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蛙源米尔伊丽莎白菌的生物膜形成能力及β内酰胺类和喹诺酮类耐药性分析
1
作者 蔺凌云 赵颖 +7 位作者 姚嘉赟 沈锦玉 袁雪梅 黄雷 陈静 彭先启 刘忆瀚 潘晓艺 《水生生物学报》 北大核心 2025年第2期95-105,共11页
研究旨在探讨蛙源米尔伊丽莎白菌(Elizabethingia miricola)的药敏特性,生物膜形成能力及对β-内酰胺类和喹诺酮类药物的耐药机制。通过16S rRNA和rpoB基因序列系统发育分析对分离菌株进行分子鉴定。采用肉汤稀释法、结晶紫微孔板法和... 研究旨在探讨蛙源米尔伊丽莎白菌(Elizabethingia miricola)的药敏特性,生物膜形成能力及对β-内酰胺类和喹诺酮类药物的耐药机制。通过16S rRNA和rpoB基因序列系统发育分析对分离菌株进行分子鉴定。采用肉汤稀释法、结晶紫微孔板法和卡尔加里生物膜装置分别测定其最小抑菌浓度(MIC)、生物膜形成能力及最低生物膜清除浓度(MBEC)。利用PCR方法分析β-内酰胺耐药基因及喹诺酮类耐药决定区(QRDR)突变,并通过双纸片法检测其超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和金属β-内酰胺酶(MBL)的产生。结果显示,从患病蛙类样本中分离到的9株优势菌株均为E.miricola;各菌株对β-内酰胺类、氨基糖苷类及喹诺酮类药物耐药,但对多西环素和氟苯尼考敏感;所有菌株均可形成生物膜,生物膜形成菌的MBEC比对应浮游菌的MIC提高8—>256倍;所有菌株均携带β-内酰胺类耐药相关基因(blaCME、blaGOB和blaB),并产生ESBL及MBL;gyrA基因的QRDR区均检测到了可介导喹诺酮类耐药的非同义突变S83R,gyrB、parC和parE未发现突变。结果表明,蛙源E.miricola呈现多重耐药性,普遍具有生物膜形成能力,β-内酰胺酶的产生及喹酮类药物作用靶点突变与其β-内酰胺及喹诺酮类耐药表型相符。多西环素和氟苯尼考的体外敏感性较高,具有治疗该菌感染的潜力。研究可为E.miricola感染的治疗及耐药机制的深入研究提供参考。 展开更多
关键词 多重耐药性 Β-内酰胺酶 喹诺酮类耐药决定区 生物膜 米尔伊丽莎白菌
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美人鱼发光杆菌抑菌中草药的筛选及应用试验
2
作者 梁一帆 吴建绍 +4 位作者 李慧耀 杨求华 郭松林 李昭杰 林琪 《水产科学》 北大核心 2025年第2期274-283,共10页
为筛选出可安全、高效防治仿刺参腐皮综合征的中草药,采用MH培养基、2216E液体培养和抑菌圈法及改良微量二倍稀释法,将诃子、大黄、板蓝根、夏枯草、乌梅、黄柏、虎杖、秦皮、黄连、白芍、五倍子、赤芍、穿心莲、五味子、青蒿、金银花... 为筛选出可安全、高效防治仿刺参腐皮综合征的中草药,采用MH培养基、2216E液体培养和抑菌圈法及改良微量二倍稀释法,将诃子、大黄、板蓝根、夏枯草、乌梅、黄柏、虎杖、秦皮、黄连、白芍、五倍子、赤芍、穿心莲、五味子、青蒿、金银花、白头翁、黄岑、石榴皮、大青叶等20种中草药粉碎过筛,取2 g药粉置于150mL双蒸水浸泡30min,大火煮沸,小火煮20min,大火浓缩至20mL,测定其对仿刺参源美人鱼发光杆菌的体外抑菌效果和筛选出的抑菌效果较好的中草药对体质量(0.40±0.15)g仿刺参的毒性,用筛选出的抑菌中草药拌饲投喂体质量(18.5±5.4)g的仿刺参28d后,计算人工攻毒感染的相对保护率。试验结果显示,诃子、大黄、秦皮、黄连、五倍子、石榴皮等6种中草药水提物对仿刺参源美人鱼发光杆菌有抑菌效果。五倍子的抑菌和杀菌效果最强,最小抑菌质量浓度和最小杀菌质量浓度分别为1.56g/L和6.25g/L;其次是石榴皮,最小抑菌质量浓度和最小杀菌质量浓度为3.13g/L和25 g/L;诃子、大黄、秦皮、黄连等中草药水提物的最小杀菌质量浓度分别为6.25~25.00g/L,抑菌效果良好。3种中草药对仿刺参幼参的急性毒性依次为:五倍子>诃子>石榴皮,诃子24、48、72、96h的半致死质量浓度分别为0.417、0.209、0.174、0.145g/L,石榴皮24、48、72、96h的半致死质量浓度分别为0.670、0.318、0.211、0.172g/L。抗病力测试结果显示,对照组15d累积死亡率为40%,第15天药物添加组相对保护率依次为3%添加组>1%添加组>5%添加组,分别为92.0%、75.0%和58.4%。试验结果表明,石榴皮可以显著提高仿刺参抗病力,以3%添加量的投喂效果最佳。 展开更多
