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利用同源重组质粒pUTK转化蓝藻Synechococc us sp.PCC7942及胸腺素α_1的表达 被引量：10
1
作者 章军 宋新强 +2 位作者 徐虹 陈天圣 楼士林 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期1-3,34,共4页
采用本实验室构建的丝状蓝藻Calothrixsp.PCC7601基因整合平台系统供体质粒pUTK转化单胞蓝藻Synechococcussp.PCC7942,通过抗性筛选获得了具卡那霉素抗性的转化藻株。经Southern杂交证实 pUTK部分序列已整合到Synechococcussp.7942染色... 采用本实验室构建的丝状蓝藻Calothrixsp.PCC7601基因整合平台系统供体质粒pUTK转化单胞蓝藻Synechococcussp.PCC7942,通过抗性筛选获得了具卡那霉素抗性的转化藻株。经Southern杂交证实 pUTK部分序列已整合到Synechococcussp.7942染色体DNA上 ;红光诱导后通过蛋白质SDS PAGE电泳 ,Westernblot证实 pUTK的胸腺素α1 基因得以有效表达,表达量达到总蛋白的4.8 %。结果表明,基因整合平台系统供体质粒 pUTK不仅可转化丝状蓝藻Calothrixsp.PCC7601,还可转化单胞蓝藻Synechococcussp.PCC7942。 展开更多
关键词 蓝藻Wynechococcus sp.pcc9742 同源重组 胸腺素α 转基因 抗性筛 卡那霉素抗性
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人表皮生长因子(hEGF)基因在蓝藻中的表达 被引量：13
2
作者 戴溦 施定基 +6 位作者 张卉 钟晖 冉亮 彭国宏 甘人宝 陈素娟 连慕兰 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第12期1260-1264,共5页
人表皮生长因子 (hEGF)是由 5 3个氨基酸组成的蛋白 ,在临床上内服与外敷可促进内外表皮细胞的生长。将人工合成的hEGF基因连接到质粒pRL_489上 ,位于启动子psbA下游。验证连接成功后 ,用三亲接合转移方法将载体pRL_hEGF导入聚球藻Synec... 人表皮生长因子 (hEGF)是由 5 3个氨基酸组成的蛋白 ,在临床上内服与外敷可促进内外表皮细胞的生长。将人工合成的hEGF基因连接到质粒pRL_489上 ,位于启动子psbA下游。验证连接成功后 ,用三亲接合转移方法将载体pRL_hEGF导入聚球藻Synechococcussp .PCC 70 0 2和鱼腥藻Anabaenasp .PCC 712 0。由于pRL_hEGF没有能在单细胞蓝藻中自主复制的复制子 ,通过筛选 ,hEGF在聚球藻 70 0 2中是整合到蓝藻染色体上进行表达的。用PCR扩增的方法在两种转基因藻中均检测到hEGF基因的存在。放射免疫分析证明 ,hEGF基因在两种转基因藻中均得到了表达。而且 ,在聚球藻 70 0 展开更多
关键词 人表皮生长因子 鱼腥藻 聚球藻 载体 转基因蓝藻 三亲接合转移
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用于微藻培养的气升式光生物反应器 被引量：20
3
作者 康瑞娟 蔡昭铃 施定基 《化学反应工程与工艺》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第1期44-49,共6页
