高效毛细管电泳-激光诱导荧光检测生物活性肽的研究 被引量：11

1

作者 熊少祥 韩慧婉 +4 位作者 赵睿 王光辉 马会民 陈义 刘国诠 《分析测试学报》 CAS CSCD 1999年第5期1-4,共4页

使用毛细管电泳 -激光诱导荧光 -增强型电荷耦合器件(CE -LIF -ICCD)系统 ,用异硫氰酸荧光素(FITC)柱前衍生了亮脑啡肽、甲硫脑啡肽、血管紧张肽、P物质4种生物活性肽 ,优化了实验条件 ,在8min内 ,对它们进行了快速分离检测 ,血管紧张... 使用毛细管电泳 -激光诱导荧光 -增强型电荷耦合器件(CE -LIF -ICCD)系统 ,用异硫氰酸荧光素(FITC)柱前衍生了亮脑啡肽、甲硫脑啡肽、血管紧张肽、P物质4种生物活性肽 ,优化了实验条件 ,在8min内 ,对它们进行了快速分离检测 ,血管紧张肽的质量检出限达到2.8×10-18 mol。 展开更多

关键词 生物活性肽 肽 测定 CE LIF ICCD

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在非水介质中进行酶促反应的几个重要问题 被引量：19

2

作者 田桂玲 邢国文 叶蕴华 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第1期11-19,共9页

介绍了在非水介质中酶促反应的最新进展。较深入地讨论了介质性质对酶的催化活性及立体选择性的影响,有机溶剂中必需水含量对酶催化反应的重要性,描述了非缓冲体系中的盐及其它极性添加剂对酶活性的影响,介绍了在非均相的低共熔体系中... 介绍了在非水介质中酶促反应的最新进展。较深入地讨论了介质性质对酶的催化活性及立体选择性的影响,有机溶剂中必需水含量对酶催化反应的重要性,描述了非缓冲体系中的盐及其它极性添加剂对酶活性的影响,介绍了在非均相的低共熔体系中进行酶促合成肽的研究。 展开更多

关键词 酶促反应 非水介质 低共熔混合物 肽合成

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大鼠阴离子交换蛋白合成肽抗体制备及鉴定 被引量：2

3

作者 李津婴 赵法 +4 位作者 郭俊生 叶煦亭 胡小健 张志鸿 周汉清 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第4期339-343,共5页

根据带 3蛋白 (阴离子交换蛋白 )拓扑学模式、氨基酸保守片段、功能片段、天然抗原表位 ,设计大鼠带 3膜外侧片段合成肽 ,制备抗合成肽 ( 1 2肽 )抗体 ,同时制备抗大片段带 3抗体加以印证 .多项免疫学实验鉴定结果表明 ,该 1 2肽是带 3... 根据带 3蛋白 (阴离子交换蛋白 )拓扑学模式、氨基酸保守片段、功能片段、天然抗原表位 ,设计大鼠带 3膜外侧片段合成肽 ,制备抗合成肽 ( 1 2肽 )抗体 ,同时制备抗大片段带 3抗体加以印证 .多项免疫学实验鉴定结果表明 ,该 1 2肽是带 3抗原决定簇之一 ,也是带 3发挥阴离子转运功能的关键肽段 ;1 2肽的氨基酸组成与序列在各种属间高度保守 .免疫金银显色———扫描电镜结果给出该 1 2肽为带 3蛋白膜外侧区片段的最直接证据 .制备的抗带 3抗体可作为研究带 3结构与功能、探讨与带 展开更多

关键词 带3蛋白 阴离子交换蛋白 合成肽 抗体

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表皮生长因子的分离纯化与检测 被引量：6

4

作者 吴大庆 吴大鹏 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第9期415-420,共6页

评述近３０年来，天然来源表皮生长因子（ＥＧＦ）分离纯化的主要方法以及活性检测的各种手段。

关键词 表皮生长因子 纯化 检测 分离 多肽

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鼠脑钠通道Ⅰ的IS3片段的溶液法合成 被引量：1

5

作者 苗振伟 蒋云 +2 位作者 李向群 徐筱杰 唐有祺 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1997年第5期734-738,共5页

