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The decoction and blood-entering sRNAs of Fritillaria thunbergii Miq. (Zhebeimu) relieve chronic obstructive pulmonary disease by PTGS2-NOS2-XPC-ABCC1 axis
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作者 Yue Wan Sheng-Tao Hu +6 位作者 Kai-Rui Liu Yu-Zhe Chang Si-Han Tang Zhi-Ru Yang Ling Zheng Hao Guo Jun Kang 《Traditional Medicine Research》 2025年第10期76-86,共11页
Background:Chronic obstructive pulmonary disease(COPD)is a progressive chronic inflammatory disease characterized by irreversible airflow limitation.Fritillaria thunbergii Miq.Zhebeimu(ZBM)has a long history in treati... Background:Chronic obstructive pulmonary disease(COPD)is a progressive chronic inflammatory disease characterized by irreversible airflow limitation.Fritillaria thunbergii Miq.Zhebeimu(ZBM)has a long history in treating COPD,but the underlying mechanism is still unclear.Methods:This study explored the pathological mechanism of COPD through RNA-Seq analysis and single-cell sequencing data analysis.And the mechanism of ZBM and blood entering sRNAs for COPD was verified with network pharmacology analysis and in vitro experiments.Results:The results showed that inflammation and oxidative stress exacerbated the progression of COPD,and the expression of HSP90AA1,PTGS2,and AGRN genes significantly increased in the lung tissue of patients.Network pharmacology analysis suggests that the natural products contained in ZBM may directly target HSP90AA1,PTGS2,and AGRN for the treatment of COPD.Analysis of the blood entering sRNA contained in the decoction of ZBM revealed its excellent antioxidant and anti-macrophage polarization effects.Meanwhile,ZBM decoction,sRNA2,and sRNA5 reduce oxidative stress and inflammation by acting on prostaglandin-endoperoxide synthase 2(PTGS2),nitric oxide synthase 2(NOS2),ATP-binding cassette,subfamily C member 1(ABCC1),and xeroderma pigmentosum complementation group C(XPC)genes.Conclusion:Our study demonstrated that ZBM extract and ZBM derived sRNA2 and sRNA5 can relieve COPD by regulating PTGS2-NOS2-XPC-ABCC1 axis. 展开更多
关键词 chronic obstructive pulmonary Zhebeimu srnas active ingredients
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人工sRNAs沉默csrA基因以优化大肠杆菌生产L-酪氨酸 被引量:3
2
作者 姚元锋 赵莹 赵广荣 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期60-65,共6页
sRNAs作为一种强有力的基因表达调控工具,在真核生物中得到了广泛的应用。随着微生物中sRNAs的不断发现以及其调控机制的逐渐明确,新近开发的人工sRNA工程在微生物代谢工程的改造上也展现了巨大的优势。通过对大肠杆菌负调控L-酪氨酸生... sRNAs作为一种强有力的基因表达调控工具,在真核生物中得到了广泛的应用。随着微生物中sRNAs的不断发现以及其调控机制的逐渐明确,新近开发的人工sRNA工程在微生物代谢工程的改造上也展现了巨大的优势。通过对大肠杆菌负调控L-酪氨酸生物合成途径的碳贮藏调控因子(csrA)基因的sRNAs进行了人工设计和筛选,分析了对L-酪氨酸合成的影响。结果表明,所设计的sRNA能有效提高L-酪氨酸的合成,较高拷贝数的短anti-csrA sRNA2比较长的sRNA1更有效,使L-酪氨酸产量提高了1.2倍。sRNA工程技术是一种有效的负调控全局代谢途径的策略,其在合成生物学以及微生物细胞工厂构建上必将有着更广泛的应用。 展开更多
