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异常球菌RM菌株脂肪酶基因LIP的克隆、表达及酶学性质
1
作者 郑炜彬 胡秋怡 +3 位作者 杨李 谭梓瀚 张玉璇 柯野 《福建农林大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期533-543,共11页
【目的】探究异常球菌RM菌株高表达的脂肪酶基因(LIP)异源表达及其重组脂肪酶(rLIP)的酶学性质,为产脂肪酶微生物菌株的筛选提供新的来源参考,以及为低温脂肪酶的开发应用提供一定的理论依据。【方法】对异常球菌RM菌株的基因组及转录... 【目的】探究异常球菌RM菌株高表达的脂肪酶基因(LIP)异源表达及其重组脂肪酶(rLIP)的酶学性质,为产脂肪酶微生物菌株的筛选提供新的来源参考,以及为低温脂肪酶的开发应用提供一定的理论依据。【方法】对异常球菌RM菌株的基因组及转录组进行测序分析,筛选出表达量高的脂肪酶基因,重组至毕赤酵母GS115菌株中进行诱导表达;对rLIP的氨基酸残基序列和3-D结构进行分析,并探究其酶学性质。【结果】RM菌株表达了6个脂肪酶基因,其中只有1个基因编码胞外脂肪酶。序列比对分析表明,LIP与脂肪酶(国际蛋白结构数据库编号:5ah0.1.A)的序列一致性最高,为43.84%。LIP具有低温脂肪酶的催化三联体(Ser-Asp-His)和α/β水解酶折叠的典型结构特征。LIP基因在毕赤酵母GS115菌株中成功获得了表达。rLIP的最适底物为对硝基苯月桂酸酯和对硝基苯棕榈酸酯;rLIP最适反应温度为30℃,低于30℃有较高催化活性和稳定性;rLIP最适pH为8.0,pH为7.0~9.0时能保持50%以上的酶活性;Mg^(2+)对rLIP活性的提高有一定的促进作用。【结论】异常球菌RM菌株分泌的LIP是一种低温碱性脂肪酶,具有较强的稳定性和底物特异性。 展开更多
关键词 脂肪酶基因LIP 异常球菌RM菌株 蛋白结构预测 克隆表达 酶学性质
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葡萄球菌JJU-412产胞外脂肪酶非灭菌发酵条件优化、煎炸废油降解能力及其酶学性质研究
2
作者 丁建弘 章芷烨 +3 位作者 陈冰艳 刘纯 石红璆 查代明 《中国油脂》 北大核心 2025年第10期86-94,共9页
旨在为葡萄球菌JJU-412的工业化产胞外脂肪酶、餐厨油污治理和资源化利用,及其胞外脂肪酶的应用提供一定的理论基础和技术支持,对JJU-412产胞外脂肪酶的非灭菌发酵条件进行单因素实验优化,并与灭菌发酵进行比较,在此基础上进一步探究其... 旨在为葡萄球菌JJU-412的工业化产胞外脂肪酶、餐厨油污治理和资源化利用,及其胞外脂肪酶的应用提供一定的理论基础和技术支持,对JJU-412产胞外脂肪酶的非灭菌发酵条件进行单因素实验优化,并与灭菌发酵进行比较,在此基础上进一步探究其煎炸废油降解性能和表征其酶学性质。结果表明:JJU-412的最优非灭菌发酵产胞外脂肪酶条件为发酵培养基pH 9、发酵温度25℃、装样量30 mL/250 mL、接种量3%(以发酵培养基体积计)和发酵时间20 h,在此条件下非灭菌发酵产酶活力与灭菌发酵相比没有显著差异;在最优非灭菌发酵培养基pH、发酵温度、装样量及接种量下发酵28 h,JJU-412产胞外脂肪酶对煎炸废油的降解率达到85.79%;JJU-412产胞外脂肪酶粗酶可特异性水解短中链对硝基苯酚酯,最适反应温度和pH分别为40℃和9,为中温碱性非金属依赖性脂肪酶,具有一定的温度稳定性和良好的pH稳定性,具有良好的有机溶剂和表面活性剂耐受性。综上,JJU-412可通过非灭菌发酵产胞外脂肪酶,并可高效降解煎炸废油,其胞外脂肪酶具有优良的酶学性质。 展开更多
关键词 脂肪酶 葡萄球菌属 非灭菌发酵 煎炸废油 油脂降解 酶学性质
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微生物发酵生产脂肪酶的研究进展 被引量：46
