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水产甲壳类抗病免疫增强剂快速筛选与评估技术的研究
1
作者 林锋 黄爱霞 +5 位作者 王雨辰 孙伟杰 陆静 周阳 陈克平 郝贵杰 《海洋与湖沼》 北大核心 2025年第3期680-687,共8页
甲壳类水产品是水产养殖中的重要组成部分,通过拌喂中草药免疫增强剂的方式提高虾蟹自身的抗病免疫力,已成为甲壳类病害防治的首选方式。以罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)为研究对象,将20种类免疫增强剂分别以3个梯度浓度加入虾... 甲壳类水产品是水产养殖中的重要组成部分,通过拌喂中草药免疫增强剂的方式提高虾蟹自身的抗病免疫力,已成为甲壳类病害防治的首选方式。以罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)为研究对象,将20种类免疫增强剂分别以3个梯度浓度加入虾血淋巴细胞培养液中,分析非特异性免疫指标表达差异,结合口服免疫增强剂试验比较评估,构建一种甲壳类免疫增强剂体外筛选和评估方法。结果表明,综合LZM、ACP、AKP、SOD、POD和PO等6项免疫指标的测定值,预筛选出5种具有潜在提高罗氏沼虾非特异性免疫力的黄芩苷、茶树菇多糖、左旋咪唑等成分;在罗氏沼虾中的LZM、ACP、SOD、PO免疫效果与预期吻合,明显高于对照组,且存活率高于对照组19%,平均增重为对照组的1.3倍;完成了罗氏沼虾与免疫相关的microRNA的筛选,建立对免疫增强剂免疫效果进行反向评估验证,成功获得3个可用于免疫效果评估的microRNA分子。利用免疫增强剂待选品在甲壳类血淋巴细胞中的短期原代培养,能够实现在体外高通量快速筛选免疫增强剂,该方法的构建可以为甲壳类抗病免疫增强剂的深入研究提供有效支撑。 展开更多
关键词 甲壳类 罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii) 原代培养 免疫增强剂 筛选
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拟穴青蟹苗种MCRV检测方法的建立及应用
2
作者 金夕雨 李守湖 +4 位作者 吴越 储旭 王伟 房文红 李新苍 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第4期230-238,共9页
拟穴青蟹(Scylla paramamosain)苗种携带青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus,MCRV)对后期养殖具有极大的风险。培育无MCRV苗种,从源头切断该病毒传播,已成为当前青蟹养殖中亟待解决的关键问题。为提高青蟹苗种MCRV检测的灵敏度,本研究选... 拟穴青蟹(Scylla paramamosain)苗种携带青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus,MCRV)对后期养殖具有极大的风险。培育无MCRV苗种,从源头切断该病毒传播,已成为当前青蟹养殖中亟待解决的关键问题。为提高青蟹苗种MCRV检测的灵敏度,本研究选择MCRV的高表达基因VP11作为靶标,设计特异性引物和Taq Man-MGB探针,以标准品质粒和RNA为模板,通过优化反应体系和反应程序,建立了一种适用于青蟹苗种MCRV检测的TaqMan-MGB实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,能够实现对MCRV的精准检测。在1×10~8~1×10~1 copies/μL标准品质粒(或dsRNA)的范围内,起始模板浓度对数值与反应循环数间呈良好的线性关系,最低可精确定量10 copies标准品质粒或dsRNA/反应的样品,该方法最低理论检测极限为2.5 copies标准品质粒/反应。以青蟹双顺反子病毒(MCDV)、对虾白斑综合症病毒(WSSV)、十足目虹彩病毒(DIV1)、虾肝肠胞虫(EHP)及副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)核酸样品作为模板进行检测,均未产生特异性扩增。该检测方法对质粒和dsRNA样品的变异系数分别为1.40%和0.98%,具有良好的重复性和稳定性。使用该方法和SYBR Green qRT-PCR方法同时对14份不同发育阶段蚤状幼体进行检测,MCRV检出率分别为78.57%和57.14%。上述研究结果表明,该检测方法稳定性好、特异性强、灵敏性更高,适用于不同发育阶段青蟹幼体的MCRV检测,可为无MCRV青蟹苗种的生产提供关键技术支撑。 展开更多
关键词 拟穴青蟹 MCRV 检测方法 TaqMan qRT-PCR 苗种
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河蟹螺原体病研究进展
3
作者 薛新宇 谢国驷 +1 位作者 吴成龙 史成银 《动物医学进展》 北大核心 2025年第3期98-102,共5页