采用本甲酸甲酯作为α－羧基的暂时性保护基，以片段缩合的方式合成了疏水性多肽──鼠脑钢通道Ⅰ的IS3片段，利用高效液相色谱对其进行了纯化，并通过了氨基酸组成分析和快原子轰击质谱鉴定．

关键词 苯甲酰甲酯 多肽 合成 IS3片段 片段缩合 钠通道

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直接用噬菌体肽进行功能性分析的研究 被引量：1

6

作者 齐杰 方锐 +1 位作者 周慧 李惟 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1997年第5期576-579,共4页

通过对胰蛋白酶抑制剂的筛选发现，噬菌体肽库不仅可以用于亲和性筛选，而且噬菌体肽（ｐｈａｇｅｐｅｐｔｉｄｅ——ｐｅｐｔｉｄｅｄｉｓｐｌａｙｉｎｇｏｎｐｈａｇｅ）可以直接用于对亲和筛选得到的克隆进行胰蛋白酶抑制实验，即所... 通过对胰蛋白酶抑制剂的筛选发现，噬菌体肽库不仅可以用于亲和性筛选，而且噬菌体肽（ｐｈａｇｅｐｅｐｔｉｄｅ——ｐｅｐｔｉｄｅｄｉｓｐｌａｙｉｎｇｏｎｐｈａｇｅ）可以直接用于对亲和筛选得到的克隆进行胰蛋白酶抑制实验，即所谓的功能性筛选．功能性筛选前后的测序结果表明用噬菌体肽直接进行功能性筛选确实能够筛去大部分的非抑制剂克隆． 展开更多

关键词 肽库 噬菌体肽 功能性分析

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由5-唑烷酮合成α-天冬氨酰肽类的简便方法(英文) 被引量：2

7

作者 陈志勇 李艳 《合成化学》 CAS CSCD 1997年第2期109-112,共4页

用一锅法制得了２－三溴甲基－３－甲酰基－５－氧－４－口恶唑烷乙酸，它与氨基酸酯反应形成题称化合物Ｎ－甲酰基－α－天冬氨酰肽类。

关键词 5恶唑烷酮 α天冬氨酰肽 恶唑烷乙酸

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反义肽及其在生化分离中的应用 被引量：1

8

作者 林启山 刘国诠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第5期415-419,共5页

反义肽是由反义ＲＮＡ编码和翻译的肽．它可与其正义肽分子发生专一性相互作用．近年反义肽的这种特异性结合实例研究，已为其在生化分离领域应用奠定了基础，尤其是在色谱亲和配基的选择方面，可以预见不久以反义肽为配基的亲和色谱将... 反义肽是由反义ＲＮＡ编码和翻译的肽．它可与其正义肽分子发生专一性相互作用．近年反义肽的这种特异性结合实例研究，已为其在生化分离领域应用奠定了基础，尤其是在色谱亲和配基的选择方面，可以预见不久以反义肽为配基的亲和色谱将是生物工程产品分离的一种有效手段． 展开更多

关键词 肽 反义肽 亲和色谱 分离

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降钙素基因相关肽（CGRP）受体的纯化和鉴定 被引量：2

