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基于PPARγ/c-Ski信号通路探讨蔓荆子黄素对膝骨关节炎大鼠滑膜组织纤维化的影响及其作用机制
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作者 胡恩睿 魏义保 +3 位作者 廖太阳 刘德仁 龚子健 王培民 《中医正骨》 2025年第4期11-19,29,共10页
目的:探讨蔓荆子黄素对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠滑膜组织纤维化的影响及其作用机制。方法:将40只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、低浓度组、高浓度组和拮抗剂组,每组8只。模型组、低浓度组、高浓度组和拮抗... 目的:探讨蔓荆子黄素对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠滑膜组织纤维化的影响及其作用机制。方法:将40只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、低浓度组、高浓度组和拮抗剂组,每组8只。模型组、低浓度组、高浓度组和拮抗剂组大鼠均采用前交叉韧带离断法建立右侧KOA模型。造模14 d后,低浓度组和高浓度组大鼠分别按照0.2 mg·kg^(-1)·d^(-1)和0.4 mg·kg^(-1)·d^(-1)的剂量给予蔓荆子黄素灌胃;拮抗剂组大鼠在给予蔓荆子黄素灌胃的同时,每日按照1.0 mg·kg^(-1)的剂量腹腔注射GW9662溶液;假手术组、模型组、低浓度组、高浓度组大鼠均每日腹腔注射等体积生理盐水;连续干预14 d。干预结束后,采用ELISA试剂盒检测大鼠血清白细胞介素(interleukin,IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;采用HE染色试剂盒、Masson染色试剂盒分别对大鼠膝关节滑膜组织进行染色,观察大鼠滑膜炎症程度与纤维化程度;分别采用实时定量PCR和Western Blot法检测大鼠膝关节滑膜组织中转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原、过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)γ、c-Ski的mRNA和蛋白表达水平。结果:①血清IL-1β和TNF-α含量检测结果。模型组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量均高于假手术组(P=0.000,P=0.000),低浓度组和高浓度组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量均低于模型组(IL-1β:P=0.004,P=0.000;TNF-α:P=0.000,P=0.000),拮抗剂组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量均高于高浓度组(P=0.027,P=0.005)。②膝关节滑膜组织病理学观察结果。模型组大鼠膝关节滑膜组织部分缺损,衬里层细胞排列不规则,滑膜细胞大量增生,炎症细胞浸润明显,胶原纤维大量沉积;与模型组相比,低浓度组、高浓度组大鼠膝关节滑膜组织衬里层细胞排列较为规则,炎症细胞浸润明显减轻,胶原纤维沉积减轻;与高浓度组相比,拮抗剂组大鼠膝关节滑膜组织炎症细胞浸润更严重,胶原纤维沉积更多。③滑膜组织纤维化相关基因的mRNA和蛋白表达量检测结果。模型组大鼠滑膜组织中TGF-β、α-SMA、Ⅰ型胶原的mRNA和蛋白相对表达量均高于假手术组(P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.000,P=0.000),低浓度组和高浓度组大鼠滑膜组织中TGF-β、α-SMA、Ⅰ型胶原的mRNA和蛋白相对表达量均低于模型组(mRNA:P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.000,P=0.000;蛋白:P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.000,P=0.000),高浓度组大鼠滑膜组织中TGF-β、α-SMA、Ⅰ型胶原的mRNA和蛋白相对表达量均低于低浓度组(P=0.000,P=0.021,P=0.001;P=0.001,P=0.000,P=0.002),拮抗剂组大鼠滑膜组织中TGF-β、α-SMA、Ⅰ型胶原的mRNA和蛋白相对表达量均高于高浓度组(P=0.000,P=0.001,P=0.001;P=0.002,P=0.001,P=0.020)。④滑膜组织中PPARγ/c-Ski信号通路相关基因的mRNA和蛋白表达量检测结果。模型组大鼠滑膜组织中PPARγ、c-Ski的mRNA和蛋白相对表达量均低于假手术组(P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.000),低浓度组和高浓度组大鼠滑膜组织中PPARγ、c-Ski的mRNA和蛋白相对表达量均高于模型组(mRNA:P=0.001,P=0.000;P=0.004,P=0.000;蛋白:P=0.001,P=0.000;P=0.004,P=0.000),高浓度组大鼠滑膜组织中PPARγ、c-Ski的mRNA和蛋白相对表达量均高于低浓度组(mRNA:P=0.000,P=0.000;蛋白:P=0.049,P=0.000),拮抗剂组大鼠滑膜组织中PPARγ、c-Ski的mRNA和蛋白相对表达量均低于高浓度组(mRNA:P=0.000,P=0.000;蛋白:P=0.000,P=0.000)。结论:蔓荆子黄素能够改善KOA大鼠滑膜组织纤维化,且高浓度蔓荆子黄素比低浓度蔓荆子黄素的改善效果更佳;其作用机制可能与其能够激活PPARγ/c-Ski信号通路、抑制炎症反应有关。 展开更多
关键词 骨关节炎 滑膜 纤维化 蔓荆子 黄酮醇类 炎症 过氧化物酶体增生物激活受体 c-ski 信号传导 大鼠
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Ecological security evaluation and early warning of ski tourism destinations
2