基于微藻光自养培养特性 ,构建了具有较大面积体积比的 15 L内外光源相结合的气升式光生物反应器 ,考察了两种不同形态藻细胞培养体系中 ,光强随细胞浓度及光程距离衰减的规律 ,得到了描述光衰减的数学关系式 ,即在鱼腥藻 712 0培养体... 基于微藻光自养培养特性 ,构建了具有较大面积体积比的 15 L内外光源相结合的气升式光生物反应器 ,考察了两种不同形态藻细胞培养体系中 ,光强随细胞浓度及光程距离衰减的规律 ,得到了描述光衰减的数学关系式 ,即在鱼腥藻 712 0培养体系中为 I=I0 exp[- (0 .0 131+0 .987OD750 )·L],在聚球藻 70 0 2培养体系中为 I=I0 exp[- (- 0 .0 2 39+0 .0 777OD750 )·L],并据此对培养过程中光强沿反应器径向的动态分布情况进行了估算。在该反应器中进行了鱼腥藻 712 0和聚球藻 70 0 2两种蓝藻的光自养培养 ,藻细胞培养终密度分别达到 1.5 3g/ L和 3.4g/ L ,体积产率分别为 0 .31g L-1d-1和 0 .5 7g L-1d-1。 展开更多
关键词 气升式光生物反应器 微藻 光衰减 鱼腥藻7120 聚球藻7002 光自养培养
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Slr0351的表达及其在Synechocystis sp.PCC 6803中功能的初步研究 被引量：1
4
作者 马琼 郑小江 +2 位作者 赵开弘 周明 王胜鹏 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期16-23,共8页
Slr0351是Synechocystis sp.PCC 6803中的未知功能蛋白,其同源蛋白广泛存在于各种蓝藻和铁硫杆菌中。为了确定Slr0351的性质,构建了表达质粒p ET-slr0351,并在E.coli中表达Slr0351。在无氧条件下采用亲和层析纯化方法获得了Slr0351,无... Slr0351是Synechocystis sp.PCC 6803中的未知功能蛋白,其同源蛋白广泛存在于各种蓝藻和铁硫杆菌中。为了确定Slr0351的性质,构建了表达质粒p ET-slr0351,并在E.coli中表达Slr0351。在无氧条件下采用亲和层析纯化方法获得了Slr0351,无氧条件下Slr0351呈棕红色,在460 nm处有[2Fe-2S]铁硫簇的特征吸收峰,棕红色Slr0351对氧气敏感,能被连二亚硫酸钠还原,由此表明Slr0351为铁硫蛋白。为了获知slr0351的功能,基于基因同源重组交换的原理,利用Kana抗性片段替换slr0351,将Synechocystis sp.PCC 6803中的slr0351基因缺失,构建了Δslr0351突变体。利用紫外-可见吸收光谱仪扫描了Δslr0351与野生型Synechocystis sp.PCC 6803(WT)的吸收光谱,发现正常光照条件下Δslr0351的叶绿素a仅为WT的68.8%,slr0351的缺失使蓝藻中叶绿素a含量降低。比较了藻细胞在缺乏不同营养元素和不同光照条件下的生长速率差异,与WT相比,Δslr0351具有如下特征:(1)对缺Fe和缺S胁迫条件更敏感;(2)在弱光照条件下Δslr0351的光能利用效率和生长速率更低,该现象与Δslr0351中叶绿素a含量的降低有关。 展开更多
关键词 蓝藻 SYNECHOCYSTIS SP.PCC 6803 Slr0351 铁硫蛋白
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封闭式光生物反应器集胞藻6803光自养和混合营养培养比较 被引量：3
5
作者 王永红 李元广 +3 位作者 施定基 沈国敏 茹炳根 张嗣良 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期247-250,共4页
采用封闭式光生物反应器进行了蓝藻基因工程常用宿主系统集胞藻 Synechocystis sp.PCC 680 3的混合营养培养 ,并与光自养培养进行了比较。在两种培养方式下 ,集胞藻 680 3的饱和光强基本相同 ,都为 50 0 0 lx。当入射光强为 50 0 0 lx... 采用封闭式光生物反应器进行了蓝藻基因工程常用宿主系统集胞藻 Synechocystis sp.PCC 680 3的混合营养培养 ,并与光自养培养进行了比较。在两种培养方式下 ,集胞藻 680 3的饱和光强基本相同 ,都为 50 0 0 lx。当入射光强为 50 0 0 lx、初始葡萄糖浓度为 1 .74g/L时 ,混合营养生长在葡萄糖消耗完 ( 69.5h)时的藻细胞密度为 1 .36g/L、叶绿素浓度为 2 0 .0 8mg/L、能量得率为1 6.7% ,分别为同期光自养生长的 3.8倍、2 .3倍和 2 .6倍。这表明封闭式光生物反应器混合营养培养方式在促进集胞藻 680 展开更多
