摘要
目的:在建立针对乙肝病毒(HBV)聚合酶基因的单管巢式PCR方法的基础上,结合熔解曲线分析,提高HBVYMDD变异检测的灵敏度。方法:针对HBV聚合酶基因段设计两对熔解温度(Tm)差异较大的内、外引物,在一个封闭反应体系中进行二次扩增并结合熔解曲线分析法检测HBVYMDD变异。结果分别与单纯PCR结合熔解曲线分析和测序法进行比较,并对107例未经拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBVYMDD的自发变异进行分析。结果:建立在单管巢式PCR方法上的熔解曲线分析检测HBVYMDD变异灵敏度要高于单纯PCR结合熔解曲线分析的方法(P<0.001),与直接测序法的符合率为81.3%。在114例CHB标本中YMDD及其变异检出率为95.6%。用本方法在107例未经拉米夫定治疗的CHB病人中YMDD自发变异检出率为31.8%。结论:单管巢式PCR结合熔解曲线分析法提高了YMDD变异检测的灵敏度,而且是一种简便、特异性较好的方法。
出处
《实用医学杂志》
CAS
2007年第2期195-198,共4页
The Journal of Practical Medicine
