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马尾藻类菌孢素氨基酸的提取工艺优化及其对酪氨酸酶活性的抑制机理
1
作者 李田乐 蒋秀婧 +5 位作者 潘明轩 韦欣 焦学 王欣冉 胡亚东 孙颖颖 《食品工业科技》 北大核心 2026年第3期263-274,I0005,I0006,共14页
为探究马尾藻类菌孢素氨基酸(Mycosporine-like amino acids,MAAs)提取物对酪氨酸酶活性的影响,本研究首先采用单因素和响应面优化试验,分析甲醇浓度、液料比、提取温度和提取时间等因素,以马尾藻MAAs的得率及其对酪氨酸酶活性的抑制率... 为探究马尾藻类菌孢素氨基酸(Mycosporine-like amino acids,MAAs)提取物对酪氨酸酶活性的影响,本研究首先采用单因素和响应面优化试验,分析甲醇浓度、液料比、提取温度和提取时间等因素,以马尾藻MAAs的得率及其对酪氨酸酶活性的抑制率为指标,建立马尾藻MAAs的适宜提取工艺。在此基础上,采用薄层层析、紫外光谱、高效液相色谱和分光光度法,对工艺优化后的MAAs提取物进行定性定量、体外抗氧化和抗酪氨酸酶活性分析。进一步,通过酶反应动力学分析、铜离子螯合实验和酪氨酸酶荧光猝灭实验,确定马尾藻MAAs对酪氨酸酶活性的抑制作用机理。结果表明,马尾藻MAAs的适宜提取参数为温度41℃、液料比26 mL/g、时间2.6 h和甲醇浓度31%,MAAs得率为89.87±0.73 mg/g,其对酪氨酸酶活性的抑制率IC_(50)为2.23±0.32 mg/mL。马尾藻MAAs具备清除DPPH(IC_(50)为0.17±0.06 mg/mL)和ABTS^(+)(IC_(50)为1.03±0.21 mg/mL)自由基的能力,以及螯合铜离子(半螯合浓度为0.70±0.21 mg/mL)的能力。马尾藻MAAs对酪氨酸酶活性的抑制作用为可逆、混合型抑制。马尾藻MAAs具有酪氨酸酶抑制活性,可有效阻断黑色素合成途径,在防止生鲜果蔬和饮料褐变以及预防虾类黑变病等方面具有潜在应用前景。 展开更多
关键词 马尾藻 类菌孢素氨基酸 提取工艺 酪氨酸酶 抑制机理
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基于可视化检测肼的吡唑类荧光猝灭型探针 被引量：1
2
作者 张应鹏 李星星 +1 位作者 杨云裳 滕志东 《无机化学学报》 北大核心 2025年第7期1301-1308,共8页
以吡唑衍生物为荧光基团,合成和表征了一种用于可视化检测N_(2)H_(4)的荧光猝灭型探针(THI)。通过研究其光谱性质发现,THI对N_(2)H_(4)表现出高选择性和高灵敏度,抗干扰能力强,响应时间短(18 s),它对N_(2)H_(4)的检测限为0.141μmol... 以吡唑衍生物为荧光基团,合成和表征了一种用于可视化检测N_(2)H_(4)的荧光猝灭型探针(THI)。通过研究其光谱性质发现,THI对N_(2)H_(4)表现出高选择性和高灵敏度,抗干扰能力强,响应时间短(18 s),它对N_(2)H_(4)的检测限为0.141μmol·L^(-1)。质谱和密度泛函理论计算验证了N_(2)H_(4)通过THI的分子内电荷转移(ICT)导致荧光猝灭的机理。此外,THI可以被制作成试纸条定量检测N_(2)H_(4),并且成功实现对HeLa细胞中N_(2)H_(4)的荧光成像。 展开更多
关键词 肼 吡唑衍生物 分子内电荷转移 可视化检测 荧光探针
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火麻仁α-葡萄糖苷酶抑制肽的快速筛选、鉴定及抑制机理研究 被引量：1
3
作者 李焯颖 刘精杏 +3 位作者 廖丹葵 李卫国 兰雄雕 刘彭如 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第22期264-271,共8页