关键词 人工srnas 基因沉默 csrA L-酪氨酸
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大鼠45SRNAs的cDNA克隆与序列分析 被引量:2
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作者 徐来祥 马建章 汪永庆 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期24-28,共5页
利用RT PCR方法 ,首次从大鼠肝脏细胞总RNA中扩增出 4 .5SRNAs的cDNA。该cDNA被克隆到pGEM3Zf( +)质粒上 ,经酶切电泳鉴定 ,然后测序。与报道的小鼠和仓鼠 4 .5SRNAs序列进行了比较研究 。
关键词 大鼠 4.5srnas RT-PCR
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sRNASVM——基于SVM方法构建大肠杆菌sRNA预测模型(英文) 被引量:1
4
作者 王立贵 应晓敏 +2 位作者 曹源 查磊 李伍举 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期287-293,共7页
在理解细菌与环境的相互作用方面,细菌sRNA的识别发挥重要作用。文章介绍了一个通过增加训练集中实验证实的sRNA来构建细菌sRNA预测模型的策略,并以大肠杆菌K-12的sRNA预测为例来说明策略的可行性。结果表明,按此策略构建的模型sRNASVM... 在理解细菌与环境的相互作用方面,细菌sRNA的识别发挥重要作用。文章介绍了一个通过增加训练集中实验证实的sRNA来构建细菌sRNA预测模型的策略,并以大肠杆菌K-12的sRNA预测为例来说明策略的可行性。结果表明,按此策略构建的模型sRNASVM的10倍交叉检验精度达到92.45%,高于目前文献中报道的精度。因此,构建的这一模型将为实验发现sRNA提供较好的生物信息学支持。有关模型和详细结果可以从网站http://ccb.bmi.ac.cn/srnasvm/下载。 展开更多
关键词 SRNA 支持向量集 预测
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Predicting sRNAs and Their Targets in Bacteria 被引量:9
5
作者 Wuju Li Xiaomin Ying +1 位作者 Qixuan Lu Linxi Chen 《Genomics, Proteomics & Bioinformatics》 CAS CSCD 2012年第5期276-284,共9页
Bacterial small RNAs (sRNAs) are an emerging class of regulatory RNAs of about 40-500 nucleotides in length and, by binding to their target mRNAs or proteins, get involved in many biological processes such as sensin... Bacterial small RNAs (sRNAs) are an emerging class of regulatory RNAs of about 40-500 nucleotides in length and, by binding to their target mRNAs or proteins, get involved in many biological processes such as sensing environmental changes and regulating gene expres- sion. Thus, identification of bacterial sRNAs and their targets has become an important part of sRNA biology. Current strategies for discovery of sRNAs and their targets usually involve bioinformatics prediction followed by experimental validation, emphasizing a key role for bioinformatics prediction. Here, therefore, we provided an overview on prediction methods, focusing on the merits and limita- tions of each class of models. Finally, we will present our thinking on developing related bioinformafics models in future. 展开更多
关键词 BACTERIAL SRNA TARGET BIOINFORMATICS Prediction
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ncBCG201对BCG适应逆境及胞内生存能力的影响
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作者 杜泽锦 章恺伦 +3 位作者 范玲 刘晗 郭爱珍 陈颖钰 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第10期1011-1015,共5页