关键词 集胞藻6803 混合营养培养 光生物反应器 葡萄糖 蓝藻 基因工程 光自养培养
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口服转胸腺素α1基因聚球藻对小鼠T细胞亚群作用的研究 被引量：5
6
作者 刘仁海 章军 +4 位作者 周克夫 徐虹 徐惠娟 楼士林 黄守杰 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期517-520,共4页
为探讨口服后转胸腺α1(Tα1)基因聚球藻对T细胞亚群的作用,将小鼠随机分为空白对照组、野生藻组、转化藻(小剂量、中剂量和大剂量)组和日达仙组,用灌服的方式,给予空白对照组20mL·kg^(-1)的生理盐水,野生藻组0.4g·kg^(-1)的... 为探讨口服后转胸腺α1(Tα1)基因聚球藻对T细胞亚群的作用,将小鼠随机分为空白对照组、野生藻组、转化藻(小剂量、中剂量和大剂量)组和日达仙组,用灌服的方式,给予空白对照组20mL·kg^(-1)的生理盐水,野生藻组0.4g·kg^(-1)的野生聚球藻;转化藻小、中、大剂量组,分别0.2g·kg^(-1)、0.4g·kg^(-1)和0.6g·kg^(-1)的转Tα1基因聚球藻;日达仙组则肌注给予3.2mg·kg^(-1)的胸腺素α1(日达仙)。结果表明转Tα1基因藻口服后可显著提高CD3亚群水平,显著提高CD4亚群水平,明显提高CD4/CD8的比值。提示转Tα1基因聚球藻具有增强机体免疫功能的作用。 展开更多
关键词 转胸腺素α1基因聚球藻 小鼠 T细胞亚群 免疫功能 蓝藻 免疫增强剂 口服
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FNRD在聚球藻7002中的表达及其性质研究 被引量：1
7
作者 李荣贵 于昕 赵进东 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期716-719,共4页
置于Lac启动子和Kan启动子控制之下的petHL基因分别转化蓝细菌Synechococcussp.PCC7002,从Southern blot分析结果推断,petHL已整合到蓝细菌染色体DNA上。Western blot分析表明,转入蓝细菌体内的petHL基因得到了表达,且Kan启动子启动该... 置于Lac启动子和Kan启动子控制之下的petHL基因分别转化蓝细菌Synechococcussp.PCC7002,从Southern blot分析结果推断,petHL已整合到蓝细菌染色体DNA上。Western blot分析表明,转入蓝细菌体内的petHL基因得到了表达,且Kan启动子启动该基因表达的效率高于Lac启动子。内源FNRD表现出与FNR全酶相同的稳定性。Triton X-114分相实验结果显示,部分FNRD可进入Triton X-114相,推测这些分子可能发生了脂酰化修饰。同时FNRD在体内可能参与了光合电子传递而使光合放氧速率增加。 展开更多
关键词 SYNECHOCOCCUS sp. PCC 7002 FD NADP^+氧化还原酶 FNRD
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利用响应面方法优化转小鼠金属硫蛋白-Ⅰ基因聚球藻7002的培养基成分 被引量：7
8
作者 曾文炉 赵飞飞 +1 位作者 曹照根 茹炳根 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期130-136,共7页