利用菠萝蛋白酶对火麻仁蛋白进行酶解,以α-葡萄糖苷酶抑制率为考察指标,通过单因素以及正交试验对酶解条件进行优化,得到最佳的酶解条件:酶解pH值为8.0,酶解温度为45℃,菠萝蛋白酶与蛋白质的比例为6000 U/g,酶解时间为0.5 h。在该条件... 利用菠萝蛋白酶对火麻仁蛋白进行酶解,以α-葡萄糖苷酶抑制率为考察指标,通过单因素以及正交试验对酶解条件进行优化,得到最佳的酶解条件:酶解pH值为8.0,酶解温度为45℃,菠萝蛋白酶与蛋白质的比例为6000 U/g,酶解时间为0.5 h。在该条件下,制备得到的酶解液对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为(2.65±0.063)mg/mL。对酶解液进行超滤,收集<100 kDa的馏分,并使用生物复合材料3-MPBA/AG@aZIF-7/PDA对其进行亲和纯化,然后用LC-MC/MC质谱和计算机虚拟筛选,获得了5个具有潜在降血糖活性的新型多肽KFL、KFY、SLFK、SWG和YFK。体外实验和分子对接研究表明,KFY的活性最好[IC_(50)为(3.10±0.22)mmol/L],5个多肽均能与α-葡萄糖苷酶上的氨基酸残基形成氢键和疏水作用,从而结合到α-葡萄糖苷酶上,形成稳定的复合物。该研究为火麻仁蛋白的高值化利用提供理论依据和数据支撑,同时也为天然降血糖药物的筛选提供参考。 展开更多
关键词 火麻仁 α-葡萄糖苷酶抑制肽 计算机筛选 分子对接
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计算机模拟筛选藻蓝蛋白中γ-氨基丁酸转氨酶抑制肽
4
作者 陈旭可 叶志能 +3 位作者 郭毅晶 邱淑萍 李昊择 张英华 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第21期189-197,共9页
焦虑症在全球范围内流行,极大降低了患者的生活质量。γ-氨基丁酸转氨酶(γ-aminobutyric acid transaminase,GABA-T)作为降解抑制性神经递质γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的限速酶,抑制其活性可有效缓解焦虑。该研究旨在借... 焦虑症在全球范围内流行,极大降低了患者的生活质量。γ-氨基丁酸转氨酶(γ-aminobutyric acid transaminase,GABA-T)作为降解抑制性神经递质γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的限速酶,抑制其活性可有效缓解焦虑。该研究旨在借助计算机模拟技术,从螺旋藻藻蓝蛋白中筛选出具有抗焦虑潜力的GABA-T抑制肽。研究构建了多层级筛选策略。首先,对藻蓝蛋白氨基酸序列进行虚拟酶切,经PeptideRanker模型筛选出高活性多肽,接着选择分子对接结合能较高的多肽进行毒性、致敏性、水溶性预测,及药物代谢动力学分析,最后通过分子对接和分子动力学模拟揭示候选肽的作用模式。结果表明,酶切获得49条高活性肽,经分子对接选择30条进行理化性质和药代动力学分析,最终可获得3条无毒、无致敏、水溶性和成药性良好的多肽序列CLNGLR、GRF、QGRF。对接结果和动力学模拟揭示,3条多肽可以与GABA-T的关键残基结合,构象在动力学模拟过程中稳定。该研究表明螺旋藻源多肽可以通过抑制GABA降解发挥抗焦虑作用,具备开发为天然抗焦虑药物的潜力。 展开更多
关键词 抗焦虑 藻蓝蛋白 γ-氨基丁酸转氨酶抑制肽 生物活性肽
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载银活性炭纤维用于L-羟脯氨酸的精制
5
作者 刘兴宇 浦军平 +2 位作者 沈霞 张峰 张春枝 《大连工业大学学报》 2025年第4期271-275,共5页
