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实时定量PCR分析CML患者胸腺近期输出功能 被引量：10
1
作者 耿素霞 李扬秋 +4 位作者 杨力建 陈少华 韩素芳 周羽竝 陈青山 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第6期317-319,共3页
目的　了解慢性粒细胞白血病 (CML)患者CD3+ 、CD4 + 和CD8+ 细胞中T细胞受体重排删除DNA环 (TRECs)的含量 ,从而推测CML患者的胸腺近期输出功能。方法　利用实时定量PCR(Taq Man)方法检测 8例CML患者外周血单个核细胞、3例CML患者CD4 +... 目的　了解慢性粒细胞白血病 (CML)患者CD3+ 、CD4 + 和CD8+ 细胞中T细胞受体重排删除DNA环 (TRECs)的含量 ,从而推测CML患者的胸腺近期输出功能。方法　利用实时定量PCR(Taq Man)方法检测 8例CML患者外周血单个核细胞、3例CML患者CD4 + 和CD8+ 细胞中TRECs的水平。并根据外周血中CD3阳性率计算CD3+ 细胞中TRECs水平。 9例正常人外周血作为对照。结果　CML患者中TRECs含量为 0 .1± 0 .2 2 / 10 0 0T细胞 ,明显低于正常人TRECs水平 (6 .84± 4 .71/ 10 0 0T细胞 ,P <0 .0 1)。其中 5例患者外周血单个核细胞中未能检测到TRECs ,经分选CD4 + 和CD8+ 细胞后 ,2例可以检测到低水平的TRECs。结论　本研究首先报道了CML患者TRECs水平情况 。 展开更多
关键词 TRECS 胸腺近期输出功能 慢性粒细胞白血病 实时定量PCR
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抗T细胞免疫毒素的T细胞清除效率及其对造血细胞的影响 被引量：11
2
作者 黎燕 沈倍奋 +3 位作者 陈兴 贺永怀 陈勇 白炎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期197-200,共4页
抗T细胞免疫毒素主要用于同种异体骨髓移植中清除T细胞,减轻移植物抗宿主反应(GVHD),提高移植成功率,也可用于白血病自体骨髓移植中清除残留白血病细胞,减少移植后白血病复发的可能性。本实验结果表明抗T细胞免疫毒素在10^(-8)M浓度对... 抗T细胞免疫毒素主要用于同种异体骨髓移植中清除T细胞,减轻移植物抗宿主反应(GVHD),提高移植成功率,也可用于白血病自体骨髓移植中清除残留白血病细胞,减少移植后白血病复发的可能性。本实验结果表明抗T细胞免疫毒素在10^(-8)M浓度对靶细胞的杀伤达3.0log以上,即可清除99.99%的靶细胞,并可有效地抑制周血T细胞转化功能和骨髓T细胞分泌IL—2的功能,同时对骨髓粒单系和红系造血细胞的增殖无明显的抑制作用。 展开更多
关键词 T细胞 免疫毒素 造血细胞
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NB4和HL-60细胞诱导的脐血T细胞TCR Vβ基因谱系分析 被引量：8
3
作者 汤冀 李扬秋 +1 位作者 杨力建 陈少华 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期740-745,共6页
目的:了解经NB4细胞和HL-60细胞体外诱导后脐血T细胞的TCR Vβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况。方法:采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)方法,用经丝裂霉素灭活的NB4细胞和HL-60细胞体外诱导脐血T细胞增殖,利用RT-PCR分析经MLTC前... 目的:了解经NB4细胞和HL-60细胞体外诱导后脐血T细胞的TCR Vβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况。方法:采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)方法,用经丝裂霉素灭活的NB4细胞和HL-60细胞体外诱导脐血T细胞增殖,利用RT-PCR分析经MLTC前后T细胞的24个TCR Vβ亚家族的利用情况,并用基因扫描分析其克隆性特点。结果:诱导前脐血T细胞表达20个TCR Vβ亚家族,诱导后的T细胞所表达的TCR Vβ亚家族随培养时间增加而逐渐减少,且诱导组呈现出克隆趋势或寡克隆增殖特点。两种细胞诱导后10 d均可见Vβ1的克隆增殖出现变化,此外,NB4诱导的T细胞出现Vβ15,而HL-60诱导的T细胞则出现Vβ23的克隆增殖情况。结论:NB4细胞和HL-60细胞可诱导脐血TCR VβT细胞克隆性增殖,此优势表达的克隆性T细胞可能与特异性抗原介导的细胞免疫反应有关。 展开更多