3
作者 汪小锋 王俊 +1 位作者 杨江科 闫云君 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第4期47-53,共7页
脂肪酶是一种重要的工业用酶,广泛应用于食品、精细化工、医药和能源等领域。脂肪酶最主要的来源是通过微生物发酵生产。综述了脂肪酶种类、高产脂肪酶菌种选育、发酵工艺优化与调控、高密度发酵和发酵工艺放大等方面的研究进展,并展望... 脂肪酶是一种重要的工业用酶,广泛应用于食品、精细化工、医药和能源等领域。脂肪酶最主要的来源是通过微生物发酵生产。综述了脂肪酶种类、高产脂肪酶菌种选育、发酵工艺优化与调控、高密度发酵和发酵工艺放大等方面的研究进展,并展望了脂肪酶发酵生产的研究方向及前景。 展开更多
关键词 发酵 脂肪酶 基因工程菌 高密度发酵 放大
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类产碱假单胞菌耐热碱性脂肪酶的研究 被引量：40
4
作者 吴松刚 谢新东 +1 位作者 黄建忠 施巧琴 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期32-39,共8页
从福建省福州市温泉澡堂污水浸润土壤中分离筛选到一株耐热碱性脂肪酶产生菌——类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)F331。产酶最适条件为:碳源小麦粉,氮源豆饼粉,起始培养pH9.4～9.5,培养温度24～26℃,培养周期32～34h。... 从福建省福州市温泉澡堂污水浸润土壤中分离筛选到一株耐热碱性脂肪酶产生菌——类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)F331。产酶最适条件为:碳源小麦粉,氮源豆饼粉,起始培养pH9.4～9.5,培养温度24～26℃,培养周期32～34h。经硫酸铵盐析、Sepharose 4B和Sephadex G-200柱层析得到纯化的酶组分。该酶最适作用温度50℃,最适作用pH 10.0,60℃保温80min酶活基本不损失,在pH 7.0～10.0范围内酶蛋白稳定:Ca^(2+)和Mg^(2+)对酶有激活作用,Pb^(2+).Zn^(2+)、Fe^(2+)和Co^(2+)对酶活有抑制作用。该酶分子量45700。 展开更多
关键词 类产碱假单胞菌 耐热碱性脂肪酶 发酵
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魔芋胶对南美白对虾肌原纤维蛋白凝胶特性的影响 被引量：17
5
作者 孙乐常 周典颖 +4 位作者 杜瀚 翁凌 缪松 刘光明 曹敏杰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第12期42-50,共9页
为探究魔芋胶(konjac glucomannan,KGM)对南美白对虾肌原纤维蛋白(shrimp myofibrillar protein,SMP)凝胶性能的影响,将KGM与SMP按不同比例(1∶50、1∶20、1∶10)进行复配制备复合凝胶体系SK50、SK20、SK10,通过测定表面疏水性、内源性... 为探究魔芋胶(konjac glucomannan,KGM)对南美白对虾肌原纤维蛋白(shrimp myofibrillar protein,SMP)凝胶性能的影响,将KGM与SMP按不同比例(1∶50、1∶20、1∶10)进行复配制备复合凝胶体系SK50、SK20、SK10,通过测定表面疏水性、内源性荧光、浊度及粒径、流变学、红外光谱、蛋白变化及凝胶微观结构,研究复合体系的凝胶特性变化。结果表明,SMP及SMP-KGM复合体系的表面疏水性、浊度及粒径随着KGM添加量的增大而增大,流变学分析表明SMP及SMP-KGM复合体系均出现剪切稀化现象,且SK20的G’值最高,其凝胶的结构稳定性最好。红外光谱分析表明SMP及SMP-KGM复合体系组的光谱特征带相似,表明无明显的基团生成。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明KGM的加入并没有引起蛋白条带的明显变化,相较于未加热组,加热后样品中肌球蛋白重链、副肌球蛋白以及肌动蛋白的条带明显减弱,说明加热能促使三者发生热聚合反应。扫描电镜与分形维数分析表明,随着KGM添加量的增加,形成了致密有序的凝胶。结果表明,一定量的KGM添加能有效提升虾糜的凝胶特性,提高虾糜类产品品质。 展开更多