将载银活性炭纤维作为过滤材料,研究其用于L-羟脯氨酸的精制条件。采用前驱体载银法制备出载银活性炭纤维,经检验银粒子结合牢固,不易脱落。研究了载银活性炭纤维去除L-羟脯氨酸中需氧菌、霉菌和酵母菌以及内毒素的条件。结果显示,使用... 将载银活性炭纤维作为过滤材料,研究其用于L-羟脯氨酸的精制条件。采用前驱体载银法制备出载银活性炭纤维,经检验银粒子结合牢固,不易脱落。研究了载银活性炭纤维去除L-羟脯氨酸中需氧菌、霉菌和酵母菌以及内毒素的条件。结果显示,使用3层载银活性炭纤维作为过滤材料,重复使用9次,L-羟脯氨酸产品中需氧菌菌落数为25 CFU/g,去除率为68.2%;霉菌和酵母菌菌落数为15 CFU/g,去除率为76.7%。使用单层载银活性炭纤维作为过滤材料,重复使用10次,内毒素含量为25.4 EU/g,去除率可达80.9%。产品理化指标符合标准,产品中未检出银和银离子。结果表明,采用3层载银活性炭纤维,重复使用9次,能同时满足除去需氧菌、霉菌和酵母菌以及内毒素的要求。 展开更多
关键词 载银活性炭纤维 L-羟脯氨酸 内毒素
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分子伴侣对破伤风毒素C蛋白原核表达水平及活性的影响
6
作者 吴惠宇 王娜 +5 位作者 武悦 吕兆伟 王丹红 徐雨昕 殷玉和 吴丛梅 《中国生物制品学杂志》 2025年第3期272-278,共7页
目的探讨分子伴侣对破伤风毒素C蛋白(tetanus toxin fragment C,TTC)原核表达水平及活性的影响,以期为新型破伤风疫苗的研发提供新思路。方法对TTC基因序列进行E.coli适应性密码子优化,构建重组质粒pET30a-HC,并经双酶切鉴定。将重组质... 目的探讨分子伴侣对破伤风毒素C蛋白(tetanus toxin fragment C,TTC)原核表达水平及活性的影响,以期为新型破伤风疫苗的研发提供新思路。方法对TTC基因序列进行E.coli适应性密码子优化,构建重组质粒pET30a-HC,并经双酶切鉴定。将重组质粒pET30a-HC与分子伴侣pGro7共转化至感受态E.coli BL21(DE3),通过IPTG诱导表达TTC,经12%SDS-PAGE分析及Western blot鉴定,并采用Ni FF金属螯合亲和层析柱进行纯化。分别采用TTC、TTC+Al、TTC+CpG、PBS、破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)经皮下免疫雌性小鼠,每组10只。免疫后,断尾或摘眼球采血,分离血清,ELISA法检测抗体滴度、抗体分型、IL-4及IFNγ水平;无菌摘取小鼠肺脏和肝脏,组织病理学方法评价TTC的安全性。结果经双酶切鉴定,重组质粒pET30a-HC构建正确。加入分子伴侣pGro7后目的蛋白可溶性表达量占总上清表达量的40%。初次免疫后42 d,TTC+CpG组血清特异性IgG抗体滴度明显高于PBS、TTC、TT组(t=4.753~8.624,P均<0.01);虽高于TTC+Al组,但差异无统计学意义(t=0.966,P>0.05)。各组小鼠血清IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgGM抗体水平差异无统计学意义(t=0.163~0.203,P>0.05),IgG1/IgG2a>1,免疫途径偏向Th2型。与TTC组比较,TTC+Al组小鼠血清中IL-4、IFNγ水平差异无统计学意义(t分别为2.666和2.470,P均>0.05),TTC+CpG组显著升高(t分别为18.080和8.440,P分别<0.001和<0.05);与TT组比较,TTC+CpG组小鼠血清中IL-4水平明显升高(t=8.561,P<0.01),但IFNγ水平差异无统计学意义(t=0.472,P>0.05)。各组小鼠的肺脏和肝脏均未见明显病理学变化。结论分子伴侣可提高TTC的可溶性表达水平,且具有良好的安全性,与CpG佐剂联合使用可诱导较强的免疫反应。 展开更多