关键词 脐血 白血病细胞株 T细胞 TCR VΒ基因 克隆性
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超抗原SEA联合PML-RARα对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响 被引量：6
4
作者 林晨 高珂 +3 位作者 白雪 陈少华 杨力建 李扬秋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期530-533,共4页
目的探讨超抗原SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,20d后收集增殖细胞,利用RT-PCR及基因扫描技术分析诱导后增殖... 目的探讨超抗原SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,20d后收集增殖细胞,利用RT-PCR及基因扫描技术分析诱导后增殖T细胞TCRVβ亚家族的利用和克隆性增殖的特点。结果单纯SEA诱导后,T细胞表达了11个TCR Vβ亚家族,且仍为多克隆增殖。单纯PML-RARα多肽诱导后,T细胞限制性表达8个Vβ亚家族,其中Vβ13、Vβ14表现出寡克隆或寡克隆趋势。PML-RARα多肽联合SEA共同诱导,其T细胞表达TCR Vβ亚家族依然呈明显的限制性,且Vβ13、Vβ14亚家族呈寡克隆、双克隆及寡克隆趋势。结论SEA能协同PML-RARα多肽诱导的T细胞克隆性活化与增殖。 展开更多
关键词 超抗原SEA PML-RARΑ 细胞受体 克隆性
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B-ALL病人TCR Vβ基因谱系和克隆性分析 被引量：7
5
作者 黄梅娟 李扬秋 +3 位作者 陈少华 杨力建 周羽竝 张涛 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第6期320-322,共3页
目的　了解B ALL病人外周血T细胞的TCRVβ基因谱系及其克隆性增殖情况。 方法　利用RT PCR方法扩增 13例初发未治B ALL病人外周血单个核细胞中 2 4个TCRVβ基因的互补决定区 3(CDR3) ,PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而... 目的　了解B ALL病人外周血T细胞的TCRVβ基因谱系及其克隆性增殖情况。 方法　利用RT PCR方法扩增 13例初发未治B ALL病人外周血单个核细胞中 2 4个TCRVβ基因的互补决定区 3(CDR3) ,PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。结果　 13例B ALL病人分别表达 2～ 18个Vβ亚家族。 13例病人均存在 1个或多个Vβ亚家族的克隆增殖T细胞 ,增殖形式包括寡克隆及寡克隆增殖趋势、双克隆和单克隆。Vβ2 1和Vβ2 3亚家族出现克隆增殖性T细胞的频率较高。结论　B ALL病人外周血T细胞的TCRVβ谱系呈现优势利用的特点 ,并存在克隆性增殖的T细胞 ,这可能是机体对白血病相关抗原产生的特异性免疫反应 ;Vβ2 1和Vβ2 3亚家族T细胞发生克隆增殖改变的趋向性比较明显 ,可能与B 展开更多
关键词 B细胞-急性淋巴细胞白血病 T细胞受体VΒ基因 T细胞克隆性
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CML患者CD4^+和CD8^+ T细胞的TCR Vβ基因谱系和克隆性分析 被引量：4
6
作者 耿素霞 李扬秋 +3 位作者 陈少华 杨力建 尹青松 汤冀 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期157-160,共4页
