摘要
目的探讨siRNA抑制线粒体Bcl-2基因联合阿霉素对人宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响及相关作用机制。方法将化学合成的靶向Bcl-2基因siRNA序列转染至SiHa细胞中,Western blot验证转染效率后,将SiHa细胞分为5组:空白对照组(不加任何处理)、阴性对照组(转染阴性siRNA序列)、干扰组(转染Bcl-2siRNA序列)、阿霉素组(5μg/mL阿霉素处理)、联合组(转染siRNA序列+5μg/mL阿霉素处理)。通过MTT比色法检测细胞增殖水平、流式细胞术检测细胞凋亡水平、分光光度法分别检测半胱氨酸蛋白酶Caspase-3和Caspase-9的活力变化以及细胞色素c(Cyt-c)释放水平变化。结果 Bcl-2 siRNA转染后,相对于阿霉素组,联合组细胞增殖率明显降低,凋亡水平则明显上升(P<0.01);细胞周期各时相重新分布,G0/G1期细胞明显减少(P<0.01),S期和G2/M期细胞则明显增多(P<0.01);Caspase-3和Caspase-9活力明显升高,Cyt-c释放水平亦显著增加(P<0.01)。结论 Bcl-2靶向反义siRNA序列联合阿霉素处理能显著促进线粒体依赖性的细胞凋亡,Bcl-2可作为人宫颈癌基因治疗的候选靶点。
出处
《广东医学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第17期2675-2677,共3页
Guangdong Medical Journal
