摘要
本实验根据已经发表的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)M蛋白基因序列设计并合成一对引物 ,利用RT_PCR扩增得到了IBV新疆分离株LX4株 (HA价为 2 7)M基因 678bp的片段 ,将该片段克隆到PUC18载体上 ,通过对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定 ,证明得到了含有目的基因片段的阳性重组质粒。采用Sanger’s双脱氧末端终止法对插入片段进行核苷酸序列测定 ,获得了IBV_LX4株M基因的核苷酸序列 ,利用DNASIS分析软件 ,将它与GENBANK中发表的 15株国外参考毒株相比较 ,发现核苷酸的同源性 (除D14 66和DE0 72外 )为 85 % ~92 % ,氨基酸的同源性为 83 % ~92 % ,与国内参考株 (H5 2_GD)相比分别为 90 %和 92 % ,确证我们得到的克隆片段为IBV -LX4株的M基因。且含有两个糖基化位点 ,9个高度保守的半胱氨酸 ,三个跨膜区域 。
Matrix glycoprotein gene of a Infectious Bronchitis Virus(IBV) isolated from China was cloned and sequenced using Reverse Transcription_polymerase Chain Reaction(RT-PCR) method. Comparative analysis of the M gene with other IBV strains showed that it shared 85%_92% identity with foreign IBV strains and 90%_92% similar to other Chinese IBV strains. The other Molecular Characterizations of this matrix glycoprotein gene were just the same as other IBV isolates.
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第6期404-407,共4页
Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine
关键词
传染性支气管炎病毒
M基因
分子特征
鸡病毒
Infectious bronchitis virus Matrix glycoprotein gene
Molecular characterization