摘要
目的探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）与氧化应激状态下的肺泡上皮细胞共培养，对氧化应激水平的变化和分裂原活化蛋白激酶（MAPKs）通路的调控机制。方法分离培养大鼠MSCs，在Transwell小室中建立共培养体系，实验分3组为A549组、香烟烟雾提取物（CES）＋A549组、CES十A549＋MSCs共培养组。收集各组细胞和上清液，检测A549细胞凋亡率、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量，c-JunN-末端激酶（JNK）、细胞外信号调节激酶（ERK）、p38蛋白激酶（p38）的表达及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶．3（Caspase-3）的表达。结果CES＋A549＋MSCs组细胞凋亡率明显低于CES＋A549组[（11．01±0．23）比（18．12±1．43），（P〈0．01）]。CES＋A549＋MSCs组MDA较CES＋A549组明显降低[（0．512±0．132）比（1．450±0．073），（P〈0．01）1，而SOD明显增高[（12．224-0．12）比（7．21±0．31），（P〈0．01）]。A549＋CSE＋MSCs组P-p38、P—JNK、Caspase-3的表达明显低于A549＋CSE组，分别为（1．55±0．13）比（3．41±0．01）、（3．24±0．21）比（7．22±0．25）、（2．29±0．15）比（5．27±0．17），P〈0．05，而P—ERK的表达明显增高[（1．21±0．03）比（0．22±0．02），P〈0．05]。结论MSCs可以通过抑制p-p38、p-JNK的表达，提高p-ERK的表达而降低氧化应激下的细胞凋亡，从而对细胞起保护作用。
Objective To explore the modulatory effects of bone marrow mesenchymal stem cells （MSCs） on changes in oxidative stress and mitogen-activated protein kinases （MAPKs） pathway by co-culturing of bone marrow MSCs with alveolar epithelial cells under oxidative stress. Methods MSCs in rats were separated and cultured, the the co-culture system was established in Transwell small chamber. Three groups were designed ： A549 group, CES ＋ A549 group, and CES ＋ A549 ＋ MSCs group. The cells and the supernatant in three groups were harvested for detection of apoptosis rate of A549 epithelial cells, the con- tents of malondialdehyde （MDA） and superoxide dismutase （SOD）, and the expression of p-C-Jun N-ter- minal kinase （p-JNK）, p-extracellular signal-regulated kinase （p-ERK） , p-p38 and Caspase-3. Results The apoptosis rate in CES ＋ A549 ＋ MSCs group was significantly lower than in CES ＋ A549 group [ （ 11. 01 ±0. 23） vs. （ 18. 12±1.43）, （P 〈0. 01 ）. The MDA content in CES ＋ A549 ＋ MSCs group was reduced significantly as compared with CES ＋ A549 group [ （0. 512 ± 0. 132） vs. （1. 450 ±0. 073 ）, （P 〈 0. 01 ） ], and the SOD content was higher than in CES ＋ A549 group [ （ 12. 22± 0. 12） vs. （7.21 ± 0. 31 ）, （P 〈 0. 01 ） ]. The expression of p-p38, p-JNK and Caspase-3 in A549 ＋ CSE ＋ MSCs group was significantly lower than in A549 ＋ CSE group [ p-p38 ： （ 1.55±0. 13 ） vs. （ 3.41± 0. O1 ） ; p-JNK ： （ 3.24 ±0. 21 ） vs. （7.22 ± 0. 25 ） ; Caspase-3 ： [ （ 2. 29±0. 15 ） vs. （5.27 ± 0. 17 ）, P 〈 0. 05 ], and the expression of p-ERK was significantly higher than in 3.549 ＋ CSE group [ （ 1.21 ± 0. 03 ） vs. （0. 22 ± 0. 02）, P 〈 0. 05 ]. Conclusion MSCs can exert the protective effects on alveolar epithelial cells under oxidative stress by reducing apoptosis through inhibiting the expression of p-p38 and p-JNK, and increasing the expression of p-ERK.
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期1796-1798,共3页
Chinese Journal of Experimental Surgery
基金
河南省医学科技重大攻关计划资助项目（200902012）：河南省科技攻关计划资助项目（102300410247）
关键词
骨髓间充质干细胞
氧化应激
脱噬作用
Bone marrow mesenchymal stem cells
Oxidative stress
Apoptosis
