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小鼠骨髓源性巨噬细胞诱导及冻存方法的优化 被引量：1
1
作者 魏琼 赵梦竹 +2 位作者 程序 刘梦华 张冬梅 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第3期611-618,共8页
目的:探讨小鼠骨髓源性巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDMs)诱导及冻存的适宜方法。方法:将小鼠成纤维细胞(L929细胞)于不同温度、接种密度、血清浓度培养条件下培养,ELISA法检测细胞上清中巨噬细胞集落刺激因子(macrophag... 目的:探讨小鼠骨髓源性巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDMs)诱导及冻存的适宜方法。方法:将小鼠成纤维细胞(L929细胞)于不同温度、接种密度、血清浓度培养条件下培养,ELISA法检测细胞上清中巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)浓度;提取小鼠骨髓细胞,细胞差速贴壁法将骨髓细胞预培养4 h,流式细胞术检测骨髓原驻留巨噬细胞比例;使用L929细胞上清或重组M-CSF诱导细胞7 d,倒置显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术检测诱导后细胞F4/80及CD11b双阳性占比;中性红法及ELISA法检测C57BL/6N和C57BL/6J两种亚型来源BMDMs吞噬能力和炎症反应水平;将提取的骨髓细胞即刻冻存后复苏再诱导,或将已成功诱导的BMDMs冻存后复苏,倒置显微镜下观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力,中性红法检测吞噬能力。结果:33℃、10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)培养7 d条件下的L929细胞上清中富集高浓度M-CSF;骨髓细胞经预培养4 h,贴壁细胞中F4/80+占比显著高于悬浮细胞(P<0.01);经L929上清或重组M-CSF诱导7 d后细胞F4/80+CD11b+占比无显著差异(P>0.05);与C57BL/6J亚型来源BMDMs相比,C57BL/6N亚型来源BMDMs具有更强的吞噬能力(P<0.01),释放较低水平TNF-α(P<0.01)和IL-6(P<0.05),以及较高水平IL-1β(P<0.05);相较于将已成功诱导的BMDMs冻存后复苏,骨髓细胞提取后即刻冻存、复苏再诱导的BMDMs具有更好的巨噬细胞形态,更高的细胞活力(P<0.01)和更强的吞噬能力(P<0.01)。结论:通过33℃、10%FBS培养7 d的L929细胞上清富含更高浓度M-CSF,可成功诱导骨髓细胞分化为小鼠骨髓源性巨噬细胞,细胞差速贴壁法预培养可去除原骨髓驻留巨噬细胞,C57BL/6N和C57BL/6J两种亚型来源BMDMs吞噬能力和炎症反应水平不同,将提取的骨髓细胞即刻冻存后复苏再诱导是较好的BMDMs冻存方法。 展开更多
关键词 小鼠骨髓源性巨噬细胞 原代细胞 成纤维细胞 巨噬细胞集落刺激因子
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单细胞转录组测序在哺乳动物内耳研究中的应用前景
2
作者 张梦蝶 朱弼成 +5 位作者 何光林 张玉忠 简锦婵 沈安琪 刘芸珠 何锴 《兽类学报》 北大核心 2025年第6期771-783,共13页
内耳作为听觉和平衡的核心器官,其结构精密复杂,细胞类型丰富多样。单细胞转录组测序技术(scRNA‑Seq)能够捕获和分析单个细胞的基因表达谱,为深入解析内耳中各种细胞类型的功能及其分子机制提供了强大的工具。本文系统回顾了2015—2024... 内耳作为听觉和平衡的核心器官,其结构精密复杂,细胞类型丰富多样。单细胞转录组测序技术(scRNA‑Seq)能够捕获和分析单个细胞的基因表达谱,为深入解析内耳中各种细胞类型的功能及其分子机制提供了强大的工具。本文系统回顾了2015—2024年scRNA‑Seq在内耳研究领域的重要应用,重点阐述了该技术在揭示细胞异质性、追踪内耳发育过程、探究听力损伤机制以及促进细胞再生研究等方面的重要进展。我们展望了scRNA‑Seq技术在野生哺乳动物研究中可能解决的关键科学问题,以及单细胞多组学技术在揭示哺乳动物内耳的适应性进化与分子机制方面的潜力。 展开更多
关键词 细胞异质性 听力损伤 毛细胞再生 发育生物学 适应性进化
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白血病抑制因子(LIF)过表达对大熊猫骨髓间充质干细胞生长的影响
3