为实现转小鼠金属硫蛋白基因-Ⅰ聚球藻7002的高密度培养,并将其应用于实际的重金属废水处理过程,首先需要对培养基的成分进行优化。本文利用响应面这一多因素过程优化的有效工具,通过全因子实验、最陡爬坡实验和中心组合实验,对转小鼠... 为实现转小鼠金属硫蛋白基因-Ⅰ聚球藻7002的高密度培养,并将其应用于实际的重金属废水处理过程,首先需要对培养基的成分进行优化。本文利用响应面这一多因素过程优化的有效工具,通过全因子实验、最陡爬坡实验和中心组合实验,对转小鼠金属硫蛋白基因-Ⅰ聚球藻7002培养基的主要成分以及初始pH进行了优化。优化后的培养基组成为:NaHCO_3 1.696 g/L,NaNO_3 8.57 g/L,初始pH为8.57,其他成分同Medium A。优化条件分别在2 L和20 L气升式光生物反应器中得到了验证,最大细胞浓度分别达到每升4.16 g干重和每升3.12 g干重,分别比优化前提高了9倍和7倍,从而为其产业化应用打下基础。 展开更多
关键词 小鼠金属硫蛋白-I 聚球藻7002 转基因 响应面方法 优化
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光催化纳米TiO_2治理蓝藻工艺的研究 被引量：7
9
作者 廖兴盛 汪星 +1 位作者 赵开弘 周明 《武汉理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期16-19,共4页
在波长253.7 nm紫外线C波段(UV-C)照射下,对受试蓝藻进行光催化纳米TiO2氧化反应,探讨反应参数对实验工艺处理效果的影响。对蓝藻生理指标叶绿素a(Chl-a)含量测定显示:在辐照光强0.15 mW/cm2、纳米TiO2浓度100 mg/L下反应,其Chl-a含量... 在波长253.7 nm紫外线C波段(UV-C)照射下,对受试蓝藻进行光催化纳米TiO2氧化反应,探讨反应参数对实验工艺处理效果的影响。对蓝藻生理指标叶绿素a(Chl-a)含量测定显示:在辐照光强0.15 mW/cm2、纳米TiO2浓度100 mg/L下反应,其Chl-a含量下降速率最快;随着辐照剂量、通入空气量(Qair)和反应温度的增大,其Chl-a含量下降速度不断加快;加入1.0 mmol/L H2O2加快了Chl-a含量下降,而加入20 mmol/L抗坏血酸(Vc)则减缓Chl-a含量下降;在偏碱性或低于纳米TiO2零电点(6.25)时,有利于加快Chl-a含量下降。结果表明,光催化纳米TiO2氧化反应能够有效降低受试蓝藻Chl-a含量,在以上参数适宜反应条件下,可以更好提高光催化纳米TiO2治理蓝藻工艺的处理效果。 展开更多
关键词 鱼腥藻PCC7120 光催化氧化反应 纳米TIO2
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重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)基因在鱼腥藻中的克隆 被引量：5
10
作者 李清艳 施定基 +4 位作者 陈翠丽 赵兴贵 邓元告 张越男 吕金印 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1389-1394,共6页
为了将rhG-CSF基因在鱼腥藻PCC7120中克隆,用于制备口服制剂,利用DNA重组技术,在不改变阅读框的前提下,将hG-CSF基因进行突变,并插入到pUC-19载体上,构建中间载体pUC-G-CSF;将pUC-G-CSF插入到pRL-489的启动子PpsbA的下游,构建穿梭表达载... 为了将rhG-CSF基因在鱼腥藻PCC7120中克隆,用于制备口服制剂,利用DNA重组技术,在不改变阅读框的前提下,将hG-CSF基因进行突变,并插入到pUC-19载体上,构建中间载体pUC-G-CSF;将pUC-G-CSF插入到pRL-489的启动子PpsbA的下游,构建穿梭表达载体pRL-G-CSF;通过三亲接合转移方法,将pRL-G-CSF转入丝状体蓝藻鱼腥藻PCC7120内。本试验得到了有抗生素抗性的鱼腥藻,并用PCR技术检测到rhG-CSF基因在转基因鱼腥藻中存在。 展开更多
关键词 人粒细胞集落刺激因子 鱼腥藻(Anabaena sp.)PCC 7120 载体 转基因鱼腥藻 三亲接合转移
