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一种快速高效的中药材DNA提取方法的建立和优化
1
作者 尹显梅 陈顺璐 +3 位作者 陈翔 钱思洁 尹鸿翔 蒋桂华 《成都中医药大学学报》 2026年第1期57-62,81,共7页
目的:建立一种快速、高效的DNA提取方法,解决中药材成分复杂,DNA提取困难的问题,以便于利用DNA分子鉴定技术实现中药材及其成药当中原料药的真伪鉴定。方法:针对中药材来源多样,成分复杂的特点,对传统CTAB法和试剂盒法进行改进和优化,... 目的:建立一种快速、高效的DNA提取方法,解决中药材成分复杂,DNA提取困难的问题,以便于利用DNA分子鉴定技术实现中药材及其成药当中原料药的真伪鉴定。方法:针对中药材来源多样,成分复杂的特点,对传统CTAB法和试剂盒法进行改进和优化,考察药材粉末的CTAB加入比例、蛋白酶K和α-高聚淀粉酶的加入量以及水浴温度和水浴时间。结果:当加入药材粉末15 mg,CTAB 300 m L,蛋白酶K(20 mg/m L) 20μL、α-高聚淀粉酶(75 mg/m L) 20μL,95℃水浴1-5 min,DNA提取效率最高。结论:本文创新性采用复合酶解体系DNA提取法,相比于传统CTAB法和试剂盒法,大大减少了提取时间,提高了提取效率,适用于根茎类、花叶类等各类中药材,并且在富含淀粉的中药材的DNA提取方法中优势显著,为中药材的分子鉴定奠定了基础。 展开更多
关键词 中药材 DNA提取 蛋白酶K α-高聚淀粉酶 分子鉴定
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食品香菇源性成分荧光PCR检测方法研究
2
作者 苏丽娜 李凤新 +2 位作者 吴杰 曾宪东 郑剑 《生物技术进展》 2026年第1期149-156,共8页
香菇具有重要的食药用价值,市场上掺假的情况屡有发生,传统的形态学鉴定方法难以对香菇深加工产品进行鉴定,建立香菇源性成分分子生物学检测方法具有重要意义。根据香菇线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1(nicotinamide adenine d... 香菇具有重要的食药用价值,市场上掺假的情况屡有发生,传统的形态学鉴定方法难以对香菇深加工产品进行鉴定,建立香菇源性成分分子生物学检测方法具有重要意义。根据香菇线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1(nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase subunit 1, ND1)基因序列设计特异性引物和探针,建立食品中香菇源性成分实时荧光PCR检测方法。结果表明,方法仅对花菇、厚菇、薄菇、野生香菇有扩增,对其他常见的28种食用菌均无交叉反应,方法的检出限分别为100 copies·μL^(-1)和0.05%(质量分数),且具有很好的重复性,实际应用检测准确。该方法特异性好、灵敏度高,稳定且实用,可以满足食品中香菇源性成分的检测需求。 展开更多
关键词 香菇 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1 实时荧光PCR 源性成分检测
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弗栎象甲病原微生物的分离鉴定及致病性测定
3
作者 耿显胜 方健 +4 位作者 彭桂彩 黎子建 应玥 张亚波 舒金平 《江苏林业科技》 2025年第2期10-17,共8页
弗栎象甲是危害弗吉尼亚栎的重要种实害虫。为了寻找对弗栎象甲具有高致病性的昆虫病原微生物,该研究采用组织分离法对罹病弗栎象甲病原微生物进行分离,通过形态学并结合分子生物学方法对病原微生物进行物种鉴定,采用扩增子测序法分析... 弗栎象甲是危害弗吉尼亚栎的重要种实害虫。为了寻找对弗栎象甲具有高致病性的昆虫病原微生物,该研究采用组织分离法对罹病弗栎象甲病原微生物进行分离,通过形态学并结合分子生物学方法对病原微生物进行物种鉴定,采用扩增子测序法分析病原细菌的来源,采用生物测定法评价病原微生物的致病性。从弗栎象甲体内分离到病原细菌和病原真菌各1种。综合分析分离菌株的形态特征、培养性状和rDNA序列,确定病原细菌为粘质沙雷氏菌,病原真菌为球孢白僵菌。扩增子分析发现,粘质沙雷氏菌仅以低丰度存在于弗栎象甲幼虫体内。生物测定结果表明,弗栎象甲幼虫取食获得FL21菌株后6 d的半数致死浓度LC_(50)为4.71 cfu/mL;而采用浸渍法对弗栎象甲幼虫接种FLBJJ4菌株,接种后13 d的半数致死浓度LC_(50)为1.40×10~3孢子/mL。分离的粘质沙雷氏菌和球孢白僵菌对弗栎象甲幼虫均具有较高的致病性,开发利用价值较高,有望应用于弗栎象甲的生物防治。 展开更多
