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纳米孔测序技术对进境玉米真菌的多样性分析
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作者 邢允允 陈云芳 +5 位作者 邓艳凤 郑斯竹 苗世远 李彬 李鑫 鲁玉杰 《中国粮油学报》 北大核心 2025年第8期183-191,共9页
为了揭示进境玉米感染真菌的种类和多样性,本研究采用传统分离培养方法对来自巴西、俄罗斯、法国、美国和乌克兰共5个国家的44份进境玉米感染真菌种类进行分析,并利用纳米孔测序技术对其中20份玉米进行真菌多样性分析。分离培养结果显... 为了揭示进境玉米感染真菌的种类和多样性,本研究采用传统分离培养方法对来自巴西、俄罗斯、法国、美国和乌克兰共5个国家的44份进境玉米感染真菌种类进行分析,并利用纳米孔测序技术对其中20份玉米进行真菌多样性分析。分离培养结果显示进境玉米中共鉴定出15个属、48种真菌,其中相对丰富度最高的3个属为曲霉属Aspergillus、青霉属Penicillium和镰刀菌属Fusarium。使用Simpson指数对培养的不同国家进境玉米感染真菌群落进行多样性分析发现5个国家之间真菌群落差异不显著(P>0.05)。20份玉米纳米孔测序结果中将OUT归为286个属,鉴定的真菌物种数更为全面,属水平相对丰富度与分离培养的有所差异,其中相对丰富度最高的3个属为曲霉属Aspergillus、镰刀菌属Fusarium和帚枝霉属Sarocladium。测序结果显示5个国家玉米感染真菌物种丰富度(Chao1指数、Ace指数)具有显著性差异(P<0.05),来自俄罗斯的玉米样品感染的真菌群落丰富度显著高于其他国家的玉米样品,Simpson指数在5个国家之间差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 纳米孔测序技术 分离培养 进境玉米 真菌 多样性分析
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基于TaqMan实时荧光聚合酶链式反应和DNA条形码技术鉴别松茸及其伪品 被引量:1
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作者 杨爱馥 万超 +3 位作者 齐欣 刘雪华 姜丽 徐静 《食品安全质量检测学报》 2025年第7期12-18,共7页
目的建立松茸(Tricholoma matsutake)成分的TaqMan实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)定性检测方法,并结合DNA条形码技术鉴定松茸及其制品成分与其标签的符合性。方法以松茸的pol基因为靶基因,设计特异性引物及探针,... 目的建立松茸(Tricholoma matsutake)成分的TaqMan实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)定性检测方法,并结合DNA条形码技术鉴定松茸及其制品成分与其标签的符合性。方法以松茸的pol基因为靶基因,设计特异性引物及探针,对其特异性、灵敏度、重复性开展研究分析,并将建立的松茸成分TaqMan实时荧光PCR检测方法对不同种类市售松茸样品开展检测,鉴别其真实性。结果采用建立的TaqMan实时荧光PCR方法进行检测,松茸与其他32种食用菌和动植物样品均无交叉反应,方法特异性强;灵敏度为质量分数0.01%的松茸和0.01 ng/μL松茸基因组DNA;对市售160份松茸及其制品开展真实性检测,研究表明松茸干品存在假冒现象,检测结果与标签不符合率为36.70%,采用DNA条形码技术进一步对假冒松茸的物种进行鉴定,物种属性为皱环球盖菇(Stropharia rugosoannulata)、巨大口蘑(Tricholoma giganteum)和栎松口蘑(Tricholoma bakamatsutake),其他收集的松茸制品成分检测结果中与标签不符合率分别为23.70%~60.00%。结论该方法灵敏度高,特异性强,可快速精准地对松茸成分进行真实性和符合性鉴别。 展开更多
关键词 松茸 TaqMan实时荧光聚合酶链式反应技术 DNA条形码技术 快速检测 真实性鉴别
