摘要
目的 :构建iNOS启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体 ,为研究细胞内iNOS的基因表达调控和相关的信号转导机制提供重要工具。方法 :采用基因重组技术构建了含iNOS启动子区的红色荧光蛋白报告基因载体pDsRed1- 1-iNOSp ;用脂质体瞬时转染NIH3T3细胞 ,观察iNOS启动子对脂多糖 (LPS)刺激的反应。结果 :酶切和DNA测序证明所构建的红色荧光蛋白报告基因载体是正确的 ;该表达载体在NIH3T3细胞静息状态下表达水平很低 ,经LPS刺激后 ,在荧光显微镜下可看到高亮度的红色荧光。结论 :所构建的iNOS启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体是正确的 ,对生理相关刺激有很好的反应 ,可有效地用于iNOS基因表达信号调控机制的研究。
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第12期1709-1712,共4页
Chinese Journal of Pathophysiology
基金
国家自然科学基金资助项目 (No .30 0 30 0 6 0
No.39870 332 )
国家杰出青年科学基金资助项目(No .3992 5 0 14 )
关键词
一氧化氮合酶
红色荧光蛋白
基因
调节
基因
报告
Nitric-oxide synthase
Red fluorescent protein
Genes,regulator
Genes, reporter