关键词 仿刺参 美人鱼发光杆菌 中草药 急性毒性 抗病力
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福建吊笼养殖刺参肠炎病的发病特征及其菌群结构分析
3
作者 王锦锦 王印庚 +6 位作者 李彬 荣小军 廖梅杰 葛建龙 黄强 王璐 施国军 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第4期201-216,共16页
本研究以福建东吾洋海域吊笼养殖区暴发肠炎病的刺参(Apostichopus japonicus)为研究对象,对其发病特征、病原病理以及刺参肠道菌群结构进行解析,以期掌握该养殖模式下相关疾病的发病原因,为该区域刺参病害防控提供科学依据。流行病学... 本研究以福建东吾洋海域吊笼养殖区暴发肠炎病的刺参(Apostichopus japonicus)为研究对象,对其发病特征、病原病理以及刺参肠道菌群结构进行解析,以期掌握该养殖模式下相关疾病的发病原因,为该区域刺参病害防控提供科学依据。流行病学调查发现,患病刺参肠道变细且肠道内含有大量积水;组织病理学结果显示,病变肠道结缔组织细胞肿大且部分崩解,排布较为松散,结缔组织与肌肉层出现分离现象。采用涂布培养法对刺参肠道及环境样品进行可培养细菌培养和占比分析,结果显示,患病刺参肠道总菌数和弧菌数均显著高于健康刺参。通过对16S rDNA可变区V3~V4区域进行高通量测序,菌群结构分析结果显示,检测到的细菌归属于25门、311科,健康组肠道排名前三的优势菌科为肠杆菌科(Enterobacteriaceae)、杆菌科(Bacillaceae)和毛螺菌科(Lachnospiraceae),相对丰度分别为8.69%、5.53%和5.12%;而患病组肠道排名前三的优势菌科依次为立克次体科(Rickettsiaceae)、弧菌科(Vibrionaceae)和肠杆菌科,相对丰度分别为12.66%、8.22%和5.71%,患病组的弧菌科丰度显著高于健康组,环境样品中混合饲料的弧菌科相对丰度最高,达到34.99%。PCoA分析及UPGMA聚类分析显示,各组样品聚类良好,且混合饲料菌群类别与肠道菌群较为接近。在差异菌群的高丰度操作分类单元(OTU)定位分析中,相对丰度高于0.5%的OTU主要定位到泥单胞菌属(Lutimonas)、另类弧菌属(Aliivibrio)和华美菌属(Formosa),且弧菌属(Vibrio)多为致病菌,华美菌属多为益生菌,高丰度OTU在健康组和患病组的肠道中差异显著。上述结果表明,患病刺参肠道组织结构发生改变,且肠道中的大量弧菌主要来源于混合饲料,刺参饵料中的大量菌群对其健康具有一定的威胁性,益生菌在健康刺参肠道中的含量高于患病刺参,致病菌在患病刺参中的含量高于健康刺参。相关研究结果将有助于为潜在益生菌的开发利用和潜在病原菌的筛查提供科学依据,并进一步推动刺参饵料的优化,为科学养殖及病害防控提供理论依据。 展开更多
关键词 刺参 肠炎病 混合饲料 菌群结构 高通量测序
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哈维氏弧菌LAMP可视化检测方法的建立
4
作者 于劼豪 黄郁葱 +4 位作者 孙良娟 钟键 鲁义善 简纪常 蔡双虎 《海洋渔业》 北大核心 2025年第1期29-39,共11页
为提高哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)早期快速诊断水平,建立一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的可视化快速检测方法。利用表达环二聚体磷酸二酯的VieA基因序列在哈维氏弧菌中的保守性,将其作为靶基因设计引物,并初步建立LAMP反应体系,对L... 为提高哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)早期快速诊断水平,建立一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的可视化快速检测方法。