作者 李非平 张梦诗 +5 位作者 王神飞 胡贤彪 刘玉良 侯蓉 刘项宇 蔡开来 《兽类学报》 北大核心 2025年第3期295-301,共7页
白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor,LIF)是一种调节细胞生长、增殖和分化的重要因子。骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BM‑MSCs)在组织损伤修复、自身免疫疾病治疗中具有广阔的应用前景,对大熊猫等濒危... 白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor,LIF)是一种调节细胞生长、增殖和分化的重要因子。骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BM‑MSCs)在组织损伤修复、自身免疫疾病治疗中具有广阔的应用前景,对大熊猫等濒危动物的疾病治疗和遗传保护方面有着巨大的潜力。本研究旨在构建大熊猫LIF过表达载体,应用脂质体转染大熊猫骨髓间充质干细胞(Panda bone marrow mesenchymal stem cells,PDBM‑MSCs),研究LIF对PDBM‑MSCs生长的影响。本研究从PDBM‑MSCs cDNA中扩增LIF基因CDS区,无缝克隆连接至pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑GFP+puro过表达载体上,构建LIF过表达重组质粒,利用Lipo3000转染重组质粒至PDBM‑MSCs中。研究结果显示,转染48 h后PDBM‑MSCs表达绿色荧光,转染72 h后分别提取细胞总RNA,反转录成cDNA,经q‑PCR检测发现,转染后LIF过表达组相比阴性对照组LIF的mRNA表达水平显著提高。同时,LIF过表达后能够显著上调细胞周期调控基因CCNB2、CDK7在mRNA水平上的表达,显著下调凋亡基因cas⁃pase3、P53、P16、P21在mRNA水平上的表达;转染72 h后流式检测显示转染LIF过表达重组质粒的PDBM‑MSCs细胞活率显著高于阴性对照组。本研究成功构建大熊猫LIF过表达载体并转染至PDBM‑MSCs中,显著提高细胞活率、抑制凋亡,表明LIF对PDBM‑MSCs起到促进生长抑制凋亡的作用,为LIF在大熊猫中的作用机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 大熊猫 骨髓间充质干细胞 白血病抑制因子 细胞生长
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黑灵芝多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响 被引量：47
4
作者 朱科学 聂少平 +3 位作者 李文娟 余强 张莘莘 谢明勇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第19期351-354,共4页
目的:研究黑灵芝多糖(PSG-1)对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测PSG-1在不同质量浓度、不同时间对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,检测不同质量浓度PSG-1单独作用及其与丝裂原共同作用对小鼠T、... 目的:研究黑灵芝多糖(PSG-1)对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测PSG-1在不同质量浓度、不同时间对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,检测不同质量浓度PSG-1单独作用及其与丝裂原共同作用对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响;用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定白介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:PSG-1在20～160μg/mL质量浓度范围能显著促进脾细胞的增殖,且48h效果最佳;PSG-1能显著增强刀豆蛋白A(ConA)诱导的T淋巴细胞和脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞的增殖作用;并且能显著诱导脾淋巴细胞分泌IL-2和TNF-α。结论:PSG-1能有效的促进脾淋巴细胞的增殖,并与ConA、LPS对T、B淋巴细胞的增殖有协同刺激作用,还可以通过IL-2和TNF-α发挥免疫增强作用。 展开更多