目的探讨小RNA ncBCG201的功能及其对分枝杆菌生存能力的影响。方法基于BCG感染THP-1巨噬细胞后的RNA测序筛选差异表达的ncRNA;构建ncBCG201过表达的BCG菌株,测定其压力存活、生长、生物被膜及胞内存活能力。结果ncBCG201过表达菌株生... 目的探讨小RNA ncBCG201的功能及其对分枝杆菌生存能力的影响。方法基于BCG感染THP-1巨噬细胞后的RNA测序筛选差异表达的ncRNA;构建ncBCG201过表达的BCG菌株,测定其压力存活、生长、生物被膜及胞内存活能力。结果ncBCG201过表达菌株生长减缓并提前进入平台期;碳饥饿下存活能力显著增强,膜压力下存活下降;生物被膜形成能力降低,表面皱襞减少;THP-1内24 h和48 h存活菌落数显著高于对照。结论ncBCG201通过调节BCG逆境适应性增强其在巨噬细胞生存能力。 展开更多
关键词 卡介苗 结核分枝杆菌 SRNA ncBCG201 逆境适应
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海南本地抗病小米辣响应象耳豆根结线虫侵染的miRNA鉴定及其靶基因预测
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作者 高畅 张志远 +3 位作者 刘子记 陈梅红 朱婕 曹振木 《热带作物学报》 北大核心 2025年第7期1571-1583,共13页
象耳豆根结线虫(Meloidogyneenterolobii)是一种对辣椒生产危害较大的病原物,使用抗病品种是防治该病害最为经济、环保的手段。深入理解根结线虫抗性调控机理将有利于加速抗病育种进程。本课题组前期研究中对海南本地抗病小米辣种质CF2... 象耳豆根结线虫(Meloidogyneenterolobii)是一种对辣椒生产危害较大的病原物,使用抗病品种是防治该病害最为经济、环保的手段。深入理解根结线虫抗性调控机理将有利于加速抗病育种进程。本课题组前期研究中对海南本地抗病小米辣种质CF25进行了接种前后的转录组数据分析,挖掘了与根结线虫抗性相关的代谢通路。为进一步探索抗性表达调控机理,本研究对CF25接种前后sRNA文库进行了高通量测序,共检测到133个差异表达miRNAs。以P≤0.05和|log2(FC)|≥3为筛选标准,鉴定出33个显著差异表达的miRNAs,其中包括19个已知miRNAs和14个新发现miRNAs。对33个显著差异表达的miRNAs进行靶基因预测,共得到373个靶基因,其中miR5658-z预测靶基因数量最多。GO功能和KEGG代谢通路富集分析显示靶基因主要富集于植物-病原菌互作、信号转导等通路,推测miRNA介导的信号转导及植物防御反应可能是CF25抗象耳豆根结线虫的重要原因。为初步验证差异表达miRNA和靶基因间的调控关系,选取6个差异表达miRNAs及其靶基因进行qRT-PCR表达验证,得出miRNA与靶基因的表达差异趋势与高通量测序结果一致,基本符合miRNA负向调控靶基因表达的规律。以上研究结果表明miRNA可能在辣椒对根结线虫的防御反应中起到了重要作用,为后续深入解析miRNA介导的根结线虫抗性机理奠定基础。 展开更多
关键词 灌木辣椒 抗象耳豆根结线虫 sRNA测序 miRNA 靶基因
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幽门螺杆菌nikS启动子T重复变异调控细菌毒力的研究
8
作者 李晓艺 谢方瑜 +4 位作者 于婷 余梦超 张程 董全江 王莉莉 《胃肠病学和肝病学杂志》 2025年第11期1644-1649,共6页
目的分析国内幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)镍调节sRNA基因nikS启动子区域中胸腺嘧啶重复序列(T-repeat)长度变异特征,探讨序列变异对细菌毒力表达的调控作用和细菌致病力的影响。方法收集125株H.pylori临床分离株(胃癌来... 目的分析国内幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)镍调节sRNA基因nikS启动子区域中胸腺嘧啶重复序列(T-repeat)长度变异特征,探讨序列变异对细菌毒力表达的调控作用和细菌致病力的影响。方法收集125株H.pylori临床分离株(胃癌来源55株,胃炎来源70株),PCR扩增nikS启动子区并测序;Clustal W比对序列;qPCR方法检测nikS和毒力基因cagA转录的相对表达水平;建立H.pylori感染AGS胃上皮细胞模型,尿素酶实验检测H.pylori对AGS细胞黏附率;利用qPCR和ELISA方法分别检测H.pylori感染AGS细胞中TNF-α和IL-8的mRNA和蛋白表达水平。结果H.pylori nikS启动子-10区上游T-repeat序列的长度在125株临床分离株中呈高度变异:从7~19个T碱基。依据含有重复T碱基数量将H.pylori分为:S组(7~13 T)和L组(14~19 T)。其中,L组胃癌患者占比(50.00%)高于S组(29.73%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.344,P<0.05);转录分析发现L组nikS相对表达量显著低于S组,L组cagA mRNA相对表达量明显高于S组,差异均有统计学意义(P<0.05)。H.pylori感染AGS细胞实验分析发现,L组H.pylori黏附胃上皮细胞能力显著高于S组(50.83%vs 15.30%,P<0.05);qPCR和ELISA检测结果表明L组H.pylori诱导胃上皮细胞TNF-α的mRNA相对表达量和TNF-α分泌量均高于S组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论国内H.pylori菌株nikS启动子-10区上游T-repeat序列长度呈高度变异。这种序列变异通过调控nikS的转录,进一步调控cagA的表达及细菌致病能力。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 SRNA nikS CAGA 调节因子 毒力
