摘要
本生烟(Nicotiana benthamiana)是普通烟草(Nicotiana tabacum)的近亲,是“植物-病原物”互作的模式植物之一。叶盘法转化法在植物分子生物学中有着广泛的应用。本研究比较了本生烟叶盘法转化过程中,不同预培养时间、共培养时间、共培养温度及共培养时农杆菌的浓度对转化效率的影响。结果发现,较低的共培养温度(18℃),能更好地平衡转化效率和后期筛选。以此为前提条件,本研究优化了该过程中的其他条件。同时,为进一步提高再生效率,研究了不同硝酸银浓度和植物凝胶浓度对本生烟再生的影响;并在此基础上,设计并进行了双因素响应面的分析实验。结果发现,培养基同时使用4.3 mg/L的硝酸银和8.8 g/L的植物凝胶时,再生效率最高。
Nicotianan benthamiana is a close relative of Nicotiana tabacum.It is one of the model plants for plant-pathogen interaction.Leaf-disk plant transformation method is widely used in plant molecular biology.The effects of different pre-culture time,co-culture time,co-culture temperature and concentration of Agrobacterium tumefaciens on transformation efficiency of Nicotiana benthamiana leaf-disk transformation procedure were compared in this study.The results showed that the lower co-culture temperature(18℃)could better balance the transformation frequency and late on selection.Upon this pre-condition,the study optimized parameters of the other steps of leaf-disk transformation of Nicotianan benthamiana.In the meanwhile,the study optimized the concentration of AgNO_(3) and phytagel of regeneration medium,in the context of buds induction.The study found that adding 4.3 mg/L AgNO_(3) and 8.8 g/L phytagel in the medium,gives the highest buds induction rate.
作者
赵贤雷
董子健
谢兴邦
张壮
吴洋洋
张钱钱
孙雯雯
杜秀菊
曹雪松
胡全安
Zhao Xianlei;Dong Zijian;Xie Xingbang;Zhang Zhuang;Wu Yangyang;Zhang Qianqian;Sun Wenwen;Du Xiuju;Cao Xuesong;Hu Quan'an(College of Life Sciences,Liaocheng University,Liaocheng,252000)
出处
《分子植物育种》
CAS
北大核心
2022年第5期1635-1642,共8页
Molecular Plant Breeding
基金
山东省自然科学基金项目(ZR2014CM001)
山东农业大学作物生物学国家重点实验室开放基金(2018KF03)
教育部归国留学科研启动基金(2015)共同资助。
关键词
本生烟草
诱导生芽
硝酸银
植物凝胶
遗传转化
Nicotiana benthamiana
Buds induction
Silver nitrate
Phytagel
Genetic transformation