关键词 黑灵芝多糖 脾淋巴细胞 四甲基偶氮唑盐(MTT)法 酶联免疫吸附实验(ELISA) 白介素-2(IL-2) 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)
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羟基红花黄色素A抗谷氨酸氧化性神经损伤的保护作用 被引量：19
5
作者 逯素梅 刘鲁华 +3 位作者 孙涛 张道来 冯玉新 辛华 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第3期232-236,共5页
目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对谷氨酸(Glu)诱导的氧化性神经损伤的保护作用。方法以体外原代培养Wistar胎鼠大脑皮层神经元为实验材料,进行形态学观察,采用噻唑蓝(MTT)比色法、Hoechst33342/PI双荧光探针染色、超氧化物歧化酶(SOD)... 目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对谷氨酸(Glu)诱导的氧化性神经损伤的保护作用。方法以体外原代培养Wistar胎鼠大脑皮层神经元为实验材料,进行形态学观察,采用噻唑蓝(MTT)比色法、Hoechst33342/PI双荧光探针染色、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)含量检测、流式细胞仪分析细胞凋亡率以及免疫细胞化学法检测细胞色素C(CytC)荧光强度,综合评价HSYA对Glu氧化性神经损伤的保护作用。结果与Glu损伤组相比,HSYA能显著提高细胞相对存活率,维持细胞内较高SOD和GSH水平,降低Glu引起的细胞凋亡率及线粒体内CytC向胞质的释放,以160μg/mL浓度的HSYA保护效果最为显著。结论HSYA对Glu氧化性神经损伤有显著的保护作用,其机制与抗氧化、抑制细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 谷氨酸 神经系统疾病 神经元 细胞培养 羟基红花黄色素A
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二氧化硫衍生物引起大鼠血管舒张的细胞信号转导途径 被引量：14
6
作者 孟紫强 李屹 +1 位作者 张海飞 王少栋 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期52-54,共3页
探讨二氧化硫(SO2)及其衍生物(Na2SO3/NaHSO3)引起大鼠血管舒张作用与细胞信号转导的关系.采用放射免疫分析技术测定不同浓度SO2衍生物染毒组和正常组大鼠胸主动脉血管环中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)及前列环素(PGI2)和血栓素(... 探讨二氧化硫(SO2)及其衍生物(Na2SO3/NaHSO3)引起大鼠血管舒张作用与细胞信号转导的关系.采用放射免疫分析技术测定不同浓度SO2衍生物染毒组和正常组大鼠胸主动脉血管环中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)及前列环素(PGI2)和血栓素(TXA2)的代谢产物6酮前列腺素F1α(6KetoPGF1α)和血栓素B2(TXB2)的浓度,以及腺苷酸环化酶(AC)活性.结果表明:①在离体大鼠胸主动脉血管中,cAMP和6KetoPGF1α的含量随二氧化硫衍生物浓度的增高而显著升高,且呈一定的剂量效应关系;②AC活性也随SO2衍生物浓度的增高而增高;③而cGMP的含量在SO2衍生物各浓度组均略微降低,但只有4mmol/L组降低显著;cAMP/cGMP比值在各浓度组与正常对照组(CK)相比均有显著性升高;④TXB2的含量在各浓度组均无明显变化;但6Keto/TXB2比值显著升高.试验得出,SO2衍生物作用于血管组织产生PGI2,后者通过激活AC使胞内cAMP增高,即通过PGI2—AC—cAMP信号转导途径引起血管舒张,血压下降. 展开更多
关键词 二氧化硫 亚硫酸钠 环磷酸腺苷 腺苷酸环化酶 环磷酸鸟苷 前列环素 血栓素A2 主动脉
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海湾扇贝血细胞的表面结构及超微结构 被引量：15
7
作者 张维翥 吴信忠 汪明 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第3期486-494,共9页
