此可见,2020年至2023年鄂尔多斯市总体食品安全情况良好,但仍存在食源性致病菌污染情况,在各类食源性致病菌中,副溶血性弧菌的检出率位居首位。肉类食品,尤其是熟肉制品,主要受金黄色葡萄球菌污染影响显著。同时,水产品及生肉类也存在副溶血性弧菌的污染问题。农贸市场中的食品污染状况尤为突出。鉴于此,未来应针对上述情况不断强化监管力度,并开展健康教育活动,以期有效辅助降低食品污染的风险。 展开更多
关键词 食源性致病菌 微生物 检出率
在线阅读 下载PDF
2015—2024年食品微生物能力验证的结果分析与探讨
10
作者 闻艳红 李楠 +3 位作者 谷田 徐代庆 彭华 舒高林 《粮油与饲料科技》 2025年第1期131-133,共3页
随着食品工业的快速发展及消费者对食品安全问题关注度的日益提升,食品微生物检测在保障食品安全方面发挥着至关重要的作用。2015—2024年,实验室积极参与了由中国检验检疫科学研究院测试评价中心、北京市疾病预防控制中心等多家检测机... 随着食品工业的快速发展及消费者对食品安全问题关注度的日益提升,食品微生物检测在保障食品安全方面发挥着至关重要的作用。2015—2024年,实验室积极参与了由中国检验检疫科学研究院测试评价中心、北京市疾病预防控制中心等多家检测机构组织的13次能力验证,共计检测了26件样品。结果显示,除2016年在副溶血性弧菌检测中出现一次不满意结果外,其余12次能力验证的结果均为满意。通过综合分析2015—2024年食品微生物能力验证的结果,探讨如何提高食品微生物检测能力,以确保食品安全。 展开更多
关键词 微生物 能力验证 质量控制
在线阅读 下载PDF
基于串联CRISPR-Cas13a的食品包装病原微生物污染免扩增分子检测
11
作者 张勇 华迪明 +1 位作者 邓锐杰 高鸿 《食品安全质量检测学报》 2025年第15期94-100,共7页
目的开发一款基于串联规律间隔成簇短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)和CRISPR相关蛋白13a(CRISPR-associated protein 13a,Cas13a)组成的CRISPR-Cas13a快速、灵敏的食品包装病原微生... 目的开发一款基于串联规律间隔成簇短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)和CRISPR相关蛋白13a(CRISPR-associated protein 13a,Cas13a)组成的CRISPR-Cas13a快速、灵敏的食品包装病原微生物检测技术。方法利用CRISPR-Cas13a技术的特异识别和信号放大特性,同时基于对病原RNA多靶点识别的串联设计,通过一个病原RNA分子激活多个Cas13a,反式切割反应体系中的RNA信号报告分子并伴随荧光信号产生,协同提升信号放大效率,从而实现对病原体的灵敏检测。结果该方法对病原微生物及RNA的检出限分别为800 copies/m L和18.7 pmol/L,能够在较短时间内完成病原RNA检测,同时能够准确区分不同病原微生物。测试新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-Co V-2)假病毒污染的食品包装样品显示,方法测定的回收率在89.71%~102.56%。结论本研究提供了一种快速、经济且操作简便的食品包装病原微生物污染检测方法,具备较好的准确性。对食源途径风险微生物的监控具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 病原微生物 规律间隔成簇短回文重复序列相关蛋白13a 免扩增检测 食品包装 食品安全
原文传递
冷链食品病原微生物污染核酸检测技术研究进展
12
作者 张婷 华迪明 +2 位作者 何强 邓莎 邓锐杰 《食品安全质量检测学报》 2025年第20期99-108,共10页