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大连地区虾夷贝、赤贝中重金属元素含量变化研究 被引量:1
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作者 孙瑶 慕铮 姜玲玲 《食品安全质量检测学报》 2025年第7期25-32,共8页
目的研究大连地区虾夷贝、赤贝中重金属元素含量变化。方法通过选取大连地区虾夷贝、赤贝样品,在一年内按月收集样本,采用电感耦合等离子体质谱法测定不同月份贝类样品中Pb、Cd、Cr、Cu重金属元素的含量,考察两种贝类对上述元素的富集... 目的研究大连地区虾夷贝、赤贝中重金属元素含量变化。方法通过选取大连地区虾夷贝、赤贝样品,在一年内按月收集样本,采用电感耦合等离子体质谱法测定不同月份贝类样品中Pb、Cd、Cr、Cu重金属元素的含量,考察两种贝类对上述元素的富集随月份变化的趋势。运用单因子污染指数法及目标危害系数法,评价食用富集一定含量重金属贝类产品的食用风险及对人体健康的潜在风险。结果虾夷贝中重金属Cd的含量在3月达到最高峰,最高检测值达到4.50 mg/kg,已超过国家食品安全标准限量;重金属Cu在3月、4月、10月均较为明显高于其他月份,但全年检测数值均低于限量指标。赤贝体内重金属Cd的含量3月、4月为最高峰,最高检测值为1.92 mg/kg,其余月份未检明显变化规律,但全年检测数值均低于限量指标。其余重金属元素的含量随时间、季节的变化未见明显变化规律。结论虾夷贝中重金属的含量随月份的变化最为明显,对于重金属Cd,虾夷贝在3月、4月、5月虾夷贝处在污染中,食用存在健康风险;赤贝全年均处在食用安全数值之内,存在的健康风险较低。 展开更多
关键词 虾夷贝 赤贝 重金属含量 健康风险评估
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大连海关全国首次从荷兰进境的百合种球中截获郁金香X病毒
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作者 张寅寅 李鑫 +1 位作者 黑多尔 白璐 《植物检疫》 北大核心 2020年第5期41-41,共1页
2020年7月,大窑湾海关入境的一批荷兰百合种球(西伯利亚),经大连海关技术中心检疫鉴定,携带郁金香X病毒(tulip virus X,TVX)。这是我国口岸首次在荷兰进境的百合种球中截获该病毒。郁金香X病毒是马铃薯X病毒属(Potexvirus)成员,最早在... 2020年7月,大窑湾海关入境的一批荷兰百合种球(西伯利亚),经大连海关技术中心检疫鉴定,携带郁金香X病毒(tulip virus X,TVX)。这是我国口岸首次在荷兰进境的百合种球中截获该病毒。郁金香X病毒是马铃薯X病毒属(Potexvirus)成员,最早在苏格兰的郁金香中分离出来,可通过鲜切花采收机械接触及种球携带远距离传播,在郁金香植株上引发叶片褪绿和坏死斑点、花被片中形成颜色加深的条纹,该病毒还可侵染百合、柠檬香蜂草等10科22种植物,在荷兰、波兰、挪威、日本、新西兰和美国等多地都有发生报道,我国尚未有发生报道。 展开更多
关键词 郁金香 远距离传播 马铃薯X病毒 百合种球 鲜切花 褪绿 检疫鉴定 进境
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大连松木中假古德伊滑刃线虫形态和分子鉴定
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作者 马欣欣 赵亚津 顾建锋 《植物检疫》 2025年第3期29-34,共6页
在大连开展松林中松材线虫调查时,从濒死马尾松中分离到一种滑刃属线虫群体,均为雌虫。该种线虫形态学主要鉴定特征为虫体细长,侧线4条,排泄孔位于神经环前或神经环对应位置,尾呈圆锥形,略腹弯,尾端有2~4个小突起,呈星状尾尖突。该大连... 在大连开展松林中松材线虫调查时,从濒死马尾松中分离到一种滑刃属线虫群体,均为雌虫。该种线虫形态学主要鉴定特征为虫体细长,侧线4条,排泄孔位于神经环前或神经环对应位置,尾呈圆锥形,略腹弯,尾端有2~4个小突起,呈星状尾尖突。该大连群体28S rRNA D2/D3序列与GenBank中假古德伊滑刃线虫序列相似度达99%以上,系统发育树显示大连线虫种群与假古德伊滑刃线虫聚在一个分支上。经形态特征比较和28S rRNA D2/D3基因序列分析,将该线虫鉴定为假古德伊滑刃线虫。这是我国关于该种线虫存活于松木中的首次报道。 展开更多