关键词 破伤风毒素C片段 分子伴侣 原核表达 佐剂
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人纤维蛋白原干热病毒灭活效果及灭活后稳定性的研究 被引量：1
7
作者 刘环 毕晓峰 +3 位作者 张良 宋天旭 江豪琨 江砚芳 《生物医学工程与临床》 2025年第2期155-159,共5页
目的评价人纤维蛋白原(Fg)干热病毒灭活效果及灭活后成品稳定性的研究。方法首先选择连续3批次制备的Fg样品,按样品与病毒9∶1的体积比例分别加入猪细小病毒(PPV)和脑心肌炎病毒(EMCV),冻干后于80℃~87℃条件下干热灭活72 h,使用96孔板... 目的评价人纤维蛋白原(Fg)干热病毒灭活效果及灭活后成品稳定性的研究。方法首先选择连续3批次制备的Fg样品,按样品与病毒9∶1的体积比例分别加入猪细小病毒(PPV)和脑心肌炎病毒(EMCV),冻干后于80℃~87℃条件下干热灭活72 h,使用96孔板微量细胞病变法测定病毒滴度降低量,考察Fg干热灭活效果;然后对干热前/后样品进行蛋白含量、Fg含量、纯度和凝固活力指标的检测并进行比较,以评价其质量变化;最后对干热灭活后的Fg成品进行加速稳定性和长期稳定性研究,考察各项质量指标(如外观、复溶时间、可见异物、水分含量、渗透压摩尔浓度、纯度和凝固活力等)与0个月相比的变化情况,并分析各批次间指标的差异性。其中,加速实验在第0、3和6个月月末抽样检测,长期实验在第0、3、6、9、12、18、24、36和42个月月末抽样检测。结果冻干工艺结合80℃~87℃干热灭活72 h后PPV和EMCV滴度降低量均大于4.0 LgTCID50/0.1 mL,干热灭活前/后Fg质量差异无统计学意义(P>0.05);加速实验和长期实验结果显示各项质量指标的检测结果与0个月相比,其中外观和可见异物指标无明显变化,其他指标均有所变化,但均满足《中华人民共和国药典》2020版(三部)规定,且各批次间指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论冻干人纤维蛋白原采用80℃~87℃干热灭活72 h工艺能有效去除PPV和EMCV,对产品质量影响较小,且最终成品的安全性和稳定性较好。 展开更多
关键词 人纤维蛋白原 干热灭活 质量 稳定性 差异性
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响应面法优化人绒毛膜促性腺激素(hCG)中间体提取工艺
8
作者 雷涛 咸庆东 咸洪泉 《生物加工过程》 2025年第1期99-106,共8页
人绒毛膜促性腺激素(hCG)中间体是重要的医药原料,为优化hCG中间体提取工艺,提高hCG提取效率,本研究以hCG粗品为原料,使用乙酸钠缓冲液一步浸提法从hCG粗品中提取hCG中间体,先以单因素实验研究了缓冲液浓度、液料比、搅拌时间和搅拌温度... 人绒毛膜促性腺激素(hCG)中间体是重要的医药原料,为优化hCG中间体提取工艺,提高hCG提取效率,本研究以hCG粗品为原料,使用乙酸钠缓冲液一步浸提法从hCG粗品中提取hCG中间体,先以单因素实验研究了缓冲液浓度、液料比、搅拌时间和搅拌温度对hCG中间体提取效价的影响,在此基础上通过响应面实验优化了提取工艺。结果表明:影响hCG中间体效价的因素从大到小排序为液料比、搅拌时间、缓冲液浓度、搅拌温度,液料比和缓冲液浓度两因素之间的交互作用对hCG中间体效价有显著影响,以此建立提取hCG中间体效价多元回归数学模型。优化后的提取hCG中间体工艺最佳条件为乙酸钠缓冲液浓度为0.15 mol/L、液料比(mL/g)为11∶1、搅拌时间为2 h、搅拌温度为10℃,在此条件下,提取后hCG中间体效价为259.55 IU/mg。该工艺较传统工艺参数明确,步骤简单,减少了原辅材料使用,提取用时减少了50%,hCG中间体效价提高了29.78%,应用前景广阔。 展开更多