9

作者 张符光 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第2期135-140,共6页

降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）为３７肽，它在体内主要分布于神经系统和心血管系统，是较强的扩张血管物质。人们已认识到脑部的ＣＧＲＰ最多，由于新鲜猪脑来源丰富，故我们选用猪脑为材料来纯化ＣＧＲＰ受体。以期为该受体的深入研究... 降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）为３７肽，它在体内主要分布于神经系统和心血管系统，是较强的扩张血管物质。人们已认识到脑部的ＣＧＲＰ最多，由于新鲜猪脑来源丰富，故我们选用猪脑为材料来纯化ＣＧＲＰ受体。以期为该受体的深入研究提供足够的材料和奠定基础，纯化的受体将用于制备抗ＣＧＲＰ受体的单克隆抗体，为了从猪脑中纯化ＣＲＲＰ受体，首先用含有胆盐的磷酸盐缓冲液将该受体从猪脑细胞膜上解离下来，解离下来的受体量较多，而杂蛋白较少，且受体活性可保持较长时间不降低。以离子交换柱层析（ＱＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ａ－２５）进行初步分离纯化，再用化学合成的ＣＧＲＰ与活化的琼脂糖（Ａｆｆｉ－Ｇｅｌ－１０，Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司产品）制备的亲和层析柱进行亲和层析，取得的纯化受体保留了与１２５Ｉ－ＣａＧＲＰ结合的能力，而与降钙素（Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ）神经肽Ｙ（ＮｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅＹ）和Ｋａｔａｃａｌｃｉｎ等无交叉反应，但与有４６％氨基酸序列同源性的Ａｍｙｌｉｎ有一定交叉反应。纯化的受体经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和高压液相色谱（ＨＰＬＣ）鉴定呈现单一蛋白条带或蛋白峰，其位置对应分子量为６６ｋＤ。 展开更多

关键词 CGRP 降钙素 37肽 受体 提纯 鉴定

原文传递

肽的等电点计算方法 被引量：1

10

作者 宫霞 《曲阜师范大学学报（自然科学版）》 CAS 1998年第3期69-71,共3页

肽是两性电解质，肽的等电点和氨基酸一样可根据它各自解离基团的ｐＫ值求得．即肽的等电点（ｐＩ）为它的两性离子两侧的ｐＫ的平均值．

关键词 肽 等电点 解离基团

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分析基因表达产物降钙素基因相关肽的高效液相色谱和电喷雾质谱法

11

作者 岳贵花 卞利萍 +3 位作者 杨芃原 刘为平 许云敏 王洪海 《分析测试学报》 CAS CSCD 1999年第5期40-42,共3页

报道了应用高效液相色谱 (HPLC)及电喷雾 (ESI)质谱对基因表达产物降钙素基因相关肽 (CGRP)进行非在线鉴定分析 ,获得了满意的结果。实验表明HPLC及ESIMS在分析鉴定未知样品中具有互补性;二者联用提高了分析的速度及准确性。

关键词 CGRP HPLC ESI 降钙素 基因相关肽 测定

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固相合成疏水肽纯度的HPSEC评价

12

作者 周伟 吴玉章 +2 位作者 王祥智 边疆 贾正才 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期568-570,共3页

目的　快速评价固相合成疏水肽P44的纯度。方法　本文为避开反相梯度色谱可能潜在的影响因素 ,运用高效体积排阻色谱 (HPSEC)原理 ,选用耐一定浓度有机相的Ultrahydrogel 2 5 0高效凝胶分析柱对固相合成疏水肽P44进行分析 ,并通过 996... 目的　快速评价固相合成疏水肽P44的纯度。方法　本文为避开反相梯度色谱可能潜在的影响因素 ,运用高效体积排阻色谱 (HPSEC)原理 ,选用耐一定浓度有机相的Ultrahydrogel 2 5 0高效凝胶分析柱对固相合成疏水肽P44进行分析 ,并通过 996二极管阵列检测器对其纯度进行了客观的评价。结果　Ultrahy drogel 2 5 0高效凝胶分析柱分离P44疏水肽目的肽峰纯度通过 996纯度鉴定 ,目的肽纯度为 70 .91% ;与分子筛柱与反相柱两步纯度评价的结果一致 (70 .90 % )。 展开更多

关键词 固相合成疏水肽 高效体积排阻色谱 纯度

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N-磷酰化二肽的分光光度法测定

13

作者 邹煜平 赵玉芬 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第2期162-165,共4页

利用双缩脲试剂，在可见光区建立了N-磷酸化二肽、二肽以及磷酸化多肽的分光光度定量分析方法。在经典的双缩脲分光光度法的实验条件下，观察到Ｎ－磷酸化二肽、二肽与双缩脲试剂的复合物的最大吸收波长均为 620 nm及 N-磷酰基对二肽有... 利用双缩脲试剂，在可见光区建立了N-磷酸化二肽、二肽以及磷酸化多肽的分光光度定量分析方法。在经典的双缩脲分光光度法的实验条件下，观察到Ｎ－磷酸化二肽、二肽与双缩脲试剂的复合物的最大吸收波长均为 620 nm及 N-磷酰基对二肽有很强的增色作用。 展开更多

