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SGT1介导自噬和凋亡促进罗氏沼虾抗氧化系统抵御嗜水气单胞菌感染
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作者 吕彬彬 赵飞 +7 位作者 王玲 于凌云 陈总会 邓玉婷 谭爱萍 廖永众 罗璋 王飞飞 《水产学报》 北大核心 2026年第3期207-222,共16页
【目的】探究抑制SKP1的G2等位基因(SGT1)的分子特征及其在罗氏沼虾抗菌免疫中的作用机制,阐明其在自噬与凋亡调控中的功能。【方法】采用PCR方法克隆并鉴定罗氏沼虾SGT1基因(命名为MrSGT1),结合生物信息学进行序列特征、结构域与系统... 【目的】探究抑制SKP1的G2等位基因(SGT1)的分子特征及其在罗氏沼虾抗菌免疫中的作用机制,阐明其在自噬与凋亡调控中的功能。【方法】采用PCR方法克隆并鉴定罗氏沼虾SGT1基因(命名为MrSGT1),结合生物信息学进行序列特征、结构域与系统进化分析;通过qRT-PCR检测MrSGT1在不同组织及经嗜水气单胞菌和脂多糖刺激后的表达变化;通过RNA干扰、qRT-PCR、Western blot以及酶活性检测等方式分析MrSGT1在自噬、凋亡及抗氧化系统中的功能。【结果】MrSGT1的开放阅读框(ORF)为687 bp,预测编码228个氨基酸,含有CS和SGS两个结构域,蛋白分子质量为25.41 ku,等电点为5.54。序列相似性分析表明MrSGT1与日本沼虾SGT1相似性为95.61%,系统进化树分析显示MrSGT1与甲壳动物聚为一支,这表明MrSGT1在甲壳类动物中进化相对保守。组织分布表明MrSGT1在肝胰腺中表达量最高。使用嗜水气单胞菌和LPS刺激罗氏沼虾后,MrSGT1在肝胰腺和鳃中的表达水平显著上调,表明其参与罗氏沼虾的抗菌免疫功能。RNA干扰MrSGT1后使用嗜水气单胞菌刺激罗氏沼虾,发现自噬水平变化,凋亡水平显著升高,同时抗氧化相关酶的活性显著降低。【结论】MrSGT1可通过调控自噬与凋亡的动态平衡以提高罗氏沼虾抗氧化系统,增强宿主抵御病原感染的能力。本研究结果将为深入探究罗氏沼虾的抗菌防御机制提供重要数据基础。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 嗜水气单胞菌 抑制SKP1的G2等位基因(SGT1) 凋亡 自噬
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新型1,3-二苯基脲类化合物的合成及其对福寿螺的杀灭活性
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作者 王梦军 普尚杰 +4 位作者 江萍 杨芸如 叶王飞 姜治国 周莹 《农药学学报》 北大核心 2026年第1期116-127,共12页
福寿螺(Pomacea canaliculata)是我国南方地区典型外来入侵物种,因适应力和繁殖力强,造成农作物减产,威胁粮食安全。开发绿色无公害的福寿螺杀灭药剂,探究其作用机制,是当前防控外来入侵物种的迫切需求。本研究以苯胺及异氰酸酯类衍生... 福寿螺(Pomacea canaliculata)是我国南方地区典型外来入侵物种,因适应力和繁殖力强,造成农作物减产,威胁粮食安全。开发绿色无公害的福寿螺杀灭药剂,探究其作用机制,是当前防控外来入侵物种的迫切需求。本研究以苯胺及异氰酸酯类衍生物为起始原料,在溶剂体系中,通过苯胺类与异氰酸酯类衍生物的定向亲核加成反应,合成了10个新型1,3-二苯基脲类化合物N-F-3a~N-F-3e及N-L-6a~N-L-6e,通过室内浸杀试验评估了其灭螺活性;采用苏木精-伊红染色(H&E)观察组织形态学变化;采用酶活测试、配体与蛋白分子对接等多种方法探究了其作用机制。结果显示:化合物N-F-3a、N-F-3b、N-L-6a~N-L-6c对福寿螺具有良好的杀灭效果,在10 mg/L下对福寿螺的杀灭率达79.2%以上。其中化合物N-F-3a的活性最好:在5 mg/L下72 h内对福寿螺杀灭率达100%;在20 mg/L下暴露72 h后鲤鱼幼苗存活率达83.3%,比市售传统灭螺药物氯硝柳胺更安全。H&E结果表明:化合物N-F-3a可明显造成福寿螺肝脏损伤,是导致福寿螺死亡的重要原因。经分子对接计算,化合物N-F-3a与磷酸果糖激酶通过氢键、疏水作用、π-π堆积多种作用相结合,结合能为-8.40 kcal/mol,低于N-F-3d的结合能(-8.04 kcal/mol),与灭螺活性结果一致,辅助验证了其杀灭福寿螺的作用机制。综上,化合物N-F-3a显示出优异的福寿螺杀灭效果及良好的生物安全性,有望成为新型福寿螺灭螺候选化合物。 展开更多
关键词 福寿螺 灭螺活性 1 3-二苯基脲类化合物合成 灭螺机制 分子对接
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东明县南美白对虾白斑综合征病毒检测与生物安全防控体系构建
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作者 丁来斌 任卫民 《中国动物保健》 2026年第1期241-242,共2页
本文首先阐述南美白对虾白斑综合征的流行特点与临床症状,介绍病毒检测的常用方法,并详细探讨覆盖养殖全周期的生物安全网络构建,旨在提升东明县及类似养殖区域对该病的系统防控能力,为产业健康、可持续发展提供参考。