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人尿激酶原基因在聚球藻7002中的克隆和表达 被引量：8
11
作者 罗娜 宁叶 +3 位作者 施定基 周先碗 俞梅敏 茹炳根 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第9期931-935,共5页
将人尿激酶原基因连在PpsbA启动子之后 ,再将启动子连同基因克隆入整合载体pTZ18中。pTZ18_8中含有一段来源于集胞藻 6 80 3的psbB基因片段作为整合平台。将整合表达载体用直接转化的方法转入聚球藻Syne chococcussp .PCC 70 0 2中。经... 将人尿激酶原基因连在PpsbA启动子之后 ,再将启动子连同基因克隆入整合载体pTZ18中。pTZ18_8中含有一段来源于集胞藻 6 80 3的psbB基因片段作为整合平台。将整合表达载体用直接转化的方法转入聚球藻Syne chococcussp .PCC 70 0 2中。经氨苄青霉素筛选并扩大培养后的转化子进行DNA斑点印迹及Western印迹 ,证明了基因的存在及表达。菌体破碎后的上清液有较高的溶解纤维蛋白的活性 ,说明表达产物未形成包含体。经ELISA测定 ,表达量为每克鲜藻 2× 10 -5～ 3× 10 -5g蛋白。 展开更多
关键词 尿激酶 溶栓剂 聚球藻7002 克隆 原基因表达
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启动子Pcpcβ提高鱼腥藻7120中hGM-CSF基因表达效率的研究 被引量：6
12
作者 魏兰珍 谭玮 王全喜 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期37-42,共6页
利用聚球藻7002中编码藻蓝蛋白基因(cpcβ)的启动子(Pcpcβ),替代穿梭表达载体pDC-GM中的启动子PpsbA,启动外源人粒巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因在鱼腥藻7120中的表达。蛋白免疫印迹证实,在含Pcpcβ启动子的cGM藻株中,hGM-CSF基... 利用聚球藻7002中编码藻蓝蛋白基因(cpcβ)的启动子(Pcpcβ),替代穿梭表达载体pDC-GM中的启动子PpsbA,启动外源人粒巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因在鱼腥藻7120中的表达。蛋白免疫印迹证实,在含Pcpcβ启动子的cGM藻株中,hGM-CSF基因的表达水平比原先构建的含PpsbA启动子的GM藻株中提高了90%,且该基因的高效表达对宿主细胞的生长未产生明显影响。结果表明,对于在蓝藻中表达hGM-CSF基因而言,Pcpcβ启动子可能是较适宜的强启动子之一。 展开更多
关键词 cpcβ基因启动子 人粒巨噬细胞集落刺激因子 鱼腥藻7120
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TNF_α基因在鱼腥藻 71 2 0中的表达及其产物的亲和层析纯化 被引量：7
13
作者 施定基 叶欣 +7 位作者 钟晖 蔡以滢 邵宁 彭国宏 董晓军 王春梅 欧阳叶新 李振甲 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第1期46-50,共5页
用转入TNF_α基因并稳定表达了 4年多的丝状体蓝藻———鱼腥藻 712 0 (Anabaenasp .PCC 712 0 ) ,研究比较了在培养液中氮源 (NaNO3 )和碳源 (NaAc)对转基因藻生长和TNF_α基因的不同影响。氮源能稳定外源蛋白的表达 ,而碳源则影响细... 用转入TNF_α基因并稳定表达了 4年多的丝状体蓝藻———鱼腥藻 712 0 (Anabaenasp .PCC 712 0 ) ,研究比较了在培养液中氮源 (NaNO3 )和碳源 (NaAc)对转基因藻生长和TNF_α基因的不同影响。氮源能稳定外源蛋白的表达 ,而碳源则影响细胞壁的合成。通过比较几种不同的破碎细胞的方法 ,发现超声破碎得到的可溶性总蛋白含量和TNF_α含量均要比冻融法高出 1倍左右 ,经过细胞破碎、硫酸铵分级沉淀、常压离子交换液相层析后 ,除去杂蛋白及大量容易堵柱的糖类等物质 ,最后通过亲和柱层析 ,分离出了纯的目标蛋白———重组肿瘤坏死因子 (TNF_α)。经凝胶电泳鉴定为单一的谱带 ,分子量为 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子α 转基因蓝藻 鱼腥藻7120 亲和层析 表达 产物