目的:了解慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)患者外周血CD4+和CD8+T细胞中TCRVβ亚家族T细胞的基因表达和克隆性。方法:利用RT-PCR分别扩增19例CML-CP患者外周血单个核细胞(PBMCs)、CD4+和CD8+细胞TCRVβ亚家族基因的CDR3,阳性产物进一步... 目的:了解慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)患者外周血CD4+和CD8+T细胞中TCRVβ亚家族T细胞的基因表达和克隆性。方法:利用RT-PCR分别扩增19例CML-CP患者外周血单个核细胞(PBMCs)、CD4+和CD8+细胞TCRVβ亚家族基因的CDR3,阳性产物进一步经基因扫描分析其克隆性。结果:CML患者外周血CD4+和CD8+细胞分别表达部分(1～21个)Vβ亚家族,均以Vβ13的表达率最高,其次为Vβ9,多数患者的一些Vβ亚家族T细胞呈克隆性增殖,主要出现于CD8+细胞中,分别以Vβ21(CD4+)和Vβ11(CD8+)亚家族的克隆性增殖多见。结论:CML患者外周血CD4+和CD8+细胞的TCRVβ谱系均存在限制性分布,患者存在的克隆性增殖CD4+和CD8+T细胞可能与宿主抗CML抗原反应有关,它们可能在抗CML效应中起主要作用。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 T细胞的克隆性 TCR VΒ亚家族 基因扫描
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APL患者外周血TCR Vα亚家族T细胞分布和增殖特点 被引量：7
7
作者 岑东芝 李扬秋 +2 位作者 陈少华 杨力建 郁志 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2007年第2期81-84,共4页
目的：了解急性早幼粒细胞白血病（APL）患者外周血TCRVα亚家族T细胞的分布及其克隆性。方法：利用RT-PCR扩增9例APL患者和10例正常人外周血单个核细胞中29个TCRVα亚家族基因的互补决定区3（CDR3），了解TCRV理亚家族T细胞的分布；阳... 目的：了解急性早幼粒细胞白血病（APL）患者外周血TCRVα亚家族T细胞的分布及其克隆性。方法：利用RT-PCR扩增9例APL患者和10例正常人外周血单个核细胞中29个TCRVα亚家族基因的互补决定区3（CDR3），了解TCRV理亚家族T细胞的分布；阳性产物进一步经基因扫描分析CDR3长度，从而了解其克隆性。结果：9例患者外周血T细胞所能检测到的Vα亚家族T细胞分别为1～9个亚家族，以Vet3和Vα19出现频率较高；克隆性增殖T细胞可在8例患者中检测到，以Vα3、Vα26和Vα27出现克隆性T细胞频率较高（3／8）。正常人外周血T细胞中表达绝大多数Vα亚家族，呈多克隆性增殖特点。结论：APL患者外周血Vα亚家族T细胞存在明显的倾斜性分布和克隆性增殖特点，后者可能是对APL细胞抗原的反应性增殖，是否具有特异性杀伤作用，有待进一步检测。 展开更多
关键词 急性早幼粒细胞白血病 T细胞受体基因 克隆性
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P物质对小鼠腹腔巨噬细胞功能的调整作用 被引量：30
8
作者 张惠华 陈慰峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期75-77,共3页
本文研究了神经肽P物质(Substance P,SP)对经硫代乙醇酸钠(TG)培基活化的小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)的免疫功能的影响。结果表明,经TG活化的Mφ在体外与SP共同培养18小时后,其吞噬中性红的能力明显提高,其有效浓度在10^(-6)～10^(-8)M之间(P... 本文研究了神经肽P物质(Substance P,SP)对经硫代乙醇酸钠(TG)培基活化的小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)的免疫功能的影响。结果表明,经TG活化的Mφ在体外与SP共同培养18小时后,其吞噬中性红的能力明显提高,其有效浓度在10^(-6)～10^(-8)M之间(P<0.05)。实验中还发现SP在10^(-7)～10^(-9)M有显著增强Mφ产生IL-1的作用,SP与LPS(10μg/ml)联合应用可协同促进IL—1的产生。SP尚可增强Mφ对肿瘤细胞增殖的抑制作用,但这一作用较巨噬细胞活化因子(MAF)明显为弱。SP不能与Con A协同增强小鼠脾脏T细胞产生MAF的能力。 展开更多
关键词 P物质 巨噬细胞 免疫调节
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人T细胞亚群的微量全血染色法 被引量：4
9
作者 张鲁榕 孔宪涛 +6 位作者 张浩 谢映华 郭亚军 葛依工 龙振洲 马树俊 田渭涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第5期303-305,共3页