关键词 南美白对虾 白斑综合征 病毒检测 生物安全防控体系 构建
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2024年东营市对虾养殖疫病监测结果分析及防控措施
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作者 常雯 于贞贞 +3 位作者 杨玉艳 王晓璇 任鹏 隋凯港 《河北渔业》 2026年第1期25-28,共4页
为了解东营市对虾疫病发生现状,及时掌握对虾疫病发生规律和流行趋势,提高疫病风险防控能力,为对虾养殖疫病防控提供数据支撑和科学依据。2024年,对东营市对虾重点养殖主体开展疫病监测及分析,主要开展白斑综合征(WSD)、虾肝肠胞虫(EHP... 为了解东营市对虾疫病发生现状,及时掌握对虾疫病发生规律和流行趋势,提高疫病风险防控能力,为对虾养殖疫病防控提供数据支撑和科学依据。2024年,对东营市对虾重点养殖主体开展疫病监测及分析,主要开展白斑综合征(WSD)、虾肝肠胞虫(EHP)、传染性肌坏死病毒(IMNV)、急性肝胰腺坏死症(AHPND)、虾虹彩病毒(DIV-1)5种对虾疫病监测。监测结果显示:2024年对虾样本中,虾肝肠胞虫病阳性率为18.7%,急性肝胰腺坏死症病阳性率为9.53%,传染性肌坏死病阳性率为4.30%,白斑综合征阳性率为1.88%,虾虹彩病毒病阳性率为0.13%。采集的样品规格0.5~10 cm之间,不同规格养殖阶段都有疫病发生,建议从苗种引进、繁育、养成各个养殖环节多频次进行疫病检测,做到早检测,早预防。 展开更多
关键词 东营 对虾 疫病监测 阳性率 措施
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Transcriptomic dynamics in the hepatopancreas of Macrobrachium rosenbergii during thermal elimination of infection with Decapod Iridescent Virus 1
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作者 Xingyu ZHENG Miaoying CAI +7 位作者 Qi SHEN Liping LI Zhenglong XIA Quanxin GAO Qiongying TANG Guoliang YANG Jiongying YU Shaokui YI 《Journal of Oceanology and Limnology》 2026年第1期445-459,共15页
Decapod Iridescent Virus 1(DIV1)is a recently discovered virus recognized for its high infectivity in Macrobrachium rosenbergii.A thermal treatment was performed on DIV1-infected M.rosenbergii,and the therapeutic effi... Decapod Iridescent Virus 1(DIV1)is a recently discovered virus recognized for its high infectivity in Macrobrachium rosenbergii.A thermal treatment was performed on DIV1-infected M.rosenbergii,and the therapeutic efficacy was evaluated.In the DIV1 challenge experiment,the mortality rate in the challenged group was found to be 2.6 times greater than that in the control group,with the viral load in deceased individuals exceeding 5.41×10^(7)copies/μg-DNA.The thermal treatment(TT)was administered at 36℃for a duration of 16 d,followed by a temperature restoration(TR)period at 26℃for 3 d.On the first day at 36℃,an average viral concentration of 5.34×10 copies/μg-DNA was detected in the survived individuals.RNA-seq analysis showed a significant upregulation of genes related to the lysosome pathway,including sialin-like isoform x2(slc17a5),beta-galactosidase-1-like protein 2(glb1),putative glucosylceramidase 3(gba),sphingomyelin phosphodiesterase-like