利用表达环二聚体磷酸二酯的VieA基因序列在哈维氏弧菌中的保守性,将其作为靶基因设计引物,并初步建立LAMP反应体系,对LAMP反应体系中各反应物浓度、内外引物比例、反应时间和反应温度进行优化,并对优化后的LAMP反应的特异性和灵敏度进行检测;分别在优化后的LAMP反应体系中加入SYBR Green I、钙黄绿素-锰离子或羟基萘酚蓝作为指标剂对LAMP反应产物进行可视化判别,从而建立一种针对哈维氏弧菌的LAMP可视化检测方法。研究表明,该LAMP反应体系最佳反应温度60℃、反应时间60 min、Mg2+浓度1.2 mmol·L^(-1)、dNTPs浓度0.64 mmol·L^(-1)、甜菜碱浓度0.25 mmol·L^(-1)及内外引物比例16∶1;该反应体系能特异性检测到哈维氏弧菌,且灵敏度为3.4×10-6 ng·μL^(-1)。可视化指标剂钙黄绿素-锰离子的添加比例为12∶1或羟基萘酚蓝的添加浓度为390μmol·L^(-1)时,LAMP反应产物的可视化效果最好,临床应用表明,该LAMP可视化技术能准确并特异性地检测到珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus♀×E.lanceolatus♂)和凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)组织中感染的哈维氏弧菌。研究提供了一种简单、快速和结果可视化的哈维氏弧菌LAMP检测方法,可以为水生动物哈维氏弧菌的现场检测和弧菌病的早期诊断提供技术支持。 展开更多
关键词 哈维氏弧菌 LAMP技术 可视化检测 临床应用
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40种中草药水提液及其复方对黑斑蛙源米尔伊丽莎白菌的体外抑菌作用
5
作者 朱能斌 陈毅凌 +1 位作者 屈学磊 徐洪森 《武汉轻工大学学报》 2025年第2期28-34,42,共8页
为筛选出对黑斑蛙(Plophylax nigromaculatus)源米尔伊丽莎白菌(Elizabethkingia miricola)体外抑菌效果较好的中草药,采用平板打孔法测定了40种中草药水提液对米尔伊丽莎白菌的体外抑菌效果,并进一步通过微量二倍稀释法测定了效果较好... 为筛选出对黑斑蛙(Plophylax nigromaculatus)源米尔伊丽莎白菌(Elizabethkingia miricola)体外抑菌效果较好的中草药,采用平板打孔法测定了40种中草药水提液对米尔伊丽莎白菌的体外抑菌效果,并进一步通过微量二倍稀释法测定了效果较好中草药的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果发现:米尔伊丽莎白菌对五倍子(Rhus chinensis)、苏木(Caesalpinia sappan)、乌梅(Fructus mume)3种中草药表现为高度敏感,其抑菌圈直径分别为18 mm、(15.67±4.33)mm、(15.67±4.33)mm;对牡丹皮(Moutan cortex)、大黄(Radix et rhizoma rhei)、石榴皮(Punica granatum)、夜交藤(Polygni multiflori Caulis)、分心木(Semen juglandis)5种中草药中度敏感;对柯子(Terminalia species)、丁香(Syringa oblata Lindl)、赤芍(Radix paeoniae rubra)3种中草药表现为低度敏感;对其余29种中草药不敏感。五倍子对米尔伊丽莎白菌的体外抑菌、杀菌作用最强,其MIC和MBC分别为31.25 mg/mL和62.5 mg/mL;其次为苏木和乌梅,两者的MIC和MBC均为62.5 mg/mL;石榴皮和大黄的MIC和MBC分别为62.5 mg/mL和125 mg/mL。五倍子、乌梅和苏木可以有效防治米尔伊丽莎白菌引起的疾病,可为使用中草药防控黑斑蛙歪头病提供参考。 展开更多
关键词 中草药 黑斑蛙 米尔伊丽莎白菌 最小抑菌质量浓度 最小杀菌质量浓度 抑菌效果
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一例寄生虫与细菌共感染刺参病例的病原分离和鉴定 被引量：1
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作者 赵庚彤 倪鑫鹏 +3 位作者 张子怡 孙清美慧 杨笑菡 黎睿君 《科学养鱼》 2025年第3期58-60,共3页
