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异常球菌RM菌株脂肪酶基因LIP的克隆、表达及酶学性质
1
作者 郑炜彬 胡秋怡 +3 位作者 杨李 谭梓瀚 张玉璇 柯野 《福建农林大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期533-543,共11页
【目的】探究异常球菌RM菌株高表达的脂肪酶基因(LIP)异源表达及其重组脂肪酶(rLIP)的酶学性质,为产脂肪酶微生物菌株的筛选提供新的来源参考,以及为低温脂肪酶的开发应用提供一定的理论依据。【方法】对异常球菌RM菌株的基因组及转录... 【目的】探究异常球菌RM菌株高表达的脂肪酶基因(LIP)异源表达及其重组脂肪酶(rLIP)的酶学性质,为产脂肪酶微生物菌株的筛选提供新的来源参考,以及为低温脂肪酶的开发应用提供一定的理论依据。【方法】对异常球菌RM菌株的基因组及转录组进行测序分析,筛选出表达量高的脂肪酶基因,重组至毕赤酵母GS115菌株中进行诱导表达;对rLIP的氨基酸残基序列和3-D结构进行分析,并探究其酶学性质。【结果】RM菌株表达了6个脂肪酶基因,其中只有1个基因编码胞外脂肪酶。序列比对分析表明,LIP与脂肪酶(国际蛋白结构数据库编号:5ah0.1.A)的序列一致性最高,为43.84%。LIP具有低温脂肪酶的催化三联体(Ser-Asp-His)和α/β水解酶折叠的典型结构特征。LIP基因在毕赤酵母GS115菌株中成功获得了表达。rLIP的最适底物为对硝基苯月桂酸酯和对硝基苯棕榈酸酯;rLIP最适反应温度为30℃,低于30℃有较高催化活性和稳定性;rLIP最适pH为8.0,pH为7.0~9.0时能保持50%以上的酶活性;Mg^(2+)对rLIP活性的提高有一定的促进作用。【结论】异常球菌RM菌株分泌的LIP是一种低温碱性脂肪酶,具有较强的稳定性和底物特异性。 展开更多
关键词 脂肪酶基因LIP 异常球菌RM菌株 蛋白结构预测 克隆表达 酶学性质
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葡萄球菌JJU-412产胞外脂肪酶非灭菌发酵条件优化、煎炸废油降解能力及其酶学性质研究
2
作者 丁建弘 章芷烨 +3 位作者 陈冰艳 刘纯 石红璆 查代明 《中国油脂》 北大核心 2025年第10期86-94,共9页
旨在为葡萄球菌JJU-412的工业化产胞外脂肪酶、餐厨油污治理和资源化利用,及其胞外脂肪酶的应用提供一定的理论基础和技术支持,对JJU-412产胞外脂肪酶的非灭菌发酵条件进行单因素实验优化,并与灭菌发酵进行比较,在此基础上进一步探究其... 旨在为葡萄球菌JJU-412的工业化产胞外脂肪酶、餐厨油污治理和资源化利用,及其胞外脂肪酶的应用提供一定的理论基础和技术支持,对JJU-412产胞外脂肪酶的非灭菌发酵条件进行单因素实验优化,并与灭菌发酵进行比较,在此基础上进一步探究其煎炸废油降解性能和表征其酶学性质。结果表明:JJU-412的最优非灭菌发酵产胞外脂肪酶条件为发酵培养基pH 9、发酵温度25℃、装样量30 mL/250 mL、接种量3%(以发酵培养基体积计)和发酵时间20 h,在此条件下非灭菌发酵产酶活力与灭菌发酵相比没有显著差异;在最优非灭菌发酵培养基pH、发酵温度、装样量及接种量下发酵28 h,JJU-412产胞外脂肪酶对煎炸废油的降解率达到85.79%;JJU-412产胞外脂肪酶粗酶可特异性水解短中链对硝基苯酚酯,最适反应温度和pH分别为40℃和9,为中温碱性非金属依赖性脂肪酶,具有一定的温度稳定性和良好的pH稳定性,具有良好的有机溶剂和表面活性剂耐受性。综上,JJU-412可通过非灭菌发酵产胞外脂肪酶,并可高效降解煎炸废油,其胞外脂肪酶具有优良的酶学性质。 展开更多
关键词 脂肪酶 葡萄球菌属 非灭菌发酵 煎炸废油 油脂降解 酶学性质
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脂肪酶产生菌的分离鉴定及产酶条件优化
3
作者 李国风 周诗雯 +5 位作者 程俊秋 李尊文 姜冉 洪瑛琪 许巧玲 叶炜 《东南园艺》 2025年第2期155-161,共7页