通过光镜、扫描电镜和透射电镜的观察对海湾扇贝血细胞的形态、表面结构及超微结构进行了研究。根据细胞的大小、形态结构可将血细胞分成四种类型:Ⅰ型小透明细胞,大小约(2·38±0·08)μm,约占比例30%-35%;Ⅰ型大透明细胞... 通过光镜、扫描电镜和透射电镜的观察对海湾扇贝血细胞的形态、表面结构及超微结构进行了研究。根据细胞的大小、形态结构可将血细胞分成四种类型:Ⅰ型小透明细胞,大小约(2·38±0·08)μm,约占比例30%-35%;Ⅰ型大透明细胞,大小约(4·41±0·33)μm,约占比例15%-25%;Ⅱ型小颗粒细胞,大小约(4·15±0·26)μm,约占比例20%-25%;Ⅱ型大颗粒细胞,大小约(8·26±0·52)μm,约占比例25%-30%。血细胞在血淋巴中的平均密度为(3·75±0·65)×107cell/ml。其中Ⅰ型透明细胞占55·3%,Ⅱ型颗粒细胞占44·7%。表面结构观察结果显示有5种形态:圆形血细胞,梨形或梭形血细胞,松果形血细胞,阿米巴样细胞,大型细胞,表面结构与功能密切相关。透射电镜观察结果表明血细胞主要归属于两大类型:Ⅰ型透明细胞和Ⅱ型颗粒细胞。超微结构显示颗粒细胞的细胞质颗粒可区分成三种类型:Ⅰ型高电子密度颗粒,Ⅱ型低电子密度颗粒和Ⅲ型中等电子密度颗粒,并推测Ⅰ型高电子密度颗粒是细胞吞噬的异物(微生物等)或细胞内的废物(沉积颗粒,衰老的胞器或碎片);Ⅱ型低电子密度颗粒是溶酶体类的胞内分泌颗粒,来源于高尔基复合体或内质网;Ⅲ型中等电子密度颗粒可能是次级溶酶体,由Ⅰ型颗粒向Ⅱ型颗粒融合并注入裂解酶类而形成[动物学报51(3):486-494,2005]。 展开更多
关键词 超微结构 表面结构 血细胞 海湾扇贝 电子密度 颗粒细胞 透射电镜观察 结构与功能 扫描电镜 形态结构 平均密度 结构观察 胞质颗粒 分泌颗粒 溶酶体 Ⅰ型 Ⅱ型 透明 比例 类型 细胞内 微生物 内质网 复合体 显示 中等 Ⅲ型
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新疆犏牛胃肠胰系统5－羟色胺免疫活性细胞的免疫组织化学研究 被引量：36
8
作者 孙宝田 谢云芳 +3 位作者 郑丕芝 邢淑琴 方之平 潘黔生 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期78-81,T005,共5页
用免疫组织化学ＡＢＣ法，显示新疆牛胃肠胰系统ＥＣ细胞──５ＨＴ细胞。从胃到十二指肠前段，细胞的分布密度呈上升趋势；结肠向心段分布最少；而直肠又有回升。ＥＣ细胞在胃肠中大多分布于腺中、下部，但在十二指肠多分布在绒毛底部... 用免疫组织化学ＡＢＣ法，显示新疆牛胃肠胰系统ＥＣ细胞──５ＨＴ细胞。从胃到十二指肠前段，细胞的分布密度呈上升趋势；结肠向心段分布最少；而直肠又有回升。ＥＣ细胞在胃肠中大多分布于腺中、下部，但在十二指肠多分布在绒毛底部和肠腺等处。在胰中，胰岛内ＥＣ细胞较多；胰腺腺泡细胞之间亦见有阳性细胞。消化道各段的ＥＣ细胞大多有胞突，可见２个胞突从细胞体相对两端伸出。细胞大多为梭形、蝌蚪形、锥形或卵圆形。细胞顶部胞突伸向腺腔，底部胞突伸向细胞间隙或基膜。胰腺和胰岛中ＥＣ细胞形状不规则且少见胞突。胃肠胰各处ＥＣ细胞体和胞突中５－ＨＴ免疫反应物明显。；ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｉｓｔｏｌｏｇｙａｎｄＥｍｂｒｙｏｌｏｇｙ，ＳｈｉｈｅｚｉＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ＊，Ｓｈｉｈｅｚｉ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ）ＢｙｕｓｉｎｇｏｆｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌＡＢＣｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅ５－ＨＴ－ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｅｃｅｌｌｓ（ＥＣｃｅｌｌｓ）ｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｉｎｔｈｅｇａｓｔｒｏ－ｅｎｔｅｒｏ－Ｆａｎｃｒｅａｔｉｃ（ＧＥＰ），ｓｙｓｔｅｍｏｆｔｈｅＸｉｎｊｉａｎｇｐｉｅｎｎｉｕ［ｙａｋ（）ｃａｔｔｌｅｈｙｂｒｉｄ? 展开更多
关键词 胃肠胰系统 免疫组织化学 新疆犏牛
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丹参注射液对模拟缺血预适应引起兔心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流变化的影响 被引量：12
9
作者 王腾 唐其柱 +3 位作者 江洪 李建军 黄从新 李庚山 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2005年第6期696-699,共4页