关键词 南美白对虾 肌原纤维蛋白 魔芋胶 凝胶特性 流变学特性
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微生物脂肪酶的最新应用研究进展 被引量：20
6
作者 刘海洲 刘均洪 +2 位作者 张媛媛 肖强 王志萍 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2009年第1期141-143,共3页
微生物脂肪酶是一种重要的工业酶类,也是当前国内外研究的热点。就微生物脂肪酶在食品加工、手性化合物合成、脂肪水解、脂肪酸提纯、三甘酯结构测定和环境治理等方面的应用及研究近况进行综述。
关键词 微生物脂肪酶 催化 手性 应用
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毕赤酵母中表达透明颤菌血红蛋白提高重组脂肪酶的表达 被引量：7
7
作者 汪小锋 孙永川 +4 位作者 申旭光 柯锋 徐莉 刘云 闫云君 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1755-1764,共10页
解脂耶氏酵母胞外脂肪酶Lip2(YlLip2)是一种具有广泛应用前景的工业酶。为了改善高密度发酵生产YlLip2过程中的溶氧限制,提高YlLip2的表达量,将YlLip2基因lip2和透明颤菌血红蛋白(VHb)基因vgb分别置于AOX1启动子和PsADH2启动子的调控之... 解脂耶氏酵母胞外脂肪酶Lip2(YlLip2)是一种具有广泛应用前景的工业酶。为了改善高密度发酵生产YlLip2过程中的溶氧限制,提高YlLip2的表达量,将YlLip2基因lip2和透明颤菌血红蛋白(VHb)基因vgb分别置于AOX1启动子和PsADH2启动子的调控之下,进行YlLip2和VHb在毕赤酵母中的共表达。PsADH2启动子来源于树干毕赤酵母Pichia stipitis,在低氧条件下能被激活。SDS-PAGE和CO-差式光谱分析表明,YlLip2和VHb在重组菌中成功实现了共表达。在氧限制性条件下,VHb表达的细胞(VHb+,GS115/9Klip2-pZPVT)与对照细胞(VHb?,GS115/9Klip2)相比,摇瓶和10 L发酵罐中YlLip2表达量分别提高了25%和83%。此外,在低氧条件下,VHb+细胞在10 L发酵罐中的生物量也比VHb?细胞高。文中也获得了一株表达了VHb的并携带有多个lip2基因拷贝的克隆子GS115/9Klip2-pZPVTlip2 49#,在低氧条件下,该克隆子在10 L发酵罐中的最高脂肪酶水解活力达33 900 U/mL。因此,在毕赤酵母中用PsADH2启动子表达VHb,同时增加lip2基因的拷贝数是提高YlLip2表达量的一种有效策略。 展开更多
关键词 脂肪酶 透明颤菌血红蛋白 PsADH2启动子 解脂耶氏酵母 毕赤酵母 表达
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中温碱性脂肪酶的研究——Ⅲ.扩展青霉PF868变株碱性脂肪酶的纯化及其酶学性质 被引量：22
8
作者 郑毅 黄建忠 +2 位作者 施巧琴 翁丽星 吴松刚 《工业微生物》 CSCD 北大核心 1996年第3期15-19,共5页