作者 TANG Chengcai HAN Ying JIANG Ling 《Journal of Geographical Sciences》 2025年第9期1953-1978,共26页
To address the contradiction between the rapid development of ski tourism and effective protection of the ecological environment,this study constructed the DPSIR-EES(Drive-Pressures-State-Impact-Response-Environment-E... To address the contradiction between the rapid development of ski tourism and effective protection of the ecological environment,this study constructed the DPSIR-EES(Drive-Pressures-State-Impact-Response-Environment-Economy-Society)model and Ski Tourism Destination Ecological Security System(STDESS)framework system.They form an integrated methodology system based on the“entropy weighting-hierarchical analysis-gray correlation projection”composite weighting method that can be used to clarify the intrinsic mechanism of ecological security in ski tourism destinations.Taking Chongli as a case study,this study evaluated the evolution of its ecological security from 1995 to 2023,predicted the ecological security early warning levels from 2024 to 2050,and analyzed the mechanism of influences on regional ecological security.The findings indicate that the ecological security of ski tourism destinations shows a significant“stepped leap–dynamic equilibrium”evolutionary path.The dynamic response mechanism of the subsystems is characterized by significant heterogeneity.The ecological security early warning system revealed the temporal and sequential differentiation of risk transmission.The factors influencing ecological security show the significant dual dominance of policy and climate.This paper enhances the applicability of ecological security systems within ski tourism contexts by analyzing their evolutionary characteristics,predicted future changes and impact factors,and it provides an effective case study for ecological improvement. 展开更多
关键词 ecological security ski tourism tourism destination sustainable development Beijing Winter Olympics
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小肠过表达Ski蛋白对扭体小鼠的抑炎镇痛作用 被引量:1
3
作者 熊翱 魏小雨 +3 位作者 彭艳 杨明 杨钱冬 罗飞 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期369-377,共9页
目的 研究小肠过表达鸟类癌基因(virus sloan-kettering institute, v-ski)的细胞内同源物(Ski)蛋白对醋酸致扭体小鼠的抑炎镇痛作用。方法 选取8周龄雄性ICR小鼠,给予腹腔注射现配的0.7%醋酸溶液(0.1 mL/10 g)诱发扭体反应。实验小鼠... 目的 研究小肠过表达鸟类癌基因(virus sloan-kettering institute, v-ski)的细胞内同源物(Ski)蛋白对醋酸致扭体小鼠的抑炎镇痛作用。方法 选取8周龄雄性ICR小鼠,给予腹腔注射现配的0.7%醋酸溶液(0.1 mL/10 g)诱发扭体反应。实验小鼠分为假手术(sham)组、醋酸(acetic acid)组、醋酸(acetic acid)+布洛芬(ibuprofen)组、醋酸(acetic acid)+腺病毒空质粒(ad-EGFP)组、醋酸(acetic acid)+腺病毒ski质粒(ad-ski)-1组、醋酸(acetic acid)+腺病毒ski质粒(ad-ski)-2组和醋酸(acetic acid)+柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)组,每组10只。观察并记录第1次扭体出现的潜伏期,同时记录15 min内的扭体次数。获取标记的小肠组织,鉴定腺病毒转染效果,检测促炎因子、疼痛生物标志物的蛋白表达量,进一步分析核转录因子-κB(NF-κB)通路蛋白表达及其与Ski蛋白的结合情况。结果 腹腔注射ad-ski腺病毒后,小肠成功过表达Ski蛋白。过表达的Ski蛋白延长了小鼠发生扭体的潜伏期,同时减少了扭体反应的频率,与布洛芬的效果相当(P>0.05)。与醋酸组比较,过表达的Ski蛋白显著抑制了促炎因子和疼痛生物标志物的蛋白表达(P<0.05)。而且NF-κB p65与Ski有复合物形成。结论过表达Ski蛋白对醋酸引起的炎性疼痛有抑炎镇痛作用,且与Ski调节NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 ski 扭体实验 白细胞介素-1Β 肿瘤坏死因子-α 神经生长因子 酪氨酸蛋白激酶A 小鼠