2023年10月,辽宁大连地区某养殖场刺参(Apostichopus japonicus)出现大量死亡情况,患病刺参海参摇头、排脏,口部肿大无法闭合。病情加重时,溃疡增多,形成蓝白斑,全身溃烂并自溶死亡,化为鼻涕状胶体,留下白色印迹。经临床检测和病原鉴定... 2023年10月,辽宁大连地区某养殖场刺参(Apostichopus japonicus)出现大量死亡情况,患病刺参海参摇头、排脏,口部肿大无法闭合。病情加重时,溃疡增多,形成蓝白斑,全身溃烂并自溶死亡,化为鼻涕状胶体,留下白色印迹。经临床检测和病原鉴定,该病例是由巨大拟阿脑虫与塔氏弧菌共感染所致。 展开更多
关键词 共感染 病原鉴定 辽宁大连 大量死亡 寄生虫 弧菌 临床检测
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紫锥菊多糖对中华鳖病毒性腮腺炎的疗效
7
作者 代小玲 吕孙建 +8 位作者 刘莉 郭琦 沈卫锋 叶子弘 马文君 张明兴 沈智慧 沈万里 卜伟绍 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第6期261-270,共10页
中华鳖出血综合征病毒(Trionyx sinensis hemorrhagic syndrome virus,TSHSV)是近年来对鳖危害较大的一种水生动脉炎病毒,引起中华鳖腮腺炎,导致其大量死亡,但目前对TSHSV仍无有效的治疗方法。紫锥菊多糖(Echinacea purpurea polysaccha... 中华鳖出血综合征病毒(Trionyx sinensis hemorrhagic syndrome virus,TSHSV)是近年来对鳖危害较大的一种水生动脉炎病毒,引起中华鳖腮腺炎,导致其大量死亡,但目前对TSHSV仍无有效的治疗方法。紫锥菊多糖(Echinacea purpurea polysaccharide,EPP)是一种天然的植物提取物,具有抗氧化、抗菌、抗病毒和免疫调节等特性。为探究EPP对中华鳖腮腺炎的治疗效果,本研究通过死亡率统计、组织病理学、实时荧光定量PCR和组织免疫荧光技术评估EPP对鳖TSHSV感染的保护作用。结果显示,500 mg/kg浓度的EPP能提高感染TSHSV的中华鳖存活率,并能显著降低脾脏和肺内的病毒载量,减轻脾脏、肝脏、肾脏和肺等组织器官的损伤。此外,EPP处理组抗病毒相关基因rsad2和usp18 mRNA的表达水平较低。综上所述,EPP对感染TSHSV的鳖具有一定的保护作用,能有效抑制TSHSV增殖,调节鳖的免疫功能,有望成为预防TSHSV的一种有效手段。本研究为研制预防TSHSV药物提供了重要的理论基础。 展开更多
关键词 中华鳖出血综合征病毒 紫锥菊多糖 抗病毒 免疫功能
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仿刺参干扰素调节因子3基因的克隆及其功能分析
8
作者 姜建洋 李宏阳 +2 位作者 王称杨 李成华 邵铱娜 《水产学报》 北大核心 2025年第1期89-102,共14页
【目的】研究仿刺参干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)基因功能。【方法】本研究首先采用RACE技术,通过克隆和序列拼接获得了仿刺参IRF3基因的全长cDNA序列,并命名为AjIRF3。AjIRF3基因全长2023 bp,编码441个氨基... 【目的】研究仿刺参干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)基因功能。【方法】本研究首先采用RACE技术,通过克隆和序列拼接获得了仿刺参IRF3基因的全长cDNA序列,并命名为AjIRF3。AjIRF3基因全长2023 bp,编码441个氨基酸。【结果】序列分析显示,AjIRF3基因C末端具有1个IAD结构域;系统进化树分析结果显示,AjIRF3能与IRF3家族成员聚合且与软体动物欧洲玉黍螺的亲缘关系最近。组织分布显示,AjIRF3在所有检测的组织中均能表达,其中在肌肉中表达量最高,肠次之,体腔细胞中的表达量最低。灿烂弧菌胁迫下,AjIRF3在仿刺参体腔细胞中的表达量明显上调,且在6 h达到最高值,为对照组的3.64倍;进一步在LPS和poly(I:C)胁迫下,AjIRF3均在48 h达到最高值,分别为对照组的3.20倍和8.57倍。亚细胞定位结果显示,AjIRF3主要分布于细胞质中,但经灿烂弧菌胁迫后AjIRF3主要从细胞质易位到细胞核中。此外,干扰AjIRF3后,仿刺参体腔细胞凋亡率与NC组相比显著下降16%;进一步用灿烂弧菌胁迫后发现,体腔细胞中的胞内菌数量与NC组相比显著上调19.83倍,表明干扰仿刺参IRF3后促进了病原感染。【结论】仿刺参IRF3能够响应病原感染,并在抵御病原感染过程中发挥重要作用。研究结果为防控仿刺参腐皮综合征的发生提供了理论基础。 展开更多