关键词 马尾松 形态特征 28S rRNA 假古德伊滑刃线虫 鉴定
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昆虫形态学鉴定用定性标准样品制备技术及关键点控制
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作者 胡强 肇慧君 +4 位作者 赵亚津 洪滨 张晓声 魏春艳 王振华 《植物检疫》 2025年第4期28-30,共3页
植物检疫标准样品是保证检疫鉴定结果质量的有效方法,是验证、评价、鉴定新技术和新方法的重要手段,标准样品在植物检疫中的地位和作用日益被人们认识和肯定。GB/T 15000系列标准给出的研制方法多为定量标准样品,并不完全适用于植物检... 植物检疫标准样品是保证检疫鉴定结果质量的有效方法,是验证、评价、鉴定新技术和新方法的重要手段,标准样品在植物检疫中的地位和作用日益被人们认识和肯定。GB/T 15000系列标准给出的研制方法多为定量标准样品,并不完全适用于植物检疫领域标准样品的研制。本文介绍了植物检疫领域中昆虫形态学鉴定用定性标准样品研制的技术路线,提出了制备过程中关键点及控制方法,旨在为实物标准样品的研制提供参考。 展开更多
关键词 昆虫 定性标准样品 技术路线 关键点控制
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等温核酸扩增技术在禾本科作物病毒检测中的应用
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作者 孙萌 董荟慧 于莹 《农村科学实验》 2025年第17期78-80,共3页
等温核酸扩增技术因快速、简便和高灵敏度的特点,在禾本科作物病毒检测中展现出明显优势。该文总结了环介导等温扩增技术、重组酶聚合酶扩增技术、滚环扩增技术等主要等温扩增技术的原理与特点,重点分析了其在小麦、玉米、水稻病毒检测... 等温核酸扩增技术因快速、简便和高灵敏度的特点,在禾本科作物病毒检测中展现出明显优势。该文总结了环介导等温扩增技术、重组酶聚合酶扩增技术、滚环扩增技术等主要等温扩增技术的原理与特点,重点分析了其在小麦、玉米、水稻病毒检测中的具体应用与成效,评估了其检测效果与性能,并指出当前技术仍面临引物设计复杂度高、抑制物质干扰及标准化程度不足等挑战。最后,该文对该技术未来发展方向进行了展望,以期为禾本科作物病毒快速检测技术的选择与应用提供参考。 展开更多
关键词 等温核酸扩增技术 禾本科作物 病毒检测
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致病性弧菌检测新技术研究进展 被引量:2
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作者 王殿夫 丁宁 +5 位作者 刘洪伟 徐文英 刘俊 李扬 麻丽丹 田卓 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第2期160-167,共8页
随着人们对水产品需求的增加及致病性弧菌引发的食源性疾病的流行,致病性弧菌对水产养殖业及人类健康造成了巨大威胁,基于此,致病性弧菌检测新技术的开发变得尤为迫切。本文介绍了包括免疫学方法、核酸检测方法、基于生物芯片的检测方... 随着人们对水产品需求的增加及致病性弧菌引发的食源性疾病的流行,致病性弧菌对水产养殖业及人类健康造成了巨大威胁,基于此,致病性弧菌检测新技术的开发变得尤为迫切。本文介绍了包括免疫学方法、核酸检测方法、基于生物芯片的检测方法、基于核酸适配体的检测方法、基于肽质量指纹图谱技术的检测方法、基于生物传感器技术的检测方法在内的6项检测技术,分析了其优缺点及其在致病性弧菌中的应用。最后,总结了致病性弧菌检测新技术的研究现状,结合新兴技术指出未来研究方向,为致病性弧菌的快速检测提供参考。 展开更多
关键词 致病性弧菌 免疫学 生物芯片 核酸适配体 肽质量指纹图谱 生物传感器
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微滴式数字PCR技术快速精准检测苹果牛眼果腐病原多年明孢盘菌
9
作者 李辉 姜锋 +3 位作者 杨春光 姜丽 赵鹏 李鑫 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期67-79,共13页
