摘要
目的:构建溶藻弧菌抗独特型抗体的单链抗体(scFv)基因的毕赤酵母分泌型表达载体。方法:从分泌溶藻弧菌抗独特型抗体的杂交瘤细胞株(2F4)中克隆该抗体的重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因(GenBank acces-sion No:DQ011530和DQ011531),并通过基因重组为scFv基因。然后将其克隆入毕赤酵母菌分泌型表达载体pPIC9K中,经序列测定后,电转化入毕赤酵母菌SMD1168中,将经表型筛选和G418抗性筛选的重组酵母菌株进行PCR鉴定。结果:获得毕赤酵母菌分泌型表达载体pPIC9K-scFv,经G418浓度梯度筛选及PCR鉴定得到高拷贝整合的重组酵母菌株。结论:成功地构建溶藻弧菌抗独特型抗体的scFv基因的真核表达载体,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第8期767-768,771,共3页
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology
基金
国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2001AA622040)