关键词 弗吉尼亚栎 橡子 弗栎象甲 粘质沙雷氏菌 球孢白僵菌 累计死亡率
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核糖核苷酸还原酶调节亚基M2与HIF-1α/iNOS/VEGF信号通路在肝细胞癌铁死亡中的相互作用及索拉非尼的治疗潜力
4
作者 刘泓辰 赵鸿宇 +5 位作者 谢天航 梁畅敏 葛堂栋 李晶 张鹏霞 朴金花 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第12期1810-1822,共13页
细胞周期调节基因核糖核苷酸还原酶调节亚基M2(ribonucleotide reductase regulatory subunit M2,RRM2)在多种癌症中能够引发细胞衰老、细胞周期停滞或细胞死亡。尽管已有研究表明RRM2在癌症细胞中发挥重要作用,但关于RRM2通过索拉非尼(... 细胞周期调节基因核糖核苷酸还原酶调节亚基M2(ribonucleotide reductase regulatory subunit M2,RRM2)在多种癌症中能够引发细胞衰老、细胞周期停滞或细胞死亡。尽管已有研究表明RRM2在癌症细胞中发挥重要作用,但关于RRM2通过索拉非尼(sorafenib,Sor)调控铁死亡的具体机制仍缺乏系统的阐述。本研究旨在探讨RRM2通过索拉非尼诱导肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞发生铁死亡的作用机制。分别使用不同浓度的索拉非尼(0,10,15,20,25,30μmol/L)干预人肝母细胞瘤细胞(HepG2)和人肝胆癌细胞(Huh7),随后通过CCK8法检测加用索拉非尼对HepG2细胞和Huh7细胞增殖抑制的影响,确定建立HepG2和Huh7细胞模型的最适浓度,实验分组PCDH组(转染空载质粒的细胞,作为过表达对照)、PCDH+sor组(转染空载质粒联用11μmol/L索拉非尼干预细胞)、OE-RRM2组(过表达细胞中的RRM2)、OE-RRM2+sor组(转染RRM2过表达载体联用11μmol/L索拉非尼干预细胞)、SINC组(转染空载体的细胞,作为敲低对照)、SIRRM2-1、SIRRM2-2、SIRRM2-3组(运用siRNA敲低细胞中的RRM2)。CCK-8和平板克隆实验结果表明,敲低RRM2导致细胞增殖能力降低,而过表达RRM2与上述结果相反(P<0.05);谷胱甘肽(glutathione,GSH)结果表明,敲低RRM2导致细胞GSH含量降低,而过表达RRM2与上述结果相反(P<0.05);胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的结果表明,敲低RRM2导致细胞ROS含量升高,而过表达RRM2与上述结果相反(P<0.05);线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)的结果表明,敲低RRM2导致细胞MMP升高,而过表达RRM2与上述结果相反(P<0.05);qRT-PCR及Western印迹的结果表明,敲低RRM2导致谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)和GSH合成酶(glutathione synthetase,GSS)及缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)/诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因表达水平降低,而RRM2过表达组与上述结果相反(P<0.05)。免疫荧光(immunofluorescence,IF)的结果表明,敲低RRM2导致HIF-1α蛋白的表达水平降低(P<0.05)。以上研究结果表明,肝癌细胞内的RRM2可以通过索拉非尼的影响来激活,进而抑制肝癌细胞发生铁死亡。同时,RRM2可能通过激活HIF-1α/iNOS/VEGF信号通路抑制细胞铁死亡促进HCC恶性进展。 展开更多
关键词 核糖核苷酸还原酶调节亚基M2 铁死亡 索拉非尼 肝细胞癌 脂质过氧化
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蟾毒它灵通过抑制DNA损伤修复增加胰腺癌细胞对阿霉素化疗敏感性