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穿心莲内酯介导c-SKI抑制心肌成纤维细胞转分化和心肌纤维化
4
作者 高敏 丁欢欢 +1 位作者 郑丽华 王娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期213-220,共8页
目的:探讨c-SKI(cellular Sloan-Kettering Institute)蛋白表达变化对穿心莲内酯(andrgrapholide,Andr)治疗小鼠心肌纤维化的影响。方法:将18只C57雄性小鼠随机分为control组、模型组[异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)组]和ISO+Andr组,每... 目的:探讨c-SKI(cellular Sloan-Kettering Institute)蛋白表达变化对穿心莲内酯(andrgrapholide,Andr)治疗小鼠心肌纤维化的影响。方法:将18只C57雄性小鼠随机分为control组、模型组[异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)组]和ISO+Andr组,每组6只。ISO组和ISO+Andr组小鼠皮下注射ISO,control组注射生理盐水;ISO+Andr组小鼠给予Andr灌胃,ISO组和control组给予等体积生理盐水灌胃。给药8周,取心脏组织进行HE和Masson染色检测病理特征;免疫组化或Western blot实验检测c-SKI和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)相关蛋白水平;qPCR检测c-SKI mRNA水平。用不同浓度Andr干预人心脏成纤维细胞(human cardiac fibroblasts,HCFBs)48 h,CCK-8实验检测细胞活力,Western blot实验检测c-SKI和ECM相关蛋白水平。用Andr最低有效剂量处理转分化细胞模型,显微镜观察细胞形态,Western blot实验检测c-SKI和ECM相关蛋白水平,qPCR检测c-SKI mRNA水平。敲减c-SKI和Andr联合处理转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的HCFBs,CCK-8实验检测细胞增殖活力,Western blot实验检测c-SKI和ECM相关蛋白水平。结果:与ISO组相比,Andr干预后小鼠心肌纤维排列整齐,心肌细胞形态基本正常,细胞膜完整,胶原容积分数显著减少(P<0.01),c-SKI的mRNA和蛋白水平显著上调(P<0.05或P<0.01),纤连蛋白1(fibronectin 1,FN1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、波形蛋白(vimentin)和I型胶原(collagen type I,Col I)蛋白水平显著下调(P<0.01)。HCFBs经50μmol/L Andr处理48 h,细胞活力显著降低(P<0.01),FN1、α-SMA、vimentin和Col I蛋白水平显著下调(P<0.01),c-SKI表达显著上调(P<0.01)。与PBS组相比,TGF-β1组细胞数量增多,胞核固缩,细胞形态改变,细胞中FN1、α-SMA、vimentin和Col I蛋白表达显著上调(P<0.01),c-SKI表达显著下调(P<0.01);Andr干预逆转了TGF-β1对HCFBs的诱导作用。敲减c-SKI和Andr联合处理显著下调HCFBs中c-SKI表达(P<0.01),显著上调FN1、α-SMA、vimentin和Col I蛋白表达水平(P<0.05),显著增强细胞活力(P<0.05)。结论:Andr可能通过调控c-SKI表达影响TGF-β1信号通路,抑制心肌成纤维细胞增殖和ECM沉积,从而抑制心肌纤维化。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 心肌纤维化 细胞外基质 c-ski蛋白 转化生长因子β1
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广义Sierpiński图的第一类Zagreb指标 被引量:1
5
作者 梁志鹏 梁晓东 《曲阜师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第1期23-27,共5页
1972年,Gutman I和Tringjstic'N提出了Zagreb指标的概念.简单(分子)图G的第一类Zagreb指标定义为M_1(G)=∑u∈V(G)d(u)~2,其中d(u)表示点u在中G的度数.本文考虑基于广义Sierpiński图的聚合物网络模型,获得了广义Sierpiń... 1972年,Gutman I和Tringjstic'N提出了Zagreb指标的概念.简单(分子)图G的第一类Zagreb指标定义为M_1(G)=∑u∈V(G)d(u)~2,其中d(u)表示点u在中G的度数.本文考虑基于广义Sierpiński图的聚合物网络模型,获得了广义Sierpiński图S(G,t)和聚合物Sierpiński图P(G,t)的第一类Zagreb指标的公式,其中G是一个完全图、一个无三角形δ-正则图或一个(δ_1,δ_2)-半正则二部图. 展开更多
关键词 Sierpiński 广义Sierpiński 聚合物Sierpiński ZAGREB指标
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清胰化积方下调Ski表达抗胰腺癌生长实验研究 被引量:9
6
作者 王鹏 刘鲁明 +6 位作者 陈震 孟志强 林钧华 周振华 陈颢 王琨 沈晔华 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期942-945,共4页