扩展青霉PF868变株发酵液经硫酸铵盐析和Sephadex-G-200及Sepharose4B柱层析纯化,获得纯化倍数为32.4的酶粉.该酶分子量为23442Dal.酶学特性表明:该酶的最适作用温度为32℃,50℃保温30min仍保留50%酶活性,最适pH为9.0,作用pH稳定范围在... 扩展青霉PF868变株发酵液经硫酸铵盐析和Sephadex-G-200及Sepharose4B柱层析纯化,获得纯化倍数为32.4的酶粉.该酶分子量为23442Dal.酶学特性表明:该酶的最适作用温度为32℃,50℃保温30min仍保留50%酶活性,最适pH为9.0,作用pH稳定范围在7.0—10.0之间.Ca^(2+)Mg^(2+)对酶有激活作用.Fe^(2+)、Cu^(2+)和Mn^(2+)对酶活力有抑制作用. 展开更多
关键词 碱性脂肪酶 扩展青霉PF868 发酵 提纯 酶学性质
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pH两阶段控制策略发酵生产重组角质酶 被引量：12
9
作者 张芙华 陈晟 +3 位作者 张东旭 华兆哲 陈坚 吴敬 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期59-64,共6页
为提高基因工程菌Bacillussubtilis WSHB06-07发酵生产角质酶的产量和生产强度，考察了pH（5．5-8．0）对菌体生长和产酶的影响。基于不同pH发酵过程中菌体比生长速率及比产物合成速率的变化，确定了pH两阶段控制策略，即0～4h时控制pH7... 为提高基因工程菌Bacillussubtilis WSHB06-07发酵生产角质酶的产量和生产强度，考察了pH（5．5-8．0）对菌体生长和产酶的影响。基于不同pH发酵过程中菌体比生长速率及比产物合成速率的变化，确定了pH两阶段控制策略，即0～4h时控制pH7．5，4h后将pH调至6．5。通过采用这一优化策略，角质酶酶活有了较大的提高，达170u／ml，生产强度为16．9kU／（L·h），比恒定pH7．5控制模式下分别提高了122．6％和123．2％。 展开更多
关键词 重组角质酶 枯草芽孢杆菌 pH两阶段控制策略 菌体比生长速率 产物比合成速率
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无溶剂体系脂肪酶催化制阿魏酸双油酸甘油酯 被引量：7
10
作者 辛嘉英 郑妍 +3 位作者 吴小梅 刘颖 夏春谷 李树本 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期172-177,共6页
在无溶剂体系中以分散在硅藻土上的褶皱假丝酵母脂肪酶为催化剂,以阿魏酸乙酯与油酸甘油酯为原料,一步合成阿魏酸双油酸甘油酯。通过质谱和红外光谱对薄层层析分离纯化后的产物结构进行了表征。定量分析表明,当反应温度为50℃,n(阿魏酸... 在无溶剂体系中以分散在硅藻土上的褶皱假丝酵母脂肪酶为催化剂,以阿魏酸乙酯与油酸甘油酯为原料,一步合成阿魏酸双油酸甘油酯。通过质谱和红外光谱对薄层层析分离纯化后的产物结构进行了表征。定量分析表明,当反应温度为50℃,n(阿魏酸乙酯)/n(油酸甘油酯)=1时,阿魏酸双油酸甘油酯的质量占生成物总质量分数较高。在1 mmoL阿魏酸乙酯,1 mmoL油酸甘油酯和70 mg脂肪酶组成的无溶剂反应体系中,50℃空气浴振荡120 h,总产率可达63.32%,其中阿魏酸双油酸甘油酯质量占生成物总质量的63.37%。 展开更多
关键词 阿魏酸双油酸甘油酯 脂肪酶 转酯反应 无溶剂体系
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响应面试验设计优化脂肪酶发酵培养基 被引量：31
11
作者 张大皓 谭天伟 王炳武 《北京化工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第2期41-45,共5页
