摘要
目的探讨伴放线放线杆菌（Actinobacillus actinomycetemcomitans，Aa）脂多糖诱导兔不同部位的单核巨噬细胞细胞因子表达的差异，以期为研究牙周炎与全身疾病间可能的免疫机制提供理论基础。方法分离5只新西兰兔外周血单核巨噬细胞（peripheral mononuclearcells，Mo）、肺单核巨噬细胞（alveolar macrophages，AM）、腹腔单核巨噬细胞（peritonealmacrophages，PM）及肝脏单核巨噬细胞（Kupffer cells，KC），对每个部位的细胞分别用1mg／L大肠杆菌一脂多糖（大肠杆菌-脂多糖组）、Aa-脂多糖刺激（Aa-脂多糖组），以不加任何刺激的细胞为空白对照组，每组均为6个样本。24h后采用实时PCR及酶联免疫吸附测定法分别检测肿瘤坏死因子α（tumornecrosis factor-α，TNF-α）、白介素（interleukin，IL）6、IL-1β、IL-8mRNA及蛋白表达。结果新西兰兔各部位单核巨噬细胞大肠杆菌．脂多糖组及Aa-脂多糖组4种细胞因子mRNA及蛋白表达均显著高于空白对照组（P〈0．05），其中AM的Aa．脂多糖组TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-8mRNA[分别为（0．4719±0．0171）、（2．7895±0．0669）、（5．1527±0．1190）、（3．6785±0．1836）]及蛋白[分别为（82．2±5．4）、（40．2±2．0）、（50308．3±445．0）、（35305．3±1480．9）ng／L]的相对表达均最强；Aa-脂多糖组4种细胞因子mRAN及蛋白表达均显著强于大肠杆菌-脂多糖组（P〈0．05）；不同部位的单核巨噬细胞对Aa-脂多糖的反应存在部位差异性（P〈0．05），总体上从强至弱依次为AM、Mo、KC、PM。结论Aa-脂多糖对兔不同部位的单核巨噬细胞各细胞因子的表达存在影响，且这种影响具有部位差异性。
Objective To investigate the expression of cytokines induced by Actinobacillus actinomycetemcomitans lipopolysaccharide（Aa-LPS） in monocytes/macrophages from different organs of rabbits. Methods The peripheral mononuclear cells（Mo）, alveolar macrophages （ AM ）, peritoneal macrophages（PM） and Kupffer ceils（KC） from five New Zealand rabbits were isolated respectively. Then the ceils from different organs were stimulated with Escherichia coli （Ec）-LPS or Aa-LPS at the dose of 1 mg/L. After culture for 24 hours, the expression of tumor necrosis factor-α （ TNF-α）, interleukin （IL） 6, IL-1β, IL-8 mRNA and protein were determined by real-time PCR and enzyme-linked immunosorbent assay respectively. Results The monocytes/macrophages challenged by Ec-LPS or Aa-LPS expressed more cytokines both in mRNA and protein levels compared with the controls （ P 〈 0. 05 ）. Among them, AM displayed the highest respond when encount with Aa-LPS,with the TNF-α,IL-6 ,IL-1β, IL-8 mRNA relative levels were（ 0.471 ± 0.0171）, ）2. 78.95 ± 0. 0669）, （5. 1527 ± 0. 1190）, （ 3. 6785 ± 0. 1836） and the proteins concentrations were （ 82. 2 ± 5.4 ）, （40. 2± 2. 0 ）, （ 50 308.3 ± 445.0 ）, （ 35 305.3 ± 1480. 9 ） ng/L respectively. And the inducibility of Aa-LPS was stronger than that of Ec-LPS （ P 〈 0.05 ）. Meanwhile thecells from different organs showed discrepant response when exposed to Aa-LPS （ P 〈 0. 05 ）. The results showed their abilities to secrete cytokines were in the sequence of AM 〉 Mo 〉 KC 〉 PM. Conclusions Aa-LPS enfluenced the expression of cytokines in monocytes/macrophages from different organs of rabbits.
出处
《中华口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期155-160,共6页
Chinese Journal of Stomatology
基金
国家自然科学基金（30973326、81170973）
福建省医学创新及省卫生厅青年科研课题资助计划（2011-CX-26）
关键词
放线杆菌
伴放射菌
脂多糖
单核巨噬细胞系统
细胞因子类
Actinobacillus actinomycetemcomitans
Lipopolysaccharides
Mononuclearphagocyte
Cytokines