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集胞藻类金属硫蛋白的纯化、性质和溶液构象的研究 被引量：11
14
作者 陈正佳 李晓凡 +2 位作者 施定基 李玲媛 茹炳根 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第2期150-155,共6页
集胞藻Synechocysitissp.PCC6803光照培养，加入100μmol/LZnCl2诱导藻内类金属硫蛋白（MT-like）的表达。离心收集鲜藻，超声波破碎细胞，离心除沉淀。上清液72℃加热3min去杂蛋白，离心，上清液依次经过分子筛层析柱，阴离子交换柱和... 集胞藻Synechocysitissp.PCC6803光照培养，加入100μmol/LZnCl2诱导藻内类金属硫蛋白（MT-like）的表达。离心收集鲜藻，超声波破碎细胞，离心除沉淀。上清液72℃加热3min去杂蛋白，离心，上清液依次经过分子筛层析柱，阴离子交换柱和脱盐柱，可得蓝藻类金属硫蛋白。5L培养液收集鲜藻7.6g，一次上样1．52g鲜藻的裂解物，冻干后得15mg纯化的蛋白样，为鲜藻重的0．1％．经分析其等电点为pH4．5，分子量为6．986kD，由58个氨基酸残基组成。其序列中含有较多疏水氨基酸残基（36％），但其半胱氨酸含量仅为5％。CD（圆二色性）图谱表明其二级结构主要为无规卷曲，不含α－helix和β-sheet，无哺乳动物的金属硫蛋白所具有的典型双结构域结构。紫外吸收光谱表明Zn结合的类金属硫蛋白在220nm也有较高的吸收值。红外光谱分析的结果表明，此类金属硫蛋白的吸收光谱与高等动物的金属硫蛋白的吸收光谱类似。 展开更多
关键词 集胞藻 类金属硫蛋白 分离和纯化 性质 溶液构象
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转小鼠金属硫蛋白-Ⅰ基因聚球藻7002净化重金属废水的研究 被引量：3
15
作者 曾文炉 赵飞飞 +1 位作者 曹照根 茹炳根 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第3期738-744,共7页
以转小鼠金属硫蛋白-Ⅰ基因（mMT-Ⅰ）聚球藻7002为对象,研究了其在含Cd^2＋、Pb^2＋和Hg^2＋的培养基中的生长特性及其对重金属的净化性能.结果表明,无论从生长速率还是对重金属的耐受特性来看,转mMT-Ⅰ聚球藻7002均明显优于野生藻;随... 以转小鼠金属硫蛋白-Ⅰ基因（mMT-Ⅰ）聚球藻7002为对象,研究了其在含Cd^2＋、Pb^2＋和Hg^2＋的培养基中的生长特性及其对重金属的净化性能.结果表明,无论从生长速率还是对重金属的耐受特性来看,转mMT-Ⅰ聚球藻7002均明显优于野生藻;随着培养进程的延续和细胞浓度逐渐提高,体系中Cd^2＋、Pb^2＋和Hg^2＋的浓度逐渐降低,降幅最大的时间约在试验开始后1-3 d左右;经3 d培养,转mMT-Ⅰ聚球藻细胞对Cd^2＋、Pb^2＋和Hg^2＋的净化率分别为63.90%、65.99%和96.27%,吸附量分别为10.75、58.89和112.61 mg·g^-1,而野生聚球藻的吸附量分别为3.40、27.01和1.12 mg·g^-1,前者分别是后者的3.16、2.18和100.45倍;并建立了操作时间和细胞浓度对净化率的单因子模型,以及总括动力学模型方程,模型对实验结果拟合良好. 展开更多
关键词 小鼠金属硫蛋白-Ⅰ 聚球藻 转基因 重金属 净化