为了建立苹果牛眼果腐病原多年明孢盘菌Neofabraea perennans微滴式数字PCR (ddPCR)检测方法,实现苹果检疫性病原菌的高效率、高精度的检疫鉴定和疫情监控,为口岸外来有害生物防控和保护我国生态安全提供技术服务和支持。本研究以N.pere... 为了建立苹果牛眼果腐病原多年明孢盘菌Neofabraea perennans微滴式数字PCR (ddPCR)检测方法,实现苹果检疫性病原菌的高效率、高精度的检疫鉴定和疫情监控,为口岸外来有害生物防控和保护我国生态安全提供技术服务和支持。本研究以N.perennans为研究对象,通过生物信息学分析确定β-微管蛋白基因(TUB2)作为靶标进行特异性引物与探针设计,通过引物和探针浓度以及退火温度的优化,构建N.perennans的ddPCR特异性检测体系。研究结果表明,N.perennans的ddPCR检测体系的绝对定量检测低限为0.16 copies/μL,最低基因组DNA检测浓度为10.0 pg/μL,与qPCR方法一致,在定量检测范围内的线性相关系数R2大于0.999,RSD小于25%,说明该检测体系的重复性较好,能够用于进口水果样品中苹果牛眼果腐病原多年明孢盘菌N.perennans的快速精准检测。 展开更多
关键词 微滴式数字PCR 苹果牛眼果腐病 多年明孢盘菌 快速检测
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X射线显微CT技术无损检测检疫性杂草种子
10
作者 刘沙 李雪梅 +3 位作者 屈菲 陈振堂 李鑫 李辉 《种子》 北大核心 2024年第1期145-149,156,共6页
为了探索检疫性杂草种子无损检测技术,建立全新的检疫对象鉴定模式,本研究使用X射线显微CT检测系统专用的三维快速重建以及可视化建模软件,通过数据采集、图像重建和三维重组,对检疫性杂草种子样品进行高分辨率内部断层扫描和整体三维... 为了探索检疫性杂草种子无损检测技术,建立全新的检疫对象鉴定模式,本研究使用X射线显微CT检测系统专用的三维快速重建以及可视化建模软件,通过数据采集、图像重建和三维重组,对检疫性杂草种子样品进行高分辨率内部断层扫描和整体三维成像。本研究实现了检疫性杂草苍耳属(非中国种)种子样品的层析三维成像以及内部二维信息的可视化。X射线显微CT技术可为口岸截获检疫性杂草的无损检测提供技术服务和支持。 展开更多
关键词 X射线显微CT 无损检测 检疫性杂草种子
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管式燃烧法测定海产品中放射性碳-14的测量不确定度评定分析
11
作者 褚莹倩 郭萌 +5 位作者 梁健健 李林朋 李雪花 曹文军 陈溪 黄大亮 《生态毒理学报》 北大核心 2025年第5期367-375,共9页
海洋放射性污染会给水域生态健康和海产品安全带来隐患,为了掌握海产品中碳-14活度浓度水平,以鱼、虾、蟹等海产品为研究对象,样品在(105±5)℃下进行过烘干处理,烘干的样品经管式燃烧装置处理后生成二氧化碳,二氧化碳通过氢氧化钠... 海洋放射性污染会给水域生态健康和海产品安全带来隐患,为了掌握海产品中碳-14活度浓度水平,以鱼、虾、蟹等海产品为研究对象,样品在(105±5)℃下进行过烘干处理,烘干的样品经管式燃烧装置处理后生成二氧化碳,二氧化碳通过氢氧化钠溶液进行吸收,后与氯化钙溶液反应,制成碳酸钙沉淀,采用悬浮法与闪烁液混匀,通过液体闪烁计数器测定碳-14的活度浓度。根据方法原理分析测量过程中不确定度的来源,包括样品称量、氧化燃烧装置回收率、探测效率、样品计数等因素,通过数学模型评定海产品中碳-14活度浓度的不确定度。结果表明,本试验测得海带、鱿鱼、虾、梭子蟹、牡蛎、鲳鱼、安康鱼样品中碳-14活度浓度分别为(7.54±0.82) Bq·kg^(-1)(鲜)、(20.8±2.20) Bq·kg^(-1)(鲜)、(4.31±0.54) Bq·kg^(-1)(鲜)、(6.56±0.92) Bq·kg^(-1)(鲜)、(7.59±0.86) Bq·kg^(-1)(鲜)、(12.80±1.69) Bq·kg^(-1)(鲜)和(1.59±0.56) Bq·kg^(-1)(鲜),比较各不确定度分量的贡献度,样品计数和探测效率引入的不确定度为碳-14活度浓度测量不确定度的主要来源,为海产品中放射性核素碳-14的食品安全监管和测量不确定度评定提供技术支持。 展开更多