冷链食品的病原微生物污染对食品品质和安全构成严重威胁。核酸检测技术因其高灵敏度和特异性,已成为冷链食品病原微生物检测的重要手段。本文系统综述了近年来冷链食品中病原微生物核酸检测技术的研究进展,包括核酸分子检测技术(聚合... 冷链食品的病原微生物污染对食品品质和安全构成严重威胁。核酸检测技术因其高灵敏度和特异性,已成为冷链食品病原微生物检测的重要手段。本文系统综述了近年来冷链食品中病原微生物核酸检测技术的研究进展,包括核酸分子检测技术(聚合酶链式反应、等温核酸扩增、成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白系统和测序技术)、原位核酸分析技术(荧光原位成像、拉曼及红外光学成像技术)、便携式现场检测技术(微流控芯片与纸基检测技术)和人工智能(artificial intelligence,AI)辅助智能化检测技术,并对比分析了不同方法的检出限、耗时、成本及适用场景。同时,重点探讨了当前技术面临的挑战,如低温环境对检测试剂的影响、多病原体同时检测局限及现场实时监测工具的开发。最后,展望了AI与物联网技术辅助在线监测系统等未来发展方向,以期为冷链食品安全的精准监测和高效防控提供理论参考和技术支撑。 展开更多
关键词 冷链食品 病原微生物 核酸检测 食品安全
原文传递
食品微生物检测,保障公众饮食安全
13
作者 焦亚东 钟瑞 《家庭药师》 2025年第10期101-102,共2页
食品安全直接关系每个人健康。微生物污染是导致食品安全问题的重要因素,食品含有的细菌、霉菌、酵母和病毒均可能引发食源性疾病。微生物在食品中繁殖迅速,在温暖、湿润环境下,其数量短时间内便可能达到危害水平。及时发现这些微生物,... 食品安全直接关系每个人健康。微生物污染是导致食品安全问题的重要因素,食品含有的细菌、霉菌、酵母和病毒均可能引发食源性疾病。微生物在食品中繁殖迅速,在温暖、湿润环境下,其数量短时间内便可能达到危害水平。及时发现这些微生物,需要科学方法检测,涵盖培养、显微观察、免疫学试剂和分子生物学技术,这些手段能揭示食品中微生物的种类、数量及潜在风险,为防控食源性疾病提供可靠依据。 展开更多
关键词 微生物检测 公众饮食安全 病毒 细菌 霉菌
原文传递
食品微生物检验中大肠杆菌的快速检测方法分析
14
作者 徐维 《工业微生物》 2025年第4期232-234,共3页
文章旨在建立食品中大肠杆菌的快速检测方法,弥补传统检测方法的缺陷。利用免疫磁珠富集食品样本中的大肠杆菌,并提取DNA进行PCR扩增,最终通过琼脂糖凝胶电泳判断检测结果。结果显示,免疫磁珠分离效果好,PCR扩增灵敏度高,最低检测限为10... 文章旨在建立食品中大肠杆菌的快速检测方法,弥补传统检测方法的缺陷。利用免疫磁珠富集食品样本中的大肠杆菌,并提取DNA进行PCR扩增,最终通过琼脂糖凝胶电泳判断检测结果。结果显示,免疫磁珠分离效果好,PCR扩增灵敏度高,最低检测限为10 CFU/g。与传统平板计数法相比,检测结果相对标准差在5%以内,且检测速度快。该方法准确高效,在食品微生物检验中应用前景良好。 展开更多
关键词 食品微生物 大肠杆菌 PCR 免疫磁珠技术
在线阅读 下载PDF
食品中大肠杆菌O157:H7快速检测方法的比较
15
作者 朱建英 孔德军 +2 位作者 金杨慧娜 徐黎慧 华思佳 《食品安全导刊》 2025年第25期156-158,共3页
大肠杆菌O157:H7作为高危食源性致病菌,其快速检测对食源性疾病防控至关重要。本文针对食品中大肠杆菌O157:H7的快速检测,分析了免疫分析、分子生物学等方法的灵敏度和成本差异,力求能为不同检测需求提供方法选择依据。
关键词 食品安全 大肠杆菌O157:H7 快速检测 技术适用性
在线阅读 下载PDF
产芽孢细菌检测方法的研究进展 被引量：1
16
作者 和晓兰 郑楠 +2 位作者 赵艳坤 王加启 孟璐 《食品科学》 北大核心 2025年第9期391-400,共10页
在不良的环境条件下,产芽孢细菌会形成芽孢休眠体。芽孢能够在极端环境中存活数年,环境条件适宜时,又重新萌发为营养细胞,进而影响产品的品质和货架期。目前,对于食品中产芽孢细菌的检测方法,我国最常用的仍然是培养法,这种方法需耗时4... 在不良的环境条件下,产芽孢细菌会形成芽孢休眠体。芽孢能够在极端环境中存活数年,环境条件适宜时,又重新萌发为营养细胞,进而影响产品的品质和货架期。目前,对于食品中产芽孢细菌的检测方法,我国最常用的仍然是培养法,这种方法需耗时48 h及以上,不能实现对产芽孢细菌的快速检测,存在一定局限性。本文对产芽孢细菌的多种检测方法进行综述,包括国内外采用的常规培养的检测方法、基于核酸扩增的检测方法、基于荧光染料的检测方法、基于芽孢特有成分吡啶二羧酸的检测和其他检测方法等,并对各种方法的优点、检测时间和检测限等进行了总结和整理,旨在为产芽孢细菌检测领域提供基础知识和研究背景。 展开更多