【目的】为筛选高效的脂肪酶产生菌及其产酶工艺。【方法】采集被油污长期污染的土壤,经富集培养后,通过罗丹明B平板法进行菌株分离筛选;采用以花生油为唯一碳源的摇床发酵方法,研究所筛选出的菌株的产酶条件参数,并系统性优化各菌株产... 【目的】为筛选高效的脂肪酶产生菌及其产酶工艺。【方法】采集被油污长期污染的土壤,经富集培养后,通过罗丹明B平板法进行菌株分离筛选;采用以花生油为唯一碳源的摇床发酵方法,研究所筛选出的菌株的产酶条件参数,并系统性优化各菌株产脂肪酶的条件。【结果】通过罗丹明B平板法筛选得到3株具有高产脂肪酶能力的菌株,并分别命名为LN2、Bk3与Bd4。经形态学及16S rRNA分子鉴定,LN2为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),Bk3为越南伯克霍尔德氏菌(Burkholderia vietnamiensis),Bd4为土壤不动杆菌(Acinetobacter soil)。3菌株的最适产酶温度为30~40℃,最适发酵起始pH值为7.0。通过综合分析,培养48 h后,在发酵30℃、起始pH值7.0条件下LN2的酶活力为1.25 U/mL;在40℃、pH 7.0时Bk3的酶活力为0.85 U/mL;在30℃、pH值7.0条件下Bd4的酶活力为3.13 U/mL。【结论】3株脂肪酶产生菌在脂肪酶生产上均表现出优秀的潜能,尤其是Bd4,为脂肪酶工厂化应用提供候选菌种材料。 展开更多
关键词 脂肪酶 铜绿假单胞菌 越南伯克霍尔德氏菌 土壤不动杆菌 产酶温度
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基于三苯胺的聚集诱导发光活性探针用于脂肪酶检测及细胞成像
4
作者 关鹏丽 白壬虎 +1 位作者 孙秀玲 刘斌 《无机化学学报》 北大核心 2025年第9期1817-1826,共10页
作为乳腺癌细胞的潜在生物标志物,脂肪酶的高灵敏检测有利于提高疾病诊断的准确性。基于脂肪酶的界面催化特性,我们设计合成了一种脂肪酶特异性响应的聚集诱导发光(AIE)荧光探针BTPA,该探针在磷酸盐缓冲溶液中可以发生聚集并与外界溶液... 作为乳腺癌细胞的潜在生物标志物,脂肪酶的高灵敏检测有利于提高疾病诊断的准确性。基于脂肪酶的界面催化特性,我们设计合成了一种脂肪酶特异性响应的聚集诱导发光(AIE)荧光探针BTPA,该探针在磷酸盐缓冲溶液中可以发生聚集并与外界溶液形成微小界面,这些界面可快速激活脂肪酶的活性,从而导致BTPA被水解并发出强烈的黄色荧光。在5.0×10^(-5)~4.5×10^(-4)U·mL^(-1)范围内,BTPA的荧光发射强度与脂肪酶的活性呈线性相关,检出限为4.94×10^(-6)U·mL^(-1)。此外,探针对脂肪酶的选择性和抗干扰性实验表明探针可用于复杂生物体内的荧光成像。细胞成像实验结果表明,该荧光探针可以精确地原位识别乳腺癌细胞并发出强烈的荧光。 展开更多
关键词 脂肪酶 荧光探针 细胞成像 肿瘤细胞
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基于环糊精的超分子自组装系统的构建及其对脂肪酶响应机制的初步探讨
5
作者 郭瑞 闫昭旭 +2 位作者 张富 朱丽英 田丹碧 《生物加工过程》 2025年第4期384-390,共7页
酶响应超分子自组装系统因其在信号传导、靶向给药等方面的应用而受到广泛的关注。为了得到对脂肪酶响应的超分子自组装系统,将客体分子荧光剂2-(2-羟基苯基)苯并噻唑(HBT)十二烷基链(LDC)与β-环糊精(β-CD)进行超分子自组装,形成复合... 酶响应超分子自组装系统因其在信号传导、靶向给药等方面的应用而受到广泛的关注。为了得到对脂肪酶响应的超分子自组装系统,将客体分子荧光剂2-(2-羟基苯基)苯并噻唑(HBT)十二烷基链(LDC)与β-环糊精(β-CD)进行超分子自组装,形成复合体HBT-LDC-β-CD,并对其结合机制进行探讨。结果发现:经过超分子自组装后,荧光团HBT能较稳定地组装在β-CD上形成HBT-β-CD复合体,水溶性和荧光强度都得到了增强,并计算得到结合常数为1.34×10^(2)L/mol。利用此方法进行荧光染料和荧光探针的超分子自组装具有操作简单、成本和耗时低的优点,为开发更多复合体荧光材料提供了新思路。 展开更多