关键词 管式燃烧法 海产品 碳-14
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有机微污染物在辽东湾海洋生物中的赋存及传递
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作者 王学梅 杨晨 +4 位作者 朱永乐 董璐 褚莹倩 张晓林 李雪花 《生态毒理学报》 北大核心 2025年第5期91-100,共10页
有机微污染物(OMPs)在海洋环境中广泛存在,可通过生物富集进入海洋生物并沿食物链传递到高营养级的生物,并对海洋生物的健康构成潜在威胁。当前研究多聚焦单一类别OMPs在海洋食物链中的赋存特征与传递规律,而同时分析多类别OMPs的复合... 有机微污染物(OMPs)在海洋环境中广泛存在,可通过生物富集进入海洋生物并沿食物链传递到高营养级的生物,并对海洋生物的健康构成潜在威胁。当前研究多聚焦单一类别OMPs在海洋食物链中的赋存特征与传递规律,而同时分析多类别OMPs的复合暴露特征及传递的研究较少。因此优化了一种同步提取和净化多环芳烃、邻苯二甲酸酯、多溴联苯醚、多氯联苯、硝基苯类、农药、氯苯类和酚类8类156种OMPs的生物样品前处理方法,并构建了气相色谱-质谱定量分析方法。通过评估156种OMPs的回收率、基质效应和相对标准偏差,验证了方法的准确性和精密度。在不同加标水平(20、50和100 ng)下,分别有83%、90%和90%的目标OMPs的平均回收率介于60%~140%之间,均有93%以上的目标OMPs回收率的相对标准偏差小于30%,说明该方法具有较好的稳定性。其中,97.5%的OMPs呈现为中等或弱基质效应。80%和98%的目标OMPs的方法检出限分别小于10 ng·g^(-1)和20 ng·g^(-1);80%和94%的目标OMPs的方法定量限分别小于20 ng·g^(-1)和100 ng·g^(-1)。基于该方法,对辽东湾近海7类17种海洋生物(营养级范围为1~3.32)体内OMPs进行分析,探究了OMPs在海洋生物体内的赋存特征,并结合氮稳定同位素比值分析营养级,解析了其在食物链中的传递规律。结果表明,在辽东湾海洋生物体内共检出42种OMPs,总浓度范围为0.02~4.99μg·g^(-1)(以干质量计),平均值为1.39μg·g^(-1)。其中,农药、邻苯二甲酸酯和硝基苯类是海洋生物体内的特征污染物,总浓度均值分别为0.72、0.54和0.11μg·g^(-1)。辽东湾7类海洋生物中,双壳类生物体内OMPs的总浓度均值最高,其次是软甲类、头足类、海星类、鱼类、腹足类和褐藻类。此外,部分OMPs(芴、荧蒽、邻苯二甲酸二正己酯和甲基异柳磷)在海洋生物体内的赋存与生物的脂质含量相关。针对检出率大于30%的12种OMPs计算其营养级放大因子(TMF),发现3种OMPs(苊、甲基异柳磷及苯氰菊酯)的TMF值均大于1,呈现生物放大趋势。通过建立适用于同步定量8类156种OMPs的生物样品分析方法,解析了辽东湾海洋生物体内OMPs的赋存特征,并识别出具有生物放大效应的OMPs,为海洋生态风险评估提供了科学依据。 展开更多
关键词 有机微污染物 海洋生物 赋存特征 食物链传递
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基于DNA条形码技术对朝鲜牛黄安宫丸中犀牛角成分鉴别的研究 被引量:3
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作者 王殿夫 齐欣 +3 位作者 李长征 刘洪伟 麻丽丹 杨希国 《辽宁大学学报(自然科学版)》 CAS 2021年第1期46-52,共7页
目的建立DNA条形码技术对朝鲜牛黄安宫丸中犀牛角成分的真伪鉴别方法,对打击非法贸易及保护珍稀濒危野生动物具有重大意义.方法以涉案朝鲜牛黄安宫丸为材料,根据材料自身的特点对其进行消化处理后采用市售动物基因组核酸提取试剂盒方法... 目的建立DNA条形码技术对朝鲜牛黄安宫丸中犀牛角成分的真伪鉴别方法,对打击非法贸易及保护珍稀濒危野生动物具有重大意义.方法以涉案朝鲜牛黄安宫丸为材料,根据材料自身的特点对其进行消化处理后采用市售动物基因组核酸提取试剂盒方法提取核酸,并采用DNA条形码片段12S rRNA通用引物对提取的基因组DNA进行PCR扩增反应和测序.结果对测序结果使用NCBI中Blast进行序列相似性分析比对,结果表明5份涉案朝鲜牛黄安宫丸的扩增产物序列与非洲水牛的线粒体DNA的12S rRNA基因序列的部分片段的一致性达98.84%,因此为水牛角成分并非使用濒危物种犀牛角.结论依靠分子生物学中DNA条形码技术对疑似犀牛角药材进行准确的物种鉴定,可用于鉴别犀牛角药材的真伪,为各执法部门提供可靠的技术支持,规范国内和口岸犀牛角制品市场. 展开更多