目的探讨清胰化积方(Qingyi Huaji Formula,QYHJ)是否通过下调Ski表达抑制胰腺肿瘤的生长。方法采用Real-time PCR和Western blot对QYHJ治疗后21天人胰腺癌裸小鼠皮下移植瘤Ski mRNA和蛋白表达进行检测;通过慢病毒介导的RNA干扰技术建立... 目的探讨清胰化积方(Qingyi Huaji Formula,QYHJ)是否通过下调Ski表达抑制胰腺肿瘤的生长。方法采用Real-time PCR和Western blot对QYHJ治疗后21天人胰腺癌裸小鼠皮下移植瘤Ski mRNA和蛋白表达进行检测;通过慢病毒介导的RNA干扰技术建立Ski低表达人胰腺癌细胞系,并通过建立裸小鼠皮下移植瘤,评价Ski不同表达肿瘤对QYHJ治疗反应性是否存在差异。结果 QYHJ治疗后,人胰腺癌SW1990皮下移植瘤Ski mRNA和蛋白表达与未用QYHJ治疗组比较分别下降了39.6%和41.3%(均P<0.05);建立了Ski低表达SW1990细胞系(SW1990/Ski RNAi)和阴性干扰细胞系(SW1990/con RNAi),其Ski mRNA和蛋白表达量分别是亲代细胞的105%、123%和46%、30%(均P<0.05);SW1990细胞和SW1990/con RNAi细胞皮下移植瘤应用QYHJ治疗后其瘤重抑制率分别为29.6%和32.2%,但SW1990/RNAi细胞组其瘤重抑制率为16.0%~17.8%(均P<0.05)。结论 Ski下调增加了人胰腺癌细胞对QYHJ治疗的敏感性,Ski为QYHJ治疗胰腺癌一个重要作用靶点,其不同表达介导了胰腺癌细胞对QYHJ治疗的反应性差异。 展开更多
关键词 清胰化积方 胰腺癌 ski癌基因 RNA干扰
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沉默ski基因对大鼠星形胶质细胞迁移的影响 被引量:7
7
作者 赵鑫 王兴文 +4 位作者 寇江力 李忠浩 郭永强 伍亚民 张海鸿 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第8期905-911,共7页
目的研究ski基因在大鼠星形胶质细胞迁移过程中的作用。方法分离大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski基因和阴性对照小干扰片段。设置ski-siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组。采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对... 目的研究ski基因在大鼠星形胶质细胞迁移过程中的作用。方法分离大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski基因和阴性对照小干扰片段。设置ski-siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组。采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对照siRNA转入大鼠星形胶质细胞。采用Western blotting检测各组ski蛋白的表达水平;采用Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验检测ski-siRNA转染后星形胶质细胞迁移能力的变化。结果与空白对照组和阴性对照组比较,ski-siRNA转染组细胞内ski蛋白的相对表达水平显著降低(F=132.957,P<0.001)。Transwell细胞迁移实验发现,ski-siRNA转染组每孔迁移细胞数少于空白对照组和阴性对照组(F>47.197,P<0.05)。细胞划痕实验显示,转染组细胞1~5 d的划痕愈合率均明显低于对照组(F>69.187,P<0.01)。结论沉默ski基因能显著抑制星形胶质细胞的迁移能力,ski可能参与星形胶质细胞的转移过程,进而调控胶质瘢痕的形成。 展开更多
关键词 ski RNA干扰 星形胶质细胞 Transwell细胞迁移实验 划痕实验 大鼠
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Ski在大鼠活化星形胶质细胞中表达的变化 被引量:7
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作者 赵鑫 寇江力 +6 位作者 郭永强 蒲彦川 周开升 南伟 汪静 伍亚民 张海鸿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期968-974,共7页
目的:探究Ski在大鼠正常及活化星形胶质细胞中的表达及随时间变化的规律。方法:提取大鼠大脑皮质,分离星形胶质细胞,体外培养。采用LPS刺激和细胞划痕损伤2种方法活化星形胶质细胞,均采用Western blot法检测各个时点2种活化星形胶质细胞... 目的:探究Ski在大鼠正常及活化星形胶质细胞中的表达及随时间变化的规律。方法:提取大鼠大脑皮质,分离星形胶质细胞,体外培养。采用LPS刺激和细胞划痕损伤2种方法活化星形胶质细胞,均采用Western blot法检测各个时点2种活化星形胶质细胞中Ski和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)蛋白表达情况,利用间接免疫荧光法检测Ski蛋白在星形胶质细胞中的表达定位。结果:GFAP蛋白在星形胶质细胞中固有表达,LPS活化和划痕损伤后表达均上调。Ski在正常星形胶质细胞中呈低表达状态,1 mg/L LPS活化星形胶质细胞后,Ski表达开始增加,4 d时表达量最高(P<0.05),6 d时开始下降,但仍高于未活化组;细胞划痕损伤后Ski蛋白表达情况与上述情况高度一致。Ski在正常及LPS活化6 d星形胶质细胞中表达主要集中在胞核,LPS活化后2和4 d时在胞质中出现明确的Ski表达。结论:Ski蛋白表达于星形胶质细胞,并在活化星形胶质细胞中表达上调。由此,我们推测Ski蛋白可能调控星形胶质细胞的活化、增殖等过程。 展开更多
关键词 ski 胶质纤维酸性蛋白 星形胶质细胞 胶质瘢痕
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SphK1抑制剂SKI Ⅱ抑制肝癌HepG2细胞周期及细胞侵袭 被引量:3