isoform x2(smpd1),betahexosaminidase subunit alpha-like(hexa_b)and legumain-like protein(lgmn),following a transient suppression period induced by thermal stress.Upon reaching 36℃,the activation of heat shock protein 70(hsp70)and heat shock protein 90(hsp90a)was observed.Concomitantly,genes that implicated in energy production critical for DIV1 replication,such as hexokinase(hk)and microsomal glutathione stransferase 3-like isoform x2(gst),were inhibited.These results collectively suggest that TT/TR treatments eliminated DIV1 in M.rosenbergii by activating the organism’s innate immune response and suppressing virus replication.This study provides a theoretical basis for utilizing thermal therapy in the management of viral infections in M.rosenbergii breeding programs,thereby facilitating the development of new strains resistant to DIV1. 展开更多
关键词 Decapod Iridescent Virus 1(DIV1) Macrobrachium rosenbergii RNA-SEQ thermal treatment
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罗氏沼虾十足目虹彩病毒1的流行病学调查
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作者 张燕飞 王玲 +5 位作者 简贺君 黄湛昌 李策 温晓彤 杨小霞 曹中 《安徽农学通报》 2026年第5期46-48,共3页
为了解广东省肇庆市罗氏沼虾的十足目虹彩病毒1(Decapod iridescent virus 1,DIV1)流行病学特征,采用环介导等温扩增方法(LAMP)对2023年和2024年4个季度采集的320份罗氏沼虾样品进行了DIV1检测。调查结果表明,2023年和2024年第一季度的... 为了解广东省肇庆市罗氏沼虾的十足目虹彩病毒1(Decapod iridescent virus 1,DIV1)流行病学特征,采用环介导等温扩增方法(LAMP)对2023年和2024年4个季度采集的320份罗氏沼虾样品进行了DIV1检测。调查结果表明,2023年和2024年第一季度的阳性检出率分别为0和6.67%;第二季度分别为22.86%和3.70%,第三季度分别为5.88%和5.26%,第四季度分别为25.00%和24.49%。说明该地区的罗氏沼虾存在一定DIV1流行风险,大多数患病虾头胸甲下可见白色三角区,可作为DIV1感染的典型临床指征。其发生原因与养殖环境(温度、水质)和动物的营养状态息息相关。因此,养殖中需统筹调控病原体、水生动物与水环境的相互作用,构建健康绿色养殖体系,以有效防控DIV1的发生。本文为相关地区罗氏沼虾的DIV1调查及防控提供参考。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 十足目虹彩病毒 环介导等温扩增 流行病学调查
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天然植物提取物复方对南美白对虾玻璃苗病的防治效果研究
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作者 陈雪影 柴文君 +3 位作者 彭书华 张峰 唐子菁 黄锦炉 《安徽农业科学》 2026年第1期83-88,99,共7页
[目的]探究以厚朴、槐米、姜黄、杜仲等组成的天然植物提取物复方对防治南美白对虾玻璃苗病的效果。[方法]采用微量肉汤稀释法测试天然植物提取物复方对7株携带高致死性毒力基因弧菌的体外抑菌活性;利用自建的南美白对虾玻璃苗病预防和... [目的]探究以厚朴、槐米、姜黄、杜仲等组成的天然植物提取物复方对防治南美白对虾玻璃苗病的效果。[方法]采用微量肉汤稀释法测试天然植物提取物复方对7株携带高致死性毒力基因弧菌的体外抑菌活性;利用自建的南美白对虾玻璃苗病预防和治疗模型,将天然植物提取物复方按5、10和15 g/kg 3个剂量对虾苗进行拌喂,通过存活率指标评估天然植物提取物复方预防和治疗玻璃苗病的效果。[结果]天然植物提取物复方对7株携带高致死毒力基因弧菌的体外MIC均为128 mg/L;预防效果,5、10和15 g/kg 3个剂量组,停药12 h后攻毒和停药60 h后攻毒,各药物组存活率显著高于阳性对照组83.3百分点~85.0百分点和60.0百分点~63.3百分点,且3个剂量组无显著差异;治疗效果,5、10和15 g/kg 3个剂量组,各药物组存活率均显著高于阳性对照组,且10和15 g/kg这2组存活率无显著差异,但显著高出5 g/kg组17.4百分点~18.7百分点;在5、10和15 g/kg 3个添加剂量下,虾苗活动状态正常、摄食正常,健康状况良好。[结论]天然植物提取物复方对虾苗玻璃苗病具有预防和治疗作用,研究结果可为临床开发安全、有效防治高致死性弧菌的药物提供试验基础与理论依据。 展开更多