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集胞藻Synechocystissp.PCC6803利用葡萄糖生长与光合能量转化的关系 被引量：4
16
作者 王永红 叶济宇 +2 位作者 米华玲 李元广 张嗣良 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第11期1122-1125,共4页
用PAM叶绿素荧光仪测定了饥饿细胞、光自养细胞和混合营养细胞的叶绿素荧光 ,并对 3种类型细胞的荧光参数 :PSⅡ实际光化学效率 φⅡ和还原型质醌Q-A 进行了比较。用双重转盘磷光机测定了光自养细胞和混合营养细胞的毫秒延迟发光。根据... 用PAM叶绿素荧光仪测定了饥饿细胞、光自养细胞和混合营养细胞的叶绿素荧光 ,并对 3种类型细胞的荧光参数 :PSⅡ实际光化学效率 φⅡ和还原型质醌Q-A 进行了比较。用双重转盘磷光机测定了光自养细胞和混合营养细胞的毫秒延迟发光。根据叶绿素荧光动力学分析和毫秒延迟发光的结果及光合电子传递抑制剂 3,4_二氯苯基二甲脲 (DCMU)、二溴百里香醌 (DBMIB)对集胞藻 6 80 3(Synechocystissp .PCC 6 80 3)混合营养生长影响进行了分析 ,集胞藻 6 80 3混合营养培养的生长速率显著高于光自养培养的原因可能在于一是外源葡萄糖没有抑制反而是促进了混合营养细胞的光自养生长 ,二是呼吸基质向质醌库提供电子 ,使光合机构的能量转化加强 ,从而促进了集胞藻6 80 3细胞的利用葡萄糖的合成代谢。 展开更多
关键词 集胞藻 光合电子传递 葡萄糖 光合能量转化
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气升式反应器培养集胞藻6803过程中光能利用特性研究 被引量：4
17
作者 张志斌 颜日明 +1 位作者 曾庆桂 朱笃 《海洋通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期54-61,共8页
在气升式光生物反应器中,对集胞藻6803分批培养条件下的光衰减、平均光强、光的分布以及藻细胞生长对光能的利用特性进行分析。结果表明:Lambert-Beer定律可较好描述细胞浓度及光程对光衰减的影响;随着藻细胞密度的增加,光生物反应器内... 在气升式光生物反应器中,对集胞藻6803分批培养条件下的光衰减、平均光强、光的分布以及藻细胞生长对光能的利用特性进行分析。结果表明:Lambert-Beer定律可较好描述细胞浓度及光程对光衰减的影响;随着藻细胞密度的增加,光生物反应器内平均光强不断减小,藻细胞的比光能吸收速率和比生长速率也不断降低,反应器中"暗区"体积在培养6d后超过总体积的80%;利用Pirt细胞生长生物能量模型描述比生长速率和比光能吸收速率的关系,在入射光强为58.73KJ/(m2·h),求得基于光能的细胞得率YG和维持系数m分别为9.98×10-3g/kJ和0.445kJ/(g·h)。 展开更多
关键词 集胞藻6803 光衰减 光分布 平均光强 光能利用
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应用细胞合成计量关系模型分析鱼腥藻7120的混合营养生长 被引量：3
18
作者 喻国策 蔡昭铃 +1 位作者 施定基 欧阳藩 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2001年第5期420-427,共8页
根据文献中鱼腥藻细胞大分子的含量和组成情况 ,计算了细胞合成所需要的小分子单体和前体代谢物的量 ,得到代谢意义上的细胞生物合成计量关系 .利用此计量关系模型 ,对鱼腥藻 712 0细胞在气升式光生物反应器中光自养和混合营养生长的对... 根据文献中鱼腥藻细胞大分子的含量和组成情况 ,计算了细胞合成所需要的小分子单体和前体代谢物的量 ,得到代谢意义上的细胞生物合成计量关系 .利用此计量关系模型 ,对鱼腥藻 712 0细胞在气升式光生物反应器中光自养和混合营养生长的对数生长阶段进行了代谢通量分析 .结果表明 ,葡萄糖的利用影响了细胞初级碳代谢的流动状况 ,混合营养生长过程比光自养生长过程磷酸戊糖途径氧化性分支的反应程度明显加强 .随着培养的进行 ,葡萄糖被细胞用作碳源的比例可能减小 ,而用作能源的比例可能增大 .图 2表 14参 展开更多