目的:探讨丹参注射液对模拟缺血预适应引起兔心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流(IK(ATP))变化的影响,试图揭示其保护心肌缺血-再灌注损伤,抗缺血性心律失常作用的离子机制。方法:采用酶解法分离兔左心室细胞,按先后顺序,用正常Tyrod... 目的:探讨丹参注射液对模拟缺血预适应引起兔心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流(IK(ATP))变化的影响,试图揭示其保护心肌缺血-再灌注损伤,抗缺血性心律失常作用的离子机制。方法:采用酶解法分离兔左心室细胞,按先后顺序,用正常Tyrode液和模拟缺血液以及模拟缺血液加丹参(750 mg.L-1)灌流,利用膜片钳全细胞记录技术记录不同条件下动作电位和IK(ATP)前后变化。结果:①模拟缺血液灌流后动作电位时程(APD)复极化的50%(APD50)和90%(APD90)分别缩短(与正常组相比P<0.05,n=12);模拟缺血液加丹参灌流,APD50和APD90缩短更加明显,分别缩短了80.46%和71.87%(与正常组相比P<0.01,与模拟缺血液组相比P<0.05,n=12)。静息电位和动作电位幅值无明显改变;②经模拟缺血液灌流,引起IK(ATP)通道的开放,膜电流显示外向性直线形,发生率为58.33%(7/12,P<0.05)。模拟缺血液加丹参,更容易引起IK(ATP)开放,膜电流曲线完全成为直线,诱发率为91.67%(11/12,与正常组和模拟缺血液组相比P<0.05);③Glibenclimide能使这种外向性直线形膜电流恢复为“N”形,证明这种膜电流为IK(ATP);经丹参作用后,改用正常Tyrode液冲洗,心肌细胞上结合的丹参可以被洗脱以及从模拟缺血液中得到恢复。结论:丹参能产生类似心肌缺预适应的病理生理过程,起到了ATP敏感性钾通道开放剂效应,这可能是丹参对心肌缺血预适应的保护作用具有增强效应电生理基础。 展开更多
关键词 丹参注射液 缺血预适应 全细胞膜片钳术 动作电位 ATP敏感性钾电流 心肌细胞
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黄精多糖对衰老小鼠肝线粒体呼吸链酶及DNA聚合酶γ表达的影响 被引量：11
10
作者 张涛 金英 +3 位作者 魏晓东 王明富 王跃新 田丽华 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第16期2076-2077,共2页
目的探讨黄精多糖对衰老小鼠肝线粒体呼吸链酶及DNA聚合酶γ表达的影响。方法选用昆明小鼠,用D-半乳糖致成亚急性衰老模型,并观察药物对小鼠呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ+Ⅲ的活性及DNA聚合酶γmRNA的表达。通过RT-PCR法检测衰老小鼠肝线粒体中... 目的探讨黄精多糖对衰老小鼠肝线粒体呼吸链酶及DNA聚合酶γ表达的影响。方法选用昆明小鼠,用D-半乳糖致成亚急性衰老模型,并观察药物对小鼠呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ+Ⅲ的活性及DNA聚合酶γmRNA的表达。通过RT-PCR法检测衰老小鼠肝线粒体中DNA聚合酶γ基因在mRNA水平的变化。结果黄精多糖可提高衰老小鼠呼吸链酶活性,降低DNA聚合酶γmRNA的表达。结论黄精多糖可以通过改善肝线粒体能量代谢,使DNA聚合酶γmRNA表达减少,提高呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ+Ⅲ而起到延缓衰老的作用。 展开更多
关键词 黄精多糖 线粒体 呼吸链复合体 DNA聚合酶γ
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INS、GLN和LP对体外培养牛脂肪细胞内HSL、LP的mRNA丰度的影响 被引量：6
11
作者 夏成 王哲 +2 位作者 张才 牛淑玲 徐闯 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1312-1318,共7页