5
作者 尹明文 韩书婷 +4 位作者 薛蛟 苗筠杰 赵诗颖 于泽 金晶 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第10期1410-1420,共11页
胰腺癌已成为全球范围内最具挑战性的恶性肿瘤之一,其对药物的高度耐药性是导致化疗失败的主要因素。因此,提高胰腺癌对化疗敏感性成为当前研究的重点,本研究探讨了蟾毒它灵(bufotaline,BT)的抗肿瘤作用,它是一种从中药蟾蜍中提取的蟾... 胰腺癌已成为全球范围内最具挑战性的恶性肿瘤之一,其对药物的高度耐药性是导致化疗失败的主要因素。因此,提高胰腺癌对化疗敏感性成为当前研究的重点,本研究探讨了蟾毒它灵(bufotaline,BT)的抗肿瘤作用,它是一种从中药蟾蜍中提取的蟾蜍甾二烯类化合物,具有显著的抗肿瘤活性。我们重点研究蟾毒它灵在增强胰腺癌细胞对阿霉素(adriamycin,ADR)化疗敏感性方面的潜力,并阐明了其潜在的分子机制。通过CCK-8及集落形成实验证明,蟾毒它灵抑制化疗药阿霉素诱导的胰腺癌细胞Patu-8988T、Aspc-1和Patu-8988S的存活。并且发现使用蟾毒它灵处理阿霉素胰腺癌耐药细胞可以将IC_(50)降低到正常胰腺癌细胞水平。采用蛋白质免疫印迹技术、免疫荧光、彗星实验和TUNEL检测DNA损伤程度,结果显示,蟾毒它灵促进阿霉素诱导的胰腺癌细胞DNA损伤。此外,利用RNA-seq分析胰腺癌细胞Patu-8988T在阿霉素单独处理及阿霉素与蟾毒它灵联合处理后的基因表达变化,并通过qRT-PCR检测发现,蟾毒它灵可以下调DNA损伤修复蛋白质NBS 1和RAD 50的基因表达。同时利用蛋白质免疫印迹检测进一步研究发现,蟾毒它灵抑制DNA损伤应答通路相关修复蛋白质的表达,并且通过免疫荧光实验发现,蟾毒它灵也能阻断ATM/CHK2信号通路的激活。最后,利用裸鼠皮下移植瘤模型发现,蟾毒它灵与阿霉素联合治疗可抑制胰腺癌生长。综上所述,蟾毒它灵促进了阿霉素诱导的胰腺癌细胞化疗敏感性;阿霉素联合蟾毒它灵治疗通过下调NBS 1和RAD 50的基因表达,降低DNA损伤应答通路的修复蛋白质水平,进而阻断ATM/CHK2介导的DNA损伤应答(DNA damage repair,DDR)信号通路,延缓DNA损伤修复。 展开更多
关键词 胰腺癌 DNA损伤修复 蟾毒它灵 化疗敏感性
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基于层次分析法的DNA存储方案评价模型构建与实证分析
6
作者 毕昆 徐琪 +2 位作者 姬正清 赵祥伟 陆祖宏 《生物信息学》 2025年第2期122-130,共9页
DNA存储作为一种稳定性强、存储密度高、能耗低的数据存储方式,在传统存储介质逐渐无法满足数据存储需求的当下,有望解决海量数据存储困境。目前,科学家已提出多种DNA存储方案,然而由于研究人员的学科背景领域以及关注重点不同,导致这... DNA存储作为一种稳定性强、存储密度高、能耗低的数据存储方式,在传统存储介质逐渐无法满足数据存储需求的当下,有望解决海量数据存储困境。目前,科学家已提出多种DNA存储方案,然而由于研究人员的学科背景领域以及关注重点不同,导致这些方案的评价指标不尽相同,亟需一套能够综合评判DNA存储方案优劣的模型。本文总结了DNA存储领域的主要质量评价指标,通过专家问卷调查法统计获得了各指标的权重,基于层次分析法构建了DNA存储方案评价模型,并利用此模型对近年来具有突破性进展的DNA存储方案进行了评估分析。结果表明,Organick的随机大规模DNA存储访问技术综合得分更高,与其他方案相比在信息检索等方面有一定优势。本文对于DNA存储方案的选择提供可借鉴的框架与思路,也为DNA存储的性能提升给出对策和建议。 展开更多
关键词 DNA存储 层次分析法 指标 评价模型
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DNA损伤修复通路因子53BP1的功能
7
作者 尤放 曹流 王美莲 《解剖科学进展》 2025年第1期144-148,共5页
DNA损伤应答(DNA damage response, DDR)在生命体遗传稳定性(尤其是DNA序列完整性)的维持中扮演着核心角色。53BP1作为该信号通路的关键效应因子,在DNA损伤发生后迅速被募集至损伤部位,对于控制DSBs修复、促进NHEJ、抑制HDR所需的5′端... DNA损伤应答(DNA damage response, DDR)在生命体遗传稳定性(尤其是DNA序列完整性)的维持中扮演着核心角色。53BP1作为该信号通路的关键效应因子,在DNA损伤发生后迅速被募集至损伤部位,对于控制DSBs修复、促进NHEJ、抑制HDR所需的5′端切除至关重要,53BP1亦可影响基因表达,其基因调控活动可影响骨髓干细胞的分化发育。此外,53BP1在B淋巴细胞所发生的特定基因组改变中也发挥潜在功能。当中心体缺失后,53BP1亦可起到稳定p53的作用。 展开更多