采用响应面试验设计方法对卡门柏青霉(Penicillium camembertii Thom PG-3)发酵生产脂肪酶的培养基进行优化。用部分因子分析法研究原始发酵培养基各成分对响应值的影响程度,发现脱脂豆粕和磷酸氢二铵的质量浓度对脂肪酶活性的影响显著... 采用响应面试验设计方法对卡门柏青霉(Penicillium camembertii Thom PG-3)发酵生产脂肪酶的培养基进行优化。用部分因子分析法研究原始发酵培养基各成分对响应值的影响程度,发现脱脂豆粕和磷酸氢二铵的质量浓度对脂肪酶活性的影响显著。利用最陡爬坡法逼近最大响应区域。用中心组合设计确定脱脂豆粕和磷酸氢二铵的最优质量浓度。实验结果经过回归分析拟合出一个二次方程的数学模型。并且用实验所得的最优培养基进行发酵试验得到的响应值基本符合数学模型。酶活性比优化前提高了43%。 展开更多
关键词 响应面 脂肪酶 青霉
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蚕丝固定化脂肪酶的研究 被引量：22
12
作者 曹国民 黄杰 高广达 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期88-92,共5页
研究了蚕丝固定化脂肪酶的工艺条件，并考察了固定化脂肪酶的稳定性。试验结果表明：蚕丝与对β硫酸酯乙砜基苯胺（ＳＥＳＡ）进行反应的最适条件是ｐＨ＝１０８，ＳＥＳＡ：２０ｇ／ｇ蚕丝，反应生成的对氨基苯磺酰乙基蚕丝（... 研究了蚕丝固定化脂肪酶的工艺条件，并考察了固定化脂肪酶的稳定性。试验结果表明：蚕丝与对β硫酸酯乙砜基苯胺（ＳＥＳＡ）进行反应的最适条件是ｐＨ＝１０８，ＳＥＳＡ：２０ｇ／ｇ蚕丝，反应生成的对氨基苯磺酰乙基蚕丝（ＡＢＳＥ蚕丝）经重氮化后与脂肪酶偶联的最适条件是：ｐＨ＝７５，偶联时间＞１０ｈ。加酶量为１６８～３０８ｕ／ｇ蚕丝时，所得固定化脂肪酶活力为１０６～１６０ｕ／ｇ蚕丝，此时固定化酶的活力回收率较高（＞５２％）。固定化脂肪酶稳定性较高，其操作半衰期约为２５０ｈ。 展开更多
关键词 蚕丝 脂肪酶 固定化
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产脂肪酸菌种的筛选及部分酶学性质 被引量：14
13
作者 王艳茹 高贵 +2 位作者 王师玉 王志 冯雁 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1999年第4期91-94,共4页
从含油污泥中筛选出一株产脂肪酶活力较高的微球菌，此菌最适产酶条件：2％的蛋白胨为氮源，1％的橄榄油为碳源，pH8.0，28℃培养48h．酶学性质研究发现，在28℃和45℃脂肪酶有较高催化活力，其中28℃活力更高些，最佳反应pH为8．0，pH... 从含油污泥中筛选出一株产脂肪酶活力较高的微球菌，此菌最适产酶条件：2％的蛋白胨为氮源，1％的橄榄油为碳源，pH8.0，28℃培养48h．酶学性质研究发现，在28℃和45℃脂肪酶有较高催化活力，其中28℃活力更高些，最佳反应pH为8．0，pH稳定范围在6．0～10．0之间，Ca2+和K+对酶有激活作用，Fe2+，Cu2+和Mn2+等对酶有抑制作用． 展开更多
关键词 微球菌 脂肪酶 培养条件 筛选 发酵 酶学性质
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三种脂肪酶活力测定方法的比较及改进 被引量：146
14
作者 江慧芳 王雅琴 刘春国 《化学与生物工程》 CAS 2007年第8期72-75,共4页
比较了碱滴定法、对硝基苯酚法和铜皂法等三种常用的脂肪酶活力测定方法的测定时间、准确性和重复性。为对硝基苯酚法找到了有效的终止反应方法,改进的对硝基苯酚法具有检测快捷、结果稳定的特点。对铜皂法进行改进,用甲苯代替了苯,改... 比较了碱滴定法、对硝基苯酚法和铜皂法等三种常用的脂肪酶活力测定方法的测定时间、准确性和重复性。为对硝基苯酚法找到了有效的终止反应方法,改进的对硝基苯酚法具有检测快捷、结果稳定的特点。对铜皂法进行改进,用甲苯代替了苯,改进的铜皂法具有毒性小、结果稳定、重复性好的优点。 展开更多
关键词 脂肪酶 活力 测定方法 改进
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中温碱性脂肪酶的研究——Ⅱ.扩展青霉PF868变株产酶条件 被引量：12