关键词 Β-环糊精 超分子自组装 荧光探针 脂肪酶 复合体荧光材料
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酶法制备人乳替代脂的研究进展 被引量：1
6
作者 陈行飞 张羽飞 +2 位作者 李雅丽 郑明明 王俊 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期69-75,共7页
人乳替代脂是一类模拟母乳脂组成的结构脂质,为促进人乳替代脂的绿色高效生产,介绍了母乳脂的甘油三酯组成,对人乳替代脂的酶法制备工艺以及实际应用的研究现状进行了分析、总结和探讨,并展望了未来的研究方向。我国母乳脂中1-油酸-2-... 人乳替代脂是一类模拟母乳脂组成的结构脂质,为促进人乳替代脂的绿色高效生产,介绍了母乳脂的甘油三酯组成,对人乳替代脂的酶法制备工艺以及实际应用的研究现状进行了分析、总结和探讨,并展望了未来的研究方向。我国母乳脂中1-油酸-2-棕榈酸-3-亚油酸甘油三酯(OPL)含量最高,其次为1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(OPO)。人乳替代脂的酶法制备工艺包括酯-酯交换法、一步酸解法、醇解-酯化两步法、两步酸解法、酯交换-酸解两步法等。提高酶的催化活性与位置选择性、抑制酰基迁移等是未来酶法制备人乳替代脂的研究方向。 展开更多
关键词 1-油酸-2-棕榈酸-3-亚油酸甘油三酯 1 3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯 人乳替代脂 酶法制备
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产脂肪酶菌株筛选及发酵条件与酶学性质研究
7
作者 陈梦越 孙劲 +4 位作者 张文丽 王洁 周星朴 黄诗维 楚菲菲 《西昌学院学报（自然科学版）》 2024年第3期78-89,共12页
[目的]获得产酶能力强、环境安全友好的产脂肪酶菌株。[方法]采用罗丹明B平板法,从受油污污染土壤和水体中筛选高产脂肪酶菌株;利用血平板接种及抗生素药敏试验确定菌株安全性;通过氮源、碳源及诱导剂单因素实验结合响应曲面法优化菌株... [目的]获得产酶能力强、环境安全友好的产脂肪酶菌株。[方法]采用罗丹明B平板法,从受油污污染土壤和水体中筛选高产脂肪酶菌株;利用血平板接种及抗生素药敏试验确定菌株安全性;通过氮源、碳源及诱导剂单因素实验结合响应曲面法优化菌株的发酵产酶条件;对菌株所产的脂肪酶进行酶学特性分析。[结果]从受油污污染土壤中分离筛选出一株具有高产脂肪酶能力的菌株JC-7,经鉴定为沙雷氏菌(Serratia sp.)。菌株于血琼脂平板上呈γ-溶血,对多数抗生素敏感。响应曲面法优化后酶活力最高达38.6μmol/min。菌株JC-7所产脂肪酶属于中温碱性脂肪酶。Ca^(2+)和Mg^(2+)能提高该酶的酶活力。该酶在丙三醇、二甲基亚砜以及甲醇中能维持较高的酶活力。十二烷基硫酸钠(SDS)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和TritonX-100都对该酶有激活作用,二硫苏糖醇(DTT)对该酶的酶活力几乎无影响,乙二胺四乙酸(EDTA)则抑制了该酶的酶活力。[结论]分离所获沙雷氏菌JC-7产脂肪酶能力强,对环境安全友好,优化培养条件后产酶能力明显提高,且该酶能适应较为广泛的作用条件,可为脂肪酶制剂的开发和环境污染生物降解菌剂的研究提供支持。 展开更多
关键词 脂肪酶 响应曲面 酶学性质
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微生物发酵生产脂肪酶的研究进展 被引量：45
8
作者 汪小锋 王俊 +1 位作者 杨江科 闫云君 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第4期47-53,共7页
脂肪酶是一种重要的工业用酶,广泛应用于食品、精细化工、医药和能源等领域。脂肪酶最主要的来源是通过微生物发酵生产。综述了脂肪酶种类、高产脂肪酶菌种选育、发酵工艺优化与调控、高密度发酵和发酵工艺放大等方面的研究进展,并展望... 脂肪酶是一种重要的工业用酶,广泛应用于食品、精细化工、医药和能源等领域。脂肪酶最主要的来源是通过微生物发酵生产。综述了脂肪酶种类、高产脂肪酶菌种选育、发酵工艺优化与调控、高密度发酵和发酵工艺放大等方面的研究进展,并展望了脂肪酶发酵生产的研究方向及前景。 展开更多