关键词 DNA损伤应答 DSBs修复 NHEJ HDR DNA损伤修复
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基于网络最短路径的miRNA对疾病异常细胞功能影响的量化方法
8
作者 鲍振申 李先彬 +1 位作者 刘晓晖 花丽 《广州大学学报(自然科学版)》 2025年第6期69-77,共9页
miRNA对凋亡、血管生成等细胞功能有关键调控作用,而癌症等复杂疾病的发生发展与细胞功能的异常密切相关。因此,确定miRNA对疾病异常细胞功能的影响,可以帮助理解疾病发生发展的相关机制、发现疾病治疗新靶点。尽管传统分子生物学实验... miRNA对凋亡、血管生成等细胞功能有关键调控作用,而癌症等复杂疾病的发生发展与细胞功能的异常密切相关。因此,确定miRNA对疾病异常细胞功能的影响,可以帮助理解疾病发生发展的相关机制、发现疾病治疗新靶点。尽管传统分子生物学实验能够验证miRNA与疾病异常细胞功能的关系,但其存在实验周期长、成本高昂等显著局限性。为了解决这个问题,文章通过计算差异表达的miRNA与功能基因之间的最短路径,提出一种量化miRNA对疾病异常细胞功能影响的方法,即SP-MFA。将SP-MFA分别应用于肺癌及结直肠癌数据集,可识别疾病异常功能相关的miRNA。经过文献检索、KEGG通路富集分析等方式分析得到的结果显示,SP-MFA可以有效地识别与疾病异常细胞功能相关的miRNA。 展开更多
关键词 MIRNA 疾病 细胞功能 最短路径
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24螺旋DNA折纸结构的高效自组装与单分散性调控研究
9
作者 郭小芳 王雅 +1 位作者 詹童凯 方维娜 《高分子学报》 北大核心 2025年第10期1727-1735,共9页
DNA折纸术利用单链DNA骨架与订书钉链的精确退火,可高效构建具有原子级精度的二维/三维纳米结构,在生物传感、纳米光子学和靶向药物递送等领域展现出重要应用前景.然而,折纸结构间的非特异性聚集问题严重制约了其功能化应用.本研究以24... DNA折纸术利用单链DNA骨架与订书钉链的精确退火,可高效构建具有原子级精度的二维/三维纳米结构,在生物传感、纳米光子学和靶向药物递送等领域展现出重要应用前景.然而,折纸结构间的非特异性聚集问题严重制约了其功能化应用.本研究以24螺旋(24-helix bundles,24HB)DNA折纸为模型体系,通过优化Mg^(2+)浓度和退火梯度等合成条件,成功制备出结构完整性达96%的目标产物,进一步探究了末端单链刷修饰和骨架环设计两种策略对24 HB DNA折纸单分散性的影响.结果表明,在24HB DNA折纸单末端修饰聚T(4 nt或7 nt)单链刷可显著提升体系单分散性,其中7 nt单链刷的分散效果优于4 nt.双端骨架环设计(单分散性72%)优于单端骨架环设计(42%),其效果与7 nt单末端聚T单链刷(78%)相当.最后,在双端骨架环的基础上,构建骨架环-末端单链刷复合策略,使单分散性达到87%.该研究不仅建立了DNA折纸高纯度制备的标准化方案,更为功能性DNA纳米器件的精准组装提供了普适性设计准则. 展开更多
关键词 DNA折纸 自组装 单分散性 末端钝化
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蛋白质O-糖基化与恶性肿瘤DNA损伤修复
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作者 李文倩 郭静雅 杭庆雷 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第10期1478-1488,共11页
