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大黄鱼基因组DNA的提取及其RAPD分析条件的探索 被引量:10

Extraction of Genomic DNA from Large Yellow Croakers and Optimization of Reaction Conditions for RAPD Analysis
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摘要 通过实验筛选出一种快速、简便提取大黄鱼基因组 DNA的方法 .以该法提取的大黄鱼基因组 DNA为模板 ,对大黄鱼 RAPD分析中的 DNA模板浓度、镁离子浓度、d NTPs浓度、引物浓度和 Taq酶浓度进行了研究 ,初步确定了适于大黄鱼 RAPD分析的最佳反应体系 :2 5μL反应体系中 ,含模板 DNA2 5 ng,1 0× PCR缓冲液 2 .5μL,d NTPs1 0 0μmol/L,Mg Cl2 2 .5 mmol/L,引物 0 .2μmol/L,Taq DNA聚合酶 1 .0 μmol/min. A simple and rapid method for extraction of high quality genomic DNA from large yellow croaker tissues was established through experiments. Using DNA extracted by this method as templates, the conditions for RAPD analysis of large yellow croakers were optimized. For a 25 μL reaction system, the optimal compositions included 25ng template DNA concentration, 2.5μL 10×PCR buffer, 0.1mmol/L dNTPs, 2.5 mmol/L MgCl 2, 0.2μmol/L random primer and 1.0 μmol/min Taq polymerase.
出处 《科技通报》 北大核心 2002年第5期368-373,共6页 Bulletin of Science and Technology
基金 浙江省自然科学基金资助项目 ( 3994 2 8)
关键词 大黄鱼 基因组 RAPD DNA提取 反应条件 反应体系 分子遗传标记 DNA多态性 large yellow croaker extraction of genomic DNA RAPD reaction conditions
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