关键词 磷酰化二肽 光度法 增色 二肽 磷酰化多肽 测定

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生长激素释放肽的合成及促生长活性 被引量：6

14

作者 胡晓愚 王勤 +3 位作者 王锐 高立伟 沈剑敏 王永谦 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第6期549-552,共4页

用固相多肽合成法合成了生长激素释放肽（ＧＨＲＰ），这是一种含Ｄ－型氨基酸的外源性激素，具有促进脑下垂体分泌生长激素功能的人工合成六肽，其氨基酸序列为Ｈｉｓ－Ｄ－Ｔｒｐ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｄ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ＿２．观... 用固相多肽合成法合成了生长激素释放肽（ＧＨＲＰ），这是一种含Ｄ－型氨基酸的外源性激素，具有促进脑下垂体分泌生长激素功能的人工合成六肽，其氨基酸序列为Ｈｉｓ－Ｄ－Ｔｒｐ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｄ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ＿２．观察了使用不同剂量的ＧＨＲＰ对不同日龄小鼠的促生长效应，当使用最佳剂量（１０００μｇ／ｋｇ）时，可使２５日龄小鼠体重较对照组增加１４．８％，同时发现鼠龄越小对ＧＨＲＰ越敏感，当使用剂量高达１０ｍｇ／ｋｇ时仍然安全无毒． 展开更多

关键词 生长激素释放肽 合成 促生长作用

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新型二肽类长链状化合物的分子动力学和量子化学研究 被引量：2

15

作者 王光斌 孙命 +1 位作者 刘小兰 缪方明 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第10期937-942,共6页

用分子动力学方法对5种新型肽类长链状化合物进行了构象研究,所得结果证明我们的构象搜索方法有效.分子L_3内的芳环堆积作用使整个分子具有特殊结构,这种结构特征可能使其具有特殊生物功能,该结果为药物分子设计提供了有用的信息.量子... 用分子动力学方法对5种新型肽类长链状化合物进行了构象研究,所得结果证明我们的构象搜索方法有效.分子L_3内的芳环堆积作用使整个分子具有特殊结构,这种结构特征可能使其具有特殊生物功能,该结果为药物分子设计提供了有用的信息.量子化学计算表明分子内形成的负电荷空穴,将使其易与受体结合. 展开更多

关键词 肽类 长链状化合物 二肽 分子动力学 构象搜索

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螯合金属离子亲和色谱法分离α-氨基酸和肽 被引量：2

16

作者 程慧文 邵天梦 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期405-407,共3页

以ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１０为基质螯合二价铜离子的亲和色谱法分离α－氨基酸和肽，使之得以完全分离。对分离过程的原理进行了讨论。

关键词 螯合金属离子 亲和色谱法 氨基酸 肽

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猪胰细胞膜缩胆囊肽结合蛋白的纯化 被引量：4

17

作者 俞逸红 陈优敏 陆瑞良 《上海医科大学学报》 CSCD 1994年第1期19-22,共4页

从猪胰细胞膜提取、纯化得到一种缩胆囊肽（ＣＣＫ）结合蛋白，达电泳纯。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），其亚基分子量为４３．１×１０－２２ｋｇ。此结合蛋白与不同的ＣＣＫ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ作用... 从猪胰细胞膜提取、纯化得到一种缩胆囊肽（ＣＣＫ）结合蛋白，达电泳纯。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），其亚基分子量为４３．１×１０－２２ｋｇ。此结合蛋白与不同的ＣＣＫ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ作用时显示，其与硫酸化ＣＣＫ－８、ＣＣＫ－８、硫酸化亮氨酸脑啡肽（Ｌｅｕ－ｅｎｋ）结合活性较大，而与ＣＣＫ－６、ＣＣＫ－４及Ｌｅｕ－ｅｎｋ结合活性较弱。说明ＣＣＫ羧基末端第七位上酪氨酸的硫酸化对ＣＣＫ结合活性有较大影响。并与ＣＣＫ肽链的长度有关。 展开更多