关键词 仿刺参 干扰素调节因子3 表达分析 细胞凋亡
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中华鳖主要疾病及研究进展(下)
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作者 靳利忠 曾嘉伟 +2 位作者 陆雨旷 胡亚洲 王晓清 《科学养鱼》 2025年第1期58-59,共2页
2.真菌性疾病。真菌引起的疾病研究相对于细菌性疾病的研究较少,常见的真菌性疾病有白斑病、水霉病、脖颈丝囊霉病等。(1)白斑病。白斑病是中华鳖真菌性疾病最常见的疾病之一,通常在稚鳖期发病,死亡率高。白斑病的主要致病菌为藻状霉目... 2.真菌性疾病。真菌引起的疾病研究相对于细菌性疾病的研究较少,常见的真菌性疾病有白斑病、水霉病、脖颈丝囊霉病等。(1)白斑病。白斑病是中华鳖真菌性疾病最常见的疾病之一,通常在稚鳖期发病,死亡率高。白斑病的主要致病菌为藻状霉目霉菌科白霉属和毛霉菌,其寄生在甲壳、颈、四肢等部位的皮肤处。机体患白斑病的主要病症为发病初期裙边处出现白斑(图5),随着病情加重发展至背甲、四肢、颈等部位,白斑处皮肤逐渐坏死、出血,随后容易感染细菌导致并发细菌性疾病,最后真菌寄生至咽喉处时,导致受感染的机体呼吸窒息致死。解剖后发现肠和胃出现积水,且腹腔积水较多,肝、脾、肾、肠、胃明显肿大,肝脏出现出血斑,肠腔无实物。 展开更多
关键词 真菌性疾病 细菌性疾病 中华鳖 白斑病 水霉病 出血斑 稚鳖 腹腔积水
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牛蛙常见疾病研究进展及防治方法 被引量：1
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作者 韩乐 靳利忠 +2 位作者 陆雨旷 成江辉 王晓晴 《科学养鱼》 2025年第1期54-55,共2页
随着牛蛙在餐饮方面的市场需求增大,牛蛙养殖产量逐年增加、产值不断提升。牛蛙养殖逐渐从个体户散养走向企业集约化、规模化养殖,高密度人工繁殖成为主流,这便对牛蛙疾病防控有了更高的需求。本文跟进牛蛙常见疾病的研究,了解疾病的病... 随着牛蛙在餐饮方面的市场需求增大,牛蛙养殖产量逐年增加、产值不断提升。牛蛙养殖逐渐从个体户散养走向企业集约化、规模化养殖,高密度人工繁殖成为主流,这便对牛蛙疾病防控有了更高的需求。本文跟进牛蛙常见疾病的研究,了解疾病的病理表现及致病机理,并结合当前一些防治研究的成果,为牛蛙疾病防治提供参考。 展开更多
关键词 防治方法 疾病防控 规模化养殖 牛蛙 致病机理 病理表现 疾病防治 养殖产量
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仿刺参非受体酪氨酸激酶家族7个成员的鉴定及其表达模式
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作者 王纪萍 万俊杰 +1 位作者 彭宇慧 赵雪琳 《水产学报》 北大核心 2025年第4期49-61,共13页
【目的】阐明仿刺参非受体酪氨酸激酶(SFKs)基因家族在病原胁迫响应中的功能。【方法】首先采用生物信息学方法,对仿刺参SFK基因家族成员的基因结构及进化关系进行分析,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测分析病原胁迫下仿刺参SFK... 【目的】阐明仿刺参非受体酪氨酸激酶(SFKs)基因家族在病原胁迫响应中的功能。【方法】首先采用生物信息学方法,对仿刺参SFK基因家族成员的基因结构及进化关系进行分析,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测分析病原胁迫下仿刺参SFK基因家族成员的时空表达模式。