河蟹螺原体病是我国三类动物疫病,其病原为中华绒螯蟹螺原体(Spiroplasma eriocheiris)。近年来,该病在我国主要河蟹养殖区均有发现,并给产业带来严重经济损失,是当前危害河蟹产业的主要病原之一。论文综述了河蟹螺原体病的研究现状,重... 河蟹螺原体病是我国三类动物疫病,其病原为中华绒螯蟹螺原体(Spiroplasma eriocheiris)。近年来,该病在我国主要河蟹养殖区均有发现,并给产业带来严重经济损失,是当前危害河蟹产业的主要病原之一。论文综述了河蟹螺原体病的研究现状,重点介绍了该病的病原学特征、临床症状、致病机制、诊断和防控方法等方面的最新研究进展,并对该病的综合防控途径进行了分析和展望,以期为河蟹螺原体病的深入研究和防控提供参考。 展开更多
关键词 河蟹螺原体病 中华绒螯蟹 诊断 防控
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基于超分支滚环扩增技术对中华绒螯蟹“牛奶病”病原二尖梅奇酵母的高灵敏检测
4
作者 魏华 赵清如 +6 位作者 谭雅冰 李金玲 孙昕 赵莹莹 李应东 孙娜 李晓东 《渔业研究》 2025年第5期681-694,共14页
【背景】二尖梅奇酵母(Metschnikowiabicuspidate)是中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)“牛奶病”的病原之一,严重阻碍着中华绒螯蟹养殖业的发展。目前尚无有效治疗“牛奶病”的药物,快速、高效、准确的病原诊断是其防控的关键。相比传统... 【背景】二尖梅奇酵母(Metschnikowiabicuspidate)是中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)“牛奶病”的病原之一,严重阻碍着中华绒螯蟹养殖业的发展。目前尚无有效治疗“牛奶病”的药物,快速、高效、准确的病原诊断是其防控的关键。相比传统的病原分离培养技术,聚合酶链式反应(PCR)等分子生物学技术已能够实现二尖梅奇酵母的安全快速检测,但仍需要复杂的变温设备,难以进行池边检测。【目的】建立一种基于超分支滚环扩增(HRCA)技术检测二尖梅奇酵母的新方法,为池边检测酵母菌病原提供新思路。【方法】本研究基于二尖梅奇酵母26S rRNA基因(U44822)序列,设计出特异性高的锁式探针(PLP)和引物,建立HRCA技术,并对该方法的灵敏度、特异性、重复性和应用效果进行了评价。【结果】HRCA最佳反应体系为PLP浓度1μmol/L、扩增时间20min、扩增温度63℃、Bst DNA聚合酶浓度2 U/mL。该方法对标准品的检测范围为0.50~1000 fmol/L,具有较高的种属间特异性,可以实现单碱基错配识别,且重复性与稳定性良好。在实际样本检测中,该方法对中华绒螯蟹二尖梅奇酵母肝胰腺DNA的检测灵敏度为4.13×10^(1) pg/μL,对随机抽取的中华绒螯蟹二尖梅奇酵母检出率为56.25%,与实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测结果一致。【结论】本文建立的HRCA技术可以在恒温条件下高效、快速、灵敏、特异地检测出中华绒螯蟹“牛奶病”病原二尖梅奇酵母,适用于池边检测。本研究结果不仅为酵母菌病原的检测提供一种新手段,也为该病的早期诊断和预防提供新的技术支撑,在水产病原诊断领域具有很大的应用潜力。 展开更多
关键词 超分支滚环扩增(HRCA)技术 二尖梅奇酵母 中华绒螯蟹 牛奶病
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罗氏沼虾源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性分析 被引量：1
5
作者 赵梦瑶 陈静 +4 位作者 姚嘉赟 袁雪梅 黄雷 彭先启 张海琪 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第2期137-143,共7页
为探究患病罗氏沼虾的病原及其感染的防治措施,本研究从浙江省某养殖场采集10只患病罗氏沼虾的肝胰腺、鳃及肌肉样品分离获得一株优势菌。通过对该优势菌经革兰氏染色镜检及生化鉴定,结果表明分离菌为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freund... 为探究患病罗氏沼虾的病原及其感染的防治措施,本研究从浙江省某养殖场采集10只患病罗氏沼虾的肝胰腺、鳃及肌肉样品分离获得一株优势菌。通过对该优势菌经革兰氏染色镜检及生化鉴定,结果表明分离菌为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。采用PCR分别扩增分离菌的16S r RNA和gyr B基因序列,测序后经BLAST检索与这两种基因同源性均最高的菌株;通过MEGA 7.0软件中的Clustal W方法将分离菌与从Gen Bank中获得的同源性较高的菌株序列进行多序列比对,采用MEGA 7.0软件中的邻接法构建分离菌与上述菌株16S r RNA和gyr B基因的系统发育树。