9
作者 张彩霞 刘虹 +2 位作者 宫玉艳 何红伟 邵荣光 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期204-208,共5页
鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1,SphK1)在调控细胞基本生物学功能方面发挥重要作用,本研究考察了SphK1抑制剂SKI II对肝癌细胞HepG2周期及侵袭的影响。采用SRB方法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期分布,Matrigel-Transwell方... 鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1,SphK1)在调控细胞基本生物学功能方面发挥重要作用,本研究考察了SphK1抑制剂SKI II对肝癌细胞HepG2周期及侵袭的影响。采用SRB方法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期分布,Matrigel-Transwell方法检测细胞侵袭能力,Western blotting检测蛋白表达变化。结果表明,SKI II能够抑制HepG2细胞的存活,诱导HepG2细胞发生G1期阻滞以及抑制HepG2细胞的侵袭;SKI II能降低细胞G1期相关蛋白CDK2、CDK4以及Cdc2的表达水平,同时降低与细胞侵袭相关的MMP2和MMP9的蛋白水平。结果提示,SphK1抑制剂SKI II能引起细胞G1期阻滞及降低细胞侵袭能力,提示SphK1可能成为肝癌治疗的一个潜在靶点。 展开更多
关键词 SphK1 ski II 肝癌 HEPG2 细胞周期 侵袭
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脂多糖对大鼠星形胶质细胞Ski蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 赵鑫 郭永强 +3 位作者 王明 陈铁戈 伍亚民 张海鸿 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第5期514-519,共6页
目的探讨内毒素脂多糖对大鼠星形胶质细胞ski蛋白表达规律及胞定位的影响。方法新生3 d内Sprague-Dawley大鼠,取大脑皮质分离星形胶质细胞,体外培养。采用0μg/ml、0.001μg/ml、0.01μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml... 目的探讨内毒素脂多糖对大鼠星形胶质细胞ski蛋白表达规律及胞定位的影响。方法新生3 d内Sprague-Dawley大鼠,取大脑皮质分离星形胶质细胞,体外培养。采用0μg/ml、0.001μg/ml、0.01μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml脂多糖诱导6 h;采用0.1μg/ml脂多糖诱导0 d、2 d、4 d、6 d、8 d。Western blotting法检测星形胶质细胞中ski蛋白的表达,间接免疫荧光双标法检测ski在星形胶质细胞中的定位。结果 0.1μg/ml脂多糖诱导下,ski蛋白表达最高(F=46.656,P<0.001)。0.1μg/ml脂多糖诱导4 d时最高,6 d时逐渐降低。在无脂多糖诱导及脂多糖诱导6 d时,ski蛋白主要表达于细胞核;脂多糖诱导2 d、4 d时,细胞质中出现ski表达。结论脂多糖可诱导星形胶质细胞ski蛋白表达,可能参与炎症反应。 展开更多
关键词 ski蛋白 脂多糖 炎症 星形胶质细胞 大鼠
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HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因联合诱导人宫颈癌Ca Ski细胞的凋亡 被引量:3
11
作者 石华 杨俊霞 +5 位作者 袁成福 易发平 魏丽丽 刘革力 马永平 宋方洲 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期348-351,共4页
目的:观察HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因体外共转染,联合诱导人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡的效应。方法:HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因的质粒载体分别以单独或联合的方式转染人宫颈癌Ca Ski细胞,随后利用RT-PCR技术检测细胞中HPV-16 E6癌基因的... 目的:观察HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因体外共转染,联合诱导人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡的效应。方法:HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因的质粒载体分别以单独或联合的方式转染人宫颈癌Ca Ski细胞,随后利用RT-PCR技术检测细胞中HPV-16 E6癌基因的mRNA水平变化;Western blot分析细胞中抑癌蛋白p53水平的变化;流式细胞技术分析细胞凋亡情况。结果:经HPV-16 E6 siRNA和hIL-24转染后细胞后HPV E6癌基因的mRNA水平均下降,其中联合转染组显著下降(P<0.05);抑癌蛋白p53水平均增高,其中联合转染组显著增高,细胞凋亡率均升高,其中联合转染组显著升高(P<0.05)。结论:HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因分别转染宫颈癌Ca Ski细胞后,均能抑制Ca Ski细胞中HPV-16 E6癌基因的表达,使抑癌蛋白p53恢复活性,诱导宫颈癌Ca Ski细胞凋亡;两者联合则具有协同效应,能显著提高肿瘤细胞凋亡率。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 RNA 小分子干扰 凋亡 基因 HPV-16 E6 SIRNA 基因 hIL-24 CA ski细胞