本研究建立了人T细胞亚群的微量全血染色法,观察了红细胞溶解液、血细胞与OKT McAb共育时间、洗液及OKT McAb用量等因素对染色率的影响。本法只需0.4ml全血即可得到CD_3、CD_4、CD_8亚群的百分率,同时避免了传统的Ficoll分离法用血量多... 本研究建立了人T细胞亚群的微量全血染色法,观察了红细胞溶解液、血细胞与OKT McAb共育时间、洗液及OKT McAb用量等因素对染色率的影响。本法只需0.4ml全血即可得到CD_3、CD_4、CD_8亚群的百分率,同时避免了传统的Ficoll分离法用血量多、淋巴细胞部分选择性丢失等缺点。 展开更多
关键词 T细胞亚群 全血染色法 流式细胞仪
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独特型TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体构建及体外表达 被引量：4
10
作者 李闯 吴秀丽 +4 位作者 李扬秋 周羽竝 陈少华 杨力建 朱康儿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期30-33,共4页
目的:构建Jurkat细胞株独特型TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体,转染后了解其体外表达情况。方法:根据聚合酶链反应-基因扫描(PCR-Genescan)检测Jurkat细胞株TCR Vα及Vβ亚家族表达情况,分别将其所表达的单克隆性的TCR Vα1及TCR Vβ8... 目的:构建Jurkat细胞株独特型TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体,转染后了解其体外表达情况。方法:根据聚合酶链反应-基因扫描(PCR-Genescan)检测Jurkat细胞株TCR Vα及Vβ亚家族表达情况,分别将其所表达的单克隆性的TCR Vα1及TCR Vβ8亚家族基因片段克隆至质粒pIRES的多克隆位点A(MCS A)和多克隆位点B(MCS B)中。通过限制性酶切分析、序列分析、RT-PCR、间接免疫荧光、流式细胞术(FCM)手段鉴定重组表达载体的正确性以及转染A549和Molt4细胞后基因及蛋白的表达情况。结果:构建了2组TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体,该表达载体转染A549和Molt4细胞后,在mRNA和蛋白水平检测到了TCR Vα1和TCR Vβ8的表达。结论:成功构建了2种独特型Vα1-pIRES-TCR Vβ8真核表达载体,为利用特异性TCR基因修饰T细胞的研究提供方法学依据。 展开更多
关键词 JURKAT细胞株 T细胞受体 转基因
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PML-RARα多肽诱导脐血TCR VβT细胞增殖研究 被引量：3
11
作者 汤冀 李扬秋 +2 位作者 杨力建 陈少华 周羽竝 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期529-532,共4页
目的了解PMLRARα多肽诱导脐血T细胞的T细胞受体(TCR)Vβ谱系表达和克隆性情况。方法以不同浓度(16.7μg/mL,33.3μg/mL或50μg/mL)的PMLRARα多肽联合IL2、抗CD3单抗以及抗CD28单抗诱导脐血T细胞增殖,利用RTPCR基因扫描技术分析诱导后... 目的了解PMLRARα多肽诱导脐血T细胞的T细胞受体(TCR)Vβ谱系表达和克隆性情况。方法以不同浓度(16.7μg/mL,33.3μg/mL或50μg/mL)的PMLRARα多肽联合IL2、抗CD3单抗以及抗CD28单抗诱导脐血T细胞增殖,利用RTPCR基因扫描技术分析诱导后第3、6、9、12天后的脐血TCRVβ亚家族的利用和克隆性增殖的特点。结果限制性表达和克隆性增殖TCRVβ亚家族T细胞可见于PMLRARα多肽诱导后脐血T细胞。结论PMLRARα多肽可在体外诱导脐血T细胞呈克隆性增殖,此优势增殖的克隆性T细胞可能具有特异性细胞毒作用。 展开更多
关键词 脐血 急性早幼粒细胞白血病 T细胞受体 克隆性
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109例病人红细胞免疫功能检测分析 被引量：10
12
作者 陈且峰 邵维传 祁敏如 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期91-92,共2页
本文应用红细胞C_(3b)受体花环试验和红细胞免疫复合物(IC)花环试验,检测109例病人的红细胞免疫功能状况,结果不支持“自身免疫病患者红细胞C_(3b)受体免疫吸附功能升高”这种结论:并认为以IC花环试验作为检测红细胞免疫功能的一个指标... 本文应用红细胞C_(3b)受体花环试验和红细胞免疫复合物(IC)花环试验,检测109例病人的红细胞免疫功能状况,结果不支持“自身免疫病患者红细胞C_(3b)受体免疫吸附功能升高”这种结论:并认为以IC花环试验作为检测红细胞免疫功能的一个指标,其意义尚需探讨。 展开更多