关键词 南美白对虾 天然植物提取物 玻璃苗病 防治
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水产甲壳类抗病免疫增强剂快速筛选与评估技术的研究
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作者 林锋 黄爱霞 +5 位作者 王雨辰 孙伟杰 陆静 周阳 陈克平 郝贵杰 《海洋与湖沼》 北大核心 2025年第3期680-687,共8页
甲壳类水产品是水产养殖中的重要组成部分,通过拌喂中草药免疫增强剂的方式提高虾蟹自身的抗病免疫力,已成为甲壳类病害防治的首选方式。以罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)为研究对象,将20种类免疫增强剂分别以3个梯度浓度加入虾... 甲壳类水产品是水产养殖中的重要组成部分,通过拌喂中草药免疫增强剂的方式提高虾蟹自身的抗病免疫力,已成为甲壳类病害防治的首选方式。以罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)为研究对象,将20种类免疫增强剂分别以3个梯度浓度加入虾血淋巴细胞培养液中,分析非特异性免疫指标表达差异,结合口服免疫增强剂试验比较评估,构建一种甲壳类免疫增强剂体外筛选和评估方法。结果表明,综合LZM、ACP、AKP、SOD、POD和PO等6项免疫指标的测定值,预筛选出5种具有潜在提高罗氏沼虾非特异性免疫力的黄芩苷、茶树菇多糖、左旋咪唑等成分;在罗氏沼虾中的LZM、ACP、SOD、PO免疫效果与预期吻合,明显高于对照组,且存活率高于对照组19%,平均增重为对照组的1.3倍;完成了罗氏沼虾与免疫相关的microRNA的筛选,建立对免疫增强剂免疫效果进行反向评估验证,成功获得3个可用于免疫效果评估的microRNA分子。利用免疫增强剂待选品在甲壳类血淋巴细胞中的短期原代培养,能够实现在体外高通量快速筛选免疫增强剂,该方法的构建可以为甲壳类抗病免疫增强剂的深入研究提供有效支撑。 展开更多
关键词 甲壳类 罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii) 原代培养 免疫增强剂 筛选
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拟穴青蟹苗种MCRV检测方法的建立及应用
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作者 金夕雨 李守湖 +4 位作者 吴越 储旭 王伟 房文红 李新苍 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第4期230-238,共9页
拟穴青蟹(Scylla paramamosain)苗种携带青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus,MCRV)对后期养殖具有极大的风险。培育无MCRV苗种,从源头切断该病毒传播,已成为当前青蟹养殖中亟待解决的关键问题。为提高青蟹苗种MCRV检测的灵敏度,本研究选... 拟穴青蟹(Scylla paramamosain)苗种携带青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus,MCRV)对后期养殖具有极大的风险。培育无MCRV苗种,从源头切断该病毒传播,已成为当前青蟹养殖中亟待解决的关键问题。为提高青蟹苗种MCRV检测的灵敏度,本研究选择MCRV的高表达基因VP11作为靶标,设计特异性引物和Taq Man-MGB探针,以标准品质粒和RNA为模板,通过优化反应体系和反应程序,建立了一种适用于青蟹苗种MCRV检测的TaqMan-MGB实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,能够实现对MCRV的精准检测。在1×10~8~1×10~1 copies/μL标准品质粒(或dsRNA)的范围内,起始模板浓度对数值与反应循环数间呈良好的线性关系,最低可精确定量10 copies标准品质粒或dsRNA/反应的样品,该方法最低理论检测极限为2.5 copies标准品质粒/反应。以青蟹双顺反子病毒(MCDV)、对虾白斑综合症病毒(WSSV)、十足目虹彩病毒(DIV1)、虾肝肠胞虫(EHP)及副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)核酸样品作为模板进行检测,均未产生特异性扩增。该检测方法对质粒和dsRNA样品的变异系数分别为1.40%和0.98%,具有良好的重复性和稳定性。使用该方法和SYBR Green qRT-PCR方法同时对14份不同发育阶段蚤状幼体进行检测,MCRV检出率分别为78.57%和57.14%。上述研究结果表明,该检测方法稳定性好、特异性强、灵敏性更高,适用于不同发育阶段青蟹幼体的MCRV检测,可为无MCRV青蟹苗种的生产提供关键技术支撑。 展开更多