BLAST检索结果显示,分离菌与弗氏柠檬酸杆菌(KC210829.1)16S r RNA基因序列的同源性高达99.93%;与弗氏柠檬酸杆菌(KF156750.1)gyr B基因序列的同源性达98.76%。16S r RNA和gyr B基因的进化树结果显示,分离菌均与弗氏柠檬酸杆菌聚为一支,且支持率高达99%。进一步表明引起罗氏沼虾发病的病原为弗氏柠檬酸杆菌。将分离菌分别以1.02×10^(9)cfu/m L~1.02×10^(4)cfu/m L 6种浓度感染健康罗氏沼虾,每日观察并记录罗氏沼虾的发病症状及死亡率,根据Probit回归法计算分离菌对罗氏沼虾的半数致死量(LD50)。结果显示,1.02×10^(6)cfu/m L以上浓度的弗氏柠檬酸杆菌均能够导致罗氏沼虾出现体型消瘦、行动迟缓无活力的症状,1.02×10^(5)cfu/m L以下浓度的弗氏柠檬酸杆菌并不致罗氏沼虾出现症状。经统计该菌株对罗氏沼虾的LD50为1.01×10^(7)cfu/m L,表明该菌株对罗氏沼虾的致病性较强。采用PCR分别检测该分离菌株的定居因子基因(cfa)、尿素酶基因簇(ure G、ure F、ure E、ure D)、Vi抗原基因(via B)、外膜蛋白基因(omp X)等7种毒力相关基因,结果显示该菌株分别扩增到375 bp(cfa)、119 bp(ure G)、300 bp(ure F)、247 bp(ure E)、243 bp(ure D)、875 bp(via B)及250 bp(oomp X)的7种毒力基因。采用K-B纸片扩散法测定分离菌对10类共35种药物的敏感性,结果显示该分离菌对β-内酰胺类的头孢他啶和头孢曲松、多肽素类的多黏菌素B、氨基糖苷类的庆大霉素以及拉氧头孢这5种药物敏感,对β-内酰胺类的青霉素、氯霉素类的氟苯尼考、多肽类的万古霉素及苯唑醂、克林霉素和新生霉素等27种药物呈不同程度的耐药性,且为多重耐药菌。综上所述,本研究从患病罗氏沼虾中分离到了一株弗氏柠檬酸杆菌,该菌携带多种毒力基因,对罗氏沼虾的致病性较强,为进一步研究弗氏柠檬酸杆菌对水产动物的致病性及对罗氏沼虾弗氏柠檬酸杆菌病的防治提供参考依据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 弗氏柠檬酸杆菌 致病性 毒力基因 药敏分析
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罗氏沼虾ATG5的鉴定及其抗菌免疫功能
6
作者 刘洋 赵飞 +9 位作者 文菁 王玲 廖永众 邓玉婷 谭爱萍 巩华 赖迎迢 黄志斌 邵蓬 王飞飞 《广东海洋大学学报》 北大核心 2025年第1期1-11,共11页
【目的】研究罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)中自噬相关基因(ATG)的免疫功能及其在抗菌免疫中的分子调节机制。【方法】从罗氏沼虾中克隆并鉴定罗氏沼虾自噬相关基因5(MrATG5),使用生物信息学方法分析MrATG5的结构特征和理化性质... 【目的】研究罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)中自噬相关基因(ATG)的免疫功能及其在抗菌免疫中的分子调节机制。【方法】从罗氏沼虾中克隆并鉴定罗氏沼虾自噬相关基因5(MrATG5),使用生物信息学方法分析MrATG5的结构特征和理化性质,采用荧光定量PCR检测MrATG5在罗氏沼虾健康组织以及受到嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)免疫刺激后在肝胰腺和鳃组织中的表达量,利用免疫细胞化学方法检测MrATG5蛋白在HEK 293T细胞中的亚细胞定位,通过RNA干扰技术、细菌结合和抑菌活性实验分析MrATG5的免疫功能。【结果】生物信息学分析显示,MrATG5开放阅读框(ORF)为807 bp,预测编码268个氨基酸,预测蛋白分子质量为31.04 ku,等电点为5.68,含有一个典型的自噬蛋白5(Autophagy protein 5,APG5)结构域。序列同源性分析及构建的系统进化树显示,MrATG5与日本沼虾(Macrobrachium nipponense)ATG5同源性最高,相似性为97.76%,MrATG5与甲壳类动物聚为一支,说明ATG5蛋白在甲壳类动物中进化相对保守。qRT-PCR结果显示,MrATG5在罗氏沼虾各组织中广泛表达,在肝胰腺中表达量最高(P<0.05)。MrATG5主要分布在HEK 293T细胞的细胞质中。经嗜水气单胞菌和LPS免疫刺激后,MrATG5在肝胰腺和鳃组织中的表达量均显著升高(P<0.05),表明MrATG5在罗氏沼虾抗菌免疫中发挥重要作用。经RNA干扰及嗜水气单胞菌刺激后,MrATG5可通过调控自噬参与罗氏沼虾抗菌免疫。细菌结合和抑菌活性实验发现,MrATG5原核重组表达活性蛋白可与嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和海豚链球菌(Streptococcus iniae)产生结合反应,并可抑制嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌的生长。【结论】MrATG5可通过调控自噬和抑制病原菌增殖提升罗氏沼虾的抗菌免疫力。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 自噬相关基因5(ATG5) 嗜水气单胞菌 原核表达 抗菌免疫