关键词 红细胞 细胞 免疫系统 免疫功能
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病原体抗原刺激的正常人外周血CD4^+T细胞对γδT细胞的影响 被引量：2
13
作者 何维 李刚 +5 位作者 林颖 于松涛 刘庆丰 杜桂书 李静 巴德年 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期401-408,共8页
CD4+T辅助（Th）细胞和γδT细胞在抗微生物感染中发挥着重要作用，两者相互作用有待阐明。本文报道以胞内感染体结核杆菌、人类VI型疱疹病毒及胞外寄生虫阴道毛滴虫刺激活化从正常人外周血经洗淘法分离纯化的CD4+T细胞，结果各组活化... CD4+T辅助（Th）细胞和γδT细胞在抗微生物感染中发挥着重要作用，两者相互作用有待阐明。本文报道以胞内感染体结核杆菌、人类VI型疱疹病毒及胞外寄生虫阴道毛滴虫刺激活化从正常人外周血经洗淘法分离纯化的CD4+T细胞，结果各组活化的细胞均表现明显增殖和产生以白介素-2（IL－2）、γ干扰素（IFN－γ）显著升高为主的Th1型细胞因子分泌谱。利用细胞隔离渗透性共培养体系，将抗原活化的CD4+T细胞和γδT细胞共培养，结果显示γδT细胞的增殖和细胞毒作用均可为CD4+T细胞产生的可溶性因子所显著增强。这提示在抗感染免疫中，CD4+Th1细胞可通过Th1型细胞因子促进γδT细胞功能。 展开更多
关键词 T细胞 细胞因子 增殖 细胞毒
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人鼠种间骨髓瘤细胞系FMC-1的建立及其在人单克隆抗体制备中的应用 被引量：3
14
作者 樊代明 张学庸 +2 位作者 陈希陶 乔太东 陈保军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期10-14,共5页
本文报告在国内首次建立的一株能用于制备人源性单克隆抗体（以下简称人单抗）的人鼠种间骨髓瘤细胞系FMC-1。FMC-1对8-偶氮鸟嘌呤及鸟本苷具有抵抗性,对HAT培基敏感。细胞倍增时间为24～36小时,无人I<sub>?</sub>或其轻重... 本文报告在国内首次建立的一株能用于制备人源性单克隆抗体（以下简称人单抗）的人鼠种间骨髓瘤细胞系FMC-1。FMC-1对8-偶氮鸟嘌呤及鸟本苷具有抵抗性,对HAT培基敏感。细胞倍增时间为24～36小时,无人I<sub>?</sub>或其轻重链的合成及分泌。目前已传代至136代,细胞中的人染色体稳定。经与人胃痛周围淋巴结的淋巴细胞再次杂交,获得两株人鼠人杂交瘤即HGO<sub>3</sub>和HMG<sub>7</sub>,在体外传代已6个月,抗体分泌稳定。其中HGO<sub>3</sub>分泌抗胃癌的人单抗。HMG<sub>7</sub>是经体外致敏人淋巴细胞与FMC-1融合获得的一株杂交瘤,能分泌针对鼠抗人胃癌单抗MG<sub>7</sub>的人单抗。两株杂交瘤1×10<sup>6</sup>细胞在24小时内的抗体分泌量达25μg～50μg/ml.初步认为FMC-1是一值得推荐用于人单抗制备的种间骨髓瘤细胞系。 展开更多
关键词 种间骨髓瘤 细胞系 人源性单克隆抗体
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慢性粒细胞白血病病人TCRζ链表达特点 被引量：2
15
作者 陈思 李扬秋 +3 位作者 陈少华 杨力建 吴秀丽 岑东芝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1111-1113,共3页
目的:建立实时定量PCR方法检测TCRζ链表达水平的方法,了解慢性粒细胞白血病(CML)外周血TCRζ链表达水平。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR,相对定量检测30例CML患者和30例正常人外周血的单个核细胞的TCRζ链表达情况,以β2微球蛋白基... 目的:建立实时定量PCR方法检测TCRζ链表达水平的方法,了解慢性粒细胞白血病(CML)外周血TCRζ链表达水平。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR,相对定量检测30例CML患者和30例正常人外周血的单个核细胞的TCRζ链表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,根据相对定量公式:2-△△Ct计算CML病人与正常人TCRζ链表达差异倍数。结果:成功建立SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR检测TCRζ链表达检测技术。18例CML患者TCRζ链出现表达低于正常人,而12例CML患者TCRζ链出现表达高于正常人。结论:CML病人中TCRζ链表达水平可分为表达下调(60%)和表达上调(40%)2组,提示部分CML病人的细胞免疫缺陷可能与其TCRζ链表达下调有关。 展开更多