关键词 hCG中间体 效价 缓冲液浸提法 响应面优化
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从麦胚蛋白质中制备降血压肽的研究 被引量：49
9
作者 辛志宏 吴守一 +1 位作者 马海乐 代春华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第10期120-123,共4页
用超临界CO2对小麦胚芽脱脂,碱溶酸沉淀法提取麦胚蛋白,用8种蛋白酶分别进行单一酶和复合酶水解麦胚蛋白生产降血压肽,用高效毛细管电泳(HPCE)测定其活性。碱性蛋白酶生产水解物的活性最大,其对麦胚蛋白作用的最适pH为9,温度为50～55℃... 用超临界CO2对小麦胚芽脱脂,碱溶酸沉淀法提取麦胚蛋白,用8种蛋白酶分别进行单一酶和复合酶水解麦胚蛋白生产降血压肽,用高效毛细管电泳(HPCE)测定其活性。碱性蛋白酶生产水解物的活性最大,其对麦胚蛋白作用的最适pH为9,温度为50～55℃,加酶量为24AU/kg,水解度为16.5%时所得水解物对ACE有强烈抑制用。 展开更多
关键词 超临界CO2 小麦胚芽 麦胚蛋白质 降血压肽 蛋白酶 血管紧张素转化酶 酶解法
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利用牡蛎制备ACE抑制肽的工艺优化 被引量：37
10
作者 邱娟 沈建东 +3 位作者 翁凌 张凌晶 刘光明 曹敏杰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第16期165-172,共8页
运用正交试验和响应面法优化牡蛎血管紧张素转换酶(angiotensin-Ⅰconverting enzyme,ACE)抑制肽的分步酶解制备工艺。采用复合蛋白酶和碱性蛋白酶对牡蛎进行分步酶解,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-poly... 运用正交试验和响应面法优化牡蛎血管紧张素转换酶(angiotensin-Ⅰconverting enzyme,ACE)抑制肽的分步酶解制备工艺。采用复合蛋白酶和碱性蛋白酶对牡蛎进行分步酶解,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析和ACE抑制率为考核指标优化工艺参数。结果表明,第1步复合蛋白酶最佳工艺参数为:料液比1∶4、加酶量1.2%、pH 7.0、反应温度50℃、酶解时间1 h;第2步碱性蛋白酶最佳工艺参数为:加酶量0.42%、pH 8.3、反应温度53℃、酶解时间73 min。凝胶过滤色谱法测得牡蛎酶解液分子质量在3 000 D以下小肽所占比例为99.72%,其ACE抑制活性IC50为0.8 mg/mL。同时,氨基酸组成分析表明,牡蛎肽中Glu含量最高,Cys含量最低;必需氨基酸和疏水性氨基酸含量分别占总氨基酸的36.6%和37.2%。本研究制备的低分子质量、高ACE抑制活性牡蛎肽,可为牡蛎资源的开发利用提供理论参考。 展开更多
关键词 牡蛎 酶解 ACE抑制肽 分子质量分布 氨基酸组成
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溶氧及pH对产朊假丝酵母分批发酵生产谷胱甘肽的影响 被引量：33
11
作者 卫功元 李寅 +1 位作者 堵国成 陈坚 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期734-739,共6页