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凡纳对虾感染副溶血弧菌后pVA1-like质粒的组织分布及增殖特点
7
作者 苏兴琦 傅强 +7 位作者 李旭鹏 孔杰 田吉腾 曹宝祥 刘宁 栾生 罗坤 孟宪红 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第3期77-89,共13页
对虾急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease,AHPND)主要由副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)携带的pVA1-like质粒表达毒力蛋白PirABVp所致。本研究通过2次定量口饲的感染方式对凡纳对虾(Penaeus vannamei)成虾... 对虾急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease,AHPND)主要由副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)携带的pVA1-like质粒表达毒力蛋白PirABVp所致。本研究通过2次定量口饲的感染方式对凡纳对虾(Penaeus vannamei)成虾进行弧菌胁迫,研究相对低摄菌量实验组(L组,105 CFU/尾)与相对高摄菌量实验组(H组,107 CFU/尾)的个体5个不同时间点(感染后3、6、9、24和48 h)的9种不同组织(鳃、胃、肠道、眼柄、肌肉、肝胰腺、第5游泳足、腹部神经和第2触角鞭)中弧菌分布及变化情况。通过毒力蛋白PirA^(Vp)的基因表达量反映副溶血弧菌携带的pVA1-like质粒量,进而代表弧菌的分布及变化特点。结果显示,H组和L组的总体死亡率无差异,且均在3~6 h达到死亡高峰。2个实验组中病原质粒在各组织中的拷贝数不同,腹部神经与肠道组织平均质粒拷贝数均高于其他组织;同一组织内H组比L组的质粒拷贝数高1.9~4.9倍。质粒变化相关性分析显示,质粒拷贝数变化情况与对虾摄菌时间、死亡率无显著关系。同时2个实验组的质粒拷贝数变化特点也不同。L组中,有6个组织的质粒拷贝数随时间呈先上升后下降的趋势,而在胃、肠和肝胰腺中随时间呈波动变化;H组中,有7个组织的质粒拷贝数随时间呈现波动变化,但在胃和第5游泳足中随时间呈先上升后下降的趋势。第2触角鞭和第5游泳足在各取样时间段均可检测出PirA^(Vp),可作为保种成虾活体常态病原检测的候选组织。本研究探究了商品规格种虾感染不同浓度VpAHPND后在体内不同组织的分布及扩增动态变化的特点,可为AHPND精准抗性测试方案的制定和致病机理研究提供数据与理论依据,也为保种期成虾准确的病原监测的候选组织提供参考。 展开更多
关键词 凡纳对虾 副溶血弧菌 PirA^(Vp) 实时荧光定量PCR 组织分布
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没食子酸对溶藻弧菌的抑菌活性及机理研究
8
作者 王春元 王印庚 +4 位作者 赵伟志 于永翔 张正 荣小军 刘定远 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第3期212-221,共10页
研究没食子酸对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的抑菌活性和机理。通过测定没食子酸对溶藻弧菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和生长曲线,研究没食子酸对溶藻弧菌的抑菌活性;测定不同浓度的没食子酸溶液与溶藻弧菌作用前后,... 研究没食子酸对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的抑菌活性和机理。通过测定没食子酸对溶藻弧菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和生长曲线,研究没食子酸对溶藻弧菌的抑菌活性;测定不同浓度的没食子酸溶液与溶藻弧菌作用前后,菌液上清液中碱性磷酸酶(AKP)活性、电导率,溶藻弧菌生物被膜、运动性和聚集能力的变化,研究没食子酸对溶藻弧菌的抗菌机理。结果显示,没食子酸对溶藻弧菌的MIC和MBC分别为4 mg/mL和8 mg/mL。没食子酸能破坏溶藻弧菌的细胞壁,增加其细胞膜通透性,抑制生物被膜的形成,清除成熟的生物被膜,抑制溶藻弧菌的运动和聚集能力。本研究为探明没食子酸抑制溶藻弧菌的作用机理奠定了良好的基础,为其防治水生动物溶藻弧菌感染性疾病提供了理论依据。 展开更多
关键词 没食子酸 溶藻弧菌 抑菌机理 细胞壁 生物膜