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非编码小RNA FrnS基因缺失对鼠伤寒沙门菌致病性的影响
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作者 宁程程 田路路 +5 位作者 冯凯 陈英 艾佳吴怡 柳旭伟 杨力伟 张再超 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第10期4912-4919,共8页
【目的】通过构建非编码小RNA(sRNA)FnrS基因缺失株,探究FnrS基因对鼠伤寒沙门菌致病性的影响。【方法】利用λ-Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌FnrS基因缺失株ΔFnrS,并测定其遗传稳定性、生长曲线及生化特性;通过检测菌株对小鼠的半... 【目的】通过构建非编码小RNA(sRNA)FnrS基因缺失株,探究FnrS基因对鼠伤寒沙门菌致病性的影响。【方法】利用λ-Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌FnrS基因缺失株ΔFnrS,并测定其遗传稳定性、生长曲线及生化特性;通过检测菌株对小鼠的半数致死剂量(LD_(50))、组织载菌量及病理组织切片观察分析FnrS基因对鼠伤寒沙门菌致病性的影响。【结果】成功构建FnrS基因缺失株ΔFnrS,其能稳定遗传。生长曲线和生化试验结果显示,FnrS基因缺失不影响鼠伤寒沙门菌的生长能力及生化特性。小鼠致病性试验结果显示,缺失株ΔFnrS对小鼠的LD_(50)为1.06×10^(5) CFU,显著高于亲本株和回补株(P<0.05);缺失株ΔFnrS与亲本株感染后小鼠存活率无显著差异(P>0.05);缺失株ΔFnrS株感染后7、9 d,小鼠肝脏载菌量显著低于亲本株和回补株(P<0.05),感染后5、7、9 d小鼠脾脏载菌量显著低于亲本株和回补株(P<0.05)。【结论】FnrS基因缺失降低了鼠伤寒沙门菌的致病能力,研究结果为鼠伤寒沙门菌致病机制的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 SRNA FnrS基因 致病性
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细菌sRNA在感染免疫中的作用机制
10
作者 王方鸿 周鹏 +2 位作者 刘红伟 马鹏 尹卫国 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第12期2271-2273,2277,共4页
sRNA(small non-coding RNA)是一类广泛存在于真核和原核生物中,长度为50~500nt的非编码小RNA。随着研究技术的发展,越来越多sRNA及其功能正逐步被阐述。sRNA广泛参与调节铁稳态、代谢反应、应激反应等多种途径来调节细菌感染免疫反应... sRNA(small non-coding RNA)是一类广泛存在于真核和原核生物中,长度为50~500nt的非编码小RNA。随着研究技术的发展,越来越多sRNA及其功能正逐步被阐述。sRNA广泛参与调节铁稳态、代谢反应、应激反应等多种途径来调节细菌感染免疫反应。该综述拟针对近期国内外研究热点,对细菌sRNA在感染免疫中的作用机制研究进展进行概述。 展开更多
关键词 SRNA 细菌感染 感染 免疫
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基于16sRNA测序技术研究重度三尖瓣关闭不全患者肠道菌群的变化
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作者 方斗 张朝龙 +4 位作者 肖硕 李玉欣 汪珍忠 钟丽珊 黄焕雷 《心血管病学进展》 2025年第6期559-564,共6页
目的 分析单纯重度三尖瓣关闭不全患者肠道菌群的变化,探索在三尖瓣关闭不全患者进行菌群干预治疗的可行性。方法 以2022年9月—2023年10月连续入住广东省人民医院心外科的单纯重度三尖瓣关闭不全患者为三尖瓣关闭不全试验组(T组,n=20)... 目的 分析单纯重度三尖瓣关闭不全患者肠道菌群的变化,探索在三尖瓣关闭不全患者进行菌群干预治疗的可行性。方法 以2022年9月—2023年10月连续入住广东省人民医院心外科的单纯重度三尖瓣关闭不全患者为三尖瓣关闭不全试验组(T组,n=20);每纳入1例试验组患者时,同期在住院拟行手术治疗的单纯重度二尖瓣关闭不全患者中随机抽取1例纳入二尖瓣关闭不全对照组(M组,n=20);另外,每纳入2例试验组患者时,在正常人群中选取1例健康成年人纳入健康对照组(N组,n=10)。使用无菌器皿采集T、M、N组三组人群的粪便样本,进行16sRNA测序,根据测序结果进行生物学分析。结果 α多样性显示,T组患者肠道菌群Simpson、Sobs、Chao1、ACE指数低于M组和N组,但无统计学差异(P>0.05)。β多样性显示,T、M和N组三组之间呈彼此分离的情况。菌群与右心功能指标的相关性分析显示,瘤胃球菌科、颤螺菌目、Ruminococcus_sp_N15MGS-57、食葡糖罗斯拜瑞氏菌的相对丰度与三尖瓣环收缩期位移呈正相关。结论 重度三尖瓣关闭不全患者存在肠道菌群紊乱,并且多种菌群与重度三尖瓣关闭不全患者的右心功能存在明显的相关性,提示肠道菌群与重度三尖瓣关闭不全的发生发展有一定的相关性。 展开更多
关键词 重度三尖瓣关闭不全 肠道菌群 心力衰竭 16sRNA测序