在 7L发酵罐中研究了溶氧和pH对产朊假丝酵母分批发酵生产谷胱甘肽的影响。结果表明 ,当葡萄糖浓度为 30g L且通气量控制在 5L min时 ,搅拌转速达到 30 0r min即可满足细胞生长和谷胱甘肽合成对溶解氧的需求。不同pH控制方式对谷胱甘肽... 在 7L发酵罐中研究了溶氧和pH对产朊假丝酵母分批发酵生产谷胱甘肽的影响。结果表明 ,当葡萄糖浓度为 30g L且通气量控制在 5L min时 ,搅拌转速达到 30 0r min即可满足细胞生长和谷胱甘肽合成对溶解氧的需求。不同pH控制方式对谷胱甘肽分批发酵的影响有较大差异。不控制pH时 ,细胞干重和谷胱甘肽产量比控制pH为 5 5的发酵分别低 2 7%和 95 % ,且有 5 0 %的谷胱甘肽向胞外渗漏。研究了将pH控制在 4 0、4 5、5 0、5 5、6 0和 6 5的谷胱甘肽分批发酵过程 ,发现在pH 5 5时谷胱甘肽总产量最高。用前期研究建立的动力学模型模拟了不同pH (4 0～ 6 5 )下的分批发酵过程 ,并从动力学角度解释了pH对细胞生长和谷胱甘肽合成的影响。 展开更多
关键词 谷胱甘肽 分批发酵 产朊假丝酵母 溶氧 PH
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环境条件及摇瓶补糖策略对谷胱甘肽发酵的影响 被引量：36
12
作者 李寅 陈坚 +3 位作者 周楠迪 傅为民 阮文权 伦世仪 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期147-152,共6页
研究了酵母摇瓶发酵中ｐＨ、装液量、初糖浓度、碳氮磷比和补糖方式对谷胱甘肽（ＧＳＨ）发酵的影响。结果表明，ＧＳＨ发酵适宜的初始ｐＨ和装液量分别为６０和５００ｍｌ锥形瓶内装液量６０ｍｌ。初糖浓度对ＧＳＨ发酵有较大的影响... 研究了酵母摇瓶发酵中ｐＨ、装液量、初糖浓度、碳氮磷比和补糖方式对谷胱甘肽（ＧＳＨ）发酵的影响。结果表明，ＧＳＨ发酵适宜的初始ｐＨ和装液量分别为６０和５００ｍｌ锥形瓶内装液量６０ｍｌ。初糖浓度对ＧＳＨ发酵有较大的影响，超过１２ｇ／Ｌ的初糖浓度将减少胞内ＧＳＨ含量。应用计算得出的一种以控制比生长速率为目的的摇瓶补糖策略，在总糖浓度为２６２ｇ／Ｌ下发酵１２ｈ，最终细胞浓度和胞内ＧＳＨ含量分别达到８７８ｇ／Ｌ和１３６ｍｇ／ｇ，发酵液内ＧＳＨ总量达到１１９４ｍｇ／Ｌ，细胞对糖产率达到０３３５ｇ／ｇ。 展开更多
关键词 谷胱甘肽 面包酵母 发酵
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酶解海蜇胶原蛋白制备抗氧化肽工艺 被引量：15
13
作者 庄永亮 李八方 +2 位作者 赵雪 闫鸣艳 任国艳 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第S1期129-133,共5页
为优化酶解海蜇胶原蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,采用响应面分析法,研究了酶解温度,酶与底物的比值和pH值对此工艺的影响。以羟自由基清除率为响应值,最终确定温度47.3℃,酶与底物的比值2.8%和pH9.1。酶解液的羟自由基清除率为79.07%,... 为优化酶解海蜇胶原蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,采用响应面分析法,研究了酶解温度,酶与底物的比值和pH值对此工艺的影响。以羟自由基清除率为响应值,最终确定温度47.3℃,酶与底物的比值2.8%和pH9.1。酶解液的羟自由基清除率为79.07%,与模型预测具有较好的拟合性。此工艺制备的酶解产物含有较高的疏水基氨基酸,相对分子质量主要分布在350～5000u之间,符合水解胶原蛋白的行业要求。 展开更多
关键词 海蜇 羟自由基 分子量 酶解 抗氧化肽
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谷胱甘肽的生物合成 被引量：23
