摘要
目的观察COX-2选择性抑制剂NS398的对肾癌细胞增殖和凋亡作用的影响及其作用机制。方法采用标准的细胞培养方法对人肾癌786-0细胞进行培养,将NS398分别以25、50、100、150、200μmoL/L的剂量加入细胞中作用24及48 h后,应用MTT法检测NS398对肾癌细胞增殖的影响;将NS398以50、100及200μmol/L的浓度作用于肾癌786-0细胞24 h后,用流式细胞仪测定细胞凋亡的情况;将NS398分别以25、50、100、150、200μmol/L的剂量加入细胞中作用24 h后,应用RT-PCR和Western blotting分别检测肾癌786-0细胞中COX-2和bcl-2的mRNA及其蛋白表达的情况。结果NS398对肾癌786-0细胞具有较强的抑制作用,且这种抑制作用随浓度和时间的增加而增大,呈浓度依赖关系(P<0.05);NS398作用肾癌786-0细胞24 h后,在细胞周期G0/ G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰,随着浓度升高凋亡峰亦越来越增高(P<0.05);RT-PCR和Western Blot结果表明,不同浓度NS398作用下的肾癌786-0细胞中,COX-2和bcl-2无论在mRNA水平还是在蛋白水平均明显减弱,且呈剂量梯度下降。结论肾癌786-0细胞中存在着COX-2的过表达,选择性COX-2抑制剂NS398通过诱导凋亡来抑制肾癌786-0细胞的增殖;其机制可能是通过抑制COX-2的表达,导致bcl-2抗凋亡活性的降低来完成的。
Objective To evaluate the effect of NS398,a selective cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitor,on cellular proliferation and apoptosis of human renal cell carcinoma (RCC) cell line,and to ex- amine the possible mechanism responsible for the anti-proliferative effects of NS398.Methods Human RCC cell line 786-0 was cultured by using standard technique and treated with NS398 at doses of 25,50, 100,150 and 200μmol/L respectively.Cellular inhibition was measured by MTT at 24 and 48 h.Apoptosis was evaluated by flow cytometry.Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blotting were used to detect the expression of COX-2 and bcl-2 mRNA and protein.Results NS398 sig- nificantly inhibit the cell growth of the 786-0 cells in a time- and concentration-dependent manner (P<0.05).NS398 inhibited proliferation of 786-0 cells,along with the induction of apoptosis in a dose-depend- ent manner (P<0.05).COX-2 and bcl-2 were significantly decreased by NS398 both at mRNA and pro- tein levels.Conclusion Overexpression of COX-2 exists in human 786-0 RCC cell line.NS398 can sup- press the proliferation of 786-0 RCC cells by inducing apoptosis.The possible mechanism is that NS398 in- hibits the expression of COX-2,resulting in the activity suppression of anti-apoptosis of bcl-2.NS398 may be a potentially effective agent against human RCC.
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期861-863,共3页
Chinese Journal of Experimental Surgery
基金
辽宁省教育厅高等学校科学项目(202013145)