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江苏省南通地区虾源弧菌的分子流行病学分析
9
作者 张鹏 吉星 +3 位作者 孙利厂 朱树娇 何涛 王冉 《江苏农业学报》 北大核心 2025年第9期1791-1802,共12页
为探明南通地区虾源弧菌的分子流行病学特征,本研究对在南通地区规模化虾养殖场中采集的560份病虾样本进行弧菌分离和鉴定,使用微量肉汤稀释法对分离株进行抗菌药物敏感性测试,基于全基因组测序技术分析分离株的耐药基因、毒力基因携带... 为探明南通地区虾源弧菌的分子流行病学特征,本研究对在南通地区规模化虾养殖场中采集的560份病虾样本进行弧菌分离和鉴定,使用微量肉汤稀释法对分离株进行抗菌药物敏感性测试,基于全基因组测序技术分析分离株的耐药基因、毒力基因携带情况,并通过多位点序列分型(MLST)和系统发育树分析南通地区虾源弧菌的流行病学特征。结果表明,560份病虾样本中共分离出119株弧菌,检出率为21.25%,其中,溶藻弧菌为优势亚型,占比达73.95%。弧菌分离株对氨苄西林、头孢氨苄和多西环素的耐药率较高,分别为73.11%、58.82%、45.38%。弧菌分离株中共检测到47种耐药基因,其中tet(34)、tet(35)、bla ampC检出率较高,分别为97.48%、88.24%、61.34%。分离株平均携带33个毒力基因,携带可编码细胞毒性的关键外毒素基因hlyA和rtxA的分离株分别为1株和7株。分离株ST型具有多样性,其中ST388为相对流行的ST型。溶藻弧菌分离株划分为1个进化分支,不同来源菌株之间的遗传进化关系较近;分离株85和分离株4与人类医疗临床来源的溶藻弧菌菌株有着高度同源性。本研究结果可为南通地区水产弧菌的有效防治提供科学依据。 展开更多
关键词 弧菌 虾 耐药基因 毒力基因 进化分型
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对虾肝肠胞虫LAMP-LFD检测方法的建立及应用
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作者 李文泽 侯晓勇 +3 位作者 杨世平 黄郁葱 简纪常 蔡双虎 《广东海洋大学学报》 北大核心 2025年第2期52-58,共7页
【目的】采用环介导等温扩增(LAMP)技术联合横向流动试纸条(LFD)快速检测对虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP),为对虾养殖场早期疫病监测提供技术支持。【方法】针对对虾肝肠胞虫18S rDNA保守基因序列设计4条特异性引物(上... 【目的】采用环介导等温扩增(LAMP)技术联合横向流动试纸条(LFD)快速检测对虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP),为对虾养殖场早期疫病监测提供技术支持。【方法】针对对虾肝肠胞虫18S rDNA保守基因序列设计4条特异性引物(上游内引物FIP由生物素标记)和1条异硫氰酸荧光素(FITC)标记的探针,使用引物进行有生物素标记的LAMP反应,产物与FITC标记的探针完成杂交,杂交产物在LFD上进行结果展示。并测试该方法的特异性、灵敏度和临床应用效果。【结果】LAMP最佳反应条件是62℃下运行15 min,加入探针杂交5 min后在LFD试纸条上进行显色反应,能特异直观检测到对虾肝肠胞虫。建立的LAMP-FLD法特异性强且灵敏度高,较普通聚合酶链式反应方法灵敏度高100倍。采用本研究建立的LAMP-LFD方法,对肝肠胞虫、对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus)、十足目虹彩病毒1(Decapod iridescent virus 1)和副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)人工感染的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肝胰腺组织和疑似感染对虾肝肠胞虫的凡纳滨对虾自然样本进行检测,结果显示该LAMP-LFD方法能100%准确检测出肝肠胞虫阳性样本。【结论】本研究建立的LAMP-LFD方法对对虾肝肠胞虫进行可视化检测,特异强、灵敏度高、操作简单、仪器设备要求及检测成本低和耗时短,适用于基层养殖场对虾肝肠胞虫感染早期的即时检测,具有较高推广价值。 展开更多
关键词 对虾肝肠胞虫 环介导等温扩增技术 横向流动试纸条 凡纳滨对虾
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一例河蟹“水瘪子”案例分析及防控建议
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作者 陈罗明 周小卫 +3 位作者 张益林 许文雅 王建新 张国娣 《科学养鱼》 2025年第1期63-63,共1页
