摘要
目的 体外研究汉滩病毒 (HTNV)S基因及其 5’端、3’端表达的意义 ,为核蛋白T细胞表位的研究奠定基础。方法 设计 2套引物 ,用PCR方法从PBV2 2 0 -S2 2原核质粒中扩增出S基因全读码框 (37- 132 6bp)及S基因 5’端 (37-5 0 1bp) ,S基因 3’端 (5 0 2 - 132 6bp)用TA克隆将其克隆入 pcDNA3 1/V5 -His -TOPO载体中 ,成功构建 pcDNA3 1-S及pcDNA3 1-S -N、pcDNA3 1-S -C真核表达载体 ,并通过脂质体转染至Vero -E6细胞中 ,进行了瞬时表达。 结果 间接免疫荧光成功检测到 pcDNA3 1-S及pcDNA3 1-S -N、pcDNA3 1-S -C在Vero -E6细胞中的表达。 结论 pcDNA3 1-S及 pcDNA3 1-S -N、pcDNA3 1-S -C真核表达载体有较高的转染效率 ,目的基因能在宿主细胞中表达 ,有利于研究HTNV -S基因在T细胞表位研究中的意义。
In order to provide some data for study of T cell epitopes,we inserted HV S and 5' 3'terminals of S gene segment into an eukaryotic expression vector pcDNA 3.1/V5-His TOPO.The recombinant expression plasmids pcDNA3.1-S and pcDNA3.1-S-N pcDNA3.1-S-C were constructed.Vero-E6 cells were transfected with these plasmids.The transient expression of HV S and 5' 3'terminals of S gene segment in Vero-E6 cells was detected by indirect immunofluorescence assay(IFA).
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2004年第2期88-91,共4页
Chinese Journal of Zoonoses