关键词 发酵 脂肪酶 基因工程菌 高密度发酵 放大
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类产碱假单胞菌耐热碱性脂肪酶的研究 被引量：39
9
作者 吴松刚 谢新东 +1 位作者 黄建忠 施巧琴 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期32-39,共8页
从福建省福州市温泉澡堂污水浸润土壤中分离筛选到一株耐热碱性脂肪酶产生菌——类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)F331。产酶最适条件为:碳源小麦粉,氮源豆饼粉,起始培养pH9.4～9.5,培养温度24～26℃,培养周期32～34h。... 从福建省福州市温泉澡堂污水浸润土壤中分离筛选到一株耐热碱性脂肪酶产生菌——类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)F331。产酶最适条件为:碳源小麦粉,氮源豆饼粉,起始培养pH9.4～9.5,培养温度24～26℃,培养周期32～34h。经硫酸铵盐析、Sepharose 4B和Sephadex G-200柱层析得到纯化的酶组分。该酶最适作用温度50℃,最适作用pH 10.0,60℃保温80min酶活基本不损失,在pH 7.0～10.0范围内酶蛋白稳定:Ca^(2+)和Mg^(2+)对酶有激活作用,Pb^(2+).Zn^(2+)、Fe^(2+)和Co^(2+)对酶活有抑制作用。该酶分子量45700。 展开更多
关键词 类产碱假单胞菌 耐热碱性脂肪酶 发酵
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微生物脂肪酶的最新应用研究进展 被引量：21
10
作者 刘海洲 刘均洪 +2 位作者 张媛媛 肖强 王志萍 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2009年第1期141-143,共3页
微生物脂肪酶是一种重要的工业酶类,也是当前国内外研究的热点。就微生物脂肪酶在食品加工、手性化合物合成、脂肪水解、脂肪酸提纯、三甘酯结构测定和环境治理等方面的应用及研究近况进行综述。
关键词 微生物脂肪酶 催化 手性 应用
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魔芋胶对南美白对虾肌原纤维蛋白凝胶特性的影响 被引量：16
11
作者 孙乐常 周典颖 +4 位作者 杜瀚 翁凌 缪松 刘光明 曹敏杰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第12期42-50,共9页
为探究魔芋胶(konjac glucomannan,KGM)对南美白对虾肌原纤维蛋白(shrimp myofibrillar protein,SMP)凝胶性能的影响,将KGM与SMP按不同比例(1∶50、1∶20、1∶10)进行复配制备复合凝胶体系SK50、SK20、SK10,通过测定表面疏水性、内源性... 为探究魔芋胶(konjac glucomannan,KGM)对南美白对虾肌原纤维蛋白(shrimp myofibrillar protein,SMP)凝胶性能的影响,将KGM与SMP按不同比例(1∶50、1∶20、1∶10)进行复配制备复合凝胶体系SK50、SK20、SK10,通过测定表面疏水性、内源性荧光、浊度及粒径、流变学、红外光谱、蛋白变化及凝胶微观结构,研究复合体系的凝胶特性变化。结果表明,SMP及SMP-KGM复合体系的表面疏水性、浊度及粒径随着KGM添加量的增大而增大,流变学分析表明SMP及SMP-KGM复合体系均出现剪切稀化现象,且SK20的G’值最高,其凝胶的结构稳定性最好。红外光谱分析表明SMP及SMP-KGM复合体系组的光谱特征带相似,表明无明显的基团生成。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明KGM的加入并没有引起蛋白条带的明显变化,相较于未加热组,加热后样品中肌球蛋白重链、副肌球蛋白以及肌动蛋白的条带明显减弱,说明加热能促使三者发生热聚合反应。扫描电镜与分形维数分析表明,随着KGM添加量的增加,形成了致密有序的凝胶。结果表明,一定量的KGM添加能有效提升虾糜的凝胶特性,提高虾糜类产品品质。 展开更多