关键词 缩胆囊肽 结合蛋白 纯化 酪氨酸

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噬菌体短肽库的构建及其随机短肽的多样性 被引量：2

18

作者 李全喜 王琰 +2 位作者 王雅明 徐建军 董志伟 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第6期668-673,共6页

噬菌体短肽库是将随机合成的寡核苷酸序列通过与单链噬菌体外壳蛋白基因融合，从而将随机短肽表达于噬菌体的表面。将体外随机化学合成的寡聚核苷酸序列重组到单价噬菌体表达载体，构建了噬菌体短肽库，证明其库容为２×１０￣７集... 噬菌体短肽库是将随机合成的寡核苷酸序列通过与单链噬菌体外壳蛋白基因融合，从而将随机短肽表达于噬菌体的表面。将体外随机化学合成的寡聚核苷酸序列重组到单价噬菌体表达载体，构建了噬菌体短肽库，证明其库容为２×１０￣７集落形成单位（ｃｆｕ），重组率为９３％。同时将１１个随机克隆进行序列测定，证实其寡聚核苷酸序列和氨基酸的分布几乎是完全随机的，其多样性可以满足特异性短肽筛选的要求。 展开更多

关键词 肽 短肽库 噬菌体表面表达

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抗吗啡活性肽的分离纯化及一级结构测定 被引量：2

19

作者 陈淑娟 王镜岩 +1 位作者 陈玉珍 周舒 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第2期211-214,共4页

报道了一种新的具有抗吗啡镇痛活性的肽的分离纯化，并进行部分一级结构测定．狗脑先经醋酸提取，冷冻成干粉，然后上ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０和Ｓ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦ．Ｆ柱，最后经ＲＰ－ＨＰＬＣ纯化，鉴定纯度后，测定其抗吗啡... 报道了一种新的具有抗吗啡镇痛活性的肽的分离纯化，并进行部分一级结构测定．狗脑先经醋酸提取，冷冻成干粉，然后上ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０和Ｓ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦ．Ｆ柱，最后经ＲＰ－ＨＰＬＣ纯化，鉴定纯度后，测定其抗吗啡镇痛活性，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测得其分子量为８．９ｋＤ．氨基酸序列分析测得该肽的Ｎ端序列为：Ｖ－Ｉ－Ｓ－Ｖ－Ａ－Ｄ－Ｗ－Ｔ－Ｑ－Ｉ－Ｆ－Ｔ－Ｍ－Ｒ－Ｙ－Ｆ－Ｉ－Ｔ－Ｇ－Ｙ－Ｈ－Ｑ－Ｄ－Ｙ－Ｘ－Ｇ－Ｌ－Ｈ－Ｉ－Ｇ．经部分一级结构同源序列检索，未见与此有同源的蛋白质的报道。 展开更多

关键词 抗吗啡肽 提纯 结构

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狗脑抗吗啡活性肽“74a”的分离纯化方法及其鉴定

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作者 廖助荣 陈玉珍 +3 位作者 杨端 陈雅惠 周舒 王镜岩 《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期115-123,共9页

本实验报道从正常狗脑中获得的第三个具有明显拮抗吗啡镇痛效应的肽,暂定为“74a”肽。所得纯品经等电聚焦电泳和SDS电泳鉴定均为一条带,分子量约10,000道尔顿,等电点pH7.5左右,N-末端35个氨基酸残基序列已经测定,经检索未见文献报导,... 本实验报道从正常狗脑中获得的第三个具有明显拮抗吗啡镇痛效应的肽,暂定为“74a”肽。所得纯品经等电聚焦电泳和SDS电泳鉴定均为一条带,分子量约10,000道尔顿,等电点pH7.5左右,N-末端35个氨基酸残基序列已经测定,经检索未见文献报导,是一个新肽。 展开更多

关键词 肽 抗吗啡 纯化 狗 脑 电泳 层析

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