关键词 细胞生物合成计量关系 鱼腥藻7120 混合营养生长 代谢通量分析 葡萄糖利用 模型
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环境因子对转hGM-CSF基因鱼腥藻生长与光合的调节 被引量：3
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作者 魏兰珍 康升云 +2 位作者 严君君 马为民 王全喜 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期193-196,共4页
以转hGM-CSF基因鱼腥藻7120为对象,分别探讨了温度、pH、光强等环境因子和外加碳、氮等基本营养源对转基因藻生长与光合活性的影响.结果表明:当基本环境因子为30℃、pH9.5和90μmol·m-2·s-1光强时,转基因藻生长最快.添加10mmo... 以转hGM-CSF基因鱼腥藻7120为对象,分别探讨了温度、pH、光强等环境因子和外加碳、氮等基本营养源对转基因藻生长与光合活性的影响.结果表明:当基本环境因子为30℃、pH9.5和90μmol·m-2·s-1光强时,转基因藻生长最快.添加10mmol·L-1的NaHCO3或5g·L-1的葡萄糖对转基因藻的光合活性促进最大;但外加氮源却抑制了转基因藻的光合活性. 展开更多
关键词 鱼腥藻7120 转基因蓝藻 hGM-CSF基因 环境因子 光合活性
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用同源重组法将人肝金属硫蛋白突变体ββ基因整合在集胞藻6803中表达 被引量：12
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作者 宋凌云 施定基 +4 位作者 宁叶 罗娜 邵宁 俞梅敏 茹炳根 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第4期399-404,共6页
将集胞藻 (Synechocystissp .)PCC 6 80 3上psbB的一段序列 (从 # 6 93bp到 # 2 5 6 3bp)插入pBluescriptKS的多克隆位点 ,构建带有整合平台的载体pKSB。再将人工合成的 ββ基因插入中间载体pRL_439上启动子PpsbA的下游 ,并将pRL_ββ... 将集胞藻 (Synechocystissp .)PCC 6 80 3上psbB的一段序列 (从 # 6 93bp到 # 2 5 6 3bp)插入pBluescriptKS的多克隆位点 ,构建带有整合平台的载体pKSB。再将人工合成的 ββ基因插入中间载体pRL_439上启动子PpsbA的下游 ,并将pRL_ββ上PpsbA和 ββ基因插入pKSB构建成整合表达载体pKSB_ββ。利用自然转化将整合表达载体导入集胞藻 6 80 3,并通过单交换同源重组使 ββ基因整合到集胞藻 6 80 3基因组DNA上。逐步提高氨苄青霉素浓度 ,筛选得到遗传性状稳定的转基因集胞藻 6 80 3。PCR检测转基因集胞藻 6 80 3,结果证实 ββ基因已整合到集胞藻 6 80 3的染色体上 ;Westernblotting结果表明 ,ββ基因在转基因集胞藻 6 80 3细胞中得到表达 ,ELISA测定表明在 5 0 μmol/L的Zn2 +诱导下 ββ在新鲜集胞藻 6 80 3中的蛋白表达量为 0 .739mg/g ;重金属耐受性实验表明 ,得到能耐受Cu2 +的转基因集胞藻 6 80 3。经原子吸收光谱法测定 ,转基因集胞藻 6 80 3在含低浓度Cu2 +(10 μmol/L)的培养液中对Cu2 +的去除率可达到 82 % 展开更多
关键词 人肝金属硫蛋白ββ突变体 集胞藻6803 单交换 同源重组 蓝藻基因工程 铜去除
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