关键词 南美白对虾 肌原纤维蛋白 魔芋胶 凝胶特性 流变学特性
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毕赤酵母中表达透明颤菌血红蛋白提高重组脂肪酶的表达 被引量：7
12
作者 汪小锋 孙永川 +4 位作者 申旭光 柯锋 徐莉 刘云 闫云君 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1755-1764,共10页
解脂耶氏酵母胞外脂肪酶Lip2(YlLip2)是一种具有广泛应用前景的工业酶。为了改善高密度发酵生产YlLip2过程中的溶氧限制,提高YlLip2的表达量,将YlLip2基因lip2和透明颤菌血红蛋白(VHb)基因vgb分别置于AOX1启动子和PsADH2启动子的调控之... 解脂耶氏酵母胞外脂肪酶Lip2(YlLip2)是一种具有广泛应用前景的工业酶。为了改善高密度发酵生产YlLip2过程中的溶氧限制,提高YlLip2的表达量,将YlLip2基因lip2和透明颤菌血红蛋白(VHb)基因vgb分别置于AOX1启动子和PsADH2启动子的调控之下,进行YlLip2和VHb在毕赤酵母中的共表达。PsADH2启动子来源于树干毕赤酵母Pichia stipitis,在低氧条件下能被激活。SDS-PAGE和CO-差式光谱分析表明,YlLip2和VHb在重组菌中成功实现了共表达。在氧限制性条件下,VHb表达的细胞(VHb+,GS115/9Klip2-pZPVT)与对照细胞(VHb?,GS115/9Klip2)相比,摇瓶和10 L发酵罐中YlLip2表达量分别提高了25%和83%。此外,在低氧条件下,VHb+细胞在10 L发酵罐中的生物量也比VHb?细胞高。文中也获得了一株表达了VHb的并携带有多个lip2基因拷贝的克隆子GS115/9Klip2-pZPVTlip2 49#,在低氧条件下,该克隆子在10 L发酵罐中的最高脂肪酶水解活力达33 900 U/mL。因此,在毕赤酵母中用PsADH2启动子表达VHb,同时增加lip2基因的拷贝数是提高YlLip2表达量的一种有效策略。 展开更多
关键词 脂肪酶 透明颤菌血红蛋白 PsADH2启动子 解脂耶氏酵母 毕赤酵母 表达
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中温碱性脂肪酶的研究——Ⅲ.扩展青霉PF868变株碱性脂肪酶的纯化及其酶学性质 被引量：22
13
作者 郑毅 黄建忠 +2 位作者 施巧琴 翁丽星 吴松刚 《工业微生物》 CSCD 北大核心 1996年第3期15-19,共5页
扩展青霉PF868变株发酵液经硫酸铵盐析和Sephadex-G-200及Sepharose4B柱层析纯化,获得纯化倍数为32.4的酶粉.该酶分子量为23442Dal.酶学特性表明:该酶的最适作用温度为32℃,50℃保温30min仍保留50%酶活性,最适pH为9.0,作用pH稳定范围在... 扩展青霉PF868变株发酵液经硫酸铵盐析和Sephadex-G-200及Sepharose4B柱层析纯化,获得纯化倍数为32.4的酶粉.该酶分子量为23442Dal.酶学特性表明:该酶的最适作用温度为32℃,50℃保温30min仍保留50%酶活性,最适pH为9.0,作用pH稳定范围在7.0—10.0之间.Ca^(2+)Mg^(2+)对酶有激活作用.Fe^(2+)、Cu^(2+)和Mn^(2+)对酶活力有抑制作用. 展开更多
关键词 碱性脂肪酶 扩展青霉PF868 发酵 提纯 酶学性质
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pH两阶段控制策略发酵生产重组角质酶 被引量：12
14
作者 张芙华 陈晟 +3 位作者 张东旭 华兆哲 陈坚 吴敬 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期59-64,共6页