O-糖基化(包括黏蛋白型O-糖基化和O-GlcNAc糖基化)作为一种关键的蛋白质翻译后修饰(post-translational modification,PTM),通过在苏氨酸或丝氨酸残基上添加糖链分子,调节蛋白质功能、稳定性和亚细胞定位,参与细胞信号传导、代谢调控和... O-糖基化(包括黏蛋白型O-糖基化和O-GlcNAc糖基化)作为一种关键的蛋白质翻译后修饰(post-translational modification,PTM),通过在苏氨酸或丝氨酸残基上添加糖链分子,调节蛋白质功能、稳定性和亚细胞定位,参与细胞信号传导、代谢调控和应激反应等生物学过程。DNA损伤是指细胞在内源性(例如代谢产物、复制错误等)或外源性因素(例如射线、化学物质等)作用下,基因组的完整性受到破坏,进而引发癌症、衰老或遗传性疾病。机体针对DNA损伤,进化出DNA损伤应答(DNA damage response,DDR)系统,通过协调复杂的蛋白质网络,用以检测DNA损伤并促进修复。研究表明,O-糖基化修饰可以通过影响DNA损伤修复相关蛋白质的活性、定位和相互作用调控DDR。然而,O-糖基化修饰参与DDR的详细机制有待阐明,为此,本文总结了黏蛋白型O-糖基化、O-GlcNAc糖基化的生物合成过程和DDR级联反应步骤,针对目前肿瘤细胞中O-糖基化与DNA损伤应答的研究现况予以回顾,并基于此提出机制研究新的展望,以期为开发新的肿瘤靶点和肿瘤治疗提供依据。 展开更多
关键词 黏蛋白型O-糖基化 O-GlcNAc糖基化 DNA损伤 肿瘤
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云南普洱茶特征成分的功能与毒理学评价 被引量：85
11
作者 龚加顺 陈文品 +2 位作者 周红杰 董兆君 张以芳 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期201-210,共10页
研究了普洱茶特征成分茶褐素、茶多糖与蛋白质等的复合体对昆明种小白鼠的抗疲劳、降胆固醇以及毒理学效应。实验结果显示:普洱茶特征成分提取物能显著提高小白鼠的抗疲劳作用和降低小鼠血液中的胆固醇含量,且优于普洱茶水提物。普洱茶... 研究了普洱茶特征成分茶褐素、茶多糖与蛋白质等的复合体对昆明种小白鼠的抗疲劳、降胆固醇以及毒理学效应。实验结果显示:普洱茶特征成分提取物能显著提高小白鼠的抗疲劳作用和降低小鼠血液中的胆固醇含量,且优于普洱茶水提物。普洱茶特征成分提取物经口LD50>10g/kg,属实际无毒级物质。Ames实验中加S9混合液和不加S9混合液的各剂量组回变菌落数与阴性对照差别无统计学意义,且无剂量反应关系。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验与阴性对照组比较差别无统计学意义。普洱茶特征成分提取物在500～5000μg/ml浓度范围内未见诱发CHL细胞染色体畸变率增高。这说明,在实验条件下,普洱茶特征成分提取物属实际无毒级,也未见有致突变作用。 展开更多
关键词 普洱茶 特征成分 抗疲劳 降胆固醇 急性毒性 致突变性
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福尔马林保存的动物标本基因组DNA的提取方法 被引量：41
12
作者 徐来祥 张知彬 +3 位作者 宋铭晶 曹小平 王福生 张春光 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期264-269,共6页
从在福尔马林长期保存的动物物标本中提取基因组DNA用于分子生物学研究一直是一个未得到彻底解决的难题。本文提出了一种从浸泡在福尔马林的大仓鼠肝脏和日本鳗鲡肌肉标本中提取基因组DNA的新方法。取浸泡于福尔马林中的大仓鼠肝脏或日... 从在福尔马林长期保存的动物物标本中提取基因组DNA用于分子生物学研究一直是一个未得到彻底解决的难题。本文提出了一种从浸泡在福尔马林的大仓鼠肝脏和日本鳗鲡肌肉标本中提取基因组DNA的新方法。取浸泡于福尔马林中的大仓鼠肝脏或日本鳗鲡肌肉适量 ,用PBS溶液冲洗 ,放在灭菌的吸水纸上将其揩干 ,于超净工作台内用无菌剪刀将材料剪成 5 0mg的小块 ,放入PBS液浸泡 12～ 2 4h ;然后转入 70 %的乙醇中处理 12～ 2 4h。依次换入下列梯度酒精中处理 :80 %乙醇 ,2h ,重复一次 ;90 %乙醇 ,2h ,重复一次 ;95 %乙醇 ,2h ,重复一次 ;10 0 %乙醇 ,1h ,重复一次。然后将材料放入 1/ 2倍的PBS液中浸泡 12h ,其间更换一次溶液。提取方法参考Sambroock等人 (1989) ,加蛋白酶K的量按标准量 (10 0 μg/mL) ,在 5 0～ 5 6℃温浴 3～ 6h处理过程中 ,不断轻摇混匀 ,视消化效果可以重复加入标准量的 1/ 2倍蛋白酶K进行消化 ,直至将材料完全消化为止 ;酚氯仿抽提最后一次的上清液移入透析袋中透析 ;沉淀DNA时 ,在 - 2 0℃下 2 0min效果为宜。该方法主要特点在于对标本进行预处理 ,在保证不使DNA进一步降解的前提下 ,首先去除标本中所含的福尔马林溶液的成分 ,然后利用改进的酚氯仿抽提法提取该类标本的基因组DNA 。 展开更多