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Ski对脂多糖诱导大鼠星形胶质细胞炎症因子释放的影响 被引量:6
12
作者 王明 杨新乐 +5 位作者 陈铁戈 张东亮 巩朝阳 向高 刘开鑫 张海鸿 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2018年第7期802-806,共5页
目的探讨Ski对激活星形胶质细胞炎症因子分泌的影响。方法从3日龄Sprague-Dawley大鼠大脑皮质分离星形胶质细胞,分为空白对照组、阴性对照组、siRNA组,siRNA组沉默Ski基因。48 h后,采用Western blotting和免疫荧光染色检测Ski表达;再以... 目的探讨Ski对激活星形胶质细胞炎症因子分泌的影响。方法从3日龄Sprague-Dawley大鼠大脑皮质分离星形胶质细胞,分为空白对照组、阴性对照组、siRNA组,siRNA组沉默Ski基因。48 h后,采用Western blotting和免疫荧光染色检测Ski表达;再以脂多糖激活星形胶质细胞24 h。ELISA检测各组细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的浓度。结果 siRNA组Ski蛋白表达显著降低(P<0.001);激活后,TNF-α、IL-1β浓度显著减少(P<0.001)。结论 Ski可能参与星形胶质细胞炎症反应。 展开更多
关键词 ski RNA干扰 脂多糖 炎症 星形胶质细胞 大鼠
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掌叶半夏提取物的有效部位不同给药途径对人宫颈癌细胞株CaSki裸小鼠移植瘤的抑制作用 被引量:11
13
作者 张明星 李桂玲 徐丛剑 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期199-202,共4页
目的:观察不同给药途径下掌叶半夏提取物的有效部位(PE)对Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤的抑制作用,以探索PE的体内最佳给药途径。方法:建立Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤模型,待移植瘤体积增至大约100mm3,将裸小鼠随机分为阴性对照组、灌胃组、腹... 目的:观察不同给药途径下掌叶半夏提取物的有效部位(PE)对Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤的抑制作用,以探索PE的体内最佳给药途径。方法:建立Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤模型,待移植瘤体积增至大约100mm3,将裸小鼠随机分为阴性对照组、灌胃组、腹腔注射组、皮下注射组、顺铂阳性对照组。测量肿瘤径线,计算肿瘤体积并描绘肿瘤生长曲线。药物处理21d,第22天颈椎脱臼处死裸小鼠,称取瘤重,计算抑瘤率。HE染色观察移植瘤组织形态,免疫组化检测移植瘤组织中Ki-67的表达情况。结果:灌胃组、腹腔注射组、顺铂阳性对照组裸小鼠移植瘤重量明显小于阴性对照组和皮下注射组(P<0.05),抑瘤率分别为38.71%,31.86%,45.92%。且灌胃组、腹腔注射组移植瘤组织Ki-67表达明显低于阴性对照组和皮下注射组(P<0.05)。结论:PE能够抑制Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤的生长,其体内实验的最佳给药途径可以是灌胃或者腹腔注射,推荐实验中采取灌胃方式。抑制Ki-67的表达可能是PE体内抑瘤作用机制之一。 展开更多
关键词 掌叶半夏提取物的有效部位 宫颈癌 Ca ski细胞株 移植瘤 裸小鼠 Ki-67
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C-ski和Smad3在大鼠皮肤成纤维细胞辐射性损伤中的变化及意义 被引量:2
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作者 刘霞 李平 +2 位作者 张恩 刘苹 周元国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第15期1455-1457,共3页
目的研究C-ski和Smad3在大鼠皮肤成纤维细胞辐射性损伤中的变化和意义。方法软X线照射诱导大鼠皮肤成纤维细胞辐射性损伤,Western blot和RT-PCR观察C-ski、Smad3蛋白和mRNA水平的变化,EMSA检测Smad3转录活性的变化。结果辐射后2h,C-ski... 目的研究C-ski和Smad3在大鼠皮肤成纤维细胞辐射性损伤中的变化和意义。方法软X线照射诱导大鼠皮肤成纤维细胞辐射性损伤,Western blot和RT-PCR观察C-ski、Smad3蛋白和mRNA水平的变化,EMSA检测Smad3转录活性的变化。结果辐射后2h,C-ski、Smad3蛋白和mRNA水平、Smad3转录活性无显著变化,4h开始,C-ski表达逐渐下降,Smad3表达和转录活性逐渐升高,在8h分别达到峰谷和峰顶。结论C-ski和Smad3参与大鼠皮肤成纤维细胞辐射性损伤的病理过程,辐射后C-ski下降,Smad3升高,并导致Smad3转录活性增强,细胞增殖受抑,凋亡增加。 展开更多
关键词 C—ski SMAD3 成纤维细胞 辐射
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c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响 被引量:4
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作者 刘霞 李平 +2 位作者 张恩 刘苹 周元国 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期173-176,共4页