15
作者 黄建忠 施巧琴 +1 位作者 郑毅 吴松刚 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期10-14,19,共6页
本文报道中温碱性脂肪酶高产变株扩展青霉(Penicillium expansum)PF868的产酶条件。研究结果表明PF868最适产酶条件为:碳源玉米粉,氮源黄豆饼粉,起始pH7.5,产酶培养温度26℃,移种量10％;亚适量的豆油有利于产酶;700ppm的泡敌不抑制菌丝... 本文报道中温碱性脂肪酶高产变株扩展青霉(Penicillium expansum)PF868的产酶条件。研究结果表明PF868最适产酶条件为:碳源玉米粉,氮源黄豆饼粉,起始pH7.5,产酶培养温度26℃,移种量10％;亚适量的豆油有利于产酶;700ppm的泡敌不抑制菌丝生长且有利于产酶;适量的非离子表面活性剂Tween和Span类有利于菌丝生长和脂肪酶的释放。 展开更多
关键词 扩展青霉 中温碱性脂肪酶 脂肪酶 产酶条件
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一株酸性脂肪酶高产菌株的筛选与鉴定 被引量：6
16
作者 王乐 刘松 +5 位作者 尹艳丽 黄巍 吕扬勇 胡元森 惠明 王金水 《食品安全质量检测学报》 CAS 2017年第12期4509-4515,共7页
目的分离筛选出一株酸性脂肪酶高产菌株并对其进行鉴定。方法通过溴甲酚紫酸碱指示剂进行平板初筛,甘油三丁酸酯透明圈法以及摇瓶培养复筛,筛选获得了一株酸性脂肪酶产生菌株;利用平板透明圈法、橄榄油乳化液滴定法和对硝基苯酚比色法3... 目的分离筛选出一株酸性脂肪酶高产菌株并对其进行鉴定。方法通过溴甲酚紫酸碱指示剂进行平板初筛,甘油三丁酸酯透明圈法以及摇瓶培养复筛,筛选获得了一株酸性脂肪酶产生菌株;利用平板透明圈法、橄榄油乳化液滴定法和对硝基苯酚比色法3种方法对所筛菌株进行酶活力测定。结果分离获得一株具有高产酸性脂肪酶活力的菌株,将其命名为菌株WY19。经过检测,其粗酶活力达到11000 U/L。通过对菌株WY19进行形态学鉴定、生理生化实验以及分子生物学鉴定,结合系统发育树分析,确定本研究获得的酸性脂肪酶产生菌为克雷伯氏菌。结论菌株WY19所产脂肪酶为酸性脂肪酶,在食品、医药、油脂加工等领域方面具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 酸性脂肪酶 活力测定 筛选 鉴定 克雷伯氏菌
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超声波破碎法提取发酵性丝孢酵母胞内脂肪酶的条件优化 被引量：7
17
作者 王迪 曹方 +1 位作者 栾静 孙玉梅 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2012年第6期405-408,共4页
利用超声波对发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans)进行细胞破碎,研究了输出功率、辐射时间、工作总时间、菌体质量浓度等因素对胞内脂肪酶活性的影响。通过单因素试验和正交试验,获得较高活性脂肪酶的提取条件:超声波每次辐射时间... 利用超声波对发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans)进行细胞破碎,研究了输出功率、辐射时间、工作总时间、菌体质量浓度等因素对胞内脂肪酶活性的影响。通过单因素试验和正交试验,获得较高活性脂肪酶的提取条件:超声波每次辐射时间为6s(间歇时间5s),菌体质量浓度为25g/L,输出功率为550W,工作总时间为5.5min,在此条件下提取的脂肪酶活力达到128.46U/g。 展开更多
关键词 超声波 发酵性丝孢酵母 细胞破碎 脂肪酶
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低温脂肪酶的分离纯化及酶学性质 被引量：9