关键词 保存 提取方法 福尔马林 动物标本 基因组DNA 大仓鼠 日本鳗鲡
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简单快速的DNA银染和胶保存方法 被引量：221
13
作者 许绍斌 陶玉芬 +1 位作者 杨昭庆 褚嘉祐 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期335-336,共2页
本文介绍了一套简单快速的DNA银染以及胶保存的方法 ,整个过程仅需 10～ 15分钟 ,而且背景浅 ,条带清楚 ,灵敏度高 ,稳定性好。胶保存采用双层玻璃纸夹心法 ,可长久地保存胶显色时的原貌。以常规PAG胶检测和HLA的SSCP分型为例 ,利用该... 本文介绍了一套简单快速的DNA银染以及胶保存的方法 ,整个过程仅需 10～ 15分钟 ,而且背景浅 ,条带清楚 ,灵敏度高 ,稳定性好。胶保存采用双层玻璃纸夹心法 ,可长久地保存胶显色时的原貌。以常规PAG胶检测和HLA的SSCP分型为例 ,利用该套方法进行了银染以及胶的保存 ,均得到了满意的结果。该方法具有推广价值。 展开更多
关键词 DNA银染 胶保存方法 PAG SSCP DNA样品
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云南古茶树(园)遗传多样性的ISSR分析 被引量：41
14
作者 季鹏章 张俊 +4 位作者 王平盛 黄兴奇 许玫 唐一春 梁名志 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期271-279,共9页
云南省保存有20多万亩古茶园，这些古茶树（阿萨姆变种Camellia sinensis vat．assamica）种质资源可能含有各种优良基因，对未来茶树良种选育有重要意义。本研究采用ISSR分子标记技术对云南省十个有代表性的古茶园遗传多样性进行分析... 云南省保存有20多万亩古茶园，这些古茶树（阿萨姆变种Camellia sinensis vat．assamica）种质资源可能含有各种优良基因，对未来茶树良种选育有重要意义。本研究采用ISSR分子标记技术对云南省十个有代表性的古茶园遗传多样性进行分析，十个居群的多态位点百分率（P）为56．5％-90．9％；Nei’氏遗传距离（He）居群平均是0．281，阿萨姆变种水平内是0．461；Shannon多样性指数（HD）居群平均是0．418，阿萨姆变种水平内是0．653。而居群间遗传分化系数Gst=0.391，和Shannon多样性指数分析（36．0％）和AMOVA分析结果（39．7％）相一致，说明阿萨姆变种60．9％的遗传变异来自居群内的个体间，39．1％的遗传变异来自居群间。研究结果揭示阿萨姆变种居群遗传多样性高，居群间遗传变异存在中度的遗传分化，这可能是由于茶树种内高度异的特性和生境片段化所致。基于观察到的居群遗传信息，建议采取就地保护和迁地保护的保护策略。 展开更多
关键词 茶树(Camellia SINENSIS vat.assamica) ISSR 遗传多样性 保护策略 古茶树
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茯茶辅助调节血脂作用研究 被引量：49
15
作者 肖文军 任国谱 +3 位作者 傅冬和 龚志华 萧力争 刘仲华 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期211-214,共4页
以0.085g/kg·bw、0.170g/kg·bw、0.510g/kg·bw低中高三种速溶茯茶的剂量饲喂Wistar大鼠30d,结果表明茯茶具有降低Wistar大鼠体重、TC、TG以及升高HDL-C的作用。以茶水比为1:1000浸提茯茶1h制成茯茶饮料,以1000ml/d剂量... 以0.085g/kg·bw、0.170g/kg·bw、0.510g/kg·bw低中高三种速溶茯茶的剂量饲喂Wistar大鼠30d,结果表明茯茶具有降低Wistar大鼠体重、TC、TG以及升高HDL-C的作用。以茶水比为1:1000浸提茯茶1h制成茯茶饮料,以1000ml/d剂量进行人体试饮34d,结果显示,受试者TG下降显著,HDL-C上升显著,TC下降极显著,LDL-C亦有下降,但无显著性差异;受试者均无不良反应发生,血常规、血糖、肝肾功能均无异常变化。所制茯茶饮料在90d内稳定,各项指标符合国家卫生标准。由此得出,茯茶具有很好的辅助调节血脂作用。 展开更多