【结果】本研究在仿刺参中共鉴定出SFK基因家族的7个成员,它们分属为SrcA、SrcB两个亚家族,不均匀地分布在3条染色体上。SFK蛋白结构域及motif分析结果显示,除SrcB-3外的6个成员都具有SH3结构域、SH2结构域、酪氨酸激酶核心结构域。其中,组成酪氨酸激酶核心结构域的5个基序在所有成员中广泛存在,不同成员SH3结构域及SH2结构域有相同的基序组成,表明AjSFK家族在进化上较为保守。SFKs在不同组织的基因表达模式分析表明,SFKs在仿刺参各个组织中广泛表达且具有明显的组织特异性,在肠道及触手中的表达量较高。另外,灿烂弧菌感染6 h后,SrcB-1~3的表达量极显著升高,体外脂多糖(LPS)胁迫24 h后SrcA-1和SrcB-2的表达量显著升高。【结论】仿刺参SFKs在响应病原刺激过程中具有较高的免疫响应且发挥重要作用。本实验是首个对仿刺参SFK基因家族进行系统识别及功能分析的研究,为仿刺参抗病研究提供了重要的理论基础。 展开更多
关键词 仿刺参 SFK基因家族 非受体酪氨酸激酶 基因表达
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蛙病毒3型类和桑蒂库帕蛙病毒类双重荧光定量PCR检测方法的建立与应用
12
作者 邓艳 柏建山 +5 位作者 徐浩 季新成 黄燕琼 何淑华 曾伟伟 蒋茗 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第1期48-53,79,共7页
为建立一种可快速鉴别检测蛙病毒3型(FV3)类和桑蒂库帕蛙病毒(SCRV)类的双重荧光定量PCR(qPCR)方法,本研究根据FV3类和SCRV类的主要衣壳蛋白(MCP)基因序列,设计一对特异性引物和两种不同荧光标记的探针,采用特异性引物扩增虎纹蛙病毒(T... 为建立一种可快速鉴别检测蛙病毒3型(FV3)类和桑蒂库帕蛙病毒(SCRV)类的双重荧光定量PCR(qPCR)方法,本研究根据FV3类和SCRV类的主要衣壳蛋白(MCP)基因序列,设计一对特异性引物和两种不同荧光标记的探针,采用特异性引物扩增虎纹蛙病毒(TFV)和大口黑鲈虹彩病毒(LMBV)的目的基因,构建重组质粒标准品pMD19-T-TFV和pMD19-T-LMBV。采用矩阵法优化各反应条件后,初步建立了检测这两类蛙病毒的双重qPCR方法。标准曲线结果显示两个重组质粒标准品混合物与各自的Ct值均呈良好的线性关系。采用本研究建立的方法分别检测TFV、LMBV、伯勒虹彩病毒(BCV)、蛙病毒3型、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、锦鲤疱疹病毒、罗非鱼湖病毒、病毒性神经坏死病毒、斑点叉尾鮰病毒、鲤浮肿病毒、传染性造血器官坏死病毒、传染性脾肾坏死病毒、呼肠孤病毒Ⅱ型、疱疹病毒Ⅱ型,评估该方法的特异;以100~108稀释的重组质粒标准混合物为模板采用建立的双重qPCR方法检测,评估该方法的敏感性;以10^(2)~10^(8)稀释的重组质粒标准混合物为模板采用该双重qPCR方法分别进行组内和组间的重复性试验。结果显示,该方法仅能扩增出FV3类的TFV、BIV、FV3及EHNV和SCRV类的LMBV,其他病毒均无扩增曲线;对pMD19-T-TFV和pMD19-T-LMBV的检测限分别为1拷贝/µL和10拷贝/µL;组内变异系数和组间变异系数均小于2%。利用建立的双重qPCR方法和WOAH推荐的常规PCR方法分别对298份临床样品分别进行检测,结果显示,双重qPCR方法检出21份SCRV类,2份FV3类,普通PCR方法检出15份SCRV类,2份FV3类,双重PCR方法与常规PCR方法对FV3类和SCRV类的检测结果的阳性符合率均达100%。本研究建立的双重qPCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,对于多种蛙病毒属成员的鉴别检测和早期预警具有重要意义。 展开更多
关键词 蛙病毒 双重荧光定量PCR TAQMAN探针
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刺参后口虫病及棒锥螺防控管理
13
作者 王翰林 《科学养鱼》 2025年第3期52-53,共2页