14
作者 李华钟 林金萍 +2 位作者 李寅 陈坚 伦世仪 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期236-239,共4页
简介了谷胱甘肽的用途和研究历史 ,重点分析了发酵法和酶法生产谷胱甘肽的工艺过程 。
关键词 谷胱甘肽 生物合成 发酵法 酶法
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醇-碱法提取啤酒糟中蛋白质的研究 被引量：22
15
作者 李娜 李志东 +4 位作者 李国德 郑治国 武士威 柳叶飞 吴迪 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第3期60-62,共3页
以酒糟为原料,通过醇-碱法进行蛋白质提取的研究。对影响蛋白质提取的因素,如醇碱比的选择、提取温度、提取时间及提取料液比等条件进行了正交试验。确定了获得最大提取量的条件,即以醇-碱比为1:2作为提取剂,提取温度30℃,提取时间为70m... 以酒糟为原料,通过醇-碱法进行蛋白质提取的研究。对影响蛋白质提取的因素,如醇碱比的选择、提取温度、提取时间及提取料液比等条件进行了正交试验。确定了获得最大提取量的条件,即以醇-碱比为1:2作为提取剂,提取温度30℃,提取时间为70min,提取料液比为1:30。 展开更多
关键词 酒糟 醇-碱法 蛋白质 提取
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谷胱甘肽的简便测定法 被引量：46
16
作者 赵旭东 魏东芝 +1 位作者 万群 俞俊棠 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期34-37,共4页
目的： 建立一种快速简便测定谷胱甘肽的新方法。方法： 样品１ 式２ 份， ｐＨ８－０ 条件下分别和甲醛反应２ｍｉｎ 和６０ ｍｉｎ， 各取１ ｍＬ加入５ ｍＬＤＴＮＢ溶液， ２５ ℃反应５ ｍｉｎ 后分别测定在波长４１２ ｎｍ 的吸... 目的： 建立一种快速简便测定谷胱甘肽的新方法。方法： 样品１ 式２ 份， ｐＨ８－０ 条件下分别和甲醛反应２ｍｉｎ 和６０ ｍｉｎ， 各取１ ｍＬ加入５ ｍＬＤＴＮＢ溶液， ２５ ℃反应５ ｍｉｎ 后分别测定在波长４１２ ｎｍ 的吸光度， 算出２者的差值ΔＡ， 代入标准曲线计算得出谷胱甘肽含量。结果： 谷胱甘肽浓度在０－１９ ～０－９５ ｇ·Ｌ－１ 之间线性关系良好， 回归方程为： Ｙ＝ ０－７１５ ４ Ｘ－ ０－０００ ４， ｒ＝ ０－９９９ ９ ， 最大误差不超过６ ％ 。结论： 方法成本低廉， 简单易行， 特别适合于有干扰物质存在时还原型谷胱甘肽浓度的分析。 展开更多
关键词 谷胱甘肽 甲醛 关胱氨酸 DTNB
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固相合成胸腺五肽的研究进展 被引量：17
17
作者 王玲 魏浩 +2 位作者 韦萍 朱颐申 欧阳平凯 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第2期153-156,共4页
叙述了胸腺五肽TP5的药理、药代及毒副作用、市场状况和前景 ,分析了胸腺五肽各氨基酸的α -氨基保护基和侧链保护基的特点 ,并从固相载体、第一个氨基酸的连接、肽链延长等 3个方面介绍了Merrifield法、Boc法、Fmoc法 。
关键词 固相合成 胸腺五肽 研究进展 综述 氨基酸
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利用低pH胁迫作用促进产朊假丝酵母生产谷胱甘肽 被引量：21