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类鼻疽伯克霍尔德菌ΔBprsE的构建及其生物学功能
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作者 高蕊 李雪苗 +5 位作者 李艳梅 厉安洋 李欣泽 章越 夏乾峰 刘靳波 《中国热带医学》 北大核心 2025年第4期467-473,共7页
目的深入理解BprsE对类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,BP)的调控作用,揭示BprsE对BP生理和病理特性的影响。方法以营养缺陷株HNBP001为对象,通过同源重组的方法构建BprsE缺失株(?BprsE),随后将?BprsE与HNBP001的多种表型... 目的深入理解BprsE对类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,BP)的调控作用,揭示BprsE对BP生理和病理特性的影响。方法以营养缺陷株HNBP001为对象,通过同源重组的方法构建BprsE缺失株(?BprsE),随后将?BprsE与HNBP001的多种表型进行比较。在抗生素敏感性测试中,通过对最低抑菌浓度的测定来评估2种菌株对不同抗生素的反应,从而了解BprsE缺失是否影响了细菌的抗生素抗性;研究2种菌株的泳动性,即细菌在软琼脂培养基中的移动能力,采用了点样培养法和菌圈直径测量法,将2种菌分别点样在软琼脂平板,观察其扩散形成的菌圈并测量菌圈的直径,从而量化细菌的泳动性;用结晶紫染色法测定生物膜形成,通过染色并测定生物膜的吸光度,来评估生物膜的形成量;用多功能酶标仪测细菌生长曲线,并通过实时监测培养液的吸光度变化反映细菌的生长情况,进而判断BprsE基因的缺失是否影响了细菌的生长速率。结果通过琼脂糖凝胶电泳及测序结果显示成功构建BprsE缺失株,与营养缺陷株HNBP001相比,ΔBprsE对头孢噻肟、阿米卡星、氨曲南耐药性增加;ΔBprsE在16 h泳动圈直径缩小,泳动能力减弱;620 mmol/L高盐浓度下,ΔBprsE的生长速率低于HNBP001;不同温度下生长速率及生物膜变化差异无统计学意义。结论BprsE会影响BP耐药及泳动相关基因的调控;ΔBprsE的成功构建,为研究sRNA在类鼻疽伯克霍尔德菌中具体的调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德菌 SRNA 基因敲除 生物学功能
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类鼻疽伯克霍尔德菌非编码RNA BprsB的生物学功能初步评价
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作者 谭君 李雪苗 +6 位作者 罗妮妮 王彦双 陈垂这 邓泽芳 罗江慧 方俊德 夏乾峰 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第6期401-407,共7页
目的:探讨Hfq相关sRNA(BprsB)对类鼻疽伯克霍尔德菌的生长速率、泳动能力、生物被膜形成以及耐药性等多方面生物学功能的影响。方法:以依赖Hfq蛋白的类鼻疽伯克霍尔德菌BprsB为靶标,利用同源重组技术构建BprsB缺失株(ΔBprsB);选取野生... 目的:探讨Hfq相关sRNA(BprsB)对类鼻疽伯克霍尔德菌的生长速率、泳动能力、生物被膜形成以及耐药性等多方面生物学功能的影响。方法:以依赖Hfq蛋白的类鼻疽伯克霍尔德菌BprsB为靶标,利用同源重组技术构建BprsB缺失株(ΔBprsB);选取野生型类鼻疽伯克霍尔德菌菌株(HNBP001)作为对照组,ΔBprsB作为实验组;通过酶标仪测定细菌的生长曲线,从而评估生长速率的变化;采用点板培养法和测量群区直径进而评价细菌泳动能力;通过结晶紫染色法测量生物膜形成情况;最后,通过MIC试验判断细菌对抗菌药物的敏感情况。结果:ΔBprsB生长速率低于HNBP001;与HNBP001相比,ΔBprsB的群区直径小(P<0.0001);ΔBprsB的生物被膜形成比HNBP001少(P<0.0001);与HNBP001相比,ΔBprsB对喹诺酮类抗菌药物(左氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星)以及β‑内酰胺类抗菌药物(氨曲南)的敏感性升高。结论:BprsB促进了类鼻疽伯克霍尔德菌的生长速率、泳动、生物被膜形成和耐药,为进一步研究BprsB在类鼻疽伯克霍尔德菌致病机制中所扮演的角色提供了证据。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德菌 SRNA 基因敲除 生物学功能
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Unlocking the small RNAs:local and systemic modulators for advancing agronomic enhancement
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作者 Wenqi Ouyang Hongda Sun Yuan Wang 《Journal of Genetics and Genomics》 2025年第8期987-1000,共14页
