摘要
[目的]对甲羟戊酸在大肠杆菌中的生物合成进行适配性优化。[方法]将来源于粪肠球菌的甲羟戊酸合成途径基因mvaE和mvaS引入大肠杆菌中,构建大肠杆菌甲羟戊酸合成体系。继而通过比较不同的表达系统和不同的RBS序列探究甲羟戊酸合成的最佳条件。接下来,考虑到乙酰辅酶A是连接大肠杆菌细胞代谢途径和外源甲羟戊酸合成途径的桥梁,通过加强乙酰CoA的代谢通量来继续提高甲羟戊酸的产量。[结果]采用pTrc99A载体,8000 au的RBS强度下,大肠杆菌甲羟戊酸合成体系的效率最高,产量达到20.5 mmol/L;通过加强乙酰CoA的代谢通量,甲羟戊酸的产量继续提高到26 mmol/L。[结论]获得一株高产甲羟戊酸的大肠杆菌菌株,该菌株可用于合成甲羟戊酸,也可作为一平台菌株用于其他萜类化合物的生物合成。
[Objective]To adaptively optimize mevalonate biosynthesis system in E.coli.[Method]Mevalonate biosynthesis system is adaptively optimized through comparing different expression systems and different RBS sequences.Next,in consideration of acetyl-CoA is the bridge of E.coli native metabolic pathways and exogenous mevalonate biosynthesis pathway,mevalonate production is further optimized by enhancing the metabolic flux of acetyl-CoA.[Result]The optimized condition for mevalonate biosynthesis is employing pTrc99A plasmid and introducing 8000 au RBS sequence,resulting in 20.5 mmol/L mevalonate production.The mevalonate production further reaches 26 mmol/L by enhancing the metabolic flux of acetyl-CoA.[Conclusion]A high-yielding E.coli strain for mevalonate production is obtained,and this strain can be used as a platform for the biosynthesis of other terpenoids.
作者
杨李阳
苗莉云
弓强
彭晓夏
郭建全
YANG Li-yang;MIAO Li-yun;GONG Qiang;PENG Xiao-xia;GUO Jian-quan(School of Basic Medical Sciences,Shanxi University of Chinese Medicine,Jinzhong 030619,China)
出处
《生物技术》
CAS
2020年第3期219-225,284,共8页
Biotechnology
基金
山西省自然科学青年面上基金项目(201801D221396)
山西省高等学校科技创新项目(2019L0726)
山西中医药大学博士科研启动基金项目(2016BK04)。