为提高基因工程菌Bacillussubtilis WSHB06-07发酵生产角质酶的产量和生产强度，考察了pH（5．5-8．0）对菌体生长和产酶的影响。基于不同pH发酵过程中菌体比生长速率及比产物合成速率的变化，确定了pH两阶段控制策略，即0～4h时控制pH7... 为提高基因工程菌Bacillussubtilis WSHB06-07发酵生产角质酶的产量和生产强度，考察了pH（5．5-8．0）对菌体生长和产酶的影响。基于不同pH发酵过程中菌体比生长速率及比产物合成速率的变化，确定了pH两阶段控制策略，即0～4h时控制pH7．5，4h后将pH调至6．5。通过采用这一优化策略，角质酶酶活有了较大的提高，达170u／ml，生产强度为16．9kU／（L·h），比恒定pH7．5控制模式下分别提高了122．6％和123．2％。 展开更多
关键词 重组角质酶 枯草芽孢杆菌 pH两阶段控制策略 菌体比生长速率 产物比合成速率
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无溶剂体系脂肪酶催化制阿魏酸双油酸甘油酯 被引量：7
15
作者 辛嘉英 郑妍 +3 位作者 吴小梅 刘颖 夏春谷 李树本 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期172-177,共6页
在无溶剂体系中以分散在硅藻土上的褶皱假丝酵母脂肪酶为催化剂,以阿魏酸乙酯与油酸甘油酯为原料,一步合成阿魏酸双油酸甘油酯。通过质谱和红外光谱对薄层层析分离纯化后的产物结构进行了表征。定量分析表明,当反应温度为50℃,n(阿魏酸... 在无溶剂体系中以分散在硅藻土上的褶皱假丝酵母脂肪酶为催化剂,以阿魏酸乙酯与油酸甘油酯为原料,一步合成阿魏酸双油酸甘油酯。通过质谱和红外光谱对薄层层析分离纯化后的产物结构进行了表征。定量分析表明,当反应温度为50℃,n(阿魏酸乙酯)/n(油酸甘油酯)=1时,阿魏酸双油酸甘油酯的质量占生成物总质量分数较高。在1 mmoL阿魏酸乙酯,1 mmoL油酸甘油酯和70 mg脂肪酶组成的无溶剂反应体系中,50℃空气浴振荡120 h,总产率可达63.32%,其中阿魏酸双油酸甘油酯质量占生成物总质量的63.37%。 展开更多
关键词 阿魏酸双油酸甘油酯 脂肪酶 转酯反应 无溶剂体系
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响应面试验设计优化脂肪酶发酵培养基 被引量：31
16
作者 张大皓 谭天伟 王炳武 《北京化工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第2期41-45,共5页
采用响应面试验设计方法对卡门柏青霉(Penicillium camembertii Thom PG-3)发酵生产脂肪酶的培养基进行优化。用部分因子分析法研究原始发酵培养基各成分对响应值的影响程度,发现脱脂豆粕和磷酸氢二铵的质量浓度对脂肪酶活性的影响显著... 采用响应面试验设计方法对卡门柏青霉(Penicillium camembertii Thom PG-3)发酵生产脂肪酶的培养基进行优化。用部分因子分析法研究原始发酵培养基各成分对响应值的影响程度,发现脱脂豆粕和磷酸氢二铵的质量浓度对脂肪酶活性的影响显著。利用最陡爬坡法逼近最大响应区域。用中心组合设计确定脱脂豆粕和磷酸氢二铵的最优质量浓度。实验结果经过回归分析拟合出一个二次方程的数学模型。并且用实验所得的最优培养基进行发酵试验得到的响应值基本符合数学模型。酶活性比优化前提高了43%。 展开更多
关键词 响应面 脂肪酶 青霉
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蚕丝固定化脂肪酶的研究 被引量：22
17
作者 曹国民 黄杰 高广达 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期88-92,共5页