Small regulatory RNAs(sRNAs)are essential regulators of gene expression across a wide range of organisms to precisely modulate gene activity based on sequence-specific recognition.In model plants like Arabidopsis thal... Small regulatory RNAs(sRNAs)are essential regulators of gene expression across a wide range of organisms to precisely modulate gene activity based on sequence-specific recognition.In model plants like Arabidopsis thaliana,extensive research has primarily concentrated on 21-to 24-nucleotide(nt)sRNAs,particularly microRNAs(miRNAs).Recent advancements in cell and tissue isolation techniques,coupled with advanced sequencing technologies,are revealing a diverse array of preciously uncharacterized sRNA species.These include structural RNA fragments as well as numerous cell-and tissue-specific sRNAs that are active during distinct developmental stages,thereby enhancing our understanding of the precise and dynamic regulatory roles of sRNAs in plant development regulation.Additionally,a notable feature of sRNAs is their capacity for amplification and movement between cells and tissues,which facilitates long-distance communication-an adaptation critical to plants due to their sessile nature.In this review,we will discuss the classification and mechanisms of sRNAs action,using legumes as a primary example due to their essential engagement for the unique organ establishment of root nodules and long-distance signaling,and further illustrating the potential applications of sRNAs in modern agricultural breeding and environmentally sustainableplantprotection strategies. 展开更多
关键词 SRNA miRNA SIRNA Mobile sRNA SOYBEAN
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sRNA113 regulates Pseudomonas plecoglossicida motility to affect immune response against infection in pearl gentian grouper
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作者 Li He Mei-Qin Mao +5 位作者 Ling-Min Zhao Qi Li Hui Ge Jiao-Nan Zhang Jiao-Lin Zhang Qing-Pi Yan 《Zoological Research》 2025年第1期152-164,共13页
Small RNAs(sRNAs)are a class of molecules capable of perceiving environmental changes and exerting posttranscriptional regulation over target gene expression,thereby influencing bacterial virulence and host immune res... Small RNAs(sRNAs)are a class of molecules capable of perceiving environmental changes and exerting posttranscriptional regulation over target gene expression,thereby influencing bacterial virulence and host immune responses.Pseudomonas plecoglossicida is a pathogenic bacterium that poses a significant threat to aquatic animal health.However,the regulatory mechanisms of sRNAs in P.plecoglossicida remain unclear.This study focused on sRNA113,previously identified as a potential regulator of the fliP gene,a key component of the lateral flagellar type III secretion system.To investigate the effects of sRNA113on