18
作者 王春雨 迟乃玉 +1 位作者 张庆芳 窦少华 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期809-813,共5页
苏云金芽胞杆菌CZW001脂肪酶发酵上清液经硫酸铵沉淀、透析、超滤离心、DEAE-纤维素-52离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析得到电泳纯的脂肪酶,纯化倍数为75.5倍,活性回收率为37.6%,12%SDS-PAGE电泳估计其相对分子质量约40 000... 苏云金芽胞杆菌CZW001脂肪酶发酵上清液经硫酸铵沉淀、透析、超滤离心、DEAE-纤维素-52离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析得到电泳纯的脂肪酶,纯化倍数为75.5倍,活性回收率为37.6%,12%SDS-PAGE电泳估计其相对分子质量约40 000。对纯化后的脂肪酶进行酶性质研究表明:酶的最适作用温度为25℃,对热敏感,60℃处理30 min仅残留30%酶活性;酶的适宜作用pH范围在7～9,最适pH为8;该脂肪酶的水解活性对Ca2+表现明显的依赖性,Al3+、Zn2+和Fe2+对脂肪酶有显著的抑制作用;脂肪酶对醇类有机溶剂的耐受性随碳链增加而减小;脂肪酶对豆油表现出显著的特异性,而蓖麻油抑制脂肪酶水解活力。 展开更多
关键词 脂肪酶 分离纯化 酶学性质
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四川腊肉中产脂肪酶霉菌筛选及产酶条件研究 被引量：6
19
作者 于华 黄丹 +5 位作者 陈卓 唐姣 毛祥 刘达玉 程华 汪礼全 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2016年第12期78-83,共6页
对四川腊肉中高产脂肪酶霉菌进行分离鉴定,并对其产酶条件进行研究。以罗丹明B为显色剂,利用平皿生化反应法对四川腊肉中高产脂肪酶的霉菌进行筛选,对分离菌株进行分子生物学鉴定,研究其在不同时间、温度及初始p H条件下产酶情况。结果... 对四川腊肉中高产脂肪酶霉菌进行分离鉴定,并对其产酶条件进行研究。以罗丹明B为显色剂,利用平皿生化反应法对四川腊肉中高产脂肪酶的霉菌进行筛选,对分离菌株进行分子生物学鉴定,研究其在不同时间、温度及初始p H条件下产酶情况。结果表明:分离获得一株产脂肪酶能力较强的霉菌,经鉴定为团青霉(Penicillium commune),其最适产酶条件为,当发酵时间为48h,温度为30℃,初始p H为8.0时,其脂肪酶活力可达384.05U/100m L。 展开更多
关键词 四川腊肉 产脂肪酶 霉菌 产酶条件
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非酿酒酵母菌在自然发酵过程中产脂肪酶特性 被引量：5
20
作者 徐亚男 李琦 +3 位作者 肖婧 倪永清 单春会 史学伟 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期976-980,共5页
通过研究新疆葡萄自然发酵过程中分离鉴定的24株酵母菌,对不同菌株的产脂能力进行研究,通过对其酶活测定得到高产脂肪酶菌株Y13。通过对其进行产脂肪酶学特性研究,利用酶学特性进一步优化发酵培养条件,得出最适培养温度为39℃,最适pH为7... 通过研究新疆葡萄自然发酵过程中分离鉴定的24株酵母菌,对不同菌株的产脂能力进行研究,通过对其酶活测定得到高产脂肪酶菌株Y13。通过对其进行产脂肪酶学特性研究,利用酶学特性进一步优化发酵培养条件,得出最适培养温度为39℃,最适pH为7.0,Ca2+可促进酶的发酵,最适培养时间为65 h。 展开更多
关键词 非酿酒酵母菌 脂肪酶 酶学性质
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