关键词 拟穴青蟹 MCRV 检测方法 TaqMan qRT-PCR 苗种
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河蟹螺原体病研究进展
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作者 薛新宇 谢国驷 +1 位作者 吴成龙 史成银 《动物医学进展》 北大核心 2025年第3期98-102,共5页
河蟹螺原体病是我国三类动物疫病,其病原为中华绒螯蟹螺原体(Spiroplasma eriocheiris)。近年来,该病在我国主要河蟹养殖区均有发现,并给产业带来严重经济损失,是当前危害河蟹产业的主要病原之一。论文综述了河蟹螺原体病的研究现状,重... 河蟹螺原体病是我国三类动物疫病,其病原为中华绒螯蟹螺原体(Spiroplasma eriocheiris)。近年来,该病在我国主要河蟹养殖区均有发现,并给产业带来严重经济损失,是当前危害河蟹产业的主要病原之一。论文综述了河蟹螺原体病的研究现状,重点介绍了该病的病原学特征、临床症状、致病机制、诊断和防控方法等方面的最新研究进展,并对该病的综合防控途径进行了分析和展望,以期为河蟹螺原体病的深入研究和防控提供参考。 展开更多
关键词 河蟹螺原体病 中华绒螯蟹 诊断 防控
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中华绒螯蟹和克氏原螯虾细菌性败血症病原学研究 被引量:15
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作者 姜光明 钱彩源 +3 位作者 顾雪林 魏宾 徐乐 宋学宏 《水产养殖》 CAS 2016年第4期46-51,共6页
从一中华绒螯蟹和克氏原螯虾混养池的自然发生败血症的个体中分离到2株细菌,对其生物学性状、致病性及药物敏感性进行分析,旨在明确分离菌的种类、病原学意义及耐药特征。从发病蟹和虾的血液中分离细菌并获纯培养,通过对纯培养菌的形态... 从一中华绒螯蟹和克氏原螯虾混养池的自然发生败血症的个体中分离到2株细菌,对其生物学性状、致病性及药物敏感性进行分析,旨在明确分离菌的种类、病原学意义及耐药特征。从发病蟹和虾的血液中分离细菌并获纯培养,通过对纯培养菌的形态特征、理化特性、16S rRNA基因序列测定及系统发育学分析,鉴定菌种。以不同浓度的分离菌悬液感染健康蟹和虾,测定其致病性;用琼脂扩散法和稀释法测定分离菌株对9种常用抗菌类药物的敏感性。分离出纯培养的2株菌分别鉴定为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)和弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii);2株菌均具有较强致病性,对氟苯尼考、盐酸环丙沙星、乳酸诺氟沙星、盐酸诺氟沙星等4种抗生素敏感。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 克氏原螯虾 细菌性败血症 维氏气单胞菌 弗氏柠檬酸杆菌 药物敏感性
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中国养殖虾白斑综合征病毒分子流行病学调查
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作者 金慧玲 刘晓玲 曾勇 《淡水渔业》 北大核心 2025年第6期41-49,共9页
为了评估目前中国养殖虾白斑综合征(White spot disease,WSD)的防控压力,采用基因分型和系统发育分析等方法对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)、南美白对虾(Penaeus vannamei)、斑节对虾(P.monodon)、日本对虾(P.japonicus)等4个物种... 为了评估目前中国养殖虾白斑综合征(White spot disease,WSD)的防控压力,采用基因分型和系统发育分析等方法对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)、南美白对虾(Penaeus vannamei)、斑节对虾(P.monodon)、日本对虾(P.japonicus)等4个物种的60份样本进行研究。结果显示,基于ORF14/15序列分析,所有毒株均属于Ⅰ型,未检出Ⅱ型和Ⅲ型毒株;ORF75系统发育分析表明所有样本均属于Ⅱ亚型,未发现Ⅰ亚型。总体来说,我国WSD防控压力正在减轻。在海水对虾中检测到17种ORF75基因型,而小龙虾中仅存在3种。其中基因型a-L-c-MP-f为小龙虾所特有。基因型M-f-c占比最高,在对虾中占比20.83%,在小龙虾中高达60%。不同地区的基因型多样性存在差异,面临的WSD防控压力也不同。但外源白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)新基因型的入侵风险依然存在,建议在进出口检疫和国内WSSV监测中采用本研究介绍的分型体系,以应对潜在的新基因型威胁,实现WSD的精准防控。 展开更多
关键词 白斑综合征病毒 分型体系 系统发育树 分子流行病学调查