2024年江苏省溧阳市某河蟹养殖户发生疑似河蟹“水瘪子”死亡现象,养殖面积35亩,水深1.2米,部分河蟹有活力不强、偷死现象。对发病塘口进行采样带回实验室进行病原检测。一、发病症状概述。采集的样品中,观察到两只河蟹存在明显的异常... 2024年江苏省溧阳市某河蟹养殖户发生疑似河蟹“水瘪子”死亡现象,养殖面积35亩,水深1.2米,部分河蟹有活力不强、偷死现象。对发病塘口进行采样带回实验室进行病原检测。一、发病症状概述。采集的样品中,观察到两只河蟹存在明显的异常情况。异常河蟹的肝胰腺颜色发生了显著变化,由正常的颜色变为浅灰色、粉色甚至白色,并且与健康河蟹相比,其肝胰腺呈现出弥散性分布的特点。此外,患病河蟹的腹腔内存在积水、水肿以及糜烂现象,并伴有腥臭味。部分河蟹的甲壳还出现了发软变黑的情况,同时鳃丝也呈现出灰褐色并断裂分布。 展开更多
关键词 防控建议 死亡现象 江苏省溧阳市 腥臭味 浅灰色 养殖面积 河蟹 案例分析
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novel miR-56对罗氏沼虾免疫相关基因表达的调节作用
12
作者 徐齐 戴习林 +1 位作者 付元帅 李云 《南方农业学报》 北大核心 2025年第6期1802-1812,共11页
【目的】揭示novel miR-56对罗氏沼虾免疫相关基因的调节机制,为进一步探究miRNA参与罗氏沼虾先天免疫调节提供理论依据。【方法】以实时荧光定量PCR检测副溶血弧菌感染后罗氏沼虾鳃组织中的novel miR-56表达变化,采用RNAhybrid预测筛选... 【目的】揭示novel miR-56对罗氏沼虾免疫相关基因的调节机制,为进一步探究miRNA参与罗氏沼虾先天免疫调节提供理论依据。【方法】以实时荧光定量PCR检测副溶血弧菌感染后罗氏沼虾鳃组织中的novel miR-56表达变化,采用RNAhybrid预测筛选出novel miR-56的潜在靶基因TLR1,通过双荧光素酶报告基因检测验证novel miR-56与靶基因TLR1的靶向关系;体外注射不同剂量(0.6、1.0和1.5μg/g)的agomiR-56和antagomiR-56干扰novel miR-56表达,筛选出agomiR-56和antagomiR-56的最佳注射剂量,并以实时荧光定量PCR检测罗氏沼虾免疫相关基因的表达变化。【结果】感染副溶血弧菌后,罗氏沼虾鳃组织中的novel miR-56相对表达量随感染时间的推移呈逐渐上升趋势,至感染后72 h,novel miR-56相对表达量约是感染前(0 h)的6.18倍。TLR1是novel miR-56的靶基因,二者的结合位点位于TLR1基因3'非编码区(3'-UTR),且novel miR-56过表达会抑制TLR1基因的表达。于罗氏沼虾围心腔注射0.6、1.0和1.5μg/g的agomiR-56均能显著抑制TLR1基因表达(P<0.05,下同),且以1.5μg/g agomiR-56的抑制效果最优;罗氏沼虾其他免疫相关基因(Spz、TLR2、TLR3、MyD88、IMD、Crustin1、Wntless、ALF1和proPO)在注射agomiR-56后的相对表达量也显著降低。antagomiR-56注射试验结果则恰好相反,注射不同剂量的antagomiR-56对罗氏沼虾TLR1基因有显著促进效果,且随着注射剂量的升高,对罗氏沼虾TLR1基因表达的促进效果呈先上升后下降的变化趋势,以1.0μg/g为antgomiR-56体外注射的最适剂量;罗氏沼虾其他免疫相关基因在注射antgomiR-56后的相对表达量均显著上升。【结论】TLR1是novel miR-56的靶基因,其结合位点位于TLR1基因3'-UTR。novel miR-56通过靶向抑制TLR1基因表达而参与Toll信号通路调控,具有抑制罗氏沼虾免疫相关基因表达的功能。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 novel miR-56 靶基因 免疫相关基因 Toll信号通路
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海水养殖鱼类病害的防治措施研究
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作者 李涛 《中文科技期刊数据库(全文版)农业科学》 2025年第9期020-023,共4页
在社会经济发展速度不断加快的今天,海水养殖产业的发展规模也越来越大。在海水养殖产业当中,海水养殖鱼类是非常重要的一个组成部分。但在海水养殖鱼类规模不断扩大、海水养殖鱼类种类不断增多、海水养殖鱼类密度不断提高的形势下,海... 在社会经济发展速度不断加快的今天,海水养殖产业的发展规模也越来越大。在海水养殖产业当中,海水养殖鱼类是非常重要的一个组成部分。但在海水养殖鱼类规模不断扩大、海水养殖鱼类种类不断增多、海水养殖鱼类密度不断提高的形势下,海水养殖鱼类的病害问题也越来越严重,甚至已经对海水养殖鱼类产业的发展产生了反制约。在这种情况下,必须要对海水养殖鱼类病害进行有效的防治。基于此,本文重点针对海水养殖鱼类病害的防治措施进行了详细的分析,旨在促进海水养殖鱼类的健康生长,提高海水养殖鱼类的经济效益,以供参考。 展开更多
关键词 海水养殖 鱼类 病害 防治