关键词 芽孢 聚合酶链式反应 流式细胞术 吡啶二羧酸 检测方法
在线阅读 下载PDF
基于重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12a的沙门氏菌可视化检测方法的建立 被引量：2
17
作者 黄建飞 陈晶 +3 位作者 张倩 肖承荣 吴燕蕙 赖心田 《食品安全质量检测学报》 2025年第8期122-130,共9页
目的建立基于重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12a的沙门氏菌可视化检测方法。方法本研究将重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术与成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a(clustered regularly interspaced... 目的建立基于重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12a的沙门氏菌可视化检测方法。方法本研究将重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术与成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/associated protein 12a,CRISPR/Cas12a)系统相结合,以沙门氏菌invA作为目标基因,设计并合成RPA引物和CRISPR引导RNA(CRISPR-derived RNA,crRNA),通过荧光法和试纸条两种方法读取结果。对优化的RPA-CRISPR/Cas12检测体系进行特异性和灵敏度实验,并应用于食品样本检测。结果本研究成功研制纳米金核酸试纸条,建立的RPA-CRISPR/Cas12a体系可在1.5 h内特异性完成沙门氏菌的检测,灵敏度为80 CFU/mL。利用此方法对21个食品样本进行检测,荧光法、试纸条法与国家标准法检测结果完全一致,沙门氏菌检出率为4.8%。结论本研究建立的沙门氏菌RPA-CRISPR/Cas12a可视化检测方法具有高特异性和灵敏度,在沙门氏菌的现场快速检测方面具有应用价值。 展开更多
关键词 沙门氏菌 成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a 试纸条 重组酶聚合酶扩增 可视化检测
原文传递
即食果蔬制品中致泻大肠埃希氏菌检测微滴数字PCR系统的建立
18
作者 张雪 马丽侠 +4 位作者 叶德萍 易艳 姜展樾 周李华 谢贞建 《食品工业科技》 北大核心 2025年第21期357-365,共9页
传统的致泻大肠埃希氏菌检验方法耗时较长,为缩短检测时间,构建了含致泻大肠埃希氏菌bfpB、ipaH、stp特征基因的质粒DNA标准物质候选物,针对bfpB、ipaH、stp基因建立一套可实现快速检测的微滴式数字PCR系统。用微滴数字PCR(Droplet Digi... 传统的致泻大肠埃希氏菌检验方法耗时较长,为缩短检测时间,构建了含致泻大肠埃希氏菌bfpB、ipaH、stp特征基因的质粒DNA标准物质候选物,针对bfpB、ipaH、stp基因建立一套可实现快速检测的微滴式数字PCR系统。用微滴数字PCR(Droplet Digital PCR,ddPCR)进行引物探针浓度和退火温度等体系优化后,以梯度稀释的质粒DNA为模板评估方法的线性相关性和精密度,添加非目标基因invE、sth为模板验证方法特异性,并将构建的ddPCR方法用于即食果蔬制品的实际检测。结果表明,bfpB、ipaH、stp质粒DNA最优引物终浓度均为400 nmol/L,最优探针终浓度分别为200、100、200 nmol/L;bfpB、ipaH、stp质粒DNA最优退火温度分别为60、58、58℃;特征基因bfpB、ipaH、stp分别在8.87~38700.00、3.33~36533.33、6.57~61833.33 copies/μL浓度范围呈线性相关,浓度梯度的线性相关系数r值均大于0.99;bfpB、ipaH、stp基因的定量限分别为15.33、7.97、15.00 copies/μL,检出限分别为8.87、3.33、6.57 copies/μL;方法精密度小于5%,特异性良好;实际样品检测结果显示,未加标样品未检出,而加标样品及阳性对照均可检出,ddPCR方法检测结果与国标方法检测结果一致。建立的方法可大大缩短致泻大肠埃希氏菌的检测时间,为食品中致泻大肠埃希氏菌的快速检测提供技术参考。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌 毒力因子 微滴式数字PCR 质粒DNA标准物质候选物