关键词 茯茶 调节血脂 总胆固醇 甘油三酯 高密度脂蛋白 低密度脂蛋白
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茶树EST-SSR的信息分析与标记建立 被引量：89
16
作者 金基强 崔海瑞 +4 位作者 陈文岳 卢美贞 姚艳玲 忻雅 龚晓春 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期17-23,共7页
在1589条茶树EST中,共发掘出了281个EST-SSR,分布于246条EST中,出现频率是17.68%,平均长度为33.06bp,平均分布频率是1/2.61kb。在茶树EST-SSR中,二核苷酸重复是主要的重复类型,出现最多的重复基元类型是AG/CT重复。设计了19对SSR引物,... 在1589条茶树EST中,共发掘出了281个EST-SSR,分布于246条EST中,出现频率是17.68%,平均长度为33.06bp,平均分布频率是1/2.61kb。在茶树EST-SSR中,二核苷酸重复是主要的重复类型,出现最多的重复基元类型是AG/CT重复。设计了19对SSR引物,在对引物、dNTP、MgCl2的浓度及退火温度等参数进行测试后,建立了合适的PCR反应体系。以衍生绝大多数EST-SSR的龙井43DNA为模板,对引物进行了筛选,有16对引物显示扩增,可用率为84.2%;进一步在10个茶树品种中进行多态性测试,显现出多态性的引物占可扩增引物的62.5%。本文研究结果证明了根据茶树EST建立SSR标记是有效、可行的。 展开更多
关键词 茶树 EST SSR信息 标记建立
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不同保藏处理的昆虫标本DNA提取及其随机扩增多态DNA反应 被引量：63
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作者 张迎春 刘波 +1 位作者 郑哲民 李力 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期693-695,共3页
实验利用CTAB法对柳二十斑叶甲Chrysomelavigintipunctata (Scopoli)、异色瓢虫HarmoniaaxyridisPollas、七星瓢虫Coc cinellaseptempunctataLinnaeus、小地老虎Agrotisypsilon (Rottemberg)、红蜻CrocothemisserviliaDrury、无齿稻蝗Ox... 实验利用CTAB法对柳二十斑叶甲Chrysomelavigintipunctata (Scopoli)、异色瓢虫HarmoniaaxyridisPollas、七星瓢虫Coc cinellaseptempunctataLinnaeus、小地老虎Agrotisypsilon (Rottemberg)、红蜻CrocothemisserviliaDrury、无齿稻蝗OxyaabentataWil lemse和中华稻蝗Oxyachinensis (Thunberg)等 7种昆虫进行了基因组DNA提取。从自然干燥标本、烘干标本及酒精浸泡标本获得的DNA均可用于RAPD PCR反应 ,且烘干标本、酒精浸泡标本提取效果优于自然干燥标本。这种提取方法简便易行 ,容易掌握 ,且耗资小于其它分子生物学方法。 展开更多
关键词 保藏处理 昆虫标本 DNA提取 RAPD-PCR 分子系统学
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陈旧皮张中DNA提取的新方法 被引量：38
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作者 饶刚 李明 +3 位作者 牛屹东 王静 魏辅文 方盛国 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期53-57,共5页
对传统的馆藏陈旧皮张标本DNA提取方法进行了改进 ,所提DNA分子量可达 1kb ,而且具有样品用量少 (约 0 0 1g)、消化时间短 (约 1 4h)和操作步骤简单等优点。利用所提DNA ,对小熊猫等珍稀动物线粒体DNA的细胞色素b和控制区序列的部分片... 对传统的馆藏陈旧皮张标本DNA提取方法进行了改进 ,所提DNA分子量可达 1kb ,而且具有样品用量少 (约 0 0 1g)、消化时间短 (约 1 4h)和操作步骤简单等优点。利用所提DNA ,对小熊猫等珍稀动物线粒体DNA的细胞色素b和控制区序列的部分片段进行了PCR扩增、序列测定和比较分析 ,证实所提DNA合格而无污染 ,完全可以用于珍稀动物保护遗传学研究。 展开更多