刺参作为重要的海水养殖物种,其健康对于养殖业的经济效益至关重要。然而,刺参在养殖过程中容易受到各种病原体和有害生物的侵害和影响,刺参后口虫病及棒锥螺便对刺参养殖有较大影响。刺参后口虫病是由后口虫大量寄生于刺参呼吸树内引... 刺参作为重要的海水养殖物种,其健康对于养殖业的经济效益至关重要。然而,刺参在养殖过程中容易受到各种病原体和有害生物的侵害和影响,刺参后口虫病及棒锥螺便对刺参养殖有较大影响。刺参后口虫病是由后口虫大量寄生于刺参呼吸树内引起的疾病,后口虫是一种寄生于刺参呼吸树上的盾纤毛虫,能引起刺参排脏反应,影响刺参的生长和养殖产量。棒锥螺在刺参池塘中大量滋生占据刺参生境和抢夺天然饵料影响刺参的产量和品质,因此探讨刺参后口虫病及池塘内棒锥螺的防控与管理策略,并筛选有效药物进行治疗,以减少这些疾病和有害生物对刺参养殖业的影响显得尤其重要。本文主要从后口虫的流行病学特征、鉴别诊断进行分析,并提出相应的综合治疗措施,以期有助于养殖者准确诊断并做到及时防治,减少养殖经济损失。 展开更多
关键词 有害生物 虫病 刺参养殖 呼吸树 防控管理 天然饵料 盾纤毛虫 刺参池塘
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黄鳝疾病的生态预防
14
作者 张志斌 《湖南农业》 2025年第8期25-25,共1页
由于黄鳝生活在水中,它的早期病况难以察觉,再加之病鳝丧失食欲,导致药物无法进入黄鳝体内。因此,对黄鳝病害的防治应遵循“无病先防、有病早治、防重于治”的原则。一、营造适宜黄鳝生长的生态环境。1.合理规划建设鳝池水泥鳝池在建设... 由于黄鳝生活在水中,它的早期病况难以察觉,再加之病鳝丧失食欲,导致药物无法进入黄鳝体内。因此,对黄鳝病害的防治应遵循“无病先防、有病早治、防重于治”的原则。一、营造适宜黄鳝生长的生态环境。1.合理规划建设鳝池水泥鳝池在建设时,池表面应光滑,鳝池四个角最好设计成弧形,避免黄鳝皮肤受到伤害。 展开更多
关键词 疾病 生态预防 弧形设计 生态环境 鳝池 黄鳝
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黄沙鳖败血症病原菌的分离鉴定及毒力基因研究
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作者 黄艳华 黄珊珊 +5 位作者 陈寿福 韩书煜 黄伟德 王明灿 施金谷 李仁志 《安徽农业科学》 2025年第21期77-81,共5页
[目的]分析广西某养殖场黄沙鳖大量死亡的原因,同时了解病原菌携带的毒力基因。[方法]采用常规方法从患败血症黄沙鳖的内脏组织中分离细菌,并对其进行生理生化特性和分子生物学鉴定;通过单一菌株及混合菌株的人工感染试验,确定菌株的致... [目的]分析广西某养殖场黄沙鳖大量死亡的原因,同时了解病原菌携带的毒力基因。[方法]采用常规方法从患败血症黄沙鳖的内脏组织中分离细菌,并对其进行生理生化特性和分子生物学鉴定;通过单一菌株及混合菌株的人工感染试验,确定菌株的致病性;利用PCR方法检测病原菌携带的毒力基因。[结果]共分离到2株优势菌株(YL01、YL02),其中YL01菌株为嗜水气单胞菌,16S rRNA基因序列与嗜水气单胞菌M83的同源性达98.21%;YL02菌株为迟缓爱德华氏菌,16S rRNA基因序列与迟缓爱德华氏菌S4的同源性达99.12%。人工感染试验结果显示,菌株YL01、YL02及混合菌液均对黄沙鳖具有较强的致病性,人工感染病鳖的症状与自然发病症状相同,且从人工感染的黄沙鳖组织器官上再次分离到嗜水气单胞菌和迟缓爱德华氏菌。经鉴定菌株YL01的毒力基因型为hly^(+)Aer^(-)Alt^(+)Act^(-)ahal^(+)ahp^(+),菌株YL02的毒力基因型为citC^(+)fimA^(+)gadB^(+)mukF^(+)esrB^(-)katB^(-)。[结论]嗜水气单胞菌和迟缓爱德华氏菌都是造成此次黄沙鳖死亡的病原菌,2种细菌混合感染试验结果也表明此次患败血症黄沙鳖的感染情况较为复杂,在病害防控中要引起重视。 展开更多
关键词 黄沙鳖 嗜水气单胞菌 迟缓爱德华氏菌 分离与鉴定 毒力基因
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人工饲养菲牛蛭弧菌感染的病原分离与鉴定
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作者 赵谦 亐开兴 +1 位作者 毕峻龙 朱玲云 《水产养殖》 2025年第9期52-54,共3页