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作者 聂薇 卫功元 +2 位作者 李寅 堵国成 陈坚 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1750-1756,共7页
谷胱甘肽(GSH)在生物细胞抵御外界环境条件的刺激和胁迫时起到非常重要的作用.研究发现,高产GSH的产朊假丝酵母(Candidautilis)在受到低pH胁迫时,能以增加GSH合成并向胞外释放GSH的方式来响应和抵御外界pH的不断降低.根据这一生理现象,... 谷胱甘肽(GSH)在生物细胞抵御外界环境条件的刺激和胁迫时起到非常重要的作用.研究发现,高产GSH的产朊假丝酵母(Candidautilis)在受到低pH胁迫时,能以增加GSH合成并向胞外释放GSH的方式来响应和抵御外界pH的不断降低.根据这一生理现象,设计了一种pH控制策略,即在C.utilisWSH0208发酵过程中,对细胞赋予短时间pH胁迫,以期提高其胞内GSH合成能力,并使GSH向胞外分泌,从而改变GSH在胞内外的分布和增加GSH合成总量.在该发酵策略的控制下,GSH总产量达到737.1mg·L-1,比对照(A:初糖浓度60g·L-1,恒定pH=5.5,培养时间48h;B:初糖浓度30g·L-1,24h一次性补料30g·L-1,恒定pH=5.5,培养时间45h)分别高出24.9%和20.0%;胞外GSH含量达到197.3mg·L-1,比对照(A、B同前)分别高出355.7%和455.8%;单位细胞的GSH含量达到2.67%(mass),而对照仅为2.28%(mass)和2.11%(mass).研究表明,基于微生物细胞的生理特性设计发酵策略,可以较大幅度地提高目标发酵产物的产量. 展开更多
关键词 谷胱甘肽 产朊假丝酵母 发酵 低pH胁迫策略
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从鳕鱼碎肉中提取水解蛋白 被引量：19
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作者 王长云 林洪 +2 位作者 周东 李钐 魏玉西 《海洋湖沼通报》 CSCD 北大核心 1995年第4期33-39,共7页
用蛋白酶水解法从鳕鱼加工废弃物──鳕鱼碎肉中提取水解蛋白。鳕鱼碎肉经枯草杆菌AS1．398中性蛋白酶240IU／ml，pH7．0，50℃下水解2h；再经黄曲霉IFFI2342（蛋白酶活力2000IU／g）1．5％（W／v），50℃，pH6．0下水解6h以脱苦味。水... 用蛋白酶水解法从鳕鱼加工废弃物──鳕鱼碎肉中提取水解蛋白。鳕鱼碎肉经枯草杆菌AS1．398中性蛋白酶240IU／ml，pH7．0，50℃下水解2h；再经黄曲霉IFFI2342（蛋白酶活力2000IU／g）1．5％（W／v），50℃，pH6．0下水解6h以脱苦味。水解液经真空浓缩后喷雾干燥得水解蛋白粉。该制品易溶于水，无苦味，有海鲜味。其氨基酸组成合理，是优良的蛋白质制品。 展开更多
关键词 鳕鱼 碎肉 水解蛋白 酶解法
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泥鳅粘液中透明质酸的制备及其理化性质的研究 被引量：22
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作者 孙智华 王建军 +1 位作者 侯喜林 张照瑞 《药物生物技术》 CAS CSCD 2001年第1期42-44,共3页
以泥鳅粘液组织为原料 ,用酶解法制备透明质酸 ,收率为 1 96 % ,红外光谱和质量分析表明 ,相对分子质量为 1 5 7× 10 4 ,红外光谱扫描图谱与文献报道一致。
关键词 透明质酸 泥鳅粘注 酶解法 制备 高分子多聚糖
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