关键词 T细胞受体ξ链 实时定量PCR 白血病 髓样 慢性
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人肺癌细胞A549产生的免疫抑制因子对T细胞的作用及其生物学特性 被引量：2
16
作者 陈兆聪 徐红霞 +2 位作者 冯作化 罗毅 王茹端 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期10-14,共5页
本文系用人肺腺癌细胞株A549为研究对象,观察了TDSF对T淋巴细胞的作用,并对其某些生物学特性作了初步研究。实验表明:TDSF对T淋巴细胞的增殖、IL-2的产生及其反应性均有明显的抑制作用。TDSF作用相当强烈,这点是应用IL-2对肿瘤进行免疫... 本文系用人肺腺癌细胞株A549为研究对象,观察了TDSF对T淋巴细胞的作用,并对其某些生物学特性作了初步研究。实验表明:TDSF对T淋巴细胞的增殖、IL-2的产生及其反应性均有明显的抑制作用。TDSF作用相当强烈,这点是应用IL-2对肿瘤进行免疫治疗时应该注意的问题。丝裂霉素等抗代谢药物可抑制TDSF的分泌,提示TDSF为瘤细胞合成和分泌的基因产物。TDSF对酸、碱、热、胰蛋白酶敏感,分子量>150KD,表明其化学本质为蛋白质。 展开更多
关键词 免疫 抑制因子 癌细胞株 IL-2
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AML-M2a诱导TCR VβT细胞的克隆性增殖和细胞毒作用 被引量：1
17
作者 陈少华 李扬秋 +4 位作者 杨力建 黄梅娟 韩素芳 罗更新 陈盛亭 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第3期195-199,共5页
目的:了解急性髓性白血病(AML)M2a细胞诱导的体外增殖T细胞的特异性杀伤作用和克隆性增殖情况。方 法:利用肿瘤细胞-T淋巴细胞混合培养方法(MLTC),分别收集3例经AML-M2a细胞体外诱导不同扩增时间的健康人T细 胞,利用LDH释放方法分析其... 目的:了解急性髓性白血病(AML)M2a细胞诱导的体外增殖T细胞的特异性杀伤作用和克隆性增殖情况。方 法:利用肿瘤细胞-T淋巴细胞混合培养方法(MLTC),分别收集3例经AML-M2a细胞体外诱导不同扩增时间的健康人T细 胞,利用LDH释放方法分析其特异性细胞毒作用,同时利用RT-PCR和基因扫描方法分析经AML-M2a细胞诱导前后T细胞 的24个TCR Vβ亚家族基因的表达和克隆性情况。结果:在培养第12天和第21天时,1例AML-M2a细胞诱导的3例健康人 T细胞对该诱导细胞的平均杀伤率分别为39.88±7.79％和62.14±9.79％,而对AML-M2a患者和健康人外周血T细胞均无 杀伤作用。TCR Vβ谱系分析发现诱导后3例健康人T细胞均出现Vβ16的克隆性增殖。结论:AML-M2a细胞可诱导健康人 T细胞成为具有克隆性增殖的特异性CTL,并以Vβ16的克隆性增殖为主。 展开更多
关键词 AML—M2a RT—PCR MLTC 基因扫描 克隆性增殖
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CML相关抗原诱导正常T细胞增殖的TCR Vα基因选用和克隆性研究 被引量：1
18
作者 岑东芝 李扬秋 +2 位作者 陈少华 杨力建 张玉平 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期124-128,共5页
目的:了解慢性粒细胞白血病(CML)相关抗原体外诱导T细胞的TCR Vα亚家族限制性表达和克隆性增殖情况。方法:采用混合淋巴细胞和肿瘤细胞培养(MLTC)方法,利用CML细胞、K562细胞和bcr3-abl2多肽体外诱导脐血或正常人的T细胞增殖,用RT-PCR... 目的:了解慢性粒细胞白血病(CML)相关抗原体外诱导T细胞的TCR Vα亚家族限制性表达和克隆性增殖情况。方法:采用混合淋巴细胞和肿瘤细胞培养(MLTC)方法,利用CML细胞、K562细胞和bcr3-abl2多肽体外诱导脐血或正常人的T细胞增殖,用RT-PCR和基因扫描分析MLTC后T细胞的29个TCR Vα亚家族基因的互补决定区(CDR3),了解各Vα亚家族的限制性表达情况和T细胞克隆性增殖特点。结果:经CML抗原刺激后增殖的T细胞仅表达部分Vα谱系基因(1-14个亚家族),两例脐血均出现有Vα3亚家族T细胞克隆性增殖趋势;正常人外周血出现寡克隆增殖的Vα5、Vα14亚家族T细胞。结论:CML相关抗原体外诱导脐血和正常人T细胞出现抗原相关的TCR Vα优势利用和克隆性增殖。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 混合淋巴细胞和肿瘤细胞培养 T细胞受体 Vα基因 克隆性