目的研究原癌基因c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞活力、肌成纤维细胞分化、型胶原分泌等生物学行为的影响。方法免疫组化检测皮肤成纤维细胞内c-Ski蛋白的表达,并在转染c-ski基因后,利用MTT法检测皮肤成纤维细胞增殖活力、免疫组化和RT-PCR... 目的研究原癌基因c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞活力、肌成纤维细胞分化、型胶原分泌等生物学行为的影响。方法免疫组化检测皮肤成纤维细胞内c-Ski蛋白的表达,并在转染c-ski基因后,利用MTT法检测皮肤成纤维细胞增殖活力、免疫组化和RT-PCR检测型胶原分泌、α-SMA细胞免疫组化检测肌成纤维细胞分化的改变。结果大鼠皮肤成纤维细胞内有c-Ski蛋白的表达,且主要表达在细胞核内,c-ski可以以剂量依赖的方式增加皮肤成纤维细胞的增殖活力,并可降低型胶原蛋白和mRNA的水平,但不改变皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化过程。结论c-ski促进细胞增殖但降低胶原分泌的作用可能对促进创伤愈合、降低瘢痕形成有着重要的意义。 展开更多
关键词 c-ski 成纤维细胞 胶原 分化
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沉默ski基因对大鼠星形胶质细胞活化增殖及Cyclin D1表达的影响 被引量:2
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作者 赵鑫 郭永强 +4 位作者 寇江力 丁宁 周开升 南伟 张海鸿 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第9期1032-1036,共5页
目的研究ski基因对大鼠星形胶质细胞增殖的影响及其分子机制。方法分离3日龄Sprague-Dawley大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski和阴性对照小干扰片段。设置ski-si RNA组、阴性对照组和空白对照组,采用脂质体法将特异性针对ski基... 目的研究ski基因对大鼠星形胶质细胞增殖的影响及其分子机制。方法分离3日龄Sprague-Dawley大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski和阴性对照小干扰片段。设置ski-si RNA组、阴性对照组和空白对照组,采用脂质体法将特异性针对ski基因的si RNA和阴性对照si RNA转入ski-si RNA组、阴性对照组星形胶质细胞中。Western blotting分析ski、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Cyclin D1蛋白表达;CCK8法检测星形胶质细胞增殖活力;流式细胞仪检测细胞周期。结果 ski-si RNA组星形胶质细胞ski蛋白表达明显降低(F=38.611,P<0.01),GFAP(F=7.547,P<0.05)和Cyclin D1蛋白(F=3.901,P<0.05)表达降低;培养12 h后,ski-si RNA组增殖活力明显降低(F>30.507,P<0.01),G1期细胞比例明显增加,S期明显减少(F>48.425,P<0.01)。结论沉默ski基因可能通过下调Cyclin D1表达,抑制星形胶质细胞增殖。 展开更多
关键词 ski RNA干扰 增殖 星形胶质细胞 大鼠
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大鼠脊髓损伤后ski相关蛋白表达的时空变化规律及作用 被引量:2
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作者 朱彦东 周开升 +7 位作者 郭永强 江龙 郑利强 汪静 李森 龙在云 伍亚民 张海鸿 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第8期912-918,共7页
目的探究大鼠脊髓损伤后ski相关蛋白(SKIP)的表达及其变化规律。方法 60只成年雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=30)和打击组(n=30),每组分为1 d、3 d、5 d、7 d、14 d五个时间点,各6只。打击组用Allen法制作T10打击损伤模型,... 目的探究大鼠脊髓损伤后ski相关蛋白(SKIP)的表达及其变化规律。方法 60只成年雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=30)和打击组(n=30),每组分为1 d、3 d、5 d、7 d、14 d五个时间点,各6只。打击组用Allen法制作T10打击损伤模型,假手术组只咬开椎板。采用BBB评分评价后肢运动功能;尼氏染色观察损伤后脊髓神经元的病理变化;免疫荧光染色观察损伤脊髓SKIP的表达情况。结果打击组各时间点BBB评分均显著低于假手术组(t>48.267,P<0.001)。与假手术组相比,打击组5 d脊髓神经元胞浆中尼氏小体开始崩解、凝聚,分布不规则,神经元变性坏死,14 d时损伤加重。免疫荧光染色显示,SKIP主要在脊髓灰质中表达,白质中极少表达;损伤后SKIP表达逐渐上升,5 d时达到高峰(t=-17.035,P<0.001),14 d时明显降低(t=3.853,P<0.05)。结论 SKIP可能是一种作用于神经元并影响其凋亡的新的信号分子。 展开更多
关键词 脊髓损伤 ski相关蛋白 神经元 凋亡 大鼠
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Ski/SnoN蛋白与TGF-β信号通路的调节 被引量:5
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作者 卢朝辉 陈杰 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期233-236,共4页
TGF-β信号通路控制着细胞的生长速度、分化方向、细胞外基质形成、胚胎发育及肿瘤发生等各个方面,但对于TGF-β信号通路的调控研究一直进展缓慢。1999年,3个研究小组几乎同时发现,Ski/SnoN蛋白通过募集转录共抑制子N-CoR蛋白而对TGF-... TGF-β信号通路控制着细胞的生长速度、分化方向、细胞外基质形成、胚胎发育及肿瘤发生等各个方面,但对于TGF-β信号通路的调控研究一直进展缓慢。1999年,3个研究小组几乎同时发现,Ski/SnoN蛋白通过募集转录共抑制子N-CoR蛋白而对TGF-β通路起抑制作用;之后又发现,TGF-β及Smad蛋白对Ski/SnoN通过介导泛素化连接而降解,具有负反馈调节作用。这一重大发现对于阐明TGF-β信号通路的功能提供了理论基础。 展开更多