研究了蚕丝固定化脂肪酶的工艺条件，并考察了固定化脂肪酶的稳定性。试验结果表明：蚕丝与对β硫酸酯乙砜基苯胺（ＳＥＳＡ）进行反应的最适条件是ｐＨ＝１０８，ＳＥＳＡ：２０ｇ／ｇ蚕丝，反应生成的对氨基苯磺酰乙基蚕丝（... 研究了蚕丝固定化脂肪酶的工艺条件，并考察了固定化脂肪酶的稳定性。试验结果表明：蚕丝与对β硫酸酯乙砜基苯胺（ＳＥＳＡ）进行反应的最适条件是ｐＨ＝１０８，ＳＥＳＡ：２０ｇ／ｇ蚕丝，反应生成的对氨基苯磺酰乙基蚕丝（ＡＢＳＥ蚕丝）经重氮化后与脂肪酶偶联的最适条件是：ｐＨ＝７５，偶联时间＞１０ｈ。加酶量为１６８～３０８ｕ／ｇ蚕丝时，所得固定化脂肪酶活力为１０６～１６０ｕ／ｇ蚕丝，此时固定化酶的活力回收率较高（＞５２％）。固定化脂肪酶稳定性较高，其操作半衰期约为２５０ｈ。 展开更多
关键词 蚕丝 脂肪酶 固定化
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产脂肪酸菌种的筛选及部分酶学性质 被引量：14
18
作者 王艳茹 高贵 +2 位作者 王师玉 王志 冯雁 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1999年第4期91-94,共4页
从含油污泥中筛选出一株产脂肪酶活力较高的微球菌，此菌最适产酶条件：2％的蛋白胨为氮源，1％的橄榄油为碳源，pH8.0，28℃培养48h．酶学性质研究发现，在28℃和45℃脂肪酶有较高催化活力，其中28℃活力更高些，最佳反应pH为8．0，pH... 从含油污泥中筛选出一株产脂肪酶活力较高的微球菌，此菌最适产酶条件：2％的蛋白胨为氮源，1％的橄榄油为碳源，pH8.0，28℃培养48h．酶学性质研究发现，在28℃和45℃脂肪酶有较高催化活力，其中28℃活力更高些，最佳反应pH为8．0，pH稳定范围在6．0～10．0之间，Ca2+和K+对酶有激活作用，Fe2+，Cu2+和Mn2+等对酶有抑制作用． 展开更多
关键词 微球菌 脂肪酶 培养条件 筛选 发酵 酶学性质
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三种脂肪酶活力测定方法的比较及改进 被引量：145
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作者 江慧芳 王雅琴 刘春国 《化学与生物工程》 CAS 2007年第8期72-75,共4页
比较了碱滴定法、对硝基苯酚法和铜皂法等三种常用的脂肪酶活力测定方法的测定时间、准确性和重复性。为对硝基苯酚法找到了有效的终止反应方法,改进的对硝基苯酚法具有检测快捷、结果稳定的特点。对铜皂法进行改进,用甲苯代替了苯,改... 比较了碱滴定法、对硝基苯酚法和铜皂法等三种常用的脂肪酶活力测定方法的测定时间、准确性和重复性。为对硝基苯酚法找到了有效的终止反应方法,改进的对硝基苯酚法具有检测快捷、结果稳定的特点。对铜皂法进行改进,用甲苯代替了苯,改进的铜皂法具有毒性小、结果稳定、重复性好的优点。 展开更多
关键词 脂肪酶 活力 测定方法 改进
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中温碱性脂肪酶的研究——Ⅱ.扩展青霉PF868变株产酶条件 被引量：12
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作者 黄建忠 施巧琴 +1 位作者 郑毅 吴松刚 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期10-14,19,共6页
本文报道中温碱性脂肪酶高产变株扩展青霉(Penicillium expansum)PF868的产酶条件。研究结果表明PF868最适产酶条件为:碳源玉米粉,氮源黄豆饼粉,起始pH7.5,产酶培养温度26℃,移种量10％;亚适量的豆油有利于产酶;700ppm的泡敌不抑制菌丝... 本文报道中温碱性脂肪酶高产变株扩展青霉(Penicillium expansum)PF868的产酶条件。研究结果表明PF868最适产酶条件为:碳源玉米粉,氮源黄豆饼粉,起始pH7.5,产酶培养温度26℃,移种量10％;亚适量的豆油有利于产酶;700ppm的泡敌不抑制菌丝生长且有利于产酶;适量的非离子表面活性剂Tween和Span类有利于菌丝生长和脂肪酶的释放。 展开更多
关键词 扩展青霉 中温碱性脂肪酶 脂肪酶 产酶条件
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