在线阅读 下载PDF
现制直饮品中铜绿假单胞菌的ERA快速检测
19
作者 赵健淞 杨艳歌 +5 位作者 刘通 魏莹 李红娜 李涛 孙冬梅 袁飞 《中国食品学报》 北大核心 2025年第4期376-385,共10页
目的:为实现现制直饮品中铜绿假单胞菌的快速检测,开发基于酶促重组等温扩增(ERA)技术的荧光检测法和试纸条检测法。方法:以铜绿假单胞菌的弹性蛋白酶编码(las B)基因为靶标基因设计引物探针,建立两种基于ERA的快速检测方法(荧光检测法... 目的:为实现现制直饮品中铜绿假单胞菌的快速检测,开发基于酶促重组等温扩增(ERA)技术的荧光检测法和试纸条检测法。方法:以铜绿假单胞菌的弹性蛋白酶编码(las B)基因为靶标基因设计引物探针,建立两种基于ERA的快速检测方法(荧光检测法、试纸条检测法)。通过系统验证试验,对检测系统的特异性、灵敏度、实际样本适用性等性能指标进行全面评估。结果:所建方法对铜绿假单胞菌展现出良好的特异性和包容性。在灵敏度方面,对于目标DNA的检测下限分别达到10-1ng/μL和10-3ng/μL。人工污染结果显示,荧光检测法和试纸条检测法分别通过6 h和4 h短时前增菌,最低检出限可达1 CFU/mL。采用上述方法检测20份市售样品,结果显示:10份样品呈阳性,阳性符合率达50%。与国家标准GB8538-2022的比对分析显示准确率达100%,证实此方法在饮品基质中的稳定性和检测结果的准确性。结论:基于ERA技术构建的铜绿假单胞菌双模式快速检测方法(荧光检测法和试纸条检测法),于37℃体温下扩增20 min左右,即可获取检测结果。方法简单、准确、快速、灵敏,为现制直饮品中铜绿假单胞菌的快速检测提供了新的技术手段。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 酶促等温扩增 现制直饮品 快速检测
在线阅读 下载PDF
噬菌体固定化磁性纳米粒子萃取-ATP生物发光检测沙门氏菌
20
作者 胡浩 杜澳博 +4 位作者 王静 张莉莉 王合叶 王冉 杨仁琴 《中国食品学报》 北大核心 2025年第10期286-296,共11页
目的:为解决传统方法检测沙门氏菌时间长,且需要预增菌处理等问题,建立一种沙门氏菌快速灵敏的活菌检测方法,以满足食品中沙门氏菌实时监测的需求。方法:结合噬菌体识别、磁性纳米粒子微萃取与三磷酸腺苷(ATP)生物发光检测,以实现沙门... 目的:为解决传统方法检测沙门氏菌时间长,且需要预增菌处理等问题,建立一种沙门氏菌快速灵敏的活菌检测方法,以满足食品中沙门氏菌实时监测的需求。方法:结合噬菌体识别、磁性纳米粒子微萃取与三磷酸腺苷(ATP)生物发光检测,以实现沙门氏菌特异性、快速富集与检测。结果:该检测方法可在15 min内完成对沙门氏菌的捕获与富集,捕获率最高为92.99%。可在20 min内完成对沙门氏菌的检测,在7×10^(2)~2.6×10^(6)CFU/mL范围显示出良好的线性关系,回归方程为y=0.00992x+52.3176,R^(2)=0.993,检测限(LOD)为348 CFU/mL。对于牛奶和鸡肉样品,回收率在82.93%~122.60%之间,相对标准差(RSD)均低于6.77%。结论:本研究成功将噬菌体定向固定化在磁性纳米粒子上,同时与三磷酸腺苷生物发光相结合,建立了一种沙门氏菌特异性富集的快速检测方法。 展开更多
关键词 沙门氏菌 沙门氏菌噬菌体 免疫磁分离 ATP生物发光
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 250 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部