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基于超分支滚环扩增技术对中华绒螯蟹“牛奶病”病原二尖梅奇酵母的高灵敏检测
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作者 魏华 赵清如 +6 位作者 谭雅冰 李金玲 孙昕 赵莹莹 李应东 孙娜 李晓东 《渔业研究》 2025年第5期681-694,共14页
【背景】二尖梅奇酵母(Metschnikowiabicuspidate)是中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)“牛奶病”的病原之一,严重阻碍着中华绒螯蟹养殖业的发展。目前尚无有效治疗“牛奶病”的药物,快速、高效、准确的病原诊断是其防控的关键。相比传统... 【背景】二尖梅奇酵母(Metschnikowiabicuspidate)是中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)“牛奶病”的病原之一,严重阻碍着中华绒螯蟹养殖业的发展。目前尚无有效治疗“牛奶病”的药物,快速、高效、准确的病原诊断是其防控的关键。相比传统的病原分离培养技术,聚合酶链式反应(PCR)等分子生物学技术已能够实现二尖梅奇酵母的安全快速检测,但仍需要复杂的变温设备,难以进行池边检测。【目的】建立一种基于超分支滚环扩增(HRCA)技术检测二尖梅奇酵母的新方法,为池边检测酵母菌病原提供新思路。【方法】本研究基于二尖梅奇酵母26S rRNA基因(U44822)序列,设计出特异性高的锁式探针(PLP)和引物,建立HRCA技术,并对该方法的灵敏度、特异性、重复性和应用效果进行了评价。【结果】HRCA最佳反应体系为PLP浓度1μmol/L、扩增时间20min、扩增温度63℃、Bst DNA聚合酶浓度2 U/mL。该方法对标准品的检测范围为0.50~1000 fmol/L,具有较高的种属间特异性,可以实现单碱基错配识别,且重复性与稳定性良好。在实际样本检测中,该方法对中华绒螯蟹二尖梅奇酵母肝胰腺DNA的检测灵敏度为4.13×10^(1) pg/μL,对随机抽取的中华绒螯蟹二尖梅奇酵母检出率为56.25%,与实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测结果一致。【结论】本文建立的HRCA技术可以在恒温条件下高效、快速、灵敏、特异地检测出中华绒螯蟹“牛奶病”病原二尖梅奇酵母,适用于池边检测。本研究结果不仅为酵母菌病原的检测提供一种新手段,也为该病的早期诊断和预防提供新的技术支撑,在水产病原诊断领域具有很大的应用潜力。 展开更多
关键词 超分支滚环扩增(HRCA)技术 二尖梅奇酵母 中华绒螯蟹 牛奶病
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没食子酸对溶藻弧菌的抑菌活性及机理研究 被引量:2
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作者 王春元 王印庚 +4 位作者 赵伟志 于永翔 张正 荣小军 刘定远 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第3期212-221,共10页
研究没食子酸对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的抑菌活性和机理。通过测定没食子酸对溶藻弧菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和生长曲线,研究没食子酸对溶藻弧菌的抑菌活性;测定不同浓度的没食子酸溶液与溶藻弧菌作用前后,... 研究没食子酸对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的抑菌活性和机理。通过测定没食子酸对溶藻弧菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和生长曲线,研究没食子酸对溶藻弧菌的抑菌活性;测定不同浓度的没食子酸溶液与溶藻弧菌作用前后,菌液上清液中碱性磷酸酶(AKP)活性、电导率,溶藻弧菌生物被膜、运动性和聚集能力的变化,研究没食子酸对溶藻弧菌的抗菌机理。结果显示,没食子酸对溶藻弧菌的MIC和MBC分别为4 mg/mL和8 mg/mL。没食子酸能破坏溶藻弧菌的细胞壁,增加其细胞膜通透性,抑制生物被膜的形成,清除成熟的生物被膜,抑制溶藻弧菌的运动和聚集能力。本研究为探明没食子酸抑制溶藻弧菌的作用机理奠定了良好的基础,为其防治水生动物溶藻弧菌感染性疾病提供了理论依据。 展开更多
关键词 没食子酸 溶藻弧菌 抑菌机理 细胞壁 生物膜
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罗氏沼虾源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性分析 被引量:5
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作者 赵梦瑶 陈静 +4 位作者 姚嘉赟 袁雪梅 黄雷 彭先启 张海琪 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第2期137-143,共7页