菲牛蛭(Hirudiaria manillensis Lesson),别名马尼拟医蛭,俗称蚂蟥、吸血虫。水蛭中含有一种特殊的物质“水蛭素”,其具有较强的抗凝血作用[1-2]。与肝素相比,水蛭素抑制血栓增长的效果更好,它还能使血管壁上已经有的血栓加快分解速度,... 菲牛蛭(Hirudiaria manillensis Lesson),别名马尼拟医蛭,俗称蚂蟥、吸血虫。水蛭中含有一种特殊的物质“水蛭素”,其具有较强的抗凝血作用[1-2]。与肝素相比,水蛭素抑制血栓增长的效果更好,它还能使血管壁上已经有的血栓加快分解速度,从而在医学上具有重要的医用价值[3-4]。20世纪80年代初,抗凝药物开始应用于心肌缺血、血栓等治疗,水蛭素的抗凝和抗血栓作用得到了广泛的认可和重视,因此水蛭素的价值备受重视,人工养殖的效益较好[5-7]。 展开更多
关键词 感染 病原分离 水蛭素 菲牛蛭 抗凝血
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不同特异性HIV抗体表达与临床分期相关性初探
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作者 宋晓钰 商正玲 +2 位作者 冯勤颖 周信忠 葛章文 《广东医学》 2025年第2期201-205,共5页
目的针对不同人类免疫缺陷病毒(HIV)抗原的特异性抗体在不同分期患者表达差异,发现其与获得性免疫缺陷综合征(AIDS)临床分期的关联,探索免疫印迹条带作为预测HIV感染期和艾滋病期的可行性。方法采用回顾性研究,选取2020年4月至2022年11... 目的针对不同人类免疫缺陷病毒(HIV)抗原的特异性抗体在不同分期患者表达差异,发现其与获得性免疫缺陷综合征(AIDS)临床分期的关联,探索免疫印迹条带作为预测HIV感染期和艾滋病期的可行性。方法采用回顾性研究,选取2020年4月至2022年11月贵州省人民医院感染科接受治疗的艾滋病患者307例为研究对象,对其血液样本进行CD3^(+)CD4^(+)T细胞计数,分析两组感染者的一般资料差异,通过蛋白质免疫印迹法检测感染期和艾滋病期感染者血清中针对HIV不同抗原的特异性抗体表达情况,绘制差异表达抗体的受试者工作特征(ROC)曲线,分析其与临床分期的可能关系。结果两组患者的性别、年龄、营养状况、吸烟史、高血压、糖尿病史、饮酒史等指标差异均无统计学意义(P>0.05);外周血中针对GP160、GP120、GP41、P24、P55以及P17病毒抗原的特异性抗体在两组患者中表达差异无统计学意义(P>0.05);但艾滋病期感染者外周血中抗P66、P51、P31的特异性抗体出现率明显多于感染期感染者(P<0.05)。分别利用不同分期P66、P51、P31特异性抗体条带绘制ROC曲线,结果显示P66、P51、P31特异性抗体更多出现在艾滋病期,ROC曲线下面积均大于0.8。结论针对病毒包膜抗原(GP160、GP120、GP41)以及核心抗原(P24、P55、P17)的抗体在感染期和艾滋病期持续存在,艾滋病期患者血清中针对病毒逆转录酶抗原(P66、P51、P31)的特异性抗体明显高于感染期患者,提示该类抗体具有作为病毒复制活跃程度和临床分期辅助评价潜能。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 病毒载量 抗体 临床分期
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甲鱼养殖环节霍乱弧菌防控技术
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作者 王心华 《渔业致富指南》 2025年第8期55-58,共4页
弧菌是咸淡水(海水)养殖环境中最为常见的细菌种群之一,除存在养殖水体中,其还广泛存在池塘泥土、养殖生物体内外,可导致甲鱼出现败血症、肠炎、腐皮等病症,严重影响甲鱼的成活率和养殖效益。弧菌属的霍乱弧菌是人类霍乱(一种古老且流... 弧菌是咸淡水(海水)养殖环境中最为常见的细菌种群之一,除存在养殖水体中,其还广泛存在池塘泥土、养殖生物体内外,可导致甲鱼出现败血症、肠炎、腐皮等病症,严重影响甲鱼的成活率和养殖效益。弧菌属的霍乱弧菌是人类霍乱(一种古老且流行广泛的急性肠道传染病)的病原体,主要通过污染的水源或饮食经口传染,在自然情况下人类是其的唯一易感者。 展开更多
关键词 防控技术 咸淡水养殖 霍乱弧菌 甲鱼养殖
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