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黄骅梭子蟹养殖中主要病虫害及防治方法
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作者 何林阳 《河北农业》 2025年第2期129-130,共2页
黄骅市的梭子蟹作为我国珍贵的海产品,近年来人工养殖产业实现了迅猛增长。在培植活动中,由于频繁遭遇多种疾病和虫害侵扰,造成梭子蟹产量降低,有时甚至导致整个培植项目的夭折,严重影响了梭子蟹的生产。文章阐述了养殖黄骅梭子蟹时常... 黄骅市的梭子蟹作为我国珍贵的海产品,近年来人工养殖产业实现了迅猛增长。在培植活动中,由于频繁遭遇多种疾病和虫害侵扰,造成梭子蟹产量降低,有时甚至导致整个培植项目的夭折,严重影响了梭子蟹的生产。文章阐述了养殖黄骅梭子蟹时常遇到的一些疾病和有害生物,并介绍了相应的防控措施,以期帮助养殖业者掌握科学的管理技术,提高经济效益。 展开更多
关键词 黄骅梭子蟹 养殖 病虫害 防治方法
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对虾梭子蟹混养模式及病害传染防控措施的深化研究
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作者 陈本峰 《中外食品工业》 2025年第8期88-90,共3页
梭子蟹是大型食用蟹类,具有较高的经济价值。生长期间一般以动物性饵料为主,喜食小鱼虾和贝类,对环境盐度的要求为20‰~35‰,温度为15~28℃。喜沙质或泥质底质,底栖生活,活动范围固定。对虾活动于水体中下层,适温20~30℃,为杂食性偏肉食... 梭子蟹是大型食用蟹类,具有较高的经济价值。生长期间一般以动物性饵料为主,喜食小鱼虾和贝类,对环境盐度的要求为20‰~35‰,温度为15~28℃。喜沙质或泥质底质,底栖生活,活动范围固定。对虾活动于水体中下层,适温20~30℃,为杂食性偏肉食,以小型甲壳类、浮游生物及人工配合饲料为主。二者具有良好的互利共生关系,能够避免空间竞争,提高单位面积产量,并降低水体富营养化风险,使养殖尾水达到排放标准,梭子蟹摄食病弱对虾后还可阻断病原传播链。因此,坚持互利共生、效应互补原则,以即墨区田横岛省级旅游度假区为例,重点研究当地对虾梭子蟹的混养模式以及病害传染防控策略,以期通过产出两种高价值品种提升水产养殖的经济效益和生态效益。 展开更多
关键词 对虾 梭子蟹 水产混养 病害防控
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恒温荧光法及RT-PCR法检测南美白对虾常见病
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作者 赵龙飞 韩煜茹 +1 位作者 王万兴 蔡树东 《现代畜牧兽医》 2025年第2期27-30,共4页
试验旨在探究恒温荧光法及RT-PCR法检测南美白对虾常见3类疾病(病毒类、细菌类、寄生虫类)的应用效果。试验随机抽取3份虾苗样品,每份样品15~20头,采用RT-PCR法检测肝胰腺细小病毒(HPV)、对虾杆状病毒(BPV),恒温荧光法检测致急性肝胰腺... 试验旨在探究恒温荧光法及RT-PCR法检测南美白对虾常见3类疾病(病毒类、细菌类、寄生虫类)的应用效果。试验随机抽取3份虾苗样品,每份样品15~20头,采用RT-PCR法检测肝胰腺细小病毒(HPV)、对虾杆状病毒(BPV),恒温荧光法检测致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(Vp_(AHPND))、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、黄头病毒(YHV)、虹彩病毒(DIVI)、哈维氏弧菌(HVS)、桃拉病毒(TSV)、虾肝肠胞虫(EHP)、白斑综合征病毒(WSSV)。结果显示,恒温荧光法检测Vp_(AHPND)、IHHNV、YHV、DIVI、TSV、HVS、WSSV、EHP等8种病原结果均为阴性,凝胶电泳试验中未出现HPV、BPV条带,表明虾苗未携带上述病原。研究表明,RT-PCR法与恒温荧光法可快速有效地检测南美白对虾虾苗病原携带情况。 展开更多
关键词 南美白对虾 恒温荧光法 RT-PCR法
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山东济宁藕虾混养的病虫害防治技术
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作者 张玉东 贾希明 王刚强 《农业工程技术》 2025年第15期128-129,共2页
藕虾混养是一种高效的水产种养模式,能提高土地利用率,提升单位面积的经济效益,但在实际生产中却因为一些病虫害问题导致经济效益达不到预期。其中,莲藕容易发生根腐病、茎腐病等,小龙虾容易感染白斑综合征、甲壳溃疡病,福寿螺和负泥虫... 藕虾混养是一种高效的水产种养模式,能提高土地利用率,提升单位面积的经济效益,但在实际生产中却因为一些病虫害问题导致经济效益达不到预期。其中,莲藕容易发生根腐病、茎腐病等,小龙虾容易感染白斑综合征、甲壳溃疡病,福寿螺和负泥虫等害虫。该文从水质管理、生物防治、生态调控等方面,总结了藕虾混养的病虫害防治技术,旨在降低病害发生率,提高产量与收益。 展开更多