为探究患病罗氏沼虾的病原及其感染的防治措施,本研究从浙江省某养殖场采集10只患病罗氏沼虾的肝胰腺、鳃及肌肉样品分离获得一株优势菌。通过对该优势菌经革兰氏染色镜检及生化鉴定,结果表明分离菌为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freund... 为探究患病罗氏沼虾的病原及其感染的防治措施,本研究从浙江省某养殖场采集10只患病罗氏沼虾的肝胰腺、鳃及肌肉样品分离获得一株优势菌。通过对该优势菌经革兰氏染色镜检及生化鉴定,结果表明分离菌为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。采用PCR分别扩增分离菌的16S r RNA和gyr B基因序列,测序后经BLAST检索与这两种基因同源性均最高的菌株;通过MEGA 7.0软件中的Clustal W方法将分离菌与从Gen Bank中获得的同源性较高的菌株序列进行多序列比对,采用MEGA 7.0软件中的邻接法构建分离菌与上述菌株16S r RNA和gyr B基因的系统发育树。BLAST检索结果显示,分离菌与弗氏柠檬酸杆菌(KC210829.1)16S r RNA基因序列的同源性高达99.93%;与弗氏柠檬酸杆菌(KF156750.1)gyr B基因序列的同源性达98.76%。16S r RNA和gyr B基因的进化树结果显示,分离菌均与弗氏柠檬酸杆菌聚为一支,且支持率高达99%。进一步表明引起罗氏沼虾发病的病原为弗氏柠檬酸杆菌。将分离菌分别以1.02×10^(9)cfu/m L~1.02×10^(4)cfu/m L 6种浓度感染健康罗氏沼虾,每日观察并记录罗氏沼虾的发病症状及死亡率,根据Probit回归法计算分离菌对罗氏沼虾的半数致死量(LD50)。结果显示,1.02×10^(6)cfu/m L以上浓度的弗氏柠檬酸杆菌均能够导致罗氏沼虾出现体型消瘦、行动迟缓无活力的症状,1.02×10^(5)cfu/m L以下浓度的弗氏柠檬酸杆菌并不致罗氏沼虾出现症状。经统计该菌株对罗氏沼虾的LD50为1.01×10^(7)cfu/m L,表明该菌株对罗氏沼虾的致病性较强。采用PCR分别检测该分离菌株的定居因子基因(cfa)、尿素酶基因簇(ure G、ure F、ure E、ure D)、Vi抗原基因(via B)、外膜蛋白基因(omp X)等7种毒力相关基因,结果显示该菌株分别扩增到375 bp(cfa)、119 bp(ure G)、300 bp(ure F)、247 bp(ure E)、243 bp(ure D)、875 bp(via B)及250 bp(oomp X)的7种毒力基因。采用K-B纸片扩散法测定分离菌对10类共35种药物的敏感性,结果显示该分离菌对β-内酰胺类的头孢他啶和头孢曲松、多肽素类的多黏菌素B、氨基糖苷类的庆大霉素以及拉氧头孢这5种药物敏感,对β-内酰胺类的青霉素、氯霉素类的氟苯尼考、多肽类的万古霉素及苯唑醂、克林霉素和新生霉素等27种药物呈不同程度的耐药性,且为多重耐药菌。综上所述,本研究从患病罗氏沼虾中分离到了一株弗氏柠檬酸杆菌,该菌携带多种毒力基因,对罗氏沼虾的致病性较强,为进一步研究弗氏柠檬酸杆菌对水产动物的致病性及对罗氏沼虾弗氏柠檬酸杆菌病的防治提供参考依据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 弗氏柠檬酸杆菌 致病性 毒力基因 药敏分析
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罗氏沼虾ATG5的鉴定及其抗菌免疫功能 被引量:1
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作者 刘洋 赵飞 +9 位作者 文菁 王玲 廖永众 邓玉婷 谭爱萍 巩华 赖迎迢 黄志斌 邵蓬 王飞飞 《广东海洋大学学报》 北大核心 2025年第1期1-11,共11页
【目的】研究罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)中自噬相关基因(ATG)的免疫功能及其在抗菌免疫中的分子调节机制。【方法】从罗氏沼虾中克隆并鉴定罗氏沼虾自噬相关基因5(MrATG5),使用生物信息学方法分析MrATG5的结构特征和理化性质... 【目的】研究罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)中自噬相关基因(ATG)的免疫功能及其在抗菌免疫中的分子调节机制。【方法】从罗氏沼虾中克隆并鉴定罗氏沼虾自噬相关基因5(MrATG5),使用生物信息学方法分析MrATG5的结构特征和理化性质,采用荧光定量PCR检测MrATG5在罗氏沼虾健康组织以及受到嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)免疫刺激后在肝胰腺和鳃组织中的表达量,利用免疫细胞化学方法检测MrATG5蛋白在HEK 293T细胞中的亚细胞定位,通过RNA干扰技术、细菌结合和抑菌活性实验分析MrATG5的免疫功能。【结果】生物信息学分析显示,MrATG5开放阅读框(ORF)为807 bp,预测编码268个氨基酸,预测蛋白分子质量为31.04 ku,等电点为5.68,含有一个典型的自噬蛋白5(Autophagy protein 5,APG5)结构域。序列同源性分析及构建的系统进化树显示,MrATG5与日本沼虾(Macrobrachium nipponense)ATG5同源性最高,相似性为97.76%,MrATG5与甲壳类动物聚为一支,说明ATG5蛋白在甲壳类动物中进化相对保守。