关键词 TCF-β SMADS ski/SnoN 信号转导
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人白介素24基因诱导人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡的实验研究 被引量:2
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作者 石华 成海恩 +4 位作者 张溢 郭风劲 易发平 马永平 宋方洲 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第6期512-514,共3页
目的:研究人白介素24(hIL-24)在体外诱导宫颈癌CaSki细胞凋亡及其作用机制.方法:①以脂质体包裹重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hIL-24转染Ca Ski细胞;②利用RT-PCR技术检测处理后Ca Ski细胞中HPV E6癌基因的mRNA水平变化;③Western Blot... 目的:研究人白介素24(hIL-24)在体外诱导宫颈癌CaSki细胞凋亡及其作用机制.方法:①以脂质体包裹重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hIL-24转染Ca Ski细胞;②利用RT-PCR技术检测处理后Ca Ski细胞中HPV E6癌基因的mRNA水平变化;③Western Blot分析处理后Ca Ski细胞中抑癌蛋白P53水平的变化;④流式细胞仪分析处理后的Ca Ski细胞凋亡情况.结果:处理后Ca Ski细胞中HPV E6癌基因的mRNA水平下降,抑癌蛋白P53水平增加,细胞凋亡率升高.结论:真核表达载体介导的hIL-24基因体外转染宫颈癌Ca Ski细胞后,能抑制Ca Ski细胞中HPV E6癌基因的表达,使抑癌蛋白P53恢复活性,促使宫颈癌Ca Ski细胞凋亡. 展开更多
关键词 人白细胞介素24 CA ski细胞 乳头状瘤病毒 E6基因 蛋白质P53 细胞凋亡
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血管紧张素Ⅱ通过抑制原癌基因c-SKI表达促进小鼠高血压性心肌纤维化 被引量:6
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作者 吕忠英 李红建 +1 位作者 张颖 王娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1738-1745,共8页
目的:探讨原癌基因c-SKI (cellular Sloan-Kettering Institute)表达变化对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)诱导的小鼠高血压性心肌纤维化的影响。方法:将12只雄性C57BL/6小鼠随机分成PBS组(n=6)和Ang Ⅱ组(n=6),利用渗透压微泵... 目的:探讨原癌基因c-SKI (cellular Sloan-Kettering Institute)表达变化对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)诱导的小鼠高血压性心肌纤维化的影响。方法:将12只雄性C57BL/6小鼠随机分成PBS组(n=6)和Ang Ⅱ组(n=6),利用渗透压微泵皮下植入小鼠慢性持续给予等体积的PBS和Ang Ⅱ,给药4周,测定小鼠血压。取小鼠心脏组织进行HE和Masson染色检测病理学变化;免疫组织化学染色和Western blot检测c-SKI、CD31、平滑肌蛋白22(smooth muscle protein 22, SM22)、Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ, Col Ⅰ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)水平。用不同浓度的AngⅡ处理人冠状动脉内皮细胞(humancoronaryarteryendothelialcells,HCAECs),显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力;用最低有效剂量的Ang Ⅱ处理HCAECs,免疫荧光染色和Western blot检测c-SKI、CD31、α-SMA、Col Ⅰ和上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)通路蛋白水平。过表达c-SKI和Ang Ⅱ联合处理HCAEC,CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡情况,免疫荧光染色和Western blot检测α-SMA、c-SKI、CD31、Col Ⅰ、EMT通路蛋白和EMT标志因子的表达。结果:Ang Ⅱ处理后小鼠尾动脉收缩压升高,心室壁增厚,Col Ⅰ和α-SMA表达显著上调(P<0.01),c-SKI、CD31和SM22表达显著下调(P<0.01)。10μmol/L Ang Ⅱ处理HCAECs后,细胞连接松散,细胞形态改变,且48 h细胞活力显著降低(P<0.01);免疫荧光染色和Western blot结果显示,Ang Ⅱ组Col Ⅰ、α-SMA、Twist、Snail和p-Smad2/3蛋白水平显著升高(P<0.01),cSKI和CD31表达显著下调(P<0.01)。与Ang Ⅱ+vector组相比,过表达c-SKI联合Ang Ⅱ处理显著促进HCAECs活力(P<0.01),显著抑制细胞凋亡(P<0.01),显著上调c-SKI、CD31和E-cadherin表达(P<0.05),显著下调α-SMA、Col Ⅰ、Twist、Snail、p-Smad2/3、N-cadherin和vimentin表达(P<0.01)。结论:Ang Ⅱ可能通过调控c-SKI表达,促进小鼠高血压性心肌纤维化。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ 高血压 心肌纤维化 原癌基因c-ski 人冠状动脉内皮细胞 小鼠
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