关键词 犀牛角 物种鉴别 DNA条形码技术 牛黄安宫丸
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辽宁沿海经济鱼类的全氟化合物污染状况和风险分析 被引量:1
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作者 徐文英 沈葆真 +2 位作者 曲世超 薛伟锋 齐欣 《食品安全质量检测学报》 2025年第7期33-37,共5页
目的调查辽宁沿海经济鱼类的全氟化合物(perfluorinated compounds,PFCs)污染状况。方法采集辽宁省主要经济海域旅顺、庄河、营口、锦州4个地区6种主要经济鱼类样品,建立海洋生物样品的前处理规范程序,用液相色谱-串联质谱法检测PFCs,... 目的调查辽宁沿海经济鱼类的全氟化合物(perfluorinated compounds,PFCs)污染状况。方法采集辽宁省主要经济海域旅顺、庄河、营口、锦州4个地区6种主要经济鱼类样品,建立海洋生物样品的前处理规范程序,用液相色谱-串联质谱法检测PFCs,研究这些经济鱼类中PFCs的污染水平,并进行生物富集风险分析。结果这些海域经济鱼类中PFCs污染主要为全氟辛磺酸(perfluorooctane sulfonates,PFOS)和全氟辛酸(perfluorooctanoic acid,FPOA)污染。PFOA在鱼类样品中检出率达到100%,PFOA含量最大值达30.30 ng/g ww,最小值为4.02 ng/g ww。PFOS在鱼类内脏中的检出率达到100%,而在鱼肉组织未检出。黑鮶鱼、六线鱼、小黄鱼是所测试的这些经济鱼类中更易富集PFOS、PFOA的鱼种,具有潜在的生物富集效应。结论经济鱼类中广泛存在PFCs污染,PFCs的检测工作应该持续开展,对于PFOS及PFOA污染严重的地区应尽早采取防治措施,持续进行这些污染物的监测及风险分析。 展开更多
关键词 全氟化合物 全氟辛磺酸 全氟辛酸 污染水平 生物富集
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植物检疫实验室废弃物无害化处理方法及管理措施 被引量:1
15
作者 吴晶 高渊 +3 位作者 缪爱斌 王有福 李曼 富宏坤 《农村科学实验》 2025年第12期37-39,共3页
由于植物检疫实验室废弃物的特殊性,其无害化处理工作受到高度重视。基于此,该文对植物检疫实验室废弃物实施科学分类,针对废弃物类型提出相应的无害化处理方法,同时提出无害化处理的管理措施,旨在为实际操作提供指引。
关键词 植物检疫 实验室废弃物 无害化处理 生物安全 有害生物防控 管理措施
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基于向日葵黑茎病菌基因特异性靶标的RAA-LFS快速检测方法建立
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作者 马晨皓 李茗乐 +5 位作者 李鑫 李立梅 段维军 范在丰 吴品珊 雷荣 《植物检疫》 2025年第4期52-56,共5页
向日葵黑茎病是由真菌病原体Plenodomus lindquistii(Frezzi)引起的重要植物病害,是我国向日葵作物的检疫性真菌病害之一。本研究通过全基因组比对筛选出一个名为Pli9004的基因特异性靶标。基于该靶标设计了重组酶介导扩增(Recombinase-... 向日葵黑茎病是由真菌病原体Plenodomus lindquistii(Frezzi)引起的重要植物病害,是我国向日葵作物的检疫性真菌病害之一。本研究通过全基因组比对筛选出一个名为Pli9004的基因特异性靶标。基于该靶标设计了重组酶介导扩增(Recombinase-Aid Amplification,RAA)结合侧流层析试纸条检测引物和探针,并优化了RAA-LFS检测的反应时间、温度和探针浓度等,用于验证该基因的特异性及快速检测能力。该方法可成功检测P.lindquistii基因组DNA,而对照菌和空白对照为阴性结果;检测灵敏度达1.76 pg/μL。RAA-LFS方法可在35 min内完成对P.lindquistii的检测,展示了其现场检测的潜力。实际样品检测结果表明,本研究建立的方法可成功用于植物组织中向日葵黑茎病菌的快速检测。 展开更多