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SEA对PML-RARα多肽体外诱导外周血单个核细胞TCRζ链表达的作用 被引量：1
19
作者 高珂 林晨 +5 位作者 白雪 陈少华 杨力建 陈思 B.N.Selvakumar 李扬秋 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期347-350,共4页
目的:了解金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合PML-RARα融合多肽体外诱导正常人外周血T细胞活化TCRζ链基因表达情况。方法:利用T细胞液体培养法分别与正常人外周血淋巴细胞加入PML-RARα融合多肽、SEA和SEA联合PML-RARα多肽诱导培养T细胞... 目的:了解金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合PML-RARα融合多肽体外诱导正常人外周血T细胞活化TCRζ链基因表达情况。方法:利用T细胞液体培养法分别与正常人外周血淋巴细胞加入PML-RARα融合多肽、SEA和SEA联合PML-RARα多肽诱导培养T细胞,其中SEA刺激包括培养初始或培养第5天加入SEA两组(PS、PSI),并设空白对照组(不加多肽及SEA)。分别收集各组培养20 d后细胞提取mRNA并合成cDNA,采用SYBR G reenⅠ荧光定量PCR和相对定量检测TCRζ链在不同组别T淋巴细胞中的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,根据相对定量公式:2-△△C t分析TCRζ链表达差异。结果:与空白组相比,联合诱导组在培养初始加入SEA及第5天加入SEA的培养T细胞中TCRζ链表达上升,而单独SEA诱导组的TCRζ链表达下降。结论:超抗原SEA联合PML-RARα多肽体外诱导T细胞可使TCRζ链基因表达水平升高,有望为研制急性早幼粒细胞白血病疫苗提供新的切入点。 展开更多
关键词 T细胞受体ζ链 实时定量PCR 金黄色葡萄球菌肠毒素A T细胞受体 PML-RARα融合多肽
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淋巴瘤白血病患者TCR Vβ亚家族T细胞的分布及其克隆性 被引量：1
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作者 杨力建 李扬秋 +2 位作者 陈少华 卢育洪 罗更新 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2002年第2期7-10,共4页
目的 :了解B细胞淋巴瘤白血病 (LL)患者TCRVβ亚家族T细胞的分布及其克隆性。方法 :利用RT -PCR分别扩增 3例LL患者外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的CDR3,以了解患者各Vβ亚家族的利用情况 ,然后将阳性的PCR产物进一步经荧... 目的 :了解B细胞淋巴瘤白血病 (LL)患者TCRVβ亚家族T细胞的分布及其克隆性。方法 :利用RT -PCR分别扩增 3例LL患者外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的CDR3,以了解患者各Vβ亚家族的利用情况 ,然后将阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度 ,了解T细胞克隆性。结果 :患者中仅存在 2～ 6个Vβ亚家族T细胞。基因扫描分析显示 ,2例患者外周血中的Vβ1、Vβ3或Vβ4亚家族出现克隆性增殖T细胞。结论 :LL患者外周血存在倾斜性分布和克隆性增殖的Vβ亚家族T细胞 ,这可能是机体T细胞受白血病细胞相关抗原的刺激作用而引起机体产生相应的特异性抗白血病的免疫反应。 展开更多
关键词 淋巴瘤白血病 T细胞受体VΒ基因 T细胞克隆性 基因扫描
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