P.plecoglossicida virulence,as well as its role in regulating pathogenic processes and host immune responses,mutant strains lacking this sRNA were generated and analyzed.Deletion of sRNA113 resulted in the up-regulation of lateral flagellar type III secretion system-related genes in P.plecoglossicida,which enhanced bacterial swarming motility,biofilm formation,and chemotaxis ability in vitro.In vivo infection experiments with pearl gentian grouper revealed that sRNA113 deletion enhanced the pathogenicity of P.plecoglossicida.This heightened virulence was attributed to the up-regulation of genes associated with the lateral flagellar type III secretion system,resulting in higher bacterial loads within host tissues.This amplification of pathogenic activity intensified tissue damage,disrupted immune responses,and impaired the ability of the host to clear infection,ultimately leading to mortality.These findings underscore the critical role of sRNA113 in regulating the virulence of P.plecoglossicida and its interaction with host immune defenses.This study provides a foundation for further exploration of sRNAmediated mechanisms in bacterial pathogenesis and hostpathogen interactions,contributing to a deeper understanding of virulence regulation and immune evasion in aquatic pathogens. 展开更多
关键词 Pseudomonas plecoglossicida SRNA Virulence Pearl gentian grouper Immune response
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细菌sRNA对环境胁迫的响应机制 被引量:4
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作者 刘福芮 钟志军 +4 位作者 周紫峣 彭广能 杨平 王亚萍 廖莉 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2012-2018,共7页
细菌小RNA(small RNAs,sRNAs)是一类长度大约在40-400个核酸之间,不编码蛋白质的RNA,在细菌适应环境方面起重要的调节作用。当环境中温度、营养、外膜蛋白、p H、铁等条件改变时,sRNA常常通过连接双组分信号转导系统和调节蛋白,来传递... 细菌小RNA(small RNAs,sRNAs)是一类长度大约在40-400个核酸之间,不编码蛋白质的RNA,在细菌适应环境方面起重要的调节作用。当环境中温度、营养、外膜蛋白、p H、铁等条件改变时,sRNA常常通过连接双组分信号转导系统和调节蛋白,来传递压力信号并调节应激响应,其作用方式一般是通过碱基互补配对的方式与靶m RNA结合,从而调控靶m RNA的翻译和稳定性;或直接与靶标蛋白质结合,调节靶标蛋白质的生物活性。本文总结了细菌在多种环境压力下,sRNA的调控响应机制。 展开更多
关键词 细菌 srnas 环境胁迫 响应机制
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金鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验 被引量:15
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作者 周毅 张培培 +3 位作者 徐晔 曹洁 孟学平 段宏安 《水产科学》 CAS 北大核心 2014年第6期379-384,共6页
自病死金鱼肝脏中分离到一株优势菌,对其进行感染试验、培养特性观察、生化特性鉴定及16SrRNA序列分析。试验结果表明,该分离菌株为嗜水气单胞菌,与已报道的嗜水气单胞菌的16S rRNA序列同源性>99.3%。用纸片扩散法进行药敏试验,试验... 自病死金鱼肝脏中分离到一株优势菌,对其进行感染试验、培养特性观察、生化特性鉴定及16SrRNA序列分析。试验结果表明,该分离菌株为嗜水气单胞菌,与已报道的嗜水气单胞菌的16S rRNA序列同源性>99.3%。用纸片扩散法进行药敏试验,试验结果显示,该分离株对四环素类、喹诺酮类、磺胺类、头孢呋新、头孢他啶、头孢吡肟等21种药物敏感,对青霉素G、氨苄西林、阿莫西林、头孢氨苄、林可霉素、麦迪霉素耐药。本次金鱼发病是由嗜水气单胞菌感染引起,可选用强力霉素、麦迪霉素、复方新诺明、磺胺甲基异恶唑、阿奇霉素、恩诺沙星、诺氟沙星等多种药物进行防治。 展开更多