为了阐明胰岛素(INS)、胰高血糖素(GLN)和瘦蛋白(LP)对牛脂肪细胞内激素敏感酯酶(HSL)、LP的mRNA表达的调控作用,本试验采用体外原代培养牛脂肪细胞的培养液中添加不同浓度的胰岛素(0、5、10、20、50、100 mmol/L)、胰高血糖素(0、25、... 为了阐明胰岛素(INS)、胰高血糖素(GLN)和瘦蛋白(LP)对牛脂肪细胞内激素敏感酯酶(HSL)、LP的mRNA表达的调控作用,本试验采用体外原代培养牛脂肪细胞的培养液中添加不同浓度的胰岛素(0、5、10、20、50、100 mmol/L)、胰高血糖素(0、25、100、200、5001、000pg/mL)和瘦蛋白(0、2.5、5、10、501、00 ng/mL),培养12 h后,应用建立的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法检测牛脂肪细胞内HSL、LP的mRNA丰度。结果表明:胰岛素对牛脂肪细胞内HSL的mRNA表达呈现剂量依赖性抑制作用,对LP的mRNA表达呈现剂量依赖性促进作用。胰高血糖素对牛脂肪细胞内HSL的mRNA表达呈现剂量依赖性促进作用,对牛脂肪细胞内LP的mRNA表达无作用。瘦蛋白对牛脂肪细胞内HSL的mRNA表达先呈现剂量依赖性促进作用,后呈现抑制作用。但对牛脂肪细胞内LP的mRNA表达呈现剂量依赖性抑制作用。 展开更多
关键词 内分泌因子 体外培养 新生牛脂肪细胞 FQ-PCR HSL MRNA丰度 LP MRNA丰度
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大鼠睾丸局部热作用对生精细胞Bcl-2及Bax蛋白表达的影响 被引量：15
12
作者 许多 朱伟杰 +1 位作者 王自能 秦达念 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期268-271,共4页
目的:探讨睾丸局部热作用对大鼠生精细胞凋亡调节蛋白Bcl-2及Bax的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠40只,随机分热处理组和对照组,热处理组按热处理后0.5d、1d、3d和6d随机分成4个亚组(n=6),每个亚组相应设立对照组(n=4)。应用免疫组... 目的:探讨睾丸局部热作用对大鼠生精细胞凋亡调节蛋白Bcl-2及Bax的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠40只,随机分热处理组和对照组,热处理组按热处理后0.5d、1d、3d和6d随机分成4个亚组(n=6),每个亚组相应设立对照组(n=4)。应用免疫组织化学方法检测Bcl-2和Bax在生精细胞的表达。结果:与对照组相比较,热作用后各组Bcl-2阳性细胞表达率及染色阳性细胞Bcl-2含量均显著下降(P<0.01),热作用后各组染色阳性细胞Bax含量均显著增高(P<0.01),除6d组Bax阳性细胞表达率显著下降外(P<0.01),其它各组Bax阳性细胞表达率无差别(P>0.05)。热作用后Bax阳性信号重新分布,从对照组分布在胞浆变成热作用后分布在核周及核。结论:热作用诱导睾丸生精细胞Bcl-2表达下降,Bax表达增高且重新分布。Bcl-2及Bax基因与热诱导生精细胞凋亡发生密切相关。 展开更多
关键词 Bcl—2 BAX 热作用 生精细胞 大鼠
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猪脾铁蛋白电子隧道特性及释放铁途径的研究 被引量：16
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作者 黄河清 林庆梅 +3 位作者 张凤章 陈中 雒占波 许良树 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期10-14,共5页
维生素Ｃ和连二亚硫酸钠混合后只能加速猪脾铁蛋白释放铁的速率，并不能使铁蛋白释放铁的动力学途径由复杂转化为简单．而单独维生素Ｃ却能利用蛋白壳上的电子隧道传递电子，迫使铁蛋白以二分之一的反应级数方式释放整体铁核的铁并起着... 维生素Ｃ和连二亚硫酸钠混合后只能加速猪脾铁蛋白释放铁的速率，并不能使铁蛋白释放铁的动力学途径由复杂转化为简单．而单独维生素Ｃ却能利用蛋白壳上的电子隧道传递电子，迫使铁蛋白以二分之一的反应级数方式释放整体铁核的铁并起着抗磷酸盐阻遏释放铁速率的作用，简化释放铁的途径．对维生素Ｃ参与铁蛋白释放铁的机理进行了讨论． 展开更多
关键词 猪脾铁蛋白 电子隧道 动力学 蛋白壳调节作用
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牛磺酸对大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的影响及作用机理初探 被引量：8
14
作者 冯颖 杨建成 +3 位作者 石娇 杨群辉 蒋燕 胡建民 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1293-1296,共4页