关键词 陈旧皮张标本 DNA 保护遗传学 提取方法 动物标本
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低温胁迫对2个茶树品种叶片叶绿素荧光特性的影响 被引量：38
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作者 李庆会 徐辉 +3 位作者 周琳 王明乐 朱旭君 房婉萍 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期26-31,共6页
以茶树〔Camellia sinensis(Linn.)O.Ktze.〕品种‘黄金芽’(‘Huangjinya’)和‘迎霜’(‘Yingshuang’)为实验材料,研究了4℃低温胁迫1、2、4和6 d对茶树叶片叶绿素荧光特性的影响。结果表明:4℃低温胁迫条件下2个茶树品种叶片的PSⅡ... 以茶树〔Camellia sinensis(Linn.)O.Ktze.〕品种‘黄金芽’(‘Huangjinya’)和‘迎霜’(‘Yingshuang’)为实验材料,研究了4℃低温胁迫1、2、4和6 d对茶树叶片叶绿素荧光特性的影响。结果表明:4℃低温胁迫条件下2个茶树品种叶片的PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)、PSⅡ潜在活性(Fv/F0)和表观光合电子传递速率(ETR)均显著低于各自的对照(25℃),且总体上随胁迫时间延长逐渐下降;‘黄金芽’叶片的光化学淬灭系数(q P)随低温胁迫时间延长持续下降且低于其对照,而‘迎霜’叶片的q P较其对照的变幅较小,且2个品种的q P总体上与各自的对照无显著差异;随低温胁迫时间延长,2个品种叶片的非光化学淬灭系数(NPQ)均先升高后降低,并在胁迫2 d时达到最高,且总体上高于各自的对照;而2个品种叶片的光合功能相对限制值(LPFD)均随低温胁迫时间延长而增大,且大多高于各自的对照。与各自的对照相比,低温胁迫条件下‘迎霜’叶片的各项叶绿素荧光参数的变幅总体上低于‘黄金芽’。研究结果显示:低温胁迫可直接损伤茶树叶片的PSⅡ反应中心,致使过剩的激发能大量积累于PSⅡ反应中心,最终导致茶树光合作用能力减弱。根据叶绿素荧光参数的比较结果,可以初步判定品种‘迎霜’的耐寒性优于品种‘黄金芽’。 展开更多
关键词 茶树 低温胁迫 叶绿荧光参数 光合作用 耐寒性
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用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA制备方法的比较 被引量：77
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作者 剧海 梁东春 +1 位作者 郭刚 张镜宇 《天津医药》 CAS 北大核心 2003年第5期270-272,共3页
目的 :比较4种用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA的制备方法 ,以寻求一种稳定、简便的DNA模板制备方法 ,用于毕赤酵母重组子的分析。方法 :分别用玻璃珠法、煮沸法、煮 -冻 -煮法以及直接法制备毕赤酵母基因组DNA模板 ,在相同条件下进行PC... 目的 :比较4种用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA的制备方法 ,以寻求一种稳定、简便的DNA模板制备方法 ,用于毕赤酵母重组子的分析。方法 :分别用玻璃珠法、煮沸法、煮 -冻 -煮法以及直接法制备毕赤酵母基因组DNA模板 ,在相同条件下进行PCR扩增并比较其差异。结果 :煮 -冻 -煮法与玻璃珠法制备的模板进行PCR均可取得理想的实验结果。以煮沸法制备模板作PCR时结果受所用模板浓度的影响很大 ,稳定性较差。直接法(即直接用未经处理的菌体作模板)的PCR结果随机性较大 ,实验结果最不理想。结论 :煮 -冻 -煮法所需时间少、费用低、操作简便而且结果稳定 。 展开更多
关键词 毕赤酵母 基因组 DNA 制备方法 聚合酶链反应
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