关键词 金鱼 嗜水气单胞菌 分离 鉴定 16sRNA 药敏试验
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基于RNA-Seq的羊种布鲁氏菌新转录本与非编码RNA鉴定 被引量:12
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作者 郭英飞 王玉飞 +7 位作者 龚春丽 杨明娟 袁久云 庄妤冰 柯跃华 杜昕颖 汪舟佳 陈泽良 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期216-221,共6页
目的对羊种布鲁氏菌的转录本进行测序,鉴定基因组中新的转录本和非编码RNA。方法提取羊布鲁氏菌的总RNA,去除rRNA后连接接头逆转录成cDNA,PCR扩增后进行测序,以羊布鲁氏菌16M的基因组序列为参照对测序得到的reads进行比对作图,通过生物... 目的对羊种布鲁氏菌的转录本进行测序,鉴定基因组中新的转录本和非编码RNA。方法提取羊布鲁氏菌的总RNA,去除rRNA后连接接头逆转录成cDNA,PCR扩增后进行测序,以羊布鲁氏菌16M的基因组序列为参照对测序得到的reads进行比对作图,通过生物信息学方法进行新转录本和非编码RNA的鉴定。结果测序数据分析显示,reads在基因组上覆盖度较好。与现有注释基因相比,有773个基因的5′或3′端在基因组的原有位置基础上发生了延伸,并发现了16个新的转录本。根据测序结果,共鉴定出241条候选的非编码RNA(sRNA),进一步的RT-PCR验证结果显示,预测的sRNA在体外条件下有表达。结论布鲁氏菌基因组中存在除了预测以外的新的转录本,布鲁氏菌中存在非编码RNA且在不同条件下有差异表达。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 RNA-SEQ 转录组 SRNA
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肠炎沙门氏菌sRNA伴侣蛋白Hfq表达与纯化 被引量:8
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作者 孟宪臣 孟霞 +3 位作者 聂佳佳 厚华艳 王勇祥 朱国强 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期1-4,19,共5页
利用pET原核表达系统和亲和层析表达纯化肠炎沙门氏菌sRNA伴侣蛋白Hfq。首先构建含靶基因hfq的重组表达质粒pET28a(+)-hfq,经PCR及双酶切鉴定构建正确,再将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导目的基因高效表达。SDS-PAGE及Western ... 利用pET原核表达系统和亲和层析表达纯化肠炎沙门氏菌sRNA伴侣蛋白Hfq。首先构建含靶基因hfq的重组表达质粒pET28a(+)-hfq,经PCR及双酶切鉴定构建正确,再将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导目的基因高效表达。SDS-PAGE及Western blot结果表明:Hfq在大肠杆菌中成功表达,蛋白分子质量约为16.6ku,且主要存在于上清中,以可溶形式表达。进一步对表达产物进行Ni 2+亲和层析纯化,获得纯度较高的融合蛋白,为研究Hfq蛋白与sRNA的相互作用以及sRNA的调控机制提供基础。 展开更多
关键词 肠炎沙门氏菌 Hfq蛋白 SRNA 表达 纯化
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不同感染来源疟原虫虫株的18S sRNA基因同源性分析 被引量:10
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作者 朱垚吉 邓艳 +3 位作者 毛祥华 王剑 陈梦妮 董莹 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第4期331-334,339,共5页
目的分析云南省不同感染来源疟原虫株的遗传差异。方法采集不同地区疟疾患者的血样,利用巢式PCR扩增疟原虫18SsRNA基因,扩增产物进行双向测序分析,以分子进化树描述18SsRNA基因序列的同源程度。结果对2012年8月~2013年8月期间诊断为云... 目的分析云南省不同感染来源疟原虫株的遗传差异。方法采集不同地区疟疾患者的血样,利用巢式PCR扩增疟原虫18SsRNA基因,扩增产物进行双向测序分析,以分子进化树描述18SsRNA基因序列的同源程度。结果对2012年8月~2013年8月期间诊断为云南当地感染的全部疟疾患者22例及感染地为缅甸、非洲、老挝的13例疟疾患者血样进行18SsRNA基因巢式PCR扩增,8份检出恶性疟原虫目的基因片段(205bp)、35份检出间日疟原虫目标片段(120bp)。对43份PCR扩增阳性产物进行测序分析,其中8株恶性疟原虫的18SsRNA基因进化树显示属云南本地感染的虫株与非洲虫株分布在不同亚支,但均与鸡疟原虫(Plasmodium gallinaceum)(Accession:M61723)遗传进化关系较近;35株间日疟原虫的18SsRNA基因进化树显示所有虫株均集中在一个进化分支内,与食蟹猴疟原虫(P.cynomolgi)(Accession:L07559)遗传关系较近,89%的云南本地感染虫株与南美两个虫株(Accession:X13926、U03079)同在一个进化亚支。结论恶性疟原虫不同地理株的18SsRNA基因序列差异性较间日疟原虫株间的差异性更明显。 展开更多
关键词 疟原虫 地理株 18S SRNA 基因 同源性
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