关键词 向日葵黑茎病 特异性靶标 重组酶介导扩增 侧向层析试纸条 检测
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车前草花叶病毒外壳蛋白基因实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用
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作者 李鑫 李扬 +2 位作者 李辉 李可 王秀芬 《生物安全学报(中英文)》 北大核心 2025年第3期212-220,共9页
【目的】建立一套适用于百合车前草花叶病毒(Plantago asiatica mosaic virus,PlAMV)快筛的实时荧光RT-PCR检测方法。【方法】以PlAMV为检测目标,在NCBI网站上Blast检索数据库中的PlAMV以及相同寄主上常见的16种病毒的特异性基因外壳蛋... 【目的】建立一套适用于百合车前草花叶病毒(Plantago asiatica mosaic virus,PlAMV)快筛的实时荧光RT-PCR检测方法。【方法】以PlAMV为检测目标,在NCBI网站上Blast检索数据库中的PlAMV以及相同寄主上常见的16种病毒的特异性基因外壳蛋白(coat protein,CP)序列信息,根据序列碱基替换的饱和性分析、系统发育树分析以及遗传距离分析结果,确定PlAMV的特异性基因,以CP基因为靶标,设计特异性强的引物和探针,建立特异性实时荧光检测方法,验证引物特异性,测试反应的灵敏度,并对21份疑似感染PlAMV的百合样品测试检测效果。【结果】确定CP基因作为PlAMV检测的特异性基因,设计2组特异性引物和探针,利用疑似感染PlAMV的百合样品进行检测效果验证,建立了2套快筛的PlAMV实时荧光RT-PCR检测体系,检出限达到1 pg·μL^(-1),2组引物和探针均检测出21份阳性样品,检出率均为100%,2组引物和探针的扩增效率相近。【结论】建立的实时荧光RT-PCR反应体系可特异性定量检测PlAMV,并可应用于口岸样品进行快速、准确的筛查,为加强对PlAMV的分析与管控,制定全面系统的控制措施提供了技术支持。 展开更多
关键词 车前草花叶病毒 外壳蛋白 实时荧光 RT-PCR 生物信息学
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柴油十六烷值近红外系统受控下数据质量目标的优化
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作者 李颖 潘志强 王斗文 《光谱学与光谱分析》 北大核心 2025年第9期2535-2542,共8页
柴油十六烷值近红外(NIR-CN)系统测试的数据质量目标(DQO)建模优化,目前尚未见到成熟的研究成果。为减轻匹配错误的综合基体效应和避免单水平无法控制的β风险,本工作利用美国瓦克夏(Waukesha)十六烷值机数据进行比对。经与幂律、二次... 柴油十六烷值近红外(NIR-CN)系统测试的数据质量目标(DQO)建模优化,目前尚未见到成熟的研究成果。为减轻匹配错误的综合基体效应和避免单水平无法控制的β风险,本工作利用美国瓦克夏(Waukesha)十六烷值机数据进行比对。经与幂律、二次线性组合和斜率弧度的统计比较,认为最大似然估计戴明回归(DR)的偏倚修正属于最佳合理拟合模型。DR建模来自水平下加权中心平方和(CSS)二维数据的变量迭代,其建立在随机变量独立同分布(i.i.d)假设检验的前提条件,非视相关系数为模型拟合优劣的判断依据,而是通过失拟效应和Anderson-Darling(AD)拟合优度检验。这种检验能有效避免自相关函数(ACF)的累积冲击和交互干扰,最大限度弥补控制图主观臆断趋势分析的目测不足。研究结果表明,DR模型更符合NIR系统的DQO稳健性和实际情况。NIR系统以往仅局限于CN单一水平讨论,现扩展到多个水平的变异研究。不同决策导致不同不确定度,错误决策会遭致额外的成本损失。随时间推移在风险与成本统一的原则下难免会出现CSS的重新选择,只要后续测试满足NIR系统所设定的DQO随机扰动,将使用条件产生的风险控制在所论证的CSS范围内即可。 展开更多