将雄性Wistar大鼠（220～250g）的睾丸间质细胞混悬液用不连续梯度（5％、30％、58％、70％）Percoll分离液分离，在细胞培养液中分别加入牛磺酸及促性腺激素（HCG）、雄烯二酮、孕酮、cAMP进行培养，用放射免疫分析方法测定作用24h后... 将雄性Wistar大鼠（220～250g）的睾丸间质细胞混悬液用不连续梯度（5％、30％、58％、70％）Percoll分离液分离，在细胞培养液中分别加入牛磺酸及促性腺激素（HCG）、雄烯二酮、孕酮、cAMP进行培养，用放射免疫分析方法测定作用24h后培养液中睾酮含量。结果表明，牛磺酸可使睾丸间质细胞分泌睾酮的能力显著增加；能增加HCG和cAMP诱导的睾酮分泌；能促进雄烯二酮和孕酮向睾酮的转化。牛磺酸能增加睾丸间质细胞睾酮的分泌，并可能在类固醇合成的多个环节中都起到了一定的促进作用。 展开更多
关键词 牛磺酸 睾丸间质细胞 睾酮 大鼠
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氨态氮、亚硝态氮对罗氏沼虾血细胞及超微结构的影响 被引量：15
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作者 胡义波 王玥 姜乃澄 《浙江大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期691-697,共7页
氨态氮和亚硝态氮是虾类养殖环境中最主要的外来和自身污染物.在1 mg/L非离子氨态氮和1 mg/L亚硝态氮的作用条件下,罗氏沼虾总血细胞计数均有减少,且亚硝态氮的短期作用大于氨态氮;透射电镜观察结果表明,在氨态氮和亚硝态氮作用前后,罗... 氨态氮和亚硝态氮是虾类养殖环境中最主要的外来和自身污染物.在1 mg/L非离子氨态氮和1 mg/L亚硝态氮的作用条件下,罗氏沼虾总血细胞计数均有减少,且亚硝态氮的短期作用大于氨态氮;透射电镜观察结果表明,在氨态氮和亚硝态氮作用前后,罗氏沼虾血细胞超微结构发生改变,透明细胞、半颗粒细胞和颗粒细胞这三种血细胞的粗面内质网、核糖体和线粒体数量减少,其中以氨态氮作用引起的血细胞超微结构的变化幅度较大.这说明1 mg/L的非离子氨态氮和亚硝态氮对罗氏沼虾总血细胞计数和超微结构具有显著的影响. 展开更多
关键词 罗氏沼虾 氨态氮 亚硝态氮 血细胞 超微结构
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流式细胞术检测脂多糖对罗氏沼虾血细胞活性和免疫功能的影响 被引量：9
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作者 冼健安 王安利 +1 位作者 苗玉涛 伍娟 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期170-177,共8页
1引言革兰氏阴性菌是虾类的一大致病菌,深入了解虾类对革兰氏阴性菌的免疫防御机制以及革兰氏阴性菌对虾类的致病机理,对虾类健康养殖有着重要的科学和实践意义。脂多糖（lipopolysac-charide,LPS）,即内毒素,是革兰氏阴性菌细胞壁最外... 1引言革兰氏阴性菌是虾类的一大致病菌,深入了解虾类对革兰氏阴性菌的免疫防御机制以及革兰氏阴性菌对虾类的致病机理,对虾类健康养殖有着重要的科学和实践意义。脂多糖（lipopolysac-charide,LPS）,即内毒素,是革兰氏阴性菌细胞壁最外层的一层较厚的类脂多糖类物质,具有很强的抗原性和毒性[1-2]。 展开更多
关键词 脂多糖 罗氏沼虾 血细胞 免疫反应 流式细胞术
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木豆叶水提物对兔破骨细胞样细胞的形成及其骨吸收功能的影响 被引量：12
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作者 张金超 王立伟 +4 位作者 孙静 王书香 申世刚 陈航 王鹏 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2009年第1期45-50,共6页
通过对骨髓单核细胞诱导分化形成的抗酒石酸酸性磷酸酯酶（TRAP）阳性多核巨细胞计数，研究了木豆叶水提物对1，25-二羟基维生素D3诱导兔骨髓单核细胞分化形成破骨细胞样细胞的影响．通过破骨细胞样细胞与骨片共培养的方法，用显微摄影... 通过对骨髓单核细胞诱导分化形成的抗酒石酸酸性磷酸酯酶（TRAP）阳性多核巨细胞计数，研究了木豆叶水提物对1，25-二羟基维生素D3诱导兔骨髓单核细胞分化形成破骨细胞样细胞的影响．通过破骨细胞样细胞与骨片共培养的方法，用显微摄影结合计算机图像分析测定骨吸收造成的陷窝数目及表面积，研究了其对破骨细胞样细胞骨吸收功能的影响．结果表明，在0．01～100mg／L质量浓度内，木豆叶水提物能够剂量依赖性地抑制破骨细胞样细胞的形成（P〈0．05），同时也明显抑制破骨细胞样细胞的骨吸收活性（P〈0.05），具体袁现在，与对照组比较，其骨吸收陷窝数目和表面积明显减少，但没有呈现出质量浓度依赖性，木豆叶水提物对破骨细胞样细胞骨吸收指数的影响的结果给予了进一步的证实．这提示木豆叶水提物对骨质疏松症患者可能有一定的疗效． 展开更多