关键词 藕虾混养 病虫害 防治技术
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温度对罗氏沼虾感染虹彩病毒的影响及转录组学分析
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作者 赵梦瑶 陈静 +5 位作者 姚嘉赟 郑阿钦 袁雪梅 黄雷 彭先启 张海琪 《水生生物学报》 北大核心 2025年第9期10-21,共12页
为探究温度对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)感染十足目虹彩病毒1(Decapod iridescent virus 1,DIV1)的影响及调控机制,研究设置5组不同温度(26、28、30、32、34℃)对罗氏沼虾人工感染DIV1,并统计其存活率,结果显示温度34℃能够... 为探究温度对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)感染十足目虹彩病毒1(Decapod iridescent virus 1,DIV1)的影响及调控机制,研究设置5组不同温度(26、28、30、32、34℃)对罗氏沼虾人工感染DIV1,并统计其存活率,结果显示温度34℃能够抑制罗氏沼虾体内的病毒复制,减少死亡并延长其存活时间。对感染DIV124h和72h的罗氏沼虾肝胰腺、鳃及肌肉进行病毒载量测定,结果表明感染DIV1的罗氏沼虾在72h内病毒迅速增殖,但当水温升高至30℃及更高温度时其体内的病毒载量明显降低。此外,采集罗氏沼虾不同温度下感染DIV1的肝胰腺进行转录组学分析,结果表明共有8483个不同差异表达基因,富集分析发现基因主要富集在花生四烯酸代谢(Arachidonic acid metabolism)、糖酵解/糖异生(Glycolysis/Gluconeogenesis)、α-亚油酸代谢(alpha-Linolenic acid metabolism)等与Warburg效应相关的代谢通路中,推测这些基因和通路可能与病毒感染机制密切相关。对罗氏沼虾感染DIV1后的免疫基因CAT、Cu/ZnSOD、CTL、ACP的表达水平进行测定,结果发现当温度为32℃时免疫基因的表达量显著高于其他温度,表明高温能够促进罗氏沼虾的免疫基因表达量增加以抵御病毒入侵。研究通过分析不同温度对DIV1感染罗氏沼虾的影响,初步揭示了温度对病毒复制的影响及调控机制,为深入探究病毒感染的分子机制和开发抗病毒免疫技术奠定一定的基础。 展开更多
关键词 温度 十足目虹彩病毒1 转录组学分析 调控机制 罗氏沼虾
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虾肝肠胞虫Septin的生物信息学分析及其在增殖中的潜在作用
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作者 张晟 乔毅 +4 位作者 曹晓慧 张雷霆 成婕 吴海龙 沈辉 《南京师大学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第1期66-74,共9页
虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是对虾养殖业的重要病原体之一,其裂殖增殖的分子机制尚不明确.本研究通过克隆和分析EHP裂殖期Septin蛋白EhpSeptin的基因序列、表达及定位,初步阐释了该基因在EHP裂殖中的潜在作用.结果表... 虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是对虾养殖业的重要病原体之一,其裂殖增殖的分子机制尚不明确.本研究通过克隆和分析EHP裂殖期Septin蛋白EhpSeptin的基因序列、表达及定位,初步阐释了该基因在EHP裂殖中的潜在作用.结果表明,EhpSeptin基因序列编码265个氨基酸的蛋白质,分子量约30.4 kDa,等电点4.75.构建EhpSeptin原核表达载体,获得高纯度表达蛋白.Western blotting验证了表达蛋白与天然蛋白一致.此外,本研究建立了EhpSeptin基因显色原位杂交技术(chromogenic in situ hybridization,CISH),分析感染对虾样本中EhpSeptin的表达模式.结果显示,EhpSeptin的表达水平随EHP感染强度增加而升高,表明其参与了EHP的裂殖过程.本研究首次报道了EHP裂殖相关蛋白EhpSeptin的克隆、表达、定位及其在EHP感染过程中的变化规律,为探究EHP裂殖分子机制和防治该病原体的感染提供了理论基础和技术手段. 展开更多
关键词 虾肝肠胞虫 SEPTIN 原核表达 显色原位杂交
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