qRT-PCR结果显示,MrATG5在罗氏沼虾各组织中广泛表达,在肝胰腺中表达量最高(P<0.05)。MrATG5主要分布在HEK 293T细胞的细胞质中。经嗜水气单胞菌和LPS免疫刺激后,MrATG5在肝胰腺和鳃组织中的表达量均显著升高(P<0.05),表明MrATG5在罗氏沼虾抗菌免疫中发挥重要作用。经RNA干扰及嗜水气单胞菌刺激后,MrATG5可通过调控自噬参与罗氏沼虾抗菌免疫。细菌结合和抑菌活性实验发现,MrATG5原核重组表达活性蛋白可与嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和海豚链球菌(Streptococcus iniae)产生结合反应,并可抑制嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌的生长。【结论】MrATG5可通过调控自噬和抑制病原菌增殖提升罗氏沼虾的抗菌免疫力。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 自噬相关基因5(ATG5) 嗜水气单胞菌 原核表达 抗菌免疫
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海水育苗过程中“荧光病”的有效防治
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作者 赵春民 李岳 《中国水产》 北大核心 2006年第5期52-53,77,共3页
关键词 育苗过程 荧光病 有效防治 海水 发生发展 育苗池 幼体 弧菌
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塔玛亚历山大藻对黑褐新糠虾存活、生长以及种群繁殖的影响 被引量:27
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作者 谭志军 颜天 +3 位作者 周名江 李钧 于仁诚 王云峰 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1635-1639,共5页
通过塔玛亚历山大藻 ( Alexandrium tamarense)对黑褐新糠虾 ( N eomysis awatschensis)的急性和慢性毒性作用研究 ,发现塔玛亚历山大藻对黑褐新糠虾的存活、生殖、生长等有不利影响 ,影响程度随塔玛亚历山大藻藻细胞密度的增加而增加。... 通过塔玛亚历山大藻 ( Alexandrium tamarense)对黑褐新糠虾 ( N eomysis awatschensis)的急性和慢性毒性作用研究 ,发现塔玛亚历山大藻对黑褐新糠虾的存活、生殖、生长等有不利影响 ,影响程度随塔玛亚历山大藻藻细胞密度的增加而增加。在 96 h急性毒性实验中 ,塔玛亚历山大藻对黑褐新糠虾的半致死密度为 70 0 0 cells/ml,去藻过滤液中糠虾的死亡率为 2 5 %。在 6 2 d的慢性毒性实验中 ,密度为 90 0 cells/ml的塔玛亚历山大藻对黑褐新糠虾的繁殖有严重影响 ,在此影响下的实验组亲虾产幼虾总数只有 2 7尾 ,仅为对照组产幼虾数目的 1 6 .4 % ;其总产幼虾天数、日最高产幼数分别只有对照的 32 %、4 1 % ,其初次产虾日期也推迟了 3d,并出现了 3次生殖中断。塔玛亚历山大藻对黑褐新糠虾亲虾的存活、生长也有一定的影响 ,处在密度为 90 0 cells/ml塔玛亚历山大藻中的黑褐新糠虾亲虾的存活率只有对照的 6 3% ,糠虾亲虾的体长和体重分别为对照组亲虾的 95 .6 %和 81 .9% ,但差异尚不显著 ( P>0 .0 5 ) 展开更多
关键词 塔玛亚历山大藻 黑褐新糠虾 存活 生长 赤潮甲藻 毒性 危害 种群繁殖
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养殖河蟹弧菌病病原茵分离鉴定及其胞外产物的致病性 被引量:41
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作者 徐海圣 舒妙安 +1 位作者 占秀安 王淑霞 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期357-362,共6页
从杭州一养蟹场的病蟹体内分离到3株细菌,经形态学检查、生化性质测定,鉴定为副溶血弧菌。人工感染健康蟹,48h内均发生死亡,死亡率100%,证实副溶血弧菌为河蟹的致病菌。药敏试验结果表明,此病原菌对链霉素、利福平、卡那霉素、复方新... 从杭州一养蟹场的病蟹体内分离到3株细菌,经形态学检查、生化性质测定,鉴定为副溶血弧菌。人工感染健康蟹,48h内均发生死亡,死亡率100%,证实副溶血弧菌为河蟹的致病菌。药敏试验结果表明,此病原菌对链霉素、利福平、卡那霉素、复方新诺明、环丙沙星、氟哌酸、四环素、氯霉素、氟嗪酸、复达欣、菌必治、萘啶酸等药物高度敏感。分离菌株培养物经理化方法处理获得的胞外产物蛋白具有明胶酶、几丁质酶、淀粉酶、酪蛋白酶、脂酶、磷脂酶等多种酶活性及溶血活性,并对河蟹具有明显的致病作用。 展开更多
关键词 河蟹 弧菌病 病原菌 分离鉴定 胞外产物 致病性
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