关键词 数据质量目标 戴明回归 加权中心平方和 失拟效应 独立同分布 自相关函数
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高产AI-2副溶血性弧菌的筛选及毒力特性研究
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作者 袁硕 王彦博 +6 位作者 刘水琳 崔方超 檀茜倩 吕欣然 励建荣 李学鹏 董浩 《中国食品学报》 北大核心 2025年第2期115-123,共9页
副溶血性弧菌是一种常见的食源性致病菌,其运动能力、生物被膜形成和毒力因子产生等受AI-2/LuxS型群体感应系统调控。本研究从9株副溶血性弧菌中筛选具有高产AI-2信号分子能力的菌株,通过添加外源AI-2信号分子分析其对生物被膜、毒力因... 副溶血性弧菌是一种常见的食源性致病菌,其运动能力、生物被膜形成和毒力因子产生等受AI-2/LuxS型群体感应系统调控。本研究从9株副溶血性弧菌中筛选具有高产AI-2信号分子能力的菌株,通过添加外源AI-2信号分子分析其对生物被膜、毒力因子和运动性等的影响。结果表明,获得1株高产AI-2信号分子的副溶血性弧菌VP-4,添加不同体积分数的外源AI-2信号分子(1%~7%)对其生物被膜、明胶酶、卵磷脂酶、淀粉酶、运动能力和溶血性的促进率分别为33.02%~67.87%,1.67%~7.26%,3.25%~48.15%,1.21%~12.17%,4.92%~35.98%,4.15%~50.60%,2.06%~15.23%。同时,扫描电镜观察发现添加外源AI-2信号分子的副溶血性弧菌生物被膜菌体聚集堆积,厚度增加,结构致密。上述结果说明AI-2信号分子可以促进副溶血性弧菌生物被膜的形成及毒力因子的释放,提高其运动能力。本研究可为控制海产品中副溶血性弧菌的致病性提供新靶点。 展开更多
关键词 海产品 副溶血性弧菌 AI-2/LuxS 生物被膜 毒力因子
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苯乳酸对食源创伤弧菌生物膜抑制作用研究
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作者 张艳芳 刘水琳 +7 位作者 郭梦伽 吕孟敏 吕欣然 白凤翎 励建荣 崔方超 檀茜倩 董浩 《食品工业科技》 北大核心 2025年第2期152-158,共7页
本文研究了苯乳酸在亚抑菌浓度条件下对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)生物膜形成的抑制作用。首先构建创伤弧菌生物膜模型,然后利用结晶紫染色法和XTT还原法分析苯乳酸对创伤弧菌生物膜形成量和代谢活性的抑制作用,并以胞外多糖、胞外蛋... 本文研究了苯乳酸在亚抑菌浓度条件下对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)生物膜形成的抑制作用。首先构建创伤弧菌生物膜模型,然后利用结晶紫染色法和XTT还原法分析苯乳酸对创伤弧菌生物膜形成量和代谢活性的抑制作用,并以胞外多糖、胞外蛋白和胞外DNA为指标,评价苯乳酸对创伤弧菌胞外聚合物的影响,进一步借助光学和激光共聚焦显微镜探究苯乳酸对创伤弧菌生物膜结构的影响。结果表明:创伤弧菌生物膜的聚集期、成熟期和脱落期分别在16~32、32~56和56~72 h。苯乳酸浓度为0.5 MIC(minimum inhibitory concentration,MIC)时,对创伤弧菌成熟期生物膜抑制作用较好,对生物膜形成量、代谢活性、胞外多糖、胞外蛋白、胞外DNA的抑制率分别为51.04%、33.62%、61.97%、32.70%、52.25%,且破坏了生物膜的致密性和完整性,使细菌呈松散分布。苯乳酸可通过减少创伤弧菌生物膜胞外聚合物的形成,从而抑制其生物膜的形成。本研究可为控制水产品中创伤弧菌生物膜提供理论基础。 展开更多
关键词 苯乳酸 创伤弧菌 生物膜 抑制作用
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