关键词 木豆叶 破骨细胞样细胞 骨吸收
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硬骨鱼免疫系统的组成与免疫应答机制研究进展 被引量：18
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作者 王卫卫 吴谡琦 +1 位作者 孙修勤 樊廷俊 《海洋科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期257-265,共9页
硬骨鱼是最低等的兼具固有与适应性免疫系统的脊椎动物。文章分别就硬骨鱼免疫系统的组织结构与细胞组成、主要免疫细胞的特性与功能以及抗原诱导的固有与适应性免疫应答等方面概括了近年来的主要研究进展。在与哺乳类等高等动物免疫系... 硬骨鱼是最低等的兼具固有与适应性免疫系统的脊椎动物。文章分别就硬骨鱼免疫系统的组织结构与细胞组成、主要免疫细胞的特性与功能以及抗原诱导的固有与适应性免疫应答等方面概括了近年来的主要研究进展。在与哺乳类等高等动物免疫系统比较异同的基础上,概括出硬骨鱼免疫系统所具有的基本特征:1)鱼类在免疫基因、细胞与功能上较为保守,在免疫器官形态和结构上差异较大;2)鱼类具有完全的固有与获得性免疫应答体系,但其固有免疫作用可能更为重要,主要表现在胚系基因编码受体的种类与抗原识别范围更广,应答启动条件相对较低而免疫效应则相对强化;3)鱼类获得性免疫组成与结构较为简单,获得性免疫应答的发生相对滞后,应答效能较低。硬骨鱼免疫系统的组成与功能特性与其自身所处的环境和变温性质密不可分。 展开更多
关键词 鱼类 免疫系统 综述
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锯缘青蟹促雄腺进行全浆分泌的证据 被引量：5
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作者 叶海辉 李少菁 +2 位作者 黄辉洋 王桂忠 林琼武 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期431-433,共3页
采用透射电镜技术,对锯缘青蟹(Scyllaserrata)促雄腺细胞的分泌活动进行了观察。结果表明,腺细胞具有2种类型:A型细胞核内常染色质丰富,具有大量的扁平嵴的线粒体、粗面内质网与核糖体,A型细胞进行分泌时,细胞质大量排出,属于全浆分泌方... 采用透射电镜技术,对锯缘青蟹(Scyllaserrata)促雄腺细胞的分泌活动进行了观察。结果表明,腺细胞具有2种类型:A型细胞核内常染色质丰富,具有大量的扁平嵴的线粒体、粗面内质网与核糖体,A型细胞进行分泌时,细胞质大量排出,属于全浆分泌方式;B型细胞异染色质绕核内膜分布,仅见极少量的细胞器或细胞质完全消失。B型细胞为A型细胞完成分泌后的存在形式。本研究为甲壳动物促雄腺的全浆分泌活动提供了直接的证据。 展开更多
关键词 锯缘青蟹 促雄腺 全浆分泌 超微结构 腺细胞 细胞器 细胞质
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大鼠脂肪组织源性间充质干细胞的分离及向心肌细胞的诱导分化 被引量：10
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作者 王燕 陈光辉 +1 位作者 邵建华 田新利 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第7期578-581,共4页
目的:探讨脂肪组织源性间充质干细胞体外分离培养的方法并将其向心肌细胞方向诱导分化。方法:无菌条件下获取2月龄SD大鼠腹部肠系膜脂肪组织,0.08%胰酶消化分离出单个核细胞,接种7～10d后形成单层贴壁长梭形细胞。0.25%胰酶消化传代,第... 目的:探讨脂肪组织源性间充质干细胞体外分离培养的方法并将其向心肌细胞方向诱导分化。方法:无菌条件下获取2月龄SD大鼠腹部肠系膜脂肪组织,0.08%胰酶消化分离出单个核细胞,接种7～10d后形成单层贴壁长梭形细胞。0.25%胰酶消化传代,第3代细胞用于鉴定细胞表面分子及诱导分化。浓度为10μmol/L5-氮胞苷与分离细胞共同培养24h,3周后应用抗desmin及抗α-actnin抗体对诱导细胞进行免疫化学鉴定。结果:所分离细胞约90%表达间充质干细胞表面抗原CD13、CD44。5-氮胞苷诱导后3周,所培养的细胞形成desmin及α-actnin染色阳性的心肌细胞团。结论:体外通过消化法可从脂肪组织中分离出大量间充质干细胞,这些细胞经5-氮胞苷诱导后分化为心肌细胞。 展开更多
关键词 间充质干细胞 脂肪组